5-氟尿嘧啶诱导直肠癌HR8348细胞凋亡作用的研究

目的　探讨 5 氟尿嘧啶 (5 fluorouracil ,5 FU )体外诱导直肠癌HR83 48细胞凋亡的作用及细胞凋亡与bcl 2、bcl xl、bax及 p5 3表达的关系。 方法　经 5 FU处理HR83 48细胞 2 4h后 ,用甲基绿 派若宁染色法和TUNEL法检测细胞凋亡情况 ,并用SP免疫组织化学法检测HR83 48细胞中bcl 2、bcl xl、bax和 p5 3的表达。 结果　HR83 48细胞经 5 FU作用 2 4h后 ,细胞凋亡指数 (AI)明显高于对照组 ,差异有显著性意义 (P<0 .0 1)。 5 FU作用不同时相bcl 2的表达评分结果与对照组比较差异均无显著性意义 ;不同时相bcl xl的表达评分结果与对照组比较稍降低 ;而bax的表达评分结果随时间延长明显增加 ,2 4h、3 6h的表达评分结果明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,而 p5 3在 5 FU组和对照组各时相均未见表达。结论　 5 FU具有诱导HR83 48细胞凋亡的作用 ;5 FU可能通过上调bax的表达并改变bax/bcl xl的比值而诱导HR83 48细胞凋亡。     

抑制自噬对5-氟尿嘧啶治疗肝癌疗效的影响及机制研究

目的研究自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对5-氟尿嘧啶（5-FU）诱导肝癌细胞系SMMC7721凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法利用单丹（磺）酰戊二胺（MDC）染色技术,在荧光显微镜下对细胞自噬进行定性观察;以CCK8法检测3-MA抑制细胞自噬前后经5-FU诱导SMMC7721细胞的存活,凋亡以AnnexinⅤ/PI流式细胞分析法检测;以Western blot法分别检测自噬特异性蛋白LC3及凋亡蛋白caspase-3活化片段和PARP裂解片段的表达。结果 5-FU处理肝癌SMMC7721细胞48 h后,可诱导其发生自噬,细胞存活率为（60.73±2.65）%,凋亡率为（40.42±2.34）%;联合应用3-MA处理48 h后,可使肝癌SMMC7721细胞存活率明显降低（P〈0.01）,为（42.31±1.32）%,而细胞凋亡率显著增加（P〈0.01）,为（60.92±2.99）%,同时引起自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ及凋亡蛋白caspase-3活化片段和PARP裂解片段表达增加,其灰度值比较差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论自噬在5-FU诱导肝癌细胞系SMMC7721凋亡过程中起保护性作用,抑制自噬可提高肝癌SMMC7721细胞对5-FU的敏感性,其可能主要通过激活caspase-3及剪切PARP来实现的。因此,自噬特异性抑制剂3-MA可能为提高肝癌对5-FU的敏感性提供新思路。     

阻断胰腺癌平衡型核苷转运载体对5-氟尿嘧啶诱导细胞凋亡及细胞周期改变的影响

目的研究应用潘生丁(DP)阻断平衡型核苷转运载体(hENTs)后,5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌细胞株Panc-1凋亡及细胞周期的影响。方法将Panc-1细胞分为hENTs未阻断组和hENTs阻断组,hENTs阻断组再根据DP浓度分为5μmol/L DP组和10μmol/L DP组。各组细胞分别在含有1.5×106ng/L 5-FU或不含5-FU的培养液中培养24 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和细胞周期改变。结果①各组细胞凋亡检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,5μmol/L及10μmol/L DP组的细胞凋亡率明显高于未阻断组(P<0.05),10μmol/L DP组又明显高于5μmol/L DP组(P<0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组之间细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。②各组细胞周期检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,未阻断组细胞进入合成期(S期)的比例减少,停滞在合成前期(G1期),5μmol/L DP组及10μmol/L DP组的细胞进入合成期(S期)的比例较未阻断组进一步减少(P<0.05),且随着DP浓度的增加,细胞进入合成期(S期)的比例减少得更多(P<0.05),5μmol/L DP组和10μmol/L DP组进入合成期(S期)的比例分别是未阻断组的87.09%和74.06%。5-FU对细胞合成后期(G2期)的影响较小,除5μmol/L DP组较未阻断组G2期细胞数量增加有统计学意义(P<0.05)外,其余各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组细胞周期中各期无明显改变,各组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在胰腺癌细胞株Panc-1中,DP阻断细胞膜上hENTs后,能显著增强5-FU对胰腺癌细胞促凋亡作用及抑制胰腺癌细胞分裂增殖的作用,这种增强作用可能与阻断hENTs后细胞内5-FU浓度提高有关,而与DP本身作用无关。     

复方苦参注射液与5-氟尿嘧啶对大肠癌细胞凋亡的影响

目的 探讨复方苦参注射液与5-氟尿嘧啶对大肠癌LoVo细胞生长抑制及诱导凋亡的影响。方法 台盼蓝染色法测定药物对LoVo细胞抑制作用与时间和剂量的关系，用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳对细胞凋亡进行检测。结果台盼蓝实验表明，经40μg／L复方苦参注射液单独处理细胞，LoVo细胞增殖的抑制率24h，12．8％；48h，25．4％；72h，42．2％。12．5mg,／L5-Fu单独处理的LoVo细胞，其增殖抑制率24h，16．3％；48h，23．1％；72h，29．3％；而当两者合用时，对LoVo细胞增殖的抑制率24h，26．8％；48h，72．3％；72h．84．6％。复方苦参注射液和．5-Fu对LoVo细胞的生长均有抑制作用，并诱导发生凋亡。实验范围内其细胞凋亡成时间与剂量依赖关系。并且复方苦参注射与低浓度的化疗药物有协同作用，可产生较强的抑制细胞增殖的作用。结论 复方苦参注射具有直接的抗肿瘤作用，并且具有增强5-Fu化疗药物作用的功效。     

白细胞介素-6抑制白细胞介素-1β诱导的兔纤维环细胞凋亡的研究

目的探讨白细胞介素(IL)-6对IL-1β在体外诱导兔纤维环细胞凋亡作用的影响。方法以10μg/L浓度的IL-1β诱导体外培养的原代兔纤维环细胞发生凋亡,然后分别加入10μg/ L和100μg/L的IL-6以影响纤维环细胞凋亡进程。对细胞行Annexin-V-PI染色和Caspase-9功能染色,采用流式细胞仪检测结果。结果IL-1β诱导下,凋亡纤维环细胞比例由(2.67±1.08)%上升至(20.37±1.57)%,而在两种浓度IL-6的干预下,细胞凋亡比例分别为(18.17±4.68)%和(9.42±1.27)%,与IL-1β诱导退变的纤维环细胞差异有统计学意义(P＜0.05)。而Caspase-9功能阳性细胞也由(19.40±0.98)%分别降至(15.13±1.45)%和(10.17±2.50)%(P＜0.05)。结论IL-6对IL-1β诱导的体外兔纤维环细胞凋亡有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制纤维环细胞内Caspase-9的激活实现的。对IL-6抑制作用的进一步研究,将有助于明确椎间盘细胞凋亡的调控途径,为椎间盘退变的治疗寻找新切入点。     

5-氟尿嘧啶加奥曲肽对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的 探讨５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）加奥曲肽（善得定）对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法取手术切除的１６例乳腺癌标本,制备癌单细胞悬液。每例癌细胞均分成４组：５－ＦＵ组（加入５－ＦＵ１０μｇ／ｍｌ）、善得定组（加入善得定０．１μｇ／ｍｌ）、５－ＦＵ加善得定组（加入５－ＦＵ１０μｇ／ｍｌ、善和定０１μｇ／ｍｌ）及对照组（不加任何药物）。用ＤＮＡ断端标记法（ＴＤＴ法）检测乳腺癌细胞癌细胞凋亡率。结果 １６例标     

解偶联蛋白2调节胰岛β细胞胰岛素分泌的研究进展

糖稳态(glucose homeostasis)对机体的代谢平衡至关重要，主要通过胰腺β细胞对升高的血糖浓度增加相应的胰岛素分泌来实现。当进餐后血糖水平升高时胰岛素分泌随之升高，而空腹时胰岛素分泌受抑。胰岛素基因的转录在维持分泌颗粒中充足的胰岛素储备方面有着重要作用，但对于血糖实时波动的调节，分泌颗粒中胰岛素的释放却依赖一个与糖代谢有关的复杂的信号转导系统。     

5-氮-2-脱氧胞苷调控p53-baX凋亡通路DNA甲基化对胆管癌细胞生长的影响

目的 探讨甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(DAC或5-aza-dc)对胆管癌细胞QBC939生长的影响及其机制.方法 应用噻唑蓝(MTT)比色法检测DAC在不同浓度(0.1、0.5、1.0、5.0、25.0、100.0μmol/L)及不同时间(24、48、72 h)下对胆管癌细胞QBC939存活率的影响,透射电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪观察细胞生长周期及凋亡率的变化;甲基化聚合酶链反应检测DAC作用前后p53-bax凋亡通路DNA甲基化变化.结果 DAC对QBC939细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率(IC50)为72h 5μmol/L;经DAC作用后电镜下胆管癌细胞凋亡增加;胆管癌细胞凋亡发生率由DAC处理前的4.31%上升至处理后的43.04%;DAC作用前p53-bax凋亡通路中p14、DAPK抑癌基因甲基化,DAC作用后p14、DAPK抑癌基因脱甲基化.结论 DAC对胆管癌QBC939细胞的生长具有抑制作用,这一抑制作用是由于DAC脱甲基化造成的,DAC对胆管癌QBC939细胞p53-bax线粒体凋亡通路DNA甲基化的影响使细胞凋亡功能得以恢复.     

整合素αvβ6通过细胞外调节蛋白激酶介导胃癌细胞对5-氟尿嘧啶的耐受作用

目的 探讨整合素αvβ6通过细胞外调节蛋白激酶介导胃癌细胞对5-氟尿嘧啶的耐受作用.方法 胃癌AGS细胞培养至对数生长期后分4组处理.(1)对照组:向细胞悬液加入含5-氟尿嘧啶的培养基培养24 h.(2)10D5组:向细胞悬液内加入0.1 g/L鼠抗人αvβ6单克隆抗体10D5,培养6 h后换液加入含5-氟尿嘧啶的培养基培养24 h.(3)IgG2a组:加入10D5对照剂IgG2a后用5-氟尿嘧啶处理,余同10D5组.(4)PD98059组:向细胞悬液内加入含5-氟尿嘧啶和20 μmol/L细胞外调节蛋白激酶抑制剂PD98059的培养基培养24 h.MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2和caspase-3蛋白的表达情况.采用单因素方差分析和LSD检验.结果 对照组、10D5组、IgG2a组和PD98059组的抑制率分别为28.1%±2.7%、84.5%±1.6%、31.4%±5.2%和86.7%±5.2%,组间比较差异有统计学意义(F=342.5,P<0.05);凋亡率分别为6.6%±1.4%、30.6%±2.4%、8.1%±1.3%和36.0%±4.0%,组间比较差异有统计学意义(F=105.4,P<0.05).caspase-3和Bcl-2的表达水平组间比较,差异有统计学意义(F=292.1,181.6,P<0.05).结论 整合素αvβ6可通过细胞外调节蛋白激酶介导胃癌细胞对5-氟尿嘧啶产生耐受.     

5-氟尿嘧啶与双嘧达莫联合对肾癌细胞生长的影响

目的探讨5-氟尿嘧啶（5-Fu）与双嘧达莫（DPM）作用对肾癌细胞生长的影响。方法以人’肾癌细胞系（RCC925）为研究对象，运用长春新硷（VLB；Velban）作为参照的有／无核苷酸体外条件培养体系来研究不同浓度5-Fu（0．6、6．0、60．0mg／L）与DPM的作用。结果当DPM浓度不变时，不同浓度5．Fu（0．6、6．0、60．0mg／L）分别对应的肾癌细胞生长抑制率组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）；当5-Fu浓度不变时，不同浓度DPM（0、1．25、2．50、5．00、10．00mg／L）分别对应的肾癌细胞生长抑制率组问比较差异有统计学意义（P〈0．05）；而且6、60mg／L浓度的5-Fu与5mg／LDPM联合应用，与单用0．078mg／LVLB对肾癌细胞的生长抑制率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论5-Fu与DPM联合应用可优化肾癌治疗。     

5-氟尿嘧啶缓释微粒对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的 研究5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)缓释微粒对肝癌HepG2细胞的抑制作用.方法 MTT法检测5-FU缓释微粒、5-FU裸药和缓释微粒载体(聚L-乳酸)对人肝癌HepG2细胞的抑制作用,采用Hochest染色和流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 5-Fu缓释微粒组细胞存活率随着时间的延长而降低,凋亡细胞数目也随之增加.5-FU裸药组第1天的抑制作用最强,有大量细胞凋亡,随着作用时间的延长,细胞存活率缓慢上升,第21、28天的细胞存活率高于5.FU缓释微粒组.缓释微粒载体组细胞凋亡均较少.3组比较差异有统计学意义(F=3163.52,128.47,P＜0.01).结论 植入用5-FU缓释微粒可以在28 d内持续释放,并且以时间依赖性方式抑制肝癌HepG2细胞生长和诱导其凋亡增加,明显优于5-FU裸药.     

氟尿嘧啶对大鼠血糖代谢及胰腺病理结构的影响

目的 探讨结直肠癌常用化疗药物5-氟尿嘧啶（5-FU）对大鼠血糖代谢及胰腺病理结构的影响.方法 20只Wistar大鼠分为5-FU组（10只,腹腔注射5-FU 20 mg·kg-1·d-1,连续5 d）和对照组（10只,相同时间和相同剂量的生理盐水腹腔注射）,给药后第2和第7天行糖耐量试验,并以放射免疫法检测胰岛素分泌水平;以光镜和透射电镜分别观察胰岛细胞组织病理学及超微结构的变化.结果 给药后第2天,5-FU组和对照组空腹血糖分别为（7.6±1.9）和（4.6±0.6）mmol/L;给药后第7大,两组空腹血糖分别为（8.9±1.0）和（4.7±0.6）mmol/L,差异均有统计学意义（P＜0.01）.胰岛素分泌试验：5-FU注射后第2天,糖负荷后胰岛素释放缓慢,30 min时胰岛素水平低于对照组水平,60 min达到峰值,与对照组水平相当,其后下降较对照组缓慢,120和180 min时胰岛素分泌量高于对照组;5-FU注射后第7天,糖负荷后60 min胰岛素水平低于对照组,120 min方达到峰值,180 min时高于对照组水平.光镜下,5-FU处理后糖耐量异常的大鼠胰腺组织中未见明显病理学异常;透射电镜部分大鼠可见胰岛内分泌细胞内胰岛素颗粒减少,极少数可见内质网扩张、线粒体肿胀,溶酶体出现脂滴.结论 5-FU所导致的高血糖与其引起的胰岛素相对分泌不足有关.5-FU通过部分改变胰岛细胞超微结构引起β细胞功能受损可能是胰岛素分泌不足的原因.     

术中腹腔内5-氟尿嘧啶缓释化疗对进展期胃癌的疗效

目的 观察术中植入5-氟尿嘧啶缓释剂对进展期胃癌术后腹腔内局部复发及患者生存率的影响.方法 回顾性分析2002年1月至2004年12月诊治100例进展期胃癌患者的临床资料,根据术中是否植入5-氟尿嘧啶缓释剂分为治疗组和对照组.治疗组于胃癌D2根治术后腹腔内植入5-氟尿嘧啶缓释剂800 mg;对照组术中未植入5-氟尿嘧啶缓释剂,两组患者术后按FOLFOX方案化疗.结果 治疗组及对照组患者术后3年生存率分别为45%和32%;3年无瘤生存率分别为28%和16%.治疗组的3年生存率和3年无瘤生存率均高于对照组.结论 术中腹腔内植入5-氟尿嘧啶缓释化疗可以降低进展期胃癌根治术后肿瘤局部复发并提高患者3年生存率.     

The modulation by L-leucovorin of 5-fluorouracil antitumor activity on human colon carcinoma cells in vitro and in vivo

We investigated the modulating effect of L-leucovorin (LV) on the antitumor effect of 5-fluorouracil (5-FU) against human colon carcinoma cells (C-1) in vitro and human colon carcinoma xenografts (Co-4) in nude mice. The modulating effect of LV on 5-FU reached an optimal concentration of 40–80 g/ml in vitro which was detected by a colorimetric MTT assay. An optimal dose of 200 mg/kg was also observed in the nude mouse system. The modulating effect of LV increased according to the increment of thymidylate synthetase inhibition in vivo. Since the pharmacokinetic pattern of LV in the nude mice administered LV at 200 mg/kg was similar to that in patients treated with LV at a dose of 100 mg/m², this clinical method of administration was thought to be adequate for modulating the antitumor activity of 5-FU against clinical colon carcinomas.     

低浓度5-氟尿嘧啶抑制血管增生在瘢痕疙瘩综合治疗中的作用初探

目的 探讨低浓度5-氟尿嘧啶（5-FU）抑制血管增生在瘢痕疙瘩临床综合治疗中的作用。方法 35名瘢痕疙瘩患者，共51个瘢痕疙瘩。平均病史9．7年。以5-Fu2～5mg／ml瘢痕内注射，1次／2周。3～6次后辅以糖皮质激素注射。平均治疗时间为10．29个月。结果 低浓度5-FU抑制瘢痕疙瘩血管增生有效率为96．77％；在治疗6个月以上的患者中，5-FU结合糖皮质激素治疗瘢痕疙瘩的总有效率为97．14％，其中完全缓解者占45．71％，极大缓解者占48．57％，部分缓解者占2．86％．未缓解者占2．86％。结论 利用低浓度5-FU抑制血管增生的作用结合糖皮质激素治疗瘢痕疙瘩具有良好的疗效。     

Full thickness skin damage due to topical administration of 5-fluorouracil

Summary A patient who developed full thickness skin damage treated with topical 5-fluorouracil is described. Extensive deep skin loss at sites treated with 5-fluorouracil has not been previously reported. The physician must be aware of the need for frequent examination of patients using this cytotoxic drug.     

鱼藤素增加人胃癌细胞株SGC-7901对氟尿嘧啶的敏感性

目的 观察鱼藤素对胃癌细胞化疗敏感性的影响.方法 胃癌SGC-7901细胞以1 μmol/L鱼藤素处理24h后,噻唑蓝(MTT)比色法检测对其对氟尿嘧啶处理48 h的敏感性变化;经鱼藤素联合氟尿嘧啶(12.5 mg/L)处理后形态学观察进一步验证MTT结果;提取1μmol/L鱼藤素处理24 h后细胞总蛋白,Western blot法检测相关蛋白表达水平的变化.结果 鱼藤素预处理后可明显增强氟尿嘧啶对SGC-7901细胞的抑制作用,其IC50值降至7.86 mg/L(P＜0.05);增强氟尿嘧啶对SGC-7901细胞增殖抑制和凋亡诱导作用;鱼藤素可明显降低蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平.结论 鱼藤素可通过下调Akt的活性,增强SGC-7901细胞对氟尿嘧啶的敏感性,与化疗药物联用可能有助于提高抗肿瘤治疗效果.     

植入用缓释氟尿嘧啶治疗结直肠癌的实验研究

目的 研究氟尿嘧啶（5-Fu）缓释植入剂对结直肠癌移植瘤的治疗效果.方法 将50只直肠癌荷瘤鼠随机分为5组,每组10只.A、B组于瘤周植入5-FU缓释剂,剂量分别为200mg/kg和100 mg/kg;C、D组于瘤周注射5-FU注射液,剂量分别为200 mg/kg和100 mg/kg;E组不予任何治疗.分别于给药后0、3、6、9和12 d,观察裸鼠生存情况、体质量变化及肿瘤体积,12 d后处死小鼠.结果 A、B组肿瘤生长曲线平缓,12 d后A、B、C及D组抑瘤率分别为72%、51%、8%及5%,A、B组肿瘤体积与C、D组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.A、B、C和D组在给药3 d后体质量下降,其中以C组最为明显;以后各组体质量增加,12 d后,各组小鼠体质量间差异无统计学意义（P＞0.05）.在实验过程中,A、B、C和D组小鼠分别死亡1、0、4和1只.结论 5-FU缓释植入剂于瘤周植入能安全有效地抑制结直肠癌移植瘤的生长.     

改良法制备5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体

目的 探讨5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体(MNLF)的最佳制备方法,并观察其理化性能.方法 采用正交设计对筛选出的制备工艺进行优化,以磁性脂质体的包封率和粒径分布为指标综合评价,以药物与磷脂的比例、表面活性剂的浓度及油水相的比例、冻融温度等为考察指标,分析了不同制备方法对脂质体性质的影响.最后选用逆向蒸发法结合冻融法制备MNLF,最佳方案为A3B3C2D2及蛋黄卵磷脂(PC):去氧胆酸钠(SD)为10∶ 1,冷冻温度为-10℃,以包封率、外观、粒径变化、渗漏率、胶体ζ电位和pH值等为评价指标,对MNLF的物理化学稳定性进行研究.结果 制备的MNLF的平均粒径为450nm,平均包封率为69.5%,ζ电位为-39.0mV,pH值为6.91,有较好的稳定性,磁响应性好.结论 以改良的逆相蒸发法+冻融法制备的MNLF粒径小、包封率高、磁响应性好.     

5-氟尿嘧啶磁性微球的制备及对人胰腺癌细胞的抑制作用

目的研究5-氟尿嘧啶磁性白蛋白微球（5-fluorouracil magnetic albumin microspheres,5-FU-MAMS）的制备及其联合恒定外磁场体外对人胰腺癌PC-3细胞的生长抑制作用。方法乳化热固化技术制备5-FU-MAMS并检测其理化性质,MTT比色分析法观察5-FU-MAMS联合恒定磁场体外对人胰腺癌细胞的抑制作用。结果5-FU-MAMS平均粒径为200～1000nm,呈球形,磁响应性良好,载药量为每毫克微球含5-FU50μg;单纯磁场组和各种浓度的空白MAMS对肿瘤生长无影响;相应药物浓度的5-FU-MAMS与5-FU抑制率（inhibition ratio,IR）相似,差异无统计学意义（P〉0.05）;相应药物浓度的5-FU-MAMS联合恒定外磁场与单纯的5-FU-MAMS和游离5-FU相比,IR明显提高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论MAMS可作为安全的药物载体;5-FU-MAMS制备方法和剂型的改变不影响5-FU的抗癌活性;联合恒定外磁场5-FU-MAMS的肿瘤细胞抑制效应显著增强。