HBeAg特异性细胞免疫反应体外抗乙肝病毒作用

目的探讨体外HBeAg特异性细胞免疫反应对乙型肝炎病毒(HBV)mRNA表达及蛋白合成的影响。方法自正常人外周血单核细胞中诱导培养树突状细胞(DC),经不同浓度的HBeAg负载后与自身T细胞共同培养,诱导产生HBeAg特异性T细胞,同时设与无HBeAg刺激的DC共同培养的T细胞、单纯T细胞为对照组,作用于HepG2.2.15细胞系,逆转录PCR(RT-PCR)检测HepG2.2.15细胞内乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝核心抗原(HBcAg)的mRNA水平,酶联免疫法(ELISA)检测细胞培养上清中HB-sAg和乙肝e抗原(HBeAg)水平。结果经HBeAg刺激激活的T细胞可以有效地抑制HBsAg、HBcAg mRNA的表达(P0.05)及HBsAg、HBeAg的合成(P0.05),且随着HBeAg刺激浓度的升高,对上述指标的抑制率逐渐上升。结论HBeAg特异性细胞免疫反应可显著抑制HBV mRNA和蛋白的表达,为开发HBeAg相关的治疗性疫苗奠定理论基础。     

慢性乙型肝炎的发病机理

乙型肝炎病毒(HBV)对肝细胞无直接致病性,而肝脏损害主要系HBV抗原所引发的细胞免疫反应造成的。这些反应主要包括迟发型超敏反应、细胞毒性T细胞(CTL)毒作用和抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)反应。CTL攻击的主要靶抗原是肝细胞膜上表达的HBcAg和HBeAg,可能还有前S_1蛋白、前S_2蛋白及HBxAg。令人费解的是HBV感染的临     

免疫功能年龄和性别的差异

年龄对T细胞免疫反应的影响普遍存在的抗原引起的迟发型过敏反应随机体年龄的增长而下降。老化减低了人淋巴细胞对植物血凝素(PHA)的敏感性。最近的一些报告指出,老年人对淋巴细胞抗原和T细胞丝裂原的增殖反应下降。随着年龄的增长,C57BL/J小鼠对二硝基苯基化牛丙种球蛋白(一种T细胞高度依赖抗原)的脾细胞免疫反应数量进行性下降。不论原发反应还是继发反应,老化的动物(25月龄)主要丧失直接反应物质(IgG)和高亲和力空斑形成细胞,同时从细胞转化实验可以发现,这些动物的辅助细胞活性下降,而抑制细胞活性增强。因为T细胞在产生     

日本血吸虫病T细胞应答的控制机制

日本血吸虫病感染的慢性期T细胞对虫卵抗原的应答受到抑制。这种现象与本病的临床症状密切相关,因为日本血吸虫病特征性的肝脾病变本质上是栓塞于肝内门脉支的虫卵周围形成肉芽肿,这一反应是T细胞控制下的宿主应答。T细胞反应的调节机制已知有抑制性T细胞(Ts)介导的和抗基因型抗体(抗Id)介导的两种。预防日本血吸虫病的感染很困难,目前正着眼于通过阐明T细胞应答的控制机制,研究即便感染也不发病,即所谓病理学预防接种的司能性。作者等在体外以可溶性虫卵抗原(SEA)刺激慢性日本血吸虫病患者末梢血中的T细     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对肺结核患者特异细胞免疫的调节作用

目的探讨调节性T细胞对结核患者特异性细胞免疫的调节作用及其在结核病发生中的意义。方法采用免疫磁珠从健康对照和结核患者外周血单个核细胞中分离CD4+CD25+调节性T细胞,观察其对结核患者外周血免疫反应,包括细胞增殖反应和细胞因子IFN-γ及IL-10分泌的影响。结果体外消除CD4+CD25+调节性T细胞没有显著影响健康对照PBMC对BCG抗原的增殖反应,但可以显著增强结核患者PBMC对BCG抗原的细胞增殖反应、细胞因子IFN-γ及IL-10的分泌。分离的CD4+CD25+调节性T细胞能显著抑制结核患者CD4+CD25-T细胞对BCG抗原及抗-CD3的细胞增殖和细胞因子IFN-γ分泌;CD4+CD25+调节性T细胞也抑制BCG刺激的CD4+CD25-T细胞IL-10的分泌,但不影响抗-CD3刺激的IL-10分泌。结论CD4+CD25+调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答促进肺结核病的发生发展。     

HBV抗原基因修饰树突状细胞疫苗体外抗HBV的作用

目的：探讨腺病毒载体介导HBV抗原基因修饰的树突状细胞(DCs)诱导抗HBV特异性CTL反应方法：制备携带HBsAg、HBeAg和HBcAg基因的3种重组腺病毒Ad-HBs,Ad-HBe,Ad- HBc,分别转染自脐带血体外诱导培养的DCs,观察腺病毒转染DCs效率和DCs中HBV抗原的表达;混合淋巴细胞反应(MLR)测定HBV抗原基因修饰DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力;乳酸脱氢酶释放法检测特异性CTL细胞对HepG_222．1．5靶细胞的杀伤能力．结果：腺病毒载体能够高效介导HBV三个抗原基因在DCs中表达,90%以上DCs表达示踪基因EGFP,且DCs细胞形态完整：感染后72 h HBsAg和HBeAg含量分别为0．919和0．328(吸光度A值)．MLR实验显示,HBV抗原基因修饰DCs仍然具有刺激同种异体T细胞的增殖能力,Ad-HBs转染DCs组、Ad-HBe转染DCs组、Ad-HBc转染DCs组和未转染DCs组之间刺激T细胞的增殖水平无明显差异(F=1．194,P=0．389);在E：T比例为2：1,10：1和25：1时,Ad-HBs转染DC组、Ad-HBe转染DCs组和Ad-HBc转染DCs组对HepG_222．1．5细胞的杀伤率均明显高于未转染DCs组(P＜0．001);以Ad- HBc转染DC组对HepG_222．1．5细胞杀伤率最高．结论：HBV抗原基因修饰DCs疫苗具有刺激同种异体T细胞增殖能力,同时能增强抗HBV特异性CTL反应的能力,可能发展为一种新型抗病毒疫苗．     

FK_(506)在心脏移植中的应用

FK_(506)是由土壤中的Streptomyces tsukubaensis代谢产物中分离出来的一种新型大环内酯类抗生素,分子量为822,不溶于水。体外实验证明:FK_(506)能抑制混合淋巴细胞反应、细胞毒性T淋巴细胞的产生、白细胞介素2的产生及白细胞介素2受体的表达。其半衰期     

人类免疫缺陷病毒感染中的特异性细胞毒T淋巴细胞反应(一)

特异性细胞毒T淋巴细胞（Cytoxic T　Lympho-cyte,CTL）是一类可以杀伤表达特异性抗原靶细胞的T细胞亚群。CTL是抗细胞内感染（病毒、单核细胞增多性李斯特菌等）、急性同种异型移植物排斥反应和杀伤肿瘤的重要效应细胞[1]。 大多数CTL表达CD8分子,由其TCRαβ识别源于细胞内合成的外源抗原肽。该抗原肽自身MHC-I类分子形成复合物,在靶细胞表面上表达。近年的研究发现,HIV特异性CD8 T淋巴细胞是机体抗HIV的最主要的免疫细胞。这类细胞与被病毒感染的细胞特异性结合后,可以分泌各种细胞因子,杀死靶细胞。在艾滋病病毒感染的急性期,患者血浆病毒     

乙型肝炎e系统与肝癌的关系研究进展

原发性肝癌(PHC)是一种严重危害人们健康的疾病,越来越多的研究表明,肝癌的发生发展与乙型肝炎病毒(HBV)感染高度相关.HBV有S、C、P、X等4个开放读码框,其中C区主要合成乙肝病毒核心抗原(HBcAg)与e抗原(HBeAg).机体感染HBV后针对e抗原可产生非保护性抗体,即e抗体(HBeAb或抗-HBe).HBeAg阳性是HBV复制、传染的指标.有学者认为HBeAg是一个免疫耐受因子[1],它的缺失将导致免疫耐受被破坏,从而诱导炎症活动;HBeAg又是细胞毒性T细胞的靶抗原,在肝细胞膜上HBeAg的缺失,会使变异株逃避宿主免疫的清除,使感染得以继续存在.在组织再生时,这部分肝细胞膜上HBeAg缺失的肝细胞可大量增生,使肝脏的纤维化程度逐渐加重,并且发生癌变的危险性增加.近年来,关于乙肝e系统(HBeAg与HBeAb)与肝癌的关系研究比较多,现综述如下.     

不同类型慢性HBV感染者外周血T细胞亚群的差异

目的：比较HBV不同感染形式的患者外周血T细胞亚群的差异。方法：采用流式细胞仪检测HBeAg阳性ALT异常者40例(A组)、HBeAg阳性ALT持续正常者20例(B组)、HBeAg及HBV DNA阴性ALT正常者20例(C组)、健康体检者(各型肝炎病毒检测均为阴性)15例(正常对照组)的外周血T细胞亚群。结果：A、B组CD4^ T细胞数量较正常组及C组明显降低，CD8^ T细胞数量较正常组明显升高，CD4／CD8、CD8^ CD28^ 、CD28^ T细胞较正常组明显降低，而CD8^ CD28^-T细胞则明显升高。结论：HBeAg阳性ALT正常患者TS细胞数量增多，TH细胞和CTL细胞受到抑制，乙肝病毒高度复制，与CD4^ T细胞及CTL数量低下，抑制性T细胞增高有关。     

肾小管与间质因子在肾炎进展中的作用(二)

(二)肾小管粘附分子的表达粘附分子(如Integrins Selectin)的表达可促进变态免疫反应和细胞溶解作用的发生。因为这些因子是MHC-Ⅱ类抗原限制性抗原提呈过程中不可缺少的要素.粘附分子通过与单枝细胞上的特异性配体相结合(ICAM-1,ICAM-2与IFA-1相结合,VACM-1与CD_4~+/CD_2~+结合等),引起单个核细胞和白细胞的迁移.粘附因子还介导了具有溶解作用的细胞与靶器官(如肾细胞)的粘附.应用抗ICAM-1能够减轻实验性动物的同种排异反应.作为T辅助细胞/诱导细胞和细胞毒性T淋巴细胞的特异性表面标记的CD_4~+及CD_6~+分子,也能够促进粘附作用,通过MHC-CD_(?)的相互     

可诱导共刺激分子和程序性死亡分子l在HIV感染者中的表达

正艾滋病病毒(HIV)侵入机体细胞后,攻击人体辅助T淋巴细胞系统,从而导致机体的免疫应答缺陷,特别是针对HIV抗原特异性T细胞的功能受损。目前关于T细胞的功能损伤机制还不明确,可能与抗原递呈细胞功能缺陷、调节性T细胞增加反应缺陷和共刺激分子表达异常等有关[1]。可诱导共刺激分子(inducible costimulatory molecure,ICOS)和程     

环孢菌素与哮喘

Alexander等在一项双盲安慰剂对照的研究中报道,环孢菌素(CS)可改善类固醇依赖性哮喘患者的肺功能。由于CS可抑制辅助性T细胞的激活,因而认为辅助性T细胞与哮喘的发病机制有关。具有抑制T细胞作用的CS类似物对哮喘可能更为有效。 CS在T细胞抗原反应通道中可抑制Ca~(2+)依赖性中间步骤,阻止T细胞转录因子NF—AT进入细胞核,抑制T细胞基因的转录,减少白介素—2等淋巴因子的产生。CS可与Cyclophilin结合,后者可能是一种与蛋     

老年人免疫功能与肾小球疾病

随着年龄的增长机体某些免疫功能渐趋减退,这是生命过程中自然生理退化现象之一。年龄老化机体对外来特异性抗原的免疫应答反应降低,自身抗体阳性率升高。T/B淋巴细胞数并不减少,但T细胞亚群Th(CD_4)增多,Ts(CD_8)减少。且白细胞介素(IL-1)和IL-2产生减少,从而抑制了T细胞的增殖。老年人T细胞免疫调节网络功能活性丧失,B细胞活化功能减退。年龄老化的主要组织相容抗原(MHC)与免疫不全所致感染、癌症、自身免疫疾病的发病率及其发病年龄密切相关。故老年人易致感染,且有难治愈及重症化的倾向。老年人肾小球疾病本身就是肾小管间质易感染     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎T细胞亚群及血清HA、TGF-β1的变化

目的 探讨拉米夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(轻度)后患者T细胞亚群及血清HA、FGF-β1的变化.方法 42例HBeAg阳性慢性乙型肝炎(轻度)患者除一般护肝治疗外,加用拉米夫定100mg,每日一次.疗程6个月.服药前及6个月后检查肝功能,HBVDNA、T细胞亚群及血清HA、TGF-β1.结果 与治疗前比较,应用拉米夫定治疗6个月后,患者血清HBVDNA滴度明显下降,CD4 上升,CD4 /CD8 上升,NK细胞上升,血清HA、TGF-β1下降.结论 拉米夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(轻度),抑制了HBV的复制,调节了患者的细胞免疫功能,减轻了肝脏的炎症反应及纤维化,有利于病毒的清除.     

白细胞介素-2(IL-2)逆转疟疾免疫者T细胞对恶性疟抗原反应的无应答性

为了在恶性疟原虫抗原存在时探讨包括T细胞反应调节在内的机制,对从疟疾流行区居民的血液中分离的外周血单核细胞(PBMC),或CD4~+和CD8~+的纯化T细胞亚群的增殖反应进行了研究。供血者为34名加蓬Haut-ogooul省的当地居民,年龄为16～40岁(平均28.3岁)和另8名22～31岁(平均25.5岁)的临时居     

CD4+CD25+调节性T细胞对肺结核患者特异细胞免疫的调节作用

目的　探讨调节性T细胞对结核患者特异性细胞免疫的调节作用及其在结核病发生中的意义。方法 采用免疫磁珠从健康对照和结核患者外周血单个核细胞中分离CD4⁺CD25⁺调节性T细胞,观察其对结核患者外周血免疫反应,包括细胞增殖反应和细胞因子IFN-γ及IL-10分泌的影响。结果 体外消除CD4⁺CD25⁺调节性T细胞没有显著影响健康对照PBMC对BCG抗原的增殖反应,但可以显著增强结核患者PBMC对BCG抗原的细胞增殖反应、细胞因子IFN-γ及IL-10的分泌。分离的CD4⁺CD25⁺调节性T细胞能显著抑制结核患者CD4⁺CD25^-T细胞对BCG抗原及抗-CD3的细胞增殖和细胞因子IFN-γ分泌;CD4⁺CD25⁺调节性T细胞也抑制BCG刺激的CD4⁺CD25^-T细胞IL-10的分泌,但不影响抗-CD3刺激的IL-10分泌。结论 CD4⁺CD25⁺调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答促进肺结核病的发生发展。     

促甲状腺素在体外增加抗体生成所需要的细胞

作者曾报告免疫细胞能产生促甲状腺素(TSH),并进一步证实TSH对T细胞依赖性抗原(TDAg)——羊红细胞(SRBC)的体外抗体生成反应具有增强作用。本文报道TSH对非T细胞依赖性抗原(TIAg)——流产布氏杆菌-三硝基苯(BA-TNP)的体外抗体生成反应也具有增强作用,后者是通过T细胞介导而无需巨噬细胞的作用。 作者用微量法培养C57BI/J6雌性小鼠的脾细胞,以能刺激最小抗体生成反应的抗原浓度免疫细胞,培养5天,每天增加培养液之前用高纯度牛     

肽核酸抑制HBV复制与表达的体外研究

合成肽核酸(PNA)片段,由OligofectamineTm转染至HepG2.2.15细胞与HBV各编码区保守区域相结合。用ELISA方法测定HepG2.2.15细胞中HBsAg、HBeAg滴度,PCR测定HBV DNA含量。通过计算抑制百分率,筛选有效PNA片段。结果在500 mol/L浓度下,PG3 HBsAg、HBeAg、HBV DNA表达抑制率分别为51.03%、55.38%、20.10%;PG6 HBsAg、HBeAg、HBV DNA表达抑制率分别为47.00%、43.10%、51.03%。表明PNA可由OligofectamineTm转染至HepG2.2.15细胞,从而抑制HBV的复制和抗原系统的表达。     

气道嗜酸细胞呈递抗原的研究

目的：探讨嗜酸细胞（EOS）在体内和体外呈递抗原的过程和特征。方法：以鸡卵清蛋白（OVA）致敏和雾化吸入刺激BALB／c小鼠以诱发EOS在气道聚集后将其分离纯化。将曾在气道接触抗原的EOS和致敏T细胞在体外共同培养;同时,将EOS注入致敏小鼠气道,然后在预定的时间收集气管旁淋巴结细胞进行培养。观察由于EOS呈递抗原所引发T细胞在体外和体内的增殖反应的变化。结果：在体外实验中,如果没有EOS存在,T细胞不增殖,EOS数量逐渐增加之后,T细胞随即出现明显的增殖反应并呈数量相关性,在体内实验中,致敏小鼠气管内注入EOS 1天后气管旁淋巴结的T细胞增殖反应即有所增强,3天后达到峰值,1周以后下降。体内T细胞增殖反应随着注入气管的EOS数量的增加而增强。此外,无论是体内还是体外实验,暴露于某一抗原的EOS仅能抗原原呈递给经同一抗原致敏的T细胞。结论：EOS无论在体内还是在体外均能摄取和处理抗原,然后将抗原信息呈递给致敏T细胞促使后者增殖。并且,EOS呈递抗原的过程均表现出严格的抗原特异性。