大鼠短暂性脑缺血后葡萄糖转运子3表达变化

目的 研究大鼠短暂性脑缺血葡萄糖转运子3（GLUT3）转录水平表达规律。方法 用插线法建立大鼠短暂性脑缺血模型。剥取缺血半暗带及中心区皮质组织,采用半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）,测定不同再灌注时间GLUT3mRNA水平的变化。结果 再灌注3h缺血半暗区GLUT3mRNA3h升高,48h达到高峰,再灌注1周后仍高于正常。结论 再灌注后,缺血半暗带GLUT3的表达明显上调,有可能是机体抗损伤性反应。     

大鼠局灶性脑缺血β淀粉样前体蛋白mRNA在缺血半暗带的表达变化

目的 :研究大鼠局灶性脑缺血不同缺血时间皮质半暗带和中心区淀粉样前体蛋白 (APP)在转录水平表达规律。方法 :用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型 ,剥取缺血半暗带及中心区皮质组织 ,采用半定量逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,测定APPmRNA水平的变化。结果 :半暗带APPmRNA在缺血后 48h升高 ,缺血 72h达到高峰 ,缺血 1周后仍高于正常。缺血中心区APPmRNA在缺血后 72h和 96h高于正常水平。结论 :APPmRNA在缺血半暗带的表达上调 ,有可能加重缺血损伤。     

辛伐他汀对局灶性脑缺血大鼠半暗带区缓激肽受体mRNA表达的影响

目的：探讨辛伐他汀预处理对局灶性脑缺血大鼠半暗带缓激肽受体基因表达的影响。方法：72只雄性SD大鼠随机分为3组：辛伐他汀干预组（干预组,给予辛伐他汀10 mg.kg-1.d-1和生理盐水1 mL的悬浊液灌胃）,脑缺血再灌注模型组（模型组,给予等体积生理盐水灌胃）,假手术组（给予等体积生理盐水灌胃）,3组分别预处理14 d。参照Longa法将干预组和模型组建立大脑中动脉栓塞模型,假手术组仅暴露右侧颈总和颈内动脉主干,不栓塞。并将各组随机分为再灌注3、24和48 h 3个亚组（均n=8）。于对应时间点行神经功能评分,用苏木精-伊红染色检测脑组织形态学,荧光定量RT-PCR技术检测脑缺血半暗带缓激肽B1、B2受体（BK-1Rs、BK-2Rs）的基因表达水平。结果：与模型组相比,3、24和48 h干预组大鼠缺血再灌注后神经功能改善、功能评分值降低（分别P〈0.05,P〈0.05,P〈0.01）,脑组织病理形态学变化减轻。荧光定量RT-PCR检测发现,3 h模型组脑缺血半暗带BK-1Rs、BK-2Rs与假手术组比表达减低,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;3 h干预组BK-1Rs、BK-2Rs与模型组比表达增加,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）,24和48 h模型组脑缺血半暗带BK-1Rs与假手术组比表达减低,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.01）;24和48 h干预组BK-1Rs与模型组比表达增加,差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.01）。结论：辛伐他汀预处理可改善大鼠局灶性脑缺血再灌注神经功能缺损及组织病理形态学,其机制可能与增加脑缺血半暗带BK-1Rs、BK-2Rs的表达有关。     

大鼠局灶性脑缺血模型缺血半暗带的定位研究

目的通过用组织病理学方法结合局部脑血流量(rCBF)测定,对大鼠局灶性脑缺血动物模型缺血半暗带的解剖定位进行初步探讨.方法用线栓法制成大鼠大脑中动脉(MCA)闭塞及再通模型、采用TTC染色法观察分组动物在MCA闭塞的不同时间再灌流48h后脑梗死灶的分布,并用氢清除法测定缺血区rCBF的变化.结果大鼠MCA闭塞1～2h,梗死灶主要位于缺血侧的外侧尾壳核和额顶叶皮质下部;MCA闭塞3h、梗死灶向周围扩大;MCA闭塞4h、梗死灶进一步扩展至大部分新皮质区,但与MCA闭塞6h时无明显区别.MCA闭塞后缺血侧的内侧尾壳核和额顶叶皮质上部rCBF下降至对照组的27%～45%.结论大鼠MCA闭塞后在2～3h的时间窗以内恢复血流,可使位于缺血边缘区的内侧尾壳核和额顶叶皮质上部脑组织被挽救,该区域可能相当于缺血半暗带的等值区.     

脑缺血半暗带的研究进展

脑缺血半暗带的研究进展刘士民郭玉璞自从Ａｓｔｒｕｐ（１９７７）将半暗带（ｐｅｎｕｍｂｒａ）定义为围绕在不可逆性损伤之外的电生理活动消失，但尚能维持自身离子平衡的脑组织以后，半暗带便成了局灶性脑缺血中心坏死区以外可逆性损伤的代名词。半暗带的特殊临床意义...     

脑缺血半暗带研究进展

综述了脑缺血半暗带的定义、基因表达、病理生理变化和影像学变化的研究进展。     

大鼠脑缺血再灌注半暗带β淀粉样前蛋白mRNA表达与梗死体积的关系

为了探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注缺血半暗带β淀粉样前蛋白(APP)转录水平与缺血时间及梗死体积的相互关系,用插线法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,剥取缺血半暗带皮质组织,采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),测定永久性缺血48 h和不同缺血时间再灌注48 h后,APPmRNA水平的变化.结果显示,梗死体积随再灌注前缺血时间的延长而增大,皮质半暗带缺血30 min再灌注48 h APPmRNA表达升高;缺血60min和缺血120 min再灌注48 h APPmRNA升高明显;缺血180 min再灌注48 h和永久性缺血48 h APPmRNA达到高峰.提示缺血半暗带APPmRNA的表达随再灌注前缺血时间延长而增加并与梗死体积有一定的相关性,早期再灌注可减少其表达.((GFDAl))     

局灶性脑缺血再灌注损伤核心区及半暗带的组织学定位

目的观察局灶性脑缺血1h和2h,再灌注至24h后的组织损伤及核心区和半暗带的组织学定位。方法利用大鼠局灶脑缺血模型及HE染色和图像分析,对损伤进行定量。结果缺血核心区表现为脑组织的完全坏死,半暗带位于核心区周围,表现为选择性神经元死亡,其中缺血1h组的病变变异较大。缺血2h组的皮质、纹体和半球核心区及其半球病变明显大于缺血1h组(P依次<0.02、0.01、0.01和0.05)。依据大鼠脑立体定位图谱,对缺血2h和缺血1h的皮质、纹体核心区和半暗带进行了组织学定位。结论脑缺血损伤时,皮质和纹体均存在核心区和半暗带,其定位相对恒定,为应用脑微透析方法探讨脑缺血损伤机制,提供了组织学依据。     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后Caspase-1的表达

目的研究Caspase-1在大鼠脑缺血／再灌注损伤中的作用。方法用Longa法制备大鼠大脑中动脉缺血（2h）／再灌注模型，HE染色观察梗死灶的形成，分别用TUNEL染色及免疫组化技术检测鼠脑缺血中心区及半暗带凋亡细胞与Caspase-1的表达。结果在缺血中心区Caspase-1及凋亡细胞主要见于缺血再灌注损伤早期；在缺血半暗带凋亡细胞与Caspase-1于缺血再灌注损伤早期表达不明显，于缺血再灌注24-48h则明显表达。结论细胞凋亡机制参与了缺血后迟发性神经元死亡，Caspase-1参与了其损伤过程。     

大鼠脑缺血再灌注半暗带β淀粉样前蛋白mRNA表达与梗死体积的关系

为了探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注缺血半暗带β淀粉样前蛋白(APP)转录水平与缺血时间及梗死体积的相互关系，用插线法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，剥取缺血半暗带皮质组织，采用半定量逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR），测定永久性缺血48h和不同缺血时间再灌注48h后，APPmRNA水平的变化。结果显示，梗死体积随再灌注前缺血时间的延长而增大，皮质半暗带缺血30min再灌注48h APPmRNA表达升高；缺血60min和缺血120min再灌注48h APPmRNA升高明显；缺血180min再灌注48h和永久性缺血48h APPmRNA达到高峰。提示缺血半暗带APPmRNA的表达随再灌注前缺血时间延长而增加并与梗死体积有一定的相关性，早期再灌注可减少其表达。（（GFDA1））。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后FADD mRNA及其蛋白的表达变化

目的观察大鼠脑缺血再灌注后缺血半暗带皮质内Fas死亡结构域相关蛋白（FADD）mRNA及蛋白的表达变化。方法用半定量的逆转录PCR（RT-PCR）法检测缺血2h再灌注不同时间点缺血半暗带皮质内FADD mRNA的表达,Western blot检测FADD蛋白表达的变化。结果缺血半暗带脑皮质内FADD mRNA及其蛋白的表达于缺血灌注后3h明显升高,再灌注后12h达高峰（P＜0．01）,至再灌注后24h明显下降。结论脑缺血再灌注后缺血半暗带皮质内FADD mRNA及蛋白表达均明显增加,提示FADD可能在脑缺血再灌注损伤中发挥重要作用。     

高血糖对大鼠脑缺血后血脑屏障葡萄糖转运蛋白1表达的影响

目的探讨高血糖对脑缺血后血脑屏障（BBB）葡萄糖转运蛋白1（GLUTl）表达的影响。方法采用链脲佐菌素法建立大鼠高血糖模型,线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,用免疫组化法观察脑缺血后1h、3h、6h、12h、1d、2d、3d、7d时BBBGLUT1表达的变化。结果正常血糖组大鼠及高血糖组大鼠脑缺血后BBBGLUT1的表达均增加,除脑缺血后7d外,高血糖组脑缺血后各时间点GLUT1的表达均低于正常血糖组（P〈0．01）。结论高血糖可降低脑缺血后BBBGLUT1的表达,隆低BRB蒴菊搐接请活性     

Neuroprotection by rosiglitazone in transient focal cerebral ischemia might not be mediated by glutamate transporter-1

Glutamate transport represents a key mechanism for maintaining low level of glutamate in the extracellular milieu to restrict the excitotoxic action of glutamate released during ischemia/reperfusion (I/R) injury. Recently, it has been reported that glutamate transporter-1 (GLT-1) is a novel target for peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) agonist, which shows neuroprotection following oxygen glucose deprivation (OGD) in neuronal-astrocytic cocultures. Hence, the present study was undertaken to investigate the role of rosiglitazone in neuroprotection mediated by GLT-1 following focal cerebral I/R injury in rat. We found that rosiglitazone (2 mg/kg i.p) administered pre- or post-I/R injury significantly improved behavioral outcome and decreased cerebral infarct volume. However, no significant changes were observed in GLT-1 mRNA and protein expression in rosiglitazone-treated rats following 1 hr of ischemia/24 hr of reperfusion (1/24 hr I/R) injury. Interestingly, bioinformatics analysis also does not reveal any PPAR response element on the GLT-1/EAAT2 promoter region. Further rosiglitazone neither increased [(3) H]glutamate uptake in glia-enriched preparations nor caused any change in glutamine synthetase activity. On the other hand, there was a significant (P < 0.05) downregulation in tumor necrosis factor-α and interleukin-1β gene expression, which were more pronounced in the posttreatment group. The posttreatment with rosiglitazone also significantly reduced the increase in prostaglandin E2 level in the ischemic brain. Therefore, the present findings suggest that the neuroprotective effect of rosiglitazone does not seem to be mediated by modulation of GLT-1 protein expression/activity in a focal cerebral ischemia model. However, the results do provide increasing evidence that the neuroprotective effect may be mediated by its antiinflammatory action.     

葡萄糖转运蛋白1型在脑肿瘤中的表达及意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1型(Glucose transporter-1,GLUT1)在脑肿瘤中的表达及其意义。方法 收集55例颅脑手术标本,包括46例脑肿瘤患者和9例正常脑组织,采用单克隆抗体的GLUT1免疫组织化学SP法进行染色。结果 7例低度恶性胶质瘤中的3例和全部13例高度恶性胶质瘤不同程度的表达GLUT1;10例良性脑膜瘤中的3例和全部5例恶性脑膜瘤为阳性表达;6例垂体瘤中的3例和5例表皮样囊肿也异常表达;所有正常脑组织均未见表达。结论 四种脑肿瘤均可不同程度表达GLUT1,尤其在恶性肿瘤为明显,其与脑肿瘤的恶性程度相关。     

实验性局灶性脑缺血再灌注后HSP70 mRNA的表达

目的：探讨脑缺血后HSP70mRNA表达变化,方法：采用沙土鼠短暂前脑缺血再灌注损伤模型。Northern blot定量检测HSP70m RNA表达,结果：沙土鼠前脑缺血6分钟再灌注后各时期HSP70 mRNA表达量增加（P＜0．05）,热休克预处理能增加沙土鼠短暂前脑缺血再灌注后各时期HSP70 mRNA表达（P＜0．05）,结论：沙土鼠前脑缺血6分钟再灌注后各时期HSP70 mRNA表达增加,热休克预处理增加HSP70mRNA表达。     

磁共振显像对缺血性脑水肿的动态实验研究

目的　探讨缺血性脑水肿的演变规律及慢性高血压对其的影响 ,评价磁共振显像 (MRI)在脑缺血研究中的价值。方法　采用肾血管性高血压鼠 (RHR)与正常鼠对比 ,制成局部脑梗死模型 ,应用MRI对缺血性脑水肿急性期进行动态研究 ,选择病灶所在最大层面测量病灶中心区和对侧对应区的T2 值和 ρ值。 结果　在缺血后 1hT2 与 ρ值就已开始明显延长 ,在缺血 7天内 ,MRI均有明显信号改变。高血压鼠组T2 值在缺血早期均较对照组延长 ,该组病灶对侧半球也可出现信号改变。结论　MRI是早期检测脑水肿的直接方法 ,高血压鼠脑水肿形成较正常鼠早且程度重 ,其病灶对全脑血流动力学亦产生影响。以上结果对临床治疗有指导价值。     

CT灌注成像对急性缺血性脑卒中半暗带的评估

目的探讨CT灌注成像(CT perfusion imaging,CTPI)对急性缺血性脑卒中半暗带的评估。方法应用16层螺旋CT对21例急性缺血性脑卒中患者行CTPI检查,于1w后复查CTPI,分析梗死区和半暗带的相对脑血流量(relative cerebral blood flow,rCBF)、相对脑血容量(relative cerebralvolume,rCBV)的数值变化,评估半暗带。结果所有患者的灌注CT图像皆有明确的异常灌注区,病灶中CBF下降,CBV下降或正常,MTT明显延长。梗死区rCBF、rCBV无变化(P>0.05),相对血流量及相对血容量极低;而半暗带区治疗前后rCBF明显改善(P<0.05)、rCBV变化不明显(P>0.05),半暗带区rCBF的可信区间为0.425~0.582。结论CTPI能够对半暗带进行判定,并指导临床的进一步治疗。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注区域STAT3激活的实验研究

目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注区域信号转导子与转录激活子-3(STAT3)激活变化,探讨其与梗死面积变化的关系. 方法 99只雄性SD大鼠分为假手术组和缺血2 h、6 h再灌注不同时间组,线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.各组动物于不同时间点处死取脑,取相应部位脑组织行TTC染色.采用免疫组化及免疫印迹法检测STAT3蛋白表达和磷酸化水平,分析其与梗死面积变化的相关性. 结果缺血后TTC染色可见部分右侧大脑半球失染呈白色.缺血6h组再灌注0 h较缺血2 h再灌注0 h TTC失染面积大.差异有统计学意义(P<0.05).缺血2 h再灌注24 h后失染面积较灌注0 h明显变小,差异有统计学意义(P<0.05).免疫组化定位:STAT3在胞浆中表达,磷酸化STAT3(P-STAT3)在胞核中表达.Western blot半定量分析结果:缺血再灌注不引起STAT3蛋白表达的变化,但P-STAT3表达增加,随着再灌注时间延长,24 h达到峰值.STATS激活的水平与TTC失染面积变化呈负性相关(缺血2 h组:r=-0.680,P<0.05;缺血6 h组:r=-0.672,P<0.05). 结论 脑缺血再灌注不同时间STAT3表达水平无明显变化,但可诱导缺血区域磷酸化水平增加,其激活水平与梗死面积相关.