肝细胞癌小上皮细胞白蛋白和CK7的表达

目的探讨人类肝癌肝组织是否存在小上皮细胞(small epitheli—cell，SEC)，这类细胞是否表达白蛋白CK7双重免疫表型。方法用肝细胞分化标记白蛋白和胆管上皮分化标记CK7抗体，对30例人肝细胞肝癌的手术标本材料作免疫组化染色，对其中10例作超微结构观察和白蛋白及CK7的免疫电镜标记。结果30例中有20例在肝癌肿瘤边缘和增生的小胆管发现有少量SEC。这类细胞既表达白蛋白，又表达CK7。电镜下，这类SEC体积较小，核大，胞质少，胞质内主要为游离核糖体，并有胞质内张力微丝及细胞间连接结构。免疫电镜下，10例中有5例可显示在同一SEC同时表达白蛋白和CK7。结论人肝细胞肝癌肝中确实存在SEC。这类SEC具有与人肝母细胞瘤和胆道闭锁肝组织中的SEC一样的形态和免疫表型特点。     

肝细胞肝癌中肝脏干细胞标志物的研究

目的：检测人肝细胞肝癌中是否存在肝内干细胞（又称为肝前体细胞）以及分化状态如何,并探讨骨髓干细胞在肝细胞肝癌的病理过程中是否发挥作用。方法：用免疫组织化学法检测40例肝癌组织及癌旁组织中的HepParl（肝细胞标志物）、CK7和CK19（胆管细胞分化标志物）以及CD90（骨髓干细胞标志物）的表达情况。结果：在肿瘤结节边缘及肝硬化的门脉区可发现肝前体细胞的存在,并且HepParl、CK7和CK19表达阳性,而CD90表达阴性。结论：肝细胞肝癌可能是在肝前体细胞长期突变积累的基础上发展而成。     

甘油二酯激酶ζ在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达

目的研究肝癌组织和人肝癌细胞系中甘油二酯激酶ζ(diacylglycerol kinase,DGKζ)和蛋白激酶C(PKC)的表达及意义。方法应用免疫组织化学和细胞化学法检测DGKζ和PKC在60例肝癌与癌旁组织、10例正常肝组织和体外培养的正常人肝细胞系、癌旁肝细胞系和人肝癌细胞系的表达情况,对肝癌组织中DGKζ和PKC的表达进行相关性分析。结果 DGKζ在正常肝组织呈阴性表达,在癌旁组织肝细胞胞质和肝癌细胞的细胞膜上有阳性表达;肝癌组织中DGKζ的阳性率为86.7%(52/60),显著高于癌旁组织(40/60,χ2=6.708,P=0.010)和正常肝组织(阴性,χ2=33.704,P<0.000 1)。PKC表达在正常肝细胞的胞质和胞核、癌旁组织肝细胞的细胞膜和肝癌组织的胞质或胞膜;肝癌组织中PKC的阳性率为71.7%(43/60),与癌旁组织61.7%(37/60,χ2=1.350,P=0.245)和正常组织100.0%(10/10,χ2=3.742,P=0.104)相比无统计学差异,癌旁组织中PKC的阳性率显著低于正常肝组织(χ2=5.709,P=0.025)。肝癌组织中DGKζ与PKC的表达呈正相关(r=0.296,P=0.022);DGKζ和PKC均主要表达在三种细胞系肝细胞的胞质。结论 DGKζ主要在肝癌组织被激活,可能有抑制肝癌细胞增殖的作用。     

人肝病变组织低分子量角蛋白CK19的表达

目的 研究低分子量角蛋白CK19在人肝细胞癌、肝癌前病变、肝硬化组织中的表达状况及意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测56例细胞癌、8例肝硬化及9例正常肝组织中CK19的表达。结果 56例肝癌旁不典型增生组中异型增生细胞及卵圆细胞的CK19表达率（51.9%)显著高于癌旁非不典型组中肝细胞的表达率（17.2%),但与肝癌组织的表达率差别不大。肝硬化组中CK19的表达率为37.5(3/8)阳性细胞均为卵圆细胞及异型增生细胞,结论 肝细胞癌和增生的卵圆细胞及异型增生肝细胞表达CK19,提示CK19可做为判断肝细胞异型增生的一个指标,肝细胞癌CK19表达与其组织学类型有密切关系。     

肝细胞癌细胞膜抗原性的初步研究

为探讨人肝癌细胞膜是否存在与癌周肝细胞膜不同的抗原表达,作者用4株人肝癌体外培养细胞分别免疫家兔,抗血清经肝粉吸附后对外科切除的33例肝细胞癌及癌周组织,10例非癌性肝病组织的冰冻切片进行了间接免疫荧光及PAP染色。结果肝癌细胞膜染色阳性,胞浆、胞核阴性;癌周组织及非癌性肝病组织中肝细胞膜也呈阴性。部分癌及非癌组织其血窦壁显弱阳性。作定量分析的结果表明,在同一张切片中,肝癌组织染色强度为癌周组织的2～17倍。结果提示肝癌细胞膜上有癌周肝细胞膜不表达或表达甚微的抗原存在。     

慢性重型肝炎肝内胆管增生的初步研究

目的：探讨CK7、8、19，白蛋白，甲胎蛋白AFP和CD34在慢性重型肝炎（CSH）患者肝组织内的表达；分析肝内胆管增生和肝再生的关系。方法：12例CSH肝组织行HE和嗜银染色；用SP免疫组织化学染色检测CK7、8、19，白蛋白、AFP和CD34表达。结果：死亡2例诊断为慢性重型肝炎；10例恢复期患者病理诊断为早期肝硬化。肝组织内胆管明显增生。肝组织内典型胆管增生细胞CK7、19强阳性；非典型胆管增生细胞CK8强阳性，CK7、19呈弱阳性，部分同时表达CK19和白蛋白，其细胞形态和表型符合肝卵圆细胞特征。结论：慢性重型肝炎患者肝组织内部分非典型增生胆管细胞可能来源于肝卵圆细胞；慢性重型肝炎患者肝细胞增生可能是干细胞参与的再生过程。     

人肝病变组织低分子量角蛋白CK19的表达

目的研究低分子量角蛋白CK19在人肝细胞癌、肝癌前病变、肝硬化组织中的表达状况及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测56例肝细胞癌、8例肝硬化及9例正常肝组织中CK19的表达。结果56例肝细胞癌组织中26例CK19表达阳性,显著高于对照组(P<0.001),癌组织CK19多分布于腺样型或梁索型肝细胞癌。癌旁不典型增生组中异型增生细胞及卵圆细胞的CK19表达率(51.9%)显著高于癌旁非不典型组中肝细胞的表达率(17.2%),但与肝癌组织的表达率差别不大。肝硬化组中CK19的表达率为37.5%(3/8),阳性细胞均为卵圆细胞及异型增生细胞。结论肝细胞癌和增生的卵圆细胞及异型增生肝细胞表达CK19,提示CK19可做为判断肝细胞异型增生的一个指标。肝细胞癌CK19表达与其组织学类型有密切关系。     

β-catenin在肝癌中的表达和意义

目的β-catenin在胞内异常表达常见于多种原发性肿瘤,本研究拟观察β-catenin在原发性肝癌中的表达,探讨β-catenin在原发性肝癌发生发展中的作用。方法免疫组织化学Envsion法检测33例肝细胞癌及其癌旁组织,22例胆管细胞癌,20例转移性癌及20例正常肝组织中β-catenin蛋白的表达。结果β-catenin蛋白在肝细胞癌胞膜/胞质/胞核的阳性表达率分别是72%(24/33),76%(25/33)和39%(13/33);在胆管细胞癌胞膜/胞质/胞核的阳性表达率分别为86%(19/22),86%(19/22)和45%(10/22);在转移性癌胞膜/胞质/胞核的阳性表达率分别是80%(16/20),90%(18/20)和40%(8/20);在癌旁和正常肝组织中胞膜/胞质/胞核的表达率分别是58%(19/33),67%(22/33),0%(0/33)和60%(12/20),70%(14/20),0%(0/20)。β-catenin蛋白胞膜/胞质/胞核在肝细胞癌和胆管细胞癌中的表达与癌旁和正常肝组织胞膜/胞质/胞核的表达两两比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论β-catenin的过表达提示其在原发性肝癌的发生发展过程中起着促癌的作用。     

人肝癌细胞自分泌促性腺激素释放激素的形态学证据

目的：明确肝癌组织细胞是否具有分泌促性腺激素释放激素（GnRH)的功能。方法：采用免疫组化和原位杂交技术，研究人肝癌组织中GnRH及其受体的表达。结果：10例石蜡包埋的肝细胞癌（HCC）组织中有7例表现为GnRH及其受体蛋白免疫反应阳性，GnRH及其受体均定位于肝癌细胞的胞膜和胞质；4例新鲜肝癌组织中有2例检测出GnRH-mRNA，阳性杂交信号定位于肝癌细胞的胞质，胞核未见杂交信号。结论：本研究表明，肝癌组织细胞具有自分泌GnRH的功能，为进一步探讨GnRH与肝癌生物学特性之间的关系提供了理论基础。     

结直肠癌CK7阳性表达的临床病理学意义

目的 探讨CK7阳性表达在结直肠癌的临床病理学意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测CK7、CK20在68例结直肠癌、20例管状腺瘤、5例锯齿状腺瘤和20例增生性息肉的表达.结果 68例直结肠癌CK20表达阳性率89.7%;CK7表达阳性率39.7%,其中结肠癌阳性率35.7%(15/42),直肠癌42.3%(11/26);管状腺瘤CK20表达阳性率100%,CK7表达阴性;锯齿状腺瘤和腺瘤增生性息肉CK20表达阳性率100%,CK7表达阳性率分别为40%和30%.在结肠癌,CK7阳性表达与Dukes'分期、腺癌分化程度及发生部位无明显相关性.结论 CK7很可能是增生性息肉-锯齿状腺瘤-癌变途径发生的结直肠癌标志物之一,检测结直肠粘膜息肉样变CK7的表达,可能对判断结肠息肉癌变具有重要意义.     

人肝细胞性和胆管细胞性肝癌的细胞角蛋白表达

为了明确用胆管型细胞角蛋白抗体在肝细胞性和胆管细胞性肝癌的鉴别诊断中的应用价值，我们用能在肝内特异性识别ＣＫ１９和ＣＫ１８的抗体及层粘连蛋白抗体进行了免疫组织化学研究。结果表明，１０例ＣＣ全为ＣＫ１９阳性，３７例ＨＣＣ中１４例（３８％）有ＣＫ１９阳性癌细胞，因此，我们提出ＣＫ１９表达与否不能作为鉴别ＨＣＣ和ＣＣ的标准，ＨＣＣ中ＣＫ１９表达与其分化程度无关，但与其组织学类型有关，呈腺样分化的癌巢全呈     

肝细胞癌中卵圆细胞表面标记的表达及意义

目的探讨卵圆细胞部分表面标记在肝细胞癌中的表达状况和意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测20例肝细胞癌中CK7、CK19、CK18、CD34、e—kit抗原的表达。结果14例肝细胞癌CK7表达呈阳性，其阳性表达率为70％（14／20）；9例c—kit的阳性表达率为45％（9／20）；在20例肝细胞癌癌组织中的CK18全部呈阳性表达，CK19和CD34全部呈阴性表达。CK7、C—kit表达与患者年龄、性别无关，与肿瘤大小、是否合并肝硬化以及组织学分级也不相关（P〉0．05）。结论肝细胞癌癌组织中存在表达卵圆细胞表面标记的细胞，其表达CK7、C—kit，不表达造血干细胞标记物CD34。其进一步提示，肝细胞癌可能不是起源于肝干细胞而是来源于过渡性的前体细胞／祖细胞，如来源于Hering管的卵圆细胞。     

大鼠肝卵圆细胞增殖模型建立及其纯化鉴定

为建立大鼠卵圆细胞增殖模型，分离纯化卵圆细胞并对其特性进行研究，SD大鼠喂饲2-乙酰氨基芴(2-acetyailamif1uorene，2-AAF)，剂量分别为5、10、15、20mg／kg，连续给药6d，于第7天行三分之二部分肝切除，术后继续给药1周，每隔3d取肝组织行常规组织学观察，作细胞增殖试验及免疫组化染色。通过免疫磁珠标记C-kit阳性细胞以纯化卵圆细胞(Magnetic activated cell sorting，MACS)，用免疫细胞化学及RT-PCR对纯化细胞进行鉴定。结果：10、15、20mg／kg三种剂量2-AAF均可成功建立卵圆细胞增殖模型，卵圆细胞增殖于第8天较明显，至第11天达高峰，第14天有所减少。卵圆细胞胞核Brdu染色阳性，其除表达卵圆细胞特异性抗原OV6外，尚表达肝细胞标记白蛋白及胆管细胞标记CKl9。胚胎期肝细胞抗原AFP、连接蛋白43在卵圆细胞中亦有高表达，同时还表达造血干细胞标记C-kit。以MACS纯化的C-kit阳性卵圆细胞，90％以上为OV6阳性，并有AFP、白蛋白、CK19 mRNA转录。结论：2-AAF剂量为10～20mg／kg时可获得满意的大鼠卵圆细胞增殖模型，增生的卵圆细胞为具有双向分化潜能的肝干细胞／前体细胞，利用C-kit标记通过MACS可纯化这种肝干细胞／前体细胞。     

CEA、CK_(8,18)、AFP和AAT在肝细胞癌中表达及意义

用免疫组化方法观察癌胚抗原(CEA)、低分子量细胞角蛋白((CK_(8,18))、甲胎蛋白(AFP)和a_l抗胰蛋白酶(AAT)在75例肝细胞癌(HCC)中的表达。其中,CEA57/75例阳性(76％);CK_(a,18)54/75例阳性(72％);AFP51/75例阳性(68％);AAT58/75例阳性(77.3％)。AFP和AAT在中等分化(Ⅱ级HCC中阳性率最高;CK_(8,18)在低分化(Ⅲ级)HCC中的表达比其他3种相对较高。CEA抗血清能显示HCC的毛细胆管分化,它是HCC的特征性标记,在病理鉴别诊断上有很大意义。CK_(,18)、AFP和AAT可见于非肝细胞来源的肿瘤,病理上的应用价值有限。AAT在HCC和癌周肝组织的阳性率分别为77.3％和66.7％,远比AFP68％和26.7％高,两者有显著差异(P<0.01)。因此,血清AAT的检测对HCC的诊断和预后估计可能比AFP更有意义。     

肺癌实质的起微结构研究

Thirty three cases of human lung carcinoma were studied by both light microscopy and electron microscopy. The diagnoses of 24 cases initially made by light microscopy were changed, extended, or supplemented by electron microscopic observation. Nineteen cases showed heterogeneity. Bidirectional or tripartite differentiation was frequently found in the same case, even in the same cell. The diagnosis and heterogeneity of lung carcinoma were discussed.     

原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的起源分析

目的观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征.方法应用HE染色、免疫组化S-P方法观察94例肝细胞癌(HCC)和12例肝内胆管细胞癌(ICC)和10例混合型肝癌的肝干细胞情况,用5例肝硬化和4例正常肝组织为对照.结果在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达,均可观察到肝于细胞向肝癌细胞的转化,以混合型肝细胞癌中肝于细胞免疫表型表达率最高(P＜0.05).结论不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞,可能由于肝干细胞(hepatic stem cell,HSC)分化不全或分化异常所致.