bcl—2高表达细胞株的构建及其抗凋亡特性的观察

目的：建立ｂｃｌ－２高表达的肿瘤细胞株，观察其抗凋亡特性。方法：利用基因转染技术，将人的ｂｃｌ－２基因ｃＤＮＡ克隆于逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，通过ＰＡ３１７细胞包装成病毒后感染宫颈癌ＨｅＬａ细胞。结果和结论：经ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明转染成功，得到ｂｃｌ－２稳定高表达株Ｈｂｃ１７。用顺铂诱导凋亡，Ｈｂｃ１７比对照细胞株Ｈ１具有更明显的抗凋亡能力。为进一步研究细胞凋亡的机理奠定了基础。     

宫颈癌bcl－2免疫反应与激素受体阳性率的关系

宫颈癌ｂｃｌ－２免疫反应与激素受体阳性率的关系２６５２００莱阳解放军第１４５医院徐廷香，李西启，王剑波关键词子宫颈肿瘤；受体，激素；ｂｃｌ－２蛋白中国图书资料分类号Ｒ７３７．３３本文对宫颈癌进行ｂｃｌ－２免疫组化检查，探讨宫颈癌ｂｃｌ－２与雌、孕激素...     

bcl－2蛋白在乳腺癌组织中表达的临床病理意义

应用ＬＳＡＢ免疫组化法，观察乳腺癌组织中ｂｃｌ－２蛋白表达，探讨其临床病理意义。结果显示，ｂｃｌ－２表达的阳性率为４２．７％，阳性反应物质位于细胞浆或核膜上，胞核中偶有表达。ｂｃｌ－２在乳腺癌组织中的表达与病人年龄、月经情况、肿瘤大小及淋巴结转移无明显关系（Ｐ＞０．０５）。浸润性小叶癌及浸润性导管癌之间，ｂｃｌ－２表达串的差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。观察还发现，ｂｃｌ－２表达与显示预后好的某些病理形态学特征关系密切，浸润性导管癌不同病理分级组间，ｂｃｌ－２表达率有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）；核分裂≥２１／１０高倍视野组，ｂｃｌ－２表达率明显低于０～１０／１０高倍视野组（Ｐ＜０．０１）；有肿瘤坏死者的ｂｃｌ－２表达率明显低于无肿瘤坏死者（Ｐ＜０．０１）。另外还观察到，ｂｃｌ－２与ｐ５３表达之间呈负相关（Ｐ＜０．０１），与ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＭＤＲ１、ＧＳＴ－、ｎｍ２３及ＰＣＮＡ之间均无显著关系（Ｐ＞０．０５）。     

急性白血病患者c-fos基因髓细胞表达测定的临床意义

急性白血病患者ｃ－ｆｏｓ基因髓细胞表达测定的临床意义２００４３３上海第二军医大学长海医院周锡建①李坚②干祥生①孟沛霖关键词白血病；基因，ｃ－ｆｏｓ中国图书资料分类号Ｒ５５７ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达同造血细胞向单核巨噬细胞系分化密切相关。作者应用ＲＮＡ斑...     

异基因骨髓及自体骨髓移植治疗白血病63例

骨髓移植治疗白血病６３例，其中异基因骨髓移植（Ａｌｌｏ－ＢＭＴ）２４例，未净化自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）１４例，净化ＡＢＭＴ２５例，年龄中位数２７岁（１０岁～４３岁）急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）３６例，急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１５例，慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）１２例，第１次缓解（ＣＲ１）５１例，ＣＲ２１０例，ＣＲ３及未缓（ＮＲ）各１例，ＣＲ到称植时间中位数６．５个月（２～１９个月），经强烈化疗及全     

^99mTc标记三种抗人肺癌细胞单抗肺放免显像的临床研究

为了解３种特异性抗人肺癌细胞单抗用于人肺癌放射免疫显像的临床价值，采用＾９９ｍＴｃ标记３种ＭｃＡｂ：抗人大细胞肺癌ＭｃＡｂ（２Ｅ３）、抗人肺鳞状细胞癌ＭｃＡｂ（Ｓｍ－１）和抗人肺腺癌细胞ＭｃＡｂ（Ａｍ－７），对５３例患者进行肺ＲⅡ。结果：５３例中真阳性３４例，假阴性１０例。２Ｅ３的诊断灵敏度高于Ｓｍ－１和Ａｍ－７，混合单抗为８７％。     

中国大陆庚型肝炎病毒结构区与非结构区部分cDNA基因的序列分析

作者在建立检测庚型肝炎病毒酶免疫和ＰＣＲ技术的基础上，将抗－ＨＣＶ上阳性病人血清经逆转录－巢式ＰＣＲ分离部分ＨＧＶｃＤＮＡ片段，用与ＨＧＶ基因互补的特异寡核苷酸引物进行双脱氧核苷酸链末端终止法－ＰＣＲ直接测序。结果表明，中国大陆ＨＧ－３０２Ⅰ株部分ｃＤＮＡ序列与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的ＨＧＢ美国株ｃＤＮＡ序列有极高的同源性。     

bcl—2在足叶乙甙诱导的K562细胞凋亡中的作用

目的研究ｂｃｌ－２及其表达产物在足叶乙甙诱导的Ｋ５６２细胞凋亡中的作用。方法采用细胞形态观察,ＤＮＡ电泳,ＤＮＡ缺口的原位检测观察Ｋ５６２细胞的凋亡,用原位杂交法检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达,用免疫荧光法检测ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果２０μｇ／ｍｌ的足叶乙甙能诱导Ｋ５６２细胞发生凋亡,在此过程中,ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ及ｂｃｌ－２蛋白的表达均下降。结论ｂｃｌ－２及其表达产物的下调在足叶乙甙诱导的Ｋ５６２细胞凋亡中起重要作用。     

人白血病抑制因子的分子克隆及其在大肠杆菌中的表达

白血病抑制因子（ＬＩＦ）是一种多功能的细胞因子，正常生理条件下，人体各组织细胞并不产生ＬＩＦ，只有在一定条件刺激下，一些细胞如淋巴细胞、单核细胞、成纤维细胞才产生ＬＩＦ，此外，一些白血病细胞系如Ｕ９３７、ＨＬ－６０在一定条件刺激下亦产生ＬＩＦ。该实验根据Ｍｏｒｅａｕ报道的ＬＩＦｃＤＮＡ序列，通过激活ＬＩＦ基因、逆转录ＰＣＲ等步骤成功地克隆了ＬＩＦｃＤＮＡ后，将ＬＩＦｃＤＮＡ亚克隆至表达载体ｐＢＶ２２０形成重组表达质粒ｐＢＶ２２０／ＬＩＦｌ，该重组质粒转化ＤＨ５α大肠杆菌，经过诱导后ＬＩＦ在ＤＨ５α中的表达量达１０％。     

p53基因cDNA突变及其蛋白高表达与大肠癌预后关系

１００份大肠癌组织，用ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变；ＰＡｂ１８０１单抗免疫组化检测Ｐ５３基因蛋白搞表达并对大肠癌术对后病人作５年生存随访，比较上述２结果与大肠癌预后的关系，１００例大肠癌中，ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ显示５１例大肠癌Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变，ＰＡｂ１８０１阳性率６２％，Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变和Ｐ５３基因蛋白高表达与Ｄｕｋｅｓ分期无关，Ｐ５３基因ＣＤＮＡ突变与Ｐ５３基因     

复方活血汤对放射性损伤小鼠造血细胞bcl-2\bax\bcl-X-L基因表达的作用

目的探讨放射性损伤骨髓衰竭的机理及防护对策。方法用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ技术检测了６０Ｃｏγ射线８．０Ｇｙ照射小鼠（对照组）及照射后立即给复方活血汤治疗小鼠（中药组）的骨髓有核细胞ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ基因表达。结果放射损伤后第３，７天，对照组骨髓有核细胞ｂｃｌ－２／ｂａｘ值减小、ｂｃｌ－ｘＬ不表达。中药组与之相反，ｂｃｌ－２／ｂａｘ值明显增大、ｂｃｌ－ｘＬ明显表达。受照后第７天两组脾脏单个核细胞ｂｃｌ－２／ｂａｘ值与骨髓有核细胞的表达一致。结论复方活血汤对放射损伤骨髓造血细胞增殖周期调控基因ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ有一定调节作用，保护骨髓造血     

慢性中性粒细胞性白血病急性变

慢性中性粒细胞性白血病急性变１０００３７北京海军总医院汪声恒关键词白血病，粒细胞性，慢性；急性变中国图书资料分类号　５５７．３慢性中性粒细胞性白血病（ＣＮＬ）为少见的白血病，发生急性变（ＡＴ）者更少见。作者于１９８９年４月收治ＣＮＬ１例。病人，女性，...     

^99mTc标记单克隆抗体在裸鼠移植人胰腺癌中的放射免疫定位

~９９ｍＴｃ标记单克隆抗体在裸鼠移植人胰腺癌中的放射免疫定位陈其奎，袁世珍，张厚德我们应用９９ｍＴＣ标记抗人胰腺癌ＹＰＣ３单抗（ＭｃＡｂ）进行荷人胰腺癌裸鼠的放射免疫定位研究，以探讨其临床应用的可行性．材料和方法１．抗体的制备与纯化：ＹＰＣ３ＭｃＡｂ?..     

三基因PCR检测产毒性大肠杆菌

产毒性大肠杆菌（ＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃＥｓ－ｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ，ＥＴＥＣ）产生的毒素分为不耐热肠毒素（ＬＴ）和耐热肠毒素（ＳＴ）［１］，根据其来源不同，耐热肠毒素又可分为猪源性（ＳＴｐ）和人源性（ＳＴｈ），它们分别由位于质粒上的三种毒力基因编码，产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）一般含有三个毒力基因中的一个或几个基因。目前，用于检测产毒性大肠杆菌的ＰＣＲ方法，一般是单基因ＰＣＲ，每次扩增只能检测一种毒力基因，虽然具有较高的特异性和敏感性，但往往产生漏检，也未能充分体现ＰＣＲ高时效的特点，…     

bcl-2反义寡核苷酸对HL-60细胞作用的研究

探讨ｂｃｌ－２反义寡核苷酸对ＨＬ－６０细胞的作用,将人工合成的ｂｃｌ－２反义寡核苷酸片段与ＨＬ－６０细胞共培养,在作用的第０、１、３、５天通过细胞计数和锥虫蓝染色法检测细胞的生长、存活情况,并通过免疫组化法（ＡＰＡＡＰ法）检测细胞内ｂｃｌ－２蛋白表达水平的变化,通过流式细胞仪分析细胞凋亡的情况。结果表明,ｂｃｌ－２反义寡核苷酸可显著地抑制ＨＬ－６０细胞增殖,而且可以调ＨＬ－６０细胞内ｂｃｌ－２蛋白     

复方活血汤对放射性损伤小鼠造血细胞bcl-2、bax、bcl-xL基因表达的作用

目的 探讨放射性损伤骨髓衰竭的机理及护理对策。方法 用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ技术检测了＾６０Ｃｏγ放射８．０Ｇｙ照射小鼠（对照组）及照射后立即给复方活血汤治疗小鼠（中药组）的骨髓有核细胞ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ基因表达。结果 放射损伤后第３，７天，对照组骨髓有核细胞ｂｃｌ－２／ｂａｘ值减小、ｂｃｌ－ＸＬ不表达。中药组与之相反，ｂｃｌ－２／ｂａｘ值明显增大、ｂｃｌ－ＸＬ明显表达。受照后第     

急、慢性髓性白血病细胞低温冻存后诱生的树突状细胞生物特性研究

目的 观察急、慢性髓性白血病原代细胞经低温冻存后诱生的白血病源性树突状细胞的生物特性.方法 取急、慢性髓性白血病原代细胞,一部分细胞立即培养,一部分细胞用5%二甲基亚砜-6%羟乙基淀粉为保护剂,-80℃冰箱降温,液氮保存一定时间后复温培养.培养时细胞内加重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子、白介素-4、肿瘤坏死因子-α等细胞因子,培养12 d,为白血病源性树突状细胞,观察细胞形态及免疫表型、自身混合淋巴细胞反应及细胞毒T淋巴细胞杀伤自身白血病细胞活性.结果 急、慢性髓性白血病新鲜或冻存的原代细胞,经组合细胞因子培养,细胞均不同程度地出现典型的树突状形态,细胞表面CD80、CD54、人白细胞表面抗原DR、CD1a、CD83、CD86表达上调,CD14下调;冻存原代细胞经培养生成的白血病源性树突状细胞,还表现为自体混合淋巴细胞反应和T淋巴细胞杀伤自体白血病细胞活性明显.结论 急、慢性髓性白血病新鲜或经低温冻存的原代细胞可诱生为白血病源性树突状细胞,这种细胞可诱导T淋巴细胞杀伤自身白血病细胞,为用树突状细胞免疫治疗微小残留病提供了实验依据.     

急性放射病救治存活第6年患者IRF-1、N-ras和bcr/abl基因的检测研究

急性放射病救治存活第６年患者ＩＲＦ－１、Ｎ－ｒａｓ和ｂｃｒ／ａｂｌ基因的检测研究夏放袁有忠章卫平刘本急性放射病（ＡＲＳ）患者可能因其骨髓受损而逐步发展为骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ），并进一步向白血病方向演化［１］。抑癌基因的失活和癌基因的激活可能与...     

西宁、杭州两地老年人血液流变学的改变及其与中青年的比较

本文对６０岁以上西宁和杭州两地老年人，同步先后检测血液流变学的指标，并与当地中青年的检测比较，结果表明：男性Ｈｂ，Ｈｃｔ，ηｂ，ηＲ均高于女性，而ＥＳＲ、ＥＳＲ－ｋ则相反；ηｐ男女无差异，Ｆｂ除西宁男女中青年有显著差异外，其他男女各组无差异；老年与中青年比，老年人ηｐ均高于中青年，但Ｆｂ西宁中青年高于老年人；与杭州地区恰相反。综观老年人ηｂ、ηｐ、ＥＳＲ、ＥＳＲ－Ｋ值、均高于中青年人，致血流不畅微循环灌注不佳，易发生血栓性疾患，促进衰老。但高原老年人，因Ｆｂ较低、纤溶亢进，血凝减弱等因素，以至较少患血栓性疾病。     

γ-catenin在白血病细胞中的表达

目的检测白血病骨髓标本及白血病细胞株中γ-catenin的表达情况,探讨γ-catenin在白血病细胞中的作用。方法以RT-PCR检测76例白血病骨髓标本、8例正常骨髓标本和白血病细胞株K562、HL-60、U-937、Jurkat中γ-catenin的mRNA表达情况,以Western blot和免疫细胞化学法检测上述白血病细胞株中γ-catenin蛋白表达及其分布情况。结果正常骨髓标本中γ-catenin表达阳性率为0（0/8）,急性髓细胞白血病（AML）骨髓标本中γ-catenin表达阳性率为40.0%[12/30,其中M2型的阳性率为50.0%（7/14）],慢性髓细胞白血病（CML）骨髓标本中γ-catenin表达阳性率为13.6%（3/22）,急性淋巴细胞白血病（ALL）和慢性淋巴细胞白血病（CLL）骨髓标本中γ-catenin表达阳性率均为25.0%（3/12）。白血病组γ-catenin表达阳性率与正常组相比,AML组有显著性差异（P〈0.05,其中M2型最为显著）,其余各组均无显著性差异（P〉0.05）。RT-PCR及免疫组化检测可见HL-60和K562细胞γ-catenin呈强阳性,U-937和Jurkat细胞呈弱阳性表达,且γ-catenin主要表达于细胞质中。Western blot检测见K562和HL-60细胞γ-catenin呈阳性表达,而U-937和Jurkat细胞未见表达。结论作为细胞内信号传导分子,γ-catenin表达于AML组、HL-60及K562细胞中,可能与急性髓细胞白血病（特别是M2型）的发生有关。