活脉通络饮对大鼠脑缺血再灌注脑组织caspase-3表达的影响

目的观察活脉通络饮对脑缺血再灌注大鼠脑组织Caspase-3表达的影响,探讨活脉通络饮对脑组织保护作用的机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注组、活脉通络饮低剂量组、活脉通络饮中剂量组、活脉通络饮高剂量组和尼莫地平阳性对照组。采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)脑缺血再灌注模型。采用HE染色观察大鼠脑组织形态改变,免疫组织化学法和Western Blot定性和定量法检测脑组织中Caspase-3的表达。结果缺血再灌注组大鼠脑组织Caspase-3的表达水平较正常对照组明显增加(<0.01),活脉通络饮组与缺血再灌注组比较Caspase-3蛋白表达明显减少(<0.01),而与尼莫地平阳性对照组相比没有明显差异。结论活脉通络饮的脑保护作用的机制之一可能与其下调Caspase-3表达相关。PP     

活脉通络饮对大鼠脑缺血再灌注脑组织Bcl-2/Bax表达的影响

目的观察活脉通络饮对脑缺血再灌注大鼠Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨活脉通络饮的神经保护机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注组、活脉通络饮低剂量组、活脉通络饮中剂量组、活脉通络饮高剂量组和银杏叶片阳性对照组。采用改良的线栓法,建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)脑缺血再灌注模型,给予大鼠评定神经功能缺损程度评分,采用免疫组织化学技术和WesternBlot检测脑组织中Bcl-2、Bax的表达。结果模型组大鼠脑组织Bax蛋白的表达较正常对照组明显增加(P<0.01),给予活脉通络饮治疗后,Bax蛋白表达与模型组相比明显减少(P<0.01),而各组的Bcl-2蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论活脉通络饮的脑保护作用机制之一可能与下调Bax蛋白表达相关。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤诱导IL-1β的表达

目的：研究脑缺血－再灌注损伤早期大鼠脑组织中ＩＬ－１β的表达及其与中性粒细胞浸润的关系。方法：应用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＩＬ－１βｍＲＮＡ,并用图象处理系统对正常、缺血及再灌注后不同时间的ＩＬ－１βｍＲＮＡ进行相对定量分析;采用ＭＴＴ和ＭＰＯ方法分别对大鼠脑组ＩＬ－１β的多肽活性及浸润的中性粒细胞进行检测。结果：单纯脑缺血ＩＬ－１β表达不增加;再灌注２ｈ,ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达量明     

脂肪源性干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠PARP和NF-κB表达的影响

目的探讨脂肪源性干细胞（ADSC）移植对大鼠脑缺血再灌注损伤区炎症递质多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶（PARP）和核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,将动物随机分为假手术组、模型组和ADSC组。ADSC组经尾静脉注射PKH-26标记的ADSC细胞悬液（0.5ml,细胞密度为4×106个/ml）,观察各组大鼠的神经功能损害评分,采用蛋白质印迹法和PCR分别检测半暗带区NF-κB和PARP蛋白及其mRNA的表达水平。结果 ADSC移植后可见PKH26标记的ADSC在半暗带区有表达。与模型组比较,ADSC组神经功能损害评分显著降低（P〈0.05）,半暗带区PARP蛋白、NF-κB蛋白和mRNA表达水平均显著下降（P〈0.05）。结论脂肪源性干细胞移植可通过下调炎症递质NF-κB和PARP的表达抑制炎性反应,从而促进脑缺血损伤神经功能的恢复。     

NGF对局灶性脑缺血再灌注后大鼠皮质IL-1β表达的调控作用

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响.方法:线栓法制作大鼠局灶性腩缺血再灌注模型,应用免疫组织化学显色、免疫印迹分析方法,结合图像分析技术检测大鼠缺血侧顶叶皮质 IL-1β蛋白表达变化.结果:假手术组大鼠顶叶皮质IL-1β没有表达,缺血再灌注组顶叶皮质IL-1β蛋白在各时间点明显表达,IL-1β蛋白阳性产物的光密度值高于假手术组;NGF组IL-1β蛋白阳性产物的光密度值低于缺血冉灌注组.结论:脑缺血再灌注损伤后诱导 IL-1β蛋白表达,NGF 明显降低缺血再灌注大鼠顶叶皮质IL-1β蛋白表达,这可能是 NGF发挥神经保护作用的分子机制之一.     

NF-κB参与七氟烷预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨七氟烷(SEVO)预处理中NF-κB P65的活性表达对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 SD大鼠随机分为13组(n=6):假手术(sham)组;单纯缺血再灌注(I/R)组;PTN组于心肌缺血前15 min腹腔内注射NF-κB P65特异性阻断剂小白菊内酯(PTN,500μg/kg);七氟烷缺血(S...     

首发精神分裂症PBMCNF-κB活性及其mRNA表达与IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达的关系

目的：探讨首发精神分裂症患者外周血单个核细胞（PBMC）NF-κB的活性及其mRNA表达与IL-β、IL-6、TNF-α mRNA表达的相互关系，为临床应用NF-κB调节剂提供理论依据。方法：应用NF-κB活性ELISA试剂盒，检测精神分裂症组和健康对照组PBMC中NF-κB活性，并采用RT-PCR方法，测定两组PBMC中NF-κB mRNA表达及IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达。结果：①精神分裂症组PBMC中NF-κB的活性及NF-κB mRNA表达量与对照组相比均明显增高，差异有显著性（P〈0．05）；②精神分裂症组PBMC中IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达量与对照组相比均明显增高，差异有显著性（均P〈0．05）；③在精神分裂症组及对照组中，PBMC中NF-κB的活性与其mRNA表达量无明显相关（均P〉0．05）；④在精神分裂症组和对照组中，PBMC中NF-κB的活性与IL-1β、TNF-α mRNA均呈正相关（均P〈0．05）；无论是在精神分裂症组或对照组中，PBMC中NF-κB的活性与IL-6 mRNA均无明显相关（均P〉0．05）。结论：精神分裂症患者PBMC中NF-κB mRNA表达及活性均增高，对NF-κB活性的检测更能反映NF-κB的转录调控功能情况；活化的NF-κB对IL-1β、TNF-α的基因转录起了重要的调控作用。     

NF-κB参与七氟烷预处理所致延迟性抗大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 观察七氟烷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的延迟性保护作用,探讨NF-κB参与保护作用的机制.方法 雄性SD大鼠随机分为:对照组(CON组);缺血再灌注组(I/R组);七氟烷延迟性组(SWOP组);七氟烷对照组(SEVO组);PTN(NF-κB特异性阻断剂)组;DMSO组以及PTN+ SWOP组.用TTC染色法测定心肌梗死范围;Western blot法检测NF-κB(P65,P50)蛋白表达.结果 与I/R组相比SWOP组梗死范围减小,且该作用可被PTN所阻断;SWOP组缺血前NF-κB(P65,P5O)蛋白表达(56±4,58±3)高于CON组(34±4,40 ±1);I/R和SWOP组再灌注后NF-κB(P65,P50)蛋白表达均上调,SWOP组蛋白上调幅度低于I/R组.结论 七氟烷预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有延迟性保护作用;NF-κB可能参与了其延迟性保护机制.     

IL-1受体相关激酶1和2协同调控IL-1诱导的NF-κB活化

目的　研究白细胞介素 1受体相关激酶 1(IRAK 1)和IRAK 2在白细胞介素 1(IL 1)诱导核因子 κB(NF κB)活化中的作用。方法　Lipofectin介导反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸转染HepG2细胞。用逆转录PCR法检测IRAK 1mRNA和IRAK 2mRNA表达水平 ,以夹心ELISA法检测NF κB的活化。结果　 (1)反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸分别抑制IRAK 1mRNA和IRAK 2mRNA表达。 (2 )反义IRAK 1寡核苷酸或反义IRAK 2寡核苷酸部分抑制NF κB活化 ,最高抑制率分别为 (34 6± 0 9) %和 (5 4 5± 0 2 ) %。 (3)反义IRAK 1寡核苷酸与反义IRAK 2寡核苷酸共转染HepG2细胞对NF κB的抑制作用明显增强 ,抑制率达 (77 5± 0 9) %。结论　IRAK 1或IRAK 2调控NF κB活化 ,但不能完全激活NF κB ;IRAK 1和IRAK 2协同调控IL 1诱导的NF κB活化。     

大鼠硅肺纤维化中NF-κB和MMP-9的表达

目的 研究核转录因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达在硅肺纤维化发生发展中的作用。方法 应用免疫组化SP法观察NF-κB和MMP-9在大鼠硅肺组织中的表达。结果 对照组支气管上皮细胞、肺巨噬细胞和肺间质细胞均可表达NF-κB和MMP-9，肺泡上皮细胞和血管内皮细胞未见表达。实验组的支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、间质细胞和肺泡上皮细胞NF-κB、MMP-9表达均明显增加。在实验的每一个时间点，肺巨噬细胞、肺间质细胞中NF-κB和MMP-9的半定量表达基本同步，呈明显正相关。支气管上皮细胞NF-κB在1～28d均呈持续高水平表达，但MMP-9在14d后开始减少；肺泡上皮细胞NF-κB在114d呈较高水平表达，以后下降，而MMP-9仅于第3～7天时有阳性表达。结论 矽尘作用下肺内多种细胞NF-κB和MMP-9表达增加，并可能通过NF-κB介导调控MMP-9表达而影响硅肺的发生发展。     

地塞米松对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型TNF-α和IL-1β的影响

目的:探讨地塞米松(dexamethasone,dexasone DEX)对大鼠脑缺血再灌注损伤的干预作用及其作用机制.方法:建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,参照改良Nagasawa大脑中动脉线栓法,随机将50只雄性SD大鼠分为5个组(n=10),分别为假手术组、脑缺血再灌注模型组、DEX注射液小剂量治疗组、DEX...     

IL-13对大鼠急性肾缺血再灌注时IL-1β表达的影响

目的:观察IL-13对急性肾缺血再灌注时IL-1β表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠57只,随机分为8组:正常组(normal);假手术组(sham);缺血组:(I)缺血再灌注组(I/R);治疗对照组-1(C-1);治疗对照组-2(C-2);治疗组-1(T-1)和治疗组-2(T-2)。阻断大鼠双侧肾脏血流45min再灌注24h建立急性肾缺血再灌注模型;治疗组分别于阻断血流前、后分别从双侧肾动脉开口注射入1.5μg/50gbw鼠重组白细胞介素13(rmIL-13);检测各组大鼠IL-1β血清水平和肾脏表达,以及肾功能和肾脏病理。结果:(1)治疗组肾脏IL-1β基因(TtoC:P＜0.01)和蛋白表达(T-1toC-1:P＜0.01;T-2toC-2:P＜0.05)明显减少,血清IL-1β水平明显下降;(2)肾功能障碍和肾组织病理变化明显减轻,肾小管损害评分减少(C-1toT-1:45.20±8.64to21.05±8.82,P＜0.01;C-2toT-2:42.25±11.15to23.25±7.31,P＜0.01);(3)血清IL-1β水平与BUN、Cr成正相关(r=0.708,P＜0.01;r=0.770,P＜0.01)。结论:IL-13能有效地抑制大鼠急性肾缺血再灌注损伤IL-1β的表达。     

NF-κB“decoy”寡核苷酸对LPS诱导巨噬细胞IL-10表达的影响

目的：探讨NF-κB “decoy”寡核苷酸（ODNs）对脂多糖（LPS）诱导小鼠巨噬细胞株J774.1表达IL-10的影响。方法： 通过体外细胞培养技术，观察转染NF-κB“decoy”ODNs对LPS刺激巨噬细胞产生IL-10及其表达的影响。结果： 在LPS刺激的巨噬细胞中转染NF-κB“decoy”ODNs对抗炎介质IL-10的合成表达无影响。结论： NF-κB“decoy”ODNs不抑制抗炎介质IL-10的表达，可能由于NF-κB在IL-10转录机制中不占主导地位。     

腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后脑内肿瘤坏死因子α和核因子κB表达的影响

目的 通过观察腺苷预处理对脑缺血-再灌注（IR）损伤后大鼠脑内肿瘤坏死因子α（TNF-α）和核因子κB（NF-κB）表达的影响,探讨腺苷对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护机制。方法 Sprague-Dawley大鼠60只随机分为假手术组（F组）、缺血-再灌注组（IR组）和腺苷预处理缺血-再灌注组（AP组）,每组动物按照缺血-再灌注后2 h、6 h、24 h及48 h这4个时间点随机分组,每组5只。采用大脑中动脉阻塞（MCAO）法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。通过对以上3组脑缺血 再灌注48 h后的大鼠脑组织行头颅MRI、HE染色以及对以上60只大鼠进行神经功能缺损评分,通过免疫组织化学方法观察大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的平均积分吸光度值进一步验证腺苷预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的脑保护作用,探讨腺苷对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护机制。结果 F组大鼠术后无神经功能缺损体征,AP组和IR组大鼠术后均出现明显神经功能缺损体征。AP组和IR组大鼠神经功能缺损评分显著高于F组,AP组大鼠神经功能缺损评分显著低于IR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。F组大鼠术后MRI中T1WI、T2WI均未见明显异常,AP组和IR组大鼠脑梗死体积显著高于F组,AP组大鼠脑梗死体积显著低于IR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。AP组和IR组术后大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达显著高于F组,AP组术后大鼠脑组织中TNF-α和NF-κB的表达显著低于IR组,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论 腺苷预处理可通过减少大鼠缺血-再灌注损伤后脑内TNF-α和NF-κB的表达而减轻神经细胞损伤,达到其脑保护作用。     

力竭游泳运动后大鼠杏仁体NF-κB、IL-1β的表达

目的:探讨力竭运动后中枢神经系统内核转录因子(NF-κB)信号通路的活化和调控机制及与其下游靶基因产物IL-1β介导的炎症反应之间的相互关系。方法:健康雄性SD大鼠70只随机分为对照组(n=10)和力竭组(n=60)。力竭组进行1周力竭游泳训练后,选择即刻、4、8、12、16、24h等不同时间点取脑,经Western-Blot半定量分析研究运动后杏仁体内NF-κB的含量变化规律;免疫组织化学SABC染色法观察IL-1β在杏仁体神经元内的表达变化。结果:NF-κB在力竭4h开始激活(P0.05),至8h达到高峰(P0.05),12～16h开始回落(P0.05),24h恢复到正常对照水平(P0.05);IL-1β免疫阳性神经元的数目在24h内持续且高于对照(P0.05),12h达峰值(P0.05),其余各组之间差异无显著性(P0.05)。结论:NF-κB信号系统和IL-1β参与了脑内的炎症反应。     

大鼠脑缺血再灌注损伤血清IL-8和中性粒细胞趋化指数的变化

目的：探讨了血清IL-8和中性粒细胞趋化指数测定在脑缺血再灌注损伤中的变化。方法：采用改良Zealonga线栓法大鼠大脑中动脉闭塞（ middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型,将大脑中动脉（MCA）先行闭塞2h,然后进行灌注不同的时间。应用免疫法测定实验组和对照组血浆中性粒细胞趋化指数,ELISA法测定IL-8。结果：血浆中性粒细胞趋化指数和IL-8于再灌注1h最高,随后缓慢下降,再灌注48h降至正常组水平。结论：中性粒细胞参与了脑组织的正常代谢及生理功能,又参与了脑缺血再灌注损伤的病理生理过程。     

NF-κ Bp65在糖尿病大鼠脑缺血再灌注中的表达

目的:通过观察糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后转录核因子NF-κBp65表达的动态变化,以探讨糖尿病在脑缺血再灌注损伤中的可能机制.方法:将SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、假手术组(B组)、脑缺血再灌注组(C组)、糖尿病脑缺血再灌注组(D组),链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型,线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血 2 h再灌注模型,免疫组织化学方法观察再灌注第3、第6、第24、第48小时脑组织中NF-κ Bp65表达的动态变化.结果:脑缺血再灌注后,C组在第6小时、D组在第3小时即可见到NF-κ Bp65免疫阳性细胞,随着再灌注时间的延长,NF-κ Bp65免疫阳性细胞表达增加,第24小时达高峰,第48小时开始下降;NF-κ Bp65表达在各个缺血再灌注时间点上,D组较C组增加(P＜0.05).结论:糖尿病可促进NF-κ Bp65活化加重脑缺血再灌注损伤.     

低分子肝素对缺血再灌注大鼠肾组织核因子-κB表达的影响

探讨低分子肝素对缺血再灌注大鼠肾组织核因子-κB（NF-κB）表达的影响。建立大鼠IRI模型，健康WistaI大鼠80只随机分为正常对照组、假手术组、模型未治疗组、LMWH治疗组，后两组又分别分为术后1、3、6、24h组。检测各组血清肌酐（Scr）水平及中性粒细胞（PMNs）细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达；通过光镜和免疫组织化学方法观察各组大鼠肾组织形态学及趋化因子NF-κB表达变化。结果表明：（1）肾缺血再灌注未治疗组造模后1h，Scr水平虽然没有明显变化，但ICAM-1、NF-κB表达增多，肾小管坏死积分值亦较假手术组明显增加（P〈0．01）；（2）缺血再灌注6h以后，两组Scr浓度明显增高（P〈0．01），但LMWH治疗组SCr、ICAM-1、NF-κB表达水平及肾小管坏死积分值均明显低于模型未治疗组（P〈0．05）；（3）肾组织中NF-κB表达与肾小管损伤积分值呈现良好的相关性（r=0．71，P〈0、01）；而NF-κB与ICAM-1间则呈现显著正相关（r=0．62，P〈0．05）。由此说明：（1）ICAM-1、NF-κB在肾缺血再灌注早期的瞬时表达，可能参与了炎症早期的白细胞迁移与浸润，与肾损伤的发生密切相关；（2）LMWH可通过减少ICAM-1及NF-κB的表达，阻抑炎症反应过程，减轻肾组织损伤。     

BDNF对大鼠急性脊髓损伤后NF-κB表达的影响

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)对急性脊髓损伤大鼠核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达的变化。方法参照Nystrom压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,按随机数字表法分为正常对照组8只、损伤组32只、BDNF组32只。免疫组化和Western blot检测各组大鼠NF-κB的表达。结果免疫组化结果显示:损伤组与BDNF组NF-κB阳性产物的平均光密度值(mean optic density,MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而BDNF组与损伤组相比A值明显降低(P<0.01);Western blot结果显示:与正常对照组比较,损伤组与BDNF组NF-κB的灰度值(integrated density value,IDV)与内参照IDV的比值明显升高(P<0.01),而BDNF组则明显低于损伤组(P<0.01)。结论 BDNF很可通过下调NF-κB的表达参与脊髓继发性损伤。