用简捷PVC-ELISA诊断旋毛虫病

用旋毛虫幼虫可溶性抗原进行 PVC-ELISA,56例旋毛虫病患者的阳性率达100％,80例健康人血清均未出现假阳性反应。此法与80例血吸虫病,30例肺吸虫病和30例华支睾吸虫病均无交叉反应,4例囊虫病人中1例出现交叉反应。此法检测结果与 PS-ELISA 完全一致。在现场共调查984人,PVC-ELISA 和 PS-ELISA 阳性率相似,分别为20.0％与19.8％。表明PVC-ELISA 法不仅敏感性高、特异性强、重现性好,而且比 PS-ELISA 简便快速、经济安全,可用于作旋毛虫病的诊断和调查。     

耳血PVC-ELISA法检测血吸虫抗体及循环抗原

四川省寄研所研制的PVC-ELISA试剂盒具有快速、简便、价廉等优点,故适用于基层血防单位。为了能达到大规模应用的目的,特将原采用血清检测〈血清法〉改为采用耳血检测〈耳血法〉。 1 材料和方法 1.1 病例 160例均系确诊血吸虫病入院病人,其中急性35例、慢性115例、晚期20例。 1.2 试剂盒 PVC-ELISA 检测血吸虫抗体及循环抗原二种试剂盒均为四川省寄生虫病防治研究所提供。 1.3 方法均按说明书进行。只是血清法采血清5μl加入。PBS-Twean 100μ内进行检测,而耳血法则采用耳血10μl加入含有5％枸橼酸钠抗凝的PBS-Tween100μl内进行检测。COPT及IHA:均按     

四种诊断血吸虫病方法的比较研究

本文对血吸虫病监测中的COPT、IHA、PVC-IEST和F-ELISA4种血清免疫诊断方法进行了比较.4种方法的敏感性依次为70.45%、65.91%、54.55%、68.18%,假阳性率均不超过5.00%,4种方法的操作时间和劳动强度以COPT为最长、最大,其余3种方法较为接近,成本费用以IHA最低.作者认为,在血吸虫病巩固监测地区,可用IHA和F-ELISA法结合门诊肝功能血清检查进行监测,有史者加做COPT,阳性者可作病人处理.疫区暂住人员监测可用PVC-IEST和IHA检测,两种方法均阳性者可作病人处理.     

几种日本血吸虫病环卵沉淀试验方法的比较

为在相同条件下,评价几种环卵沉淀试验(COPT)改进方法的诊断效果,全国血吸虫病研究委员会诊断组于1983年在江苏省常熟市组织了有七个单位参加的COPT现场对比试验,并以间接血凝试验(IHA)作为对照。共试验82倒粪检阳性血吸虫病人、51例经治疗后粪检阴性病人、51名健康输血员、5例华支睾吸虫病人及4例肺吸虫病人。试验时全部血清采用双盲法。结果:几种COPT改进法的阳性检出率为65.9～85.2％。酶联环卵法(ECOPT)和荧光环卵法(FCOPT)的检测效果与常规法相比,无显著性差异:对健康人的假阳性率为2.0～33.3％,其中常规法为2.0～7.8％。常规法COPT孵育72小时的结果(69.6～84.2％)高于48小时结果(65.9～73.2％)。IHA的敏感性为91.5％,假阳性率为3.9％,但IHA对肺吸虫病人的交叉反应似较高。     

微量末梢稀释血浆用于IHA及LAT诊断血吸虫病的研究

本文报道了采用耳垂或手指的微量末梢血液,使之成为1∶5抗凝稀释血浆代替静脉血分离血清进行IHA及LAT诊断血吸虫病。在现场同等条件下,用该法与静脉取血法对558例样本作配对检测,其结果经统计学处理,无显著差异;与静脉血分离血清IHA的阳性符合率为97.0％,GMRT符合率为96.4％;LAT的阳性符合率为95.7％,GMRT符合率为92.4％。该法采血简便、快速,节省人力、物力,适用于现场血吸虫病的诊断。     

塑料条ELISA检测日本血吸虫病抗体方法的建立及应用

塑料条ELISA(PS-ELISA)方法,以PVC塑料条代替微孔板,作为ELISA的固相载体,以达到简化操作、节约成本的目的.建立的PS-ELISA方法,在抗原、血清、酶结合物工作浓度选择时,与常规ELISA方法相比,两法OD值差异不大;检测73份血吸虫病人血清、95份健康人血清、18份肺吸虫病人血清和18份丝虫病人血清,PS-ELISA和ELISA检测阳性率分别为95.9%、1%、0%、0%和94.5%、1%、0%、0%,两法无显著差异;检测73份血吸虫病人血清,PS-ELISA和ELISA的平均P/N值分别为14.63和5.47,t检验有显著差异(t=12.28,P<0.01);检测95份健康人血清,PS-ELISA和ELISA的平均P/N值分别为1.01和1.16,(t=1.92,P>0.05).结果提示,PS-ELISA可应用于检测血吸虫病,且该法似能提高低感染度的检出率和降低假阳性率.     

隐匿性血吸虫感染的研究

在已达到消灭血吸虫病标准的泰兴市和已达到基本消灭标准的昆山市各为8000余人的2个社区,分别发现隐匿性血吸虫感染111例和74例,预期人群感染检出率分别为2.4％及1.69％。患者检出率为0.04％及0.37％。用COPT、IHA、ELISA和IESA 4种方法检测血清特异性抗体,2项及2项以上同时阳性者达40.0％,吡喹酮抗虫治疗后1年,COPT呈下降趋势。     

弓形虫IHA和ELISA的一种非特异性交叉反应的初步报告

<正> 本试验以RH株弓形虫速殖子按常规方法提取可溶性抗原,对124例急性血吸虫病人血清及吡喹酮杀虫治疗3个月的63份急性血吸虫病人血清,作IHA和ELISA检测;同时以各30份慢性血吸虫病人和晚期血吸虫病人血清以及31份正常人血清为对照,观察其反应结果。IHA的阳性滴度为1:64,ELISA以酶联免疫检测仪(DG-3022型)S/N>2.1为阳性反应标准,其结果如下。 124例急性血吸虫病人血清,阳性反应94例,占75.0％,慢性和晚期血吸虫病血清阳性反应均为6.7％(2/30),正常人血清阳性反应为3.2％(1/31)。急性血吸虫病人血清阳性反应率与慢性、晚期血吸虫病人及正常人血清之间的阳性反应率,均有着非常显著差异(P<0.001),但正常人与慢性、晚期血吸虫病人之间却无明显差异(P>0.05)。     

PVF抗原片环卵沉淀试验诊断日本血吸虫病敏感性和特异性的进一步观察

据80份粪检阳性的血吸虫病人血清,95份经吡喹酮治疗后3～8年的血吸虫病患者血清和90份非流行区健康人血清,按单盲法混合编号的考核实验结果:PVF—COPT使用江苏省寄研所提供的冷冻干卵抗原和热处理超声干卵抗原,对血吸虫病人血清的阳性率均为83.8％;在有血吸虫病治疗史者血清的阳性率分别为22.1％和15.8％;对正常人血清的假阳性率分别为8.9％和6.7％.此外,对肺吸虫、华枝睾吸虫病和姜片虫病人血清采用冷冻干卵抗原的交叉反应阳性率分别为8％、12％和4％。与常规法COPT的平行对比实验结果均无显著的差异.但标准化的PVF—COPT能预制定量的干卵抗原片,有利于提高COPT的稳定性.操作上较常规法COPT简便.     

急性血吸虫病患者血清弓形虫病IHA试验阳性反应探讨

<正> 在运用绵羊红细胞为载体的弓形虫病间凝试验(IHA)对血吸虫病流行区进行调查时,观察到急性血吸虫病人血清中,弓形虫病IHA试验阳性率高达76.8％。国内外资料表明绵羊红细胞表面存在嗜异性抗原,血吸虫病人血清中有大量嗜异性抗体。本文着重讨论急性血吸虫病人血清中嗜异性抗体对弓形虫病IHA的影响。 30份正常人血清和52份急性血吸虫病人血清,经嗜异性抗体凝集试验,正常人阳性率为60％,滴度小于1:160;而急性血吸虫病人阳性率为100％,且滴度大于1320。把嗜异性抗体阳性病人血清用10％的绵羊红细胞吸收后,正常人血清全为阴性,而52例急性血吸虫病人中,血吸虫病IHA试验有73.1％(38/52)的滴度小于1:3000;而弓形虫病IHA     

水网型达到消灭血吸虫病标准地区监测方法的研究

为寻找一种较为合理的血吸虫病监测方法，在达到消灭标准10年以上的两个试区分别采取A、B两种监测方案，经3年观察，两试区均未发现钉螺和病人。整群COPT阳性率分别为0．94％（13／1381）和1．85％（3／162），均在正常人假阳性率范围内。表明两种方案的监测效果相似，但监测用费B方案比A方案节约89．7％。提示，B方案似可作为一种监测的试行方案。     

9种抗日本血吸虫单克隆抗体特性鉴定及其组合试验研究

9种抗日本血吸虫抗原的单克隆抗体,经IFA定位可分为4类.将其中抗不同抗原表位的单抗组合使用,检测抗原敏感性可提高4—8倍.用3种单抗组合,建立的夹心ELISA检测慢性血吸虫病的阳性率为81.3%,276例正常人假阳性率为1.5%.环卵沉淀反应阳性的单抗似可用来分离有关COP反应的虫卵抗原,或在小鼠中诱导及/或调节免疫病理的免疫反应.     

血吸虫肝卵免疫酶试验切片载体的改进

应用PVC薄膜代替载玻片作肝卵组织切片载体,进行免疫酶染色试验(简称PVC-IEST)。与玻片法免疫酶染色试验(IEST)比较,两法同时检测78份血吸虫病患者血清,结果PVC-IEST和IEST阳性率分别为96.2％和97.4％。此外,用PVC-IEST检测粪便孵化阳性的血吸虫病患者血清164份和粪便孵化阴性而COPT阳性的血清15份,其PVC-IEST阳性率为97.2％(174/179)。检测6份并殖吸虫病患者血清及并殖吸虫病犬血清6份,均为阴性。健康人血清63份,62份阴性,仅1例假阳性。     

日本血吸虫病患者体内自然抗独特型抗体的初步研究

成用杂交瘤技术所制备的鼠抗日本血吸虫可溶性抗原(SEA)单克隆抗体5B5H腹水经饱和硫酸铵提纯后制成亲和层析柱,血吸虫病人血清过此柱后获得抗Id抗体提取物。经McAb-ELISA测试,提取物与5B5H单抗特异性结合,与另一株抗SEA单抗W_(29)及抗成虫单抗W_(46)均不结合,补体结合试验表明此提取物不含有免疫复合物。SEA可显著竞争抑制Id(5B5H)-抗Id抗体的结合,提示抗Id抗体所针对的5B5H单抗的Id位于抗原结合部位或其邻近。用5B5H-ELISA检测两个不同地区血吸虫病患者的抗Id抗体,阳性率分别为35.1％和60％,与姜片虫病人血清(0/15)、华支睾吸虫病人血清(0/15)无交叉反应,在并殖吸虫病人血清中出现一例阳性(1/20),与健康人也无假阳性反应(0/50)。     

血吸虫病病人唾液中特异性抗体的检测

目的 研究血吸虫病病人唾液中特异性抗体的诊断价值。方法 用间接ELIWA平行检测50例血吸虫病病人和55例正常人(选自非血吸虫病疫区)唾液中IgG和IgA抗体。结果 血吸虫病患者唾液中IgG与粪检的阳性符合率为78．0％(39／50),与正常对照组3．6％(2／55)比较,差异有高度显著性(P＜0．001),唾液中IgA与粪检的阳性符合率为8．0％(4／50),与正常对照组5．5％(3／55)比较,两者差异无显著性(P＞0．05)。结论 在血吸虫病患者唾液中可检测出特异性IgG抗体,可视为诊断血吸虫病的新途径。     

Dot-IGSS检测日本血吸虫病人血清抗体的研究

运用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)检测了日本血吸虫病人血清抗体,并与斑点酶联免疫试验(Dot-ELISA)作了比较。检测了急性血吸虫病人血清38份,两法结果全部阳性;慢性血吸虫病人血清70份,Dot-IGSS阳性69份(98.6％),Dot-ELISA阳性65份(92.9％);治疗后血吸虫病人血清40份,Dot-IGSS阳性15份(37.5％),Dot-ELlSA阳性11份(27.5％)。用两法检测华枝睾吸虫病人血清20份,均有1份为阳性;检测正常人血清40份,均未出现阳性反应。将8份阳性血清作倍比稀释(1:20～1:61440)后分别用该两法检测,Dot-IGSS的敏感性明显高于Dot-ELISA(P<0.05)。对120例过去无血吸虫病史、接触疫水且皮试阳性者血清检测结果表明,Dot-IGSS的阳性检出率明显高于Dot-ELISA、COPT及循环抗原测定法(P<0.01)。     

日本血吸虫病患者尿液中循环抗原和抗体联合检测的诊断价值

[目的 ]探讨尿液中血吸虫循环抗原和抗体检测对日本血吸虫病的诊断价值。 [方法 ]用单克隆抗体夹心 ELISA法检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原 ,间接ELISA检测尿液中特异性抗体。 [结果 ]10例急性血吸虫病和 6 1例慢性血吸虫病患者尿液中循环抗原的阳性率分别为 6 0 %和 40 % ,特异性抗体的阳性率分别为 80 %和 6 1 7%。两者联合检测的总阳性率分别为 10 0 %和 71 7%。 10 0例健康对照者尿液中仅 3%出现假阳性。 [结论 ]检测尿液中日本血吸虫循环抗原和特异性抗体简便、实用 ,为一种非损伤性的血吸虫病诊断方法。     

应用斑点金免疫渗滤法诊断日本血吸虫病

目的：探索一种便捷的血吸虫病诊断方法。方法：在原已建立的ELISA法的基础上，应用3个针对日本血吸虫抗原的不同表位的单克隆抗体标记胶体金，建立检测日本血吸虫病患者血清中血吸虫抗原的斑点金免疫渗滤法。抗原与抗体通过渗滤在硝酸纤维薄膜上进行反应，数分钟用肉眼观察结果。结果：本法检测SEA的敏感度为16ng／ml，在69例慢性日本血吸虫病患者血清的检测中，阳性率为60．8％，特异性为95．2％；同时用dot－ELISA检测137例慢性日本血吸虫病患者，阳性率为54．7％、特异性为94．6％；夹心ELISA检测118例 慢性日本血吸虫病患者，阳性率为61．9％、特异性为95．7％。结论：经数理统计G检验证实斑点金免疫渗滤法的敏感性和特异性同ELISA 相近, 且操作更简便且快速。     

血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅰ

将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫感染疾病血清无明显交叉反应。用单盲法Dot—ELISA检测3批血清,结果敏感性为86.5％～95.1％;特异性为96.9％～100.0％。检测流行区居民547份血清,Dot—ELISA阳性反应130份;粪检阳性72例。两者均为阳性者55例,相符率为76.4％。上述结果表明,Dot—ELISA检测循环抗原确实具有较好的敏感性与特异性,适于大规模应用及流行病学调查。