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相似文献
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1.
用Fura-2/AM做荧光指示剂,测量粉防己碱对电刺激诱导的〔Ca2+〕i瞬间变化的作用。粉防己碱3—100μM浓度和时间依赖性地抑制电刺激诱导〔Ca2+〕i的瞬间变化幅度,而没有影响静息〔Ca2+〕i水平。该浓度的粉防己碱抑制KCl除极化所致的细胞〔Ca2+〕i增加。高浓度的粉防己碱(60—100μM)明显延长〔Ca2+〕i衰减的时间,也减少Caf-feine诱导〔Ca2+〕i瞬间变化幅度。结果提示粉防己碱除了抑制Ca2+内流外,在高浓度也影响心肌细胞肌质网Ca2+的摄取或释放  相似文献   

2.
本实验结果表明,以Fura-2/AM负载家兔洗脱血小板,当Fura-2/AM的浓度低于2μmol/L时,3μmol/L和10μmol/L花生四稀酸(AA)诱导的血小板聚集(透光度增加:72.5±7.84%)及释放反应(ATP释放:1.12±0.21μmol/4×105血小板)不受影响,但随Fura-2/AM浓度增加,AA的聚集和释放反应明显减弱(P<0.05或P<0.01)。Fura-2/AM浓度对单一血小板内钙([Ca2+]i)的静息水平无影响,但Fura-2/AM为2μmol/L时,AA诱导的[Ca2+]i动员最明显。另外,标本中血小板的数量也明显影响[Ca2+]i的测定结果(P<0.05或P<0.01)。提示,Fura-2/AM浓度过高,很可能导致过多的钙离子被螯合,降低了血小板的功能,同时,细胞内游离钙与Fura-2/AM的结合过程存在着饱和性。  相似文献   

3.
用Fura-2/AM做荧光指示剂,测量粉防己碱对电刺激诱导的〔Ca^2+〕i瞬间变化的作用。粉防己碱3-100μM浓度和时间依赖性地抑制电刺激诱导〔Ca^2+〕i的瞬间变化幅度,而没有影响静息〔Ca^2+〕i水平。该浓度的粉防己碱抑制KCl除极化所致的细胞〔Ca^2+〕i增加。高浓度的粉防己碱(60 ̄100μM)明显延长〔Ca^2+〕i衰减的时间,也减少Caffeine诱导〔Ca^2+〕i瞬间变化  相似文献   

4.
目的;研究N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法:分别用Ca^2+和Na^+敏感的染料Fura-2/AM和SBFI/AM测定胞内Ca^2+和Ba^+浓度「(Ca^2+)i,(Na^+)i」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷(ATP)的含量。结果:(1)在NMDA预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ca^2+反应高峰,两者无显著性差异。而后在NM  相似文献   

5.
高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:分析高钾离子(K^+)引起PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca^2+]i)升高的可能机制。方法:利用MiraCal Imiage System检测[Ca^2+]i,Ca^2+荧光探针为Fura-2/AM。结果:(1)KC1浓度为30 ̄100mmol/L时,可剂量依赖性地诱导PC12细胞[Ca^2+]i升高;(2)在细胞外无Ca^2+时,高K^+对PC12细胞[Ca^2+]i无影响;(3)L-  相似文献   

6.
目的:建立适宜条件下,用荧光指示剂Fura-2测定乳兔视网膜细胞内游离钙(简称[Ca2+]i)的方法。方法:用酶解制备视网膜细胞悬液。Fura-2/AM负载进行荧光测定。结果:经0.05%胰蛋白酶消化10分钟,可使细胞存活率达90%以上。在37℃条件下与Fura-2/AM温育40分钟,于30分钟内测定为最佳条件。结论:静息状态下([Ca2+]i)水平为(223±27)nmol/L,其值在文献报道范围内。高钾去极化,在K+为25mmol/L和50mmol/L时,分别使([Ca2+]i)增加了59%和148%,由此证明视网膜细胞悬液制备和测定方法是可行的。  相似文献   

7.
目的:研究Fas抗原介导的死亡效应在超抗原诱导T细胞凋亡中的作用。方法:SEA诱导从人外周血建立的短期SEA反应T细胞系凋亡,1.8%琼脂凝胶DNA电泳观察凋亡的特征条带;FCM检测Fas,FasL的表达量变化,Fura-2/AM荧光批示剂检测胞浆「Ca^2+」i的变化。  相似文献   

8.
了解缺氧缺血后新生离脑细胞胞浆及线粒体Ca^2+浓度的动态变化及MK-801,硫酸镁,苯巴比妥钠干预对胞浆钙超载的影响。结扎左颈总动脉并吸入8%氧气2h制成缺氧缺血模型,用Fura-2/AM法及原子吸收火焰法测定。缺氧缺血后1h胞浆及线粒体Ca^2+浓度均明显升高,24h胞浆Ca^2+浓度恢复正常,线粒体Ca^2+含量进一步升高,48及72h两均降至正常;预防性应用MK-801及硫酸镁可抑制缺氧  相似文献   

9.
目的 通过测定小鼠卵细胞受精过程中胞质游离Ca^2+浓度的变化,研究其变化规律及在胚胎早期发育中的作用。 方法 采用Ca^2+特导荧光试剂Fura-2/AM和AR/CM/MIC型单细胞阳离子测定系统,测定了休止于第二次成熟分裂中期(MⅡ)的小鼠卵母细胞受精过程中的胞质游离Ca^2+浓度。 结果 小鼠卵受精过程中胞质游离Ca^2+浓度发生波动或振荡。 结论 这对胚胎发育的早期研究有一定意义。  相似文献   

10.
aFGF对肺腺癌AGZY—83A细胞株TPK,PKC活性及Ca^2+浓度的影响   总被引:3,自引:2,他引:1  
目的:观察aFGF与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径,探讨aFGF导致细胞增殖的机理。方法:以不同浓度的aFGF处理AGZY-83A细胞,利用[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性(TPK)及蛋白激酶C(PKC)活性;用Fura-2/AM为荧光指示剂测定[Ca2+]i。结果:随着aFGF浓度增加,TPK及PKC活性随之升高。当aFGF浓度为1.12μg/ml时aFGF处理组的TPK是对照组的4倍;膜PKC活性也是对照组的4倍,胞浆PKC活性是对照组的1.75倍。[Ca2+]i是对照组的3倍。结论:该细胞株中aFGF受体具有TPK活性。TPK激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化,而使PKC活性及[Ca2+]i升高,即PKC和Ca2+是TPK的下游信号分子,进一步促进c-fos、jun基因表达增加,导致细胞增殖  相似文献   

11.
目的:探讨aFGF及TPK抑制剂Genistein对AGZY-83A细胞内PKC活性游离Ca^2+浓度的影响。方法:用不同浓度的aFGF和Genistein诱导AGZY-83A细胞,(γ-P^32)-ATP标记的Histone Ⅰ为底物,液体闪烁测定PKC活性;Fura-2/AM负载荧光光度法测定细胞内游离Ca^2+浓度。结果:aFGF诱导后,细胞内PKC活性及Ca^2+浓度升高,且与aFGF呈剂  相似文献   

12.
将中药有效成分黄芩甙、豆腐果甙、金丝桃甙、熊果酸与大白鼠神经细胞一起进行温育,应用新型钙离子荧光指示剂Fura-2/AM测定神经细胞内游离Ca2+浓度变化。结果表明,上述中药有效成分均能影响胞内Ca2+释放和胞外Ca2+内流。从而有效地保护神经元免受兴奋性毒性作用  相似文献   

13.
目的通过测定小鼠卵细胞受精过程中胞质游离Ca2+浓度的变化,研究其变化规律及在胚胎早期发育中的作用。方法采用Ca2+特导荧光试剂Fura-2/AM和AR-CM-MIC型单细胞阳离子测定系统,测定了休止于第二次成熟分裂中期(MⅡ)的小鼠卵母细胞受精过程中的胞质游离Ca2+浓度。结果小鼠卵受精过程中胞质游离Ca2+浓度发生波动或振荡。结论这对胚胎发育的早期研究有一定意义  相似文献   

14.
将中药有效成分黄芩甙、豆腐果甙、金丝桃甙、熊果酸与大白鼠神经细胞一起进行温育,应用新型钙离子荧光指示剂Fura-2/AM测定神经细胞内游离Ca2+浓度变化。结果表明,上述中药有效成分均能影响胞内Ca2+释放和胞外Ca2+内流。从而有效地保护神经元免受兴奋  相似文献   

15.
目的 观察血管紧张素Ⅱ受体亚型(AT1a)基因敲除对跨膜钙内流的影响。方法 培养AT1a基因敲除及其野生型对照小鼠的主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)和应用荧光倒置显微镜及钙荧光指示剂Fura-2/AM动态观测VSMC钙离子(Ca^2+)i变化。结果 在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下钙内流显著增加,AT1a敲除组VSMC钙净增值为(204±22)nmol/L,基础(Ca^2+)i为(108±9)nm  相似文献   

16.
电针对家兔高血压及心肌细胞游离钙镁浓度的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
谢吉民  胡洁 《镇江医学院学报》1998,8(4):439-440,442
利用AR-CM-COM阳离子测定系统和离子探针Fura-2-AM及Furaptra-AM,观察了电针在治疗家兔实验性高血压时心肌细胞内游离钙离子2和游离镁离子2(「Mg^2+」)的变化情况,静脉滴注去甲肾上腺素(NE)造在家兔实验性高血压,心肌细胞(「Ca^2+」),随血压升高而增大,「Mg^2+」,则降低,「Ca^2+」/「Mg^2+」,比值升高,电针两侧“足三里”穴位后,治疗有兔血压明显降低,  相似文献   

17.
目的:探讨反复呼吸道感染(RRTI)患儿T细胞增殖(TLP)及其胞浆游离钙浓度(〔Ca2+〕i)的关系。方法:采用MTT比色法测定30例RRTI患儿及31名健康儿童TLP,使用Fura-2/Am做荧光探剂,双波长荧光分光光度仪测定T细胞活化及未活化时〔Ca2+〕i。结果:RRTI患儿TLP明显低于对照组,T细胞未活化时两组间〔Ca2+〕i的差异无统计学意义,当T细胞活化时RRTI患儿〔Ca2+〕i明显低于对照组。结论:RRTI患儿TLP降低,T细胞活化过程中〔Ca2+〕i的动员存在一定程度异常,这是其TLP降低的原因之一。  相似文献   

18.
成年大鼠脑细胞内钙的测定   总被引:6,自引:0,他引:6  
目的:探讨成年大鼠脑细胞分离及其细胞内钙([Ca2+]i)的测定。方法:低浓度胰蛋白酶消化及机械吹打等方法分离脑细胞,以Fura-2/AM为Ca2+-敏感的荧光指示剂,应用荧光分光光度计测定[Ca2+]i。结果:分离的脑细胞存活率在95%以上,在细胞外Ca2+1mmol/L的情况下[Ca2+]i为(270±35)nmol/L,高钾使[Ca2+]i急剧增加。结论:本方法分离成年大鼠脑细胞简单、可靠,且能准确反映[Ca2+]i的变化。  相似文献   

19.
目的探讨呼吸中枢M受体亚型与细胞内钙的关系。方法采用Fura-2双波长荧光法测定M1和M2受体激动剂和拮抗剂对胎鼠桥脑和延脑神经细胞内游离钙浓度([Ca2+]i)的影响。结果在静息状态下,其[Ca2+]i为72±6nmol/L,加入200μmol/LAch,[Ca2+]i升高38%,匹鲁卡品(Pil)0.4~200μmol/L无明显的升高细胞内钙的作用,而M2受体激动剂6β-乙酰氧基去甲托烷(6β-AN)1~10μmol/L。对神经细胞内的游离钙均无明显影响。M1-R拮抗剂哌仑西平(Pi)60μmol/L能拮抗Ach升高细胞内钙的作用,M2-R拮抗剂AF-DX11620μmol/L不能拮抗。结论M1-R兴奋与细胞内钙升高有关。  相似文献   

20.
采用荧光法测定负载Fura-2/AM大脑皮层突触体内游离钙「Ca^2+」i浓度大鼠感染性脑损伤中的变化及其意义。  相似文献   

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