胰腺癌MTS1／p16基因纯合性缺失和突变的研究

目的：研究人胰腺癌组织及正常胰腺组织中p16基因第1外显子和第2外显子的纯合性缺失和突变情况。探讨p16基因异常与胰腺癌的关系。方法：应用聚合酶链式反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）技术检测51例胰腺癌组织中p16基因第1外显子和第2外显子的纯合性缺失和突变频率,以正常胰腺组织15例为对照。结果：全部被检胰腺癌组织中有23例发生p16基因第2外显子缺失,缺失率45％,有1例发生第1外显子的突变,未发现第1外显子缺失和第2外显子突变。正常胰腺组织中均未发生第1外显子和第2外显子的缺失及突变。结论：p16基因缺失与胰腺癌的发生关系密切,p16基因的突变可能与胰腺癌的发生关系不大。     

卵巢癌p16基因的纯合性缺失、突变及表达异常的研究

目的：研究p16基因的纯合性缺失，突变及表达异常与卵巢癌的发生是否存在相关关系。方法：采用PCR-SSCP检测卵巢癌p16基因的纯合性缺失和突变；采用RP-PCR定性及半定量分析p16基因；采用免疫组化技术检测p16蛋白。结果：32例卵巢癌中检测到1例外显子1突变，未检测到p16基因的纯合性缺失；RT-PCR分析卵巢癌中p16基因mRNA均有表达，半定量分析卵巢癌与正常卵巢组织中p16基因mRNA表达水平无差别；免疫组化检测9例卵巢癌中的p16蛋白为阴性（28.2%)。结论：卵巢癌的发生与p16基因的纯合性缺失和突变无相关关系，与p16基因异常表达有相关关系。     

非小细胞肺癌p16基因缺失的研究

目的：分析我国非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织中p16基因缺失的情况．探讨该基因在肺癌发生中的作用。方法：采用逆转录-聚合酶链反应．对31例手术切除的NSCLC标本中p16基因外显子1和外显子2的缺失进行检测。结果：31例NSCLC中．有26例发生了p16基因的缺失．缺失率达83．9%;p16基因缺失以杂合性缺失为主;p16基因缺失与NSCLC组织学类型,分化程度,有无淋巴结转移以及临床分期无关;NSCIC Ⅰ,Ⅱ期病例即有较为显著的p16基因的缺失。结论：抑癌基因p16在NSCLC发生发展中起主要作用。p16基因缺失可能是NSCLC发生的早期始动环节．检测相关标本中p16基因缺失对肺癌的早期诊断有重要意义。     

非小细胞肺癌组织p16基因缺失及突变的临床意义

目的 探讨人类非小细胞肺癌组织中ｐ＾１６基因缺失及突变情况及其与临床病理的关系。方法 应用控制模板ＤＮＡ量的银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测４０例非小细胞肺癌手术切除标本中ｐ＾１６基因第２外显子。结果 ４０例中有１３例发生纯合缺失,３例发生突变,缺失及突变率为４０％,其缺失及突变率与肺癌的临床病理分期有密切关系（Ｐ〈０．０５）。结论 ｐ＾１６基因的缺失及突变可能在非小细胞肺癌的发生、发展及转移中起重要     

p16/MTS1抑癌基因与肿瘤

<正>当前,肿瘤是危害人类生命的主要疾病之一。随着科学技术的进步,已从肿瘤遗传学、分子生物学水平来研究肿瘤的发生与发展。癌基因和抑癌基因的研究已成为热点,目前已发现100多种癌基因和12种抑癌基因。1994年,两个美国实验室(Kamb和Larson)几乎同时发表了有关p16基因的研究工作,报道一种新型的抑癌基因p16基因,对于分析探讨肿瘤增生具有重要意义。     

非小细胞肺癌p16基因突变与表达的研究

目的 观察ｐ１６基因在非小细胞肺癌（Ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）中的表达与突变情况与ＮＳＣＬＣ发生发展的关系。方法 应用免疫组织化学、ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对５２例非小细胞肺癌石蜡标本进行ｐ１６蛋白及ｐ１６蛋白表达阳性,ｐ１６蛋白在良、恶性细胞中均有表达,肿瘤细胞中ｐ１６表达呈现异质性。各肿瘤类型中鳞癌和大细胞癌阳性率高于腺癌,但无显著差异。高分化腺癌阳     

非小细胞肺癌p15基因缺失的研究

目的　研究 p1 5基因的纯合性缺失与非小细胞肺癌的发生、发展和预后的关系。　方法　应用聚合酶链反应 (PCR)对 97例非小细胞肺癌与 1 0例非肿瘤疾病的正常肺组织和 2例畸胎瘤进行 p1 5基因的检测。　结果　 97例非小细胞肺癌中 ,p1 5基因的缺失率为 44.3 % ,而正常肺组织和畸胎瘤均未发生缺失 ;不同病理类型间缺失率差异无统计学意义 ,不同TNM分期中 ,p1 5的缺失率是不同的 ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分别为 2 9.4%、40 .0 %和 5 3 .3 % (P <0 .0 5 ) ;有淋巴结转移组的缺失率为 5 2 .2 % ,高于无淋巴结转移组的 2 6.7% ;p1 5基因缺失组的术后 1、3年生存率分别为 88.4%和 3 2 .6% ,较无缺失组的 97.7%和5 1 .2 %为低 (P <0 .0 1 )。　结论　p1 5基因缺失与非小细胞肺癌的发生、发展相关 ,是预后的独立预测指标。     

胸水p16基因纯合性缺失的检测及临床应用价值

目的探讨胸水p16基因纯合性缺失的检测及其在临床上的应用价值。方法选取该院2010年12月—2014年6月收治的伴有胸水的肺癌患者176例,随机分为对照组和PCR组各88例,对照组应用胸水脱落细胞学检测,PCR组应用PCR技术检测纯合性缺失,比较阳性率。结果对照组88例肺癌所致癌性胸水患者的标本中有52例出现胸水脱落细胞血阳性结果,其阳性率为59.09%;PCR组88例肺癌所致癌性胸水患者的标本中没有出现一例p16基因第一外显子纯合性缺失,但是有35例p16基因第二外显子纯合性缺失,其阳性率为39.77%。阳性对照组优于PCR组,经统计学处理差异有统计学意义（P〈0.05）。结论将p16基因作为肺癌治疗的靶基因具有可行性,同时胸水p16基因纯合性缺失的检测方法不仅方便,而且准确率高,可以作为癌症检测和预后的重要辅助手段,为广大的肺癌患者带来福音,值得临床推广。     

p16基因第二外显子纯合性缺失检测对肺癌所致胸液的临床价值

目的　探讨p16基因第二外显子纯合性缺失检测对肺癌所致胸腔积液的临床价值。方法　用PCR技术检测 31例肺癌胸液及 21例结核性胸腔积液中p16基因第二外显子纯合性缺失的情况,同时送检胸液脱落细胞学作为对照分析。结果　表明所检 21例结核性胸液无p16基因第二外显子纯合性缺失, 31例肺癌胸液标本中有 12例出现第二外显子纯合性缺失,缺失率为 38 7% ( 12 /31 )。同时 16例脱落细胞学检测阳性,阳性率为 51 62% (16 /31)。在 15例脱落细胞学阴性中,有 6例存在p16基因第二外显子纯合性缺失,两者联合检测阳性率提高至 70 97% (22 /31),明显高于单独检测(P<0 05)。另外,p16基因第二外显子纯合性缺失与肿瘤细胞的组织学类型、转移、预后相关。本组研究表明鳞癌出现p16基因第二外显子缺失的机率虽高于腺癌但差异无显著性;而有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者(P<0 005)。同时,在 12例p16基因纯合性缺失的患者中有 9例已发生一处以上的肺外转移,预后极差。结论　检测胸液p16基因第二外显子纯合性缺失对肺癌胸腔积液的诊断有重要价值,且特异性高;与脱落细胞学联合检测,可补充和提高其诊断阳性率,对鉴别癌性和结核性胸腔积液及判断肺癌的预后有一定的参考意义。     

胃癌组织p16／MTS1基因缺失研究

应用多重ＰＣＲ技术分析了２８例胃癌组织ｐ１６基因第２外显子缺失情况。结果显示，胃癌组织ｐ１６基因第２外显子缺失率达１４．３％（４／２８），且伴有ｐ１６基因缺失的胃癌均有周围器官的转移。提示ｐ１６基因缺失与胃癌发生发展有关，ｐ１６基因缺失患者易发生周围器官转移，预后不良。     

肺癌中GRIM-19 mRNA的表达及其临床意义

目的了解干扰素／维甲酸诱导凋亡相关基因（GRIM-19）在肺癌中的表达及其临床意义。方法RT-PCR检测40例肺癌患者的癌组织和癌旁组织中GRIM-19mRNA表达水平,用Western blot法验证20例肺癌组织中GRIM-19蛋白表达情况,并分析GRIM-19mRNA表达与临床病理参数之间的关系。结果肺癌组织中GRIM-19mRNA表达水平低于癌旁组织,两组间差异有显著性（P〈0．05）,并且mRNA表达水平的降低伴随有蛋白表达水平的相应下降。GRIM-19mRNA水平与临床病理分期之间有关联（P〈0．05）,Ⅰ-Ⅱ期Grim19mRNA表达量显著高于Ⅲ～Ⅳ期中的表达,而与患者性别、年龄、组织分型、吸烟指数之间均无关联（P〉0．05）。结论GRIM-19mRNA的表达下降是肺癌发生过程中的重要事件,可能与肺癌的发生及进展有关。     

抑癌基因产物Rb蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究乳腺癌组织中Rb蛋白的表达及其临床意义。 方法:采用S-P免疫组织化学染色法对52例乳腺癌组织和20例良性乳腺病变组织中Rb蛋白的表达进行检测。 结果:Rb蛋白阴性表达率在乳腺癌组中为76.9%（40/52）,显著高于良性乳腺病变组织 ［15.00%(3/20)］(P<0.01);Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌临床病理参数间无关联（P＞0.05）。随访46例乳腺癌患者,38例Rb蛋白阴性表达者局部复发或远处转移为10.5%,而8例Rb蛋白阳性表达者则为0,两者比较差异有显著性（P<0.01）。结论:Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌的发生有关;作为抑癌基因产物,Rb蛋白可以在蛋白质水平估计乳腺癌的病情,为临床制定治疗方案、估计病情及预后提供一个有意义的客观指标。     

肿瘤转移抑制基因Kiss-1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的:观察肿瘤转移抑制基因Kiss-1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,探讨其表达与NSCLC临床病理参数间的关系。方法:应用免疫组织化学EliVision二步法检测68例NSCLC患者癌组织及其癌旁组织中Kiss-1的表达,统计学分析表达结果与NSCLC的临床病理参数的关系。结果:NSCLC癌组织和癌旁组织中Kiss-1阳性率分别为82.4%和66.2%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移和无淋巴结转移的NSCLC组织中Kiss-1阳性率分别为39.4%和91.4%;高、中分化和低、未分化的NSCLC组织中Kiss-1阳性率分别为82.5%和42.9%;Ⅰ+Ⅱ期和Ⅲa期NSCLC组织中Kiss-1阳性率分别为81.8%和37.5%,其差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:有淋巴结转移、分化差和病理分期晚的NSCLC中Kiss-1表达下调或缺失,有望为NSCLC基因治疗提供理论依据。     

聚合酶链反应分析多肿瘤抑癌基因1第二外显子纯合性缺失

目的 摸索可靠、高效和特异的聚合酶链反应（ＰＣＲ）条件，分析多肿瘤抑癌基因１（ＭＴＳ１）第二外显子纯合性缺失。方法 对一系列ＰＣＲ参数进行摸索同时设立对照，并对ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析。结果 ＰＣＲ产物是特异的ＭＴＳ１第二外显子。结论 扩增ＭＴＳ１第二外显子的ＰＣＲ反应条件可以得到可靠、特异的结果。     

急性白血病患者骨髓细胞中TSLC1的表达及其临床意义

目的:观察肺癌肿瘤抑制物1(tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)在急性白血病(acute leukemia,AL)患者骨髓细胞中的表达情况,探讨其在AL的早期诊断、预后评估及指导治疗中的意义。方法:应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测39例AL患者及10例对照组骨髓细胞中TSLC1 mRNA的表达情况。结果:对照组TSLC1表达阳性率为80.00%,AL组为12.82%,两组差异有统计学意义(P<0.01)。急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)中M1、M2及M5型与对照组TSLC1表达差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01);M3、M4型与对照组TSLC1表达差异均无统计学意义(P>0.05),各亚型间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:AL中TSLC1失表达是一个频发事件,可能与AL的发生、发展有关,对AL的早期诊断、预后评估及指导治疗具有重要意义。     

甲硫腺苷磷酸化酶基因在非小细胞肺癌中的转录表达及临床意义

目的 探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)基因在非小细胞肺癌中的转录表达变化情况及其临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了15例新鲜肺癌标本及相应癌旁组织中MTAP mRNA的表达情况。同时运用Western印迹法检测了MTAP蛋白质的表达情况。结果 MTAP在73．30%,(11／15)的肿瘤标本中不表达或转录水平降低,而MTAP在癌旁对照组织中的表达率却高达93．3％(14／15);对于11例RT-PCR分析认定低表达或不表达的样本,再通过Western印迹方法进一步验证,发现与RT-PCR结果一致。另外,MTAP在肺腺癌和鳞癌中低表达现象差异无显著意义,但在中／低分化肺癌中的低表达与高分化癌相比增高,差异有显著意义。结论 MTAP基因低表达或丢失可能与肺癌的恶性程度密切相关。     

KAI1基因表达和淋巴管生成对非小细胞肺癌淋巴结转移的影响

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) KAI1基因表达下调和淋巴管生成对淋巴结转移是否具有协同作用。方法:应用兔抗人多克隆抗体KAI1和兔抗人抗Podoplanin单克隆抗体(EliVision法)对68例NSCLC组织石蜡切片进行染色,Logistic回归分析判断转移抑制基因KAI1的表达和淋巴管生成与淋巴结转移的关系。结果:NSCLC淋巴结阳性组和淋巴结阴性组KAI1表达阳性率分别为30.3%和88.6%,两者差异有统计学意义(P<0.01)。肿瘤间质中淋巴结阳性患者淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)为15.73±0.74,明显高于淋巴结阴性患者8.31±0.32(P<0.01)。Logistic回归分析显示,仅LVD对淋巴结转移有影响(P<0.05),其相对危险度(OR)为2.065,95%可信区间(1.202,3.547);而KAI1表达下调无统计学意义(P=0.375),95%可信区间为(0.003,8.714)。NSCLC患者转移抑制基因KAI1的表达下调和肿瘤间质中淋巴管生成对淋巴结转移无明显协同作用(P>0.05)。结论:肿瘤转移抑制基因KAI1表达下调与淋巴管生成对NSCLC淋巴结转移有促进作用,但未见明显协同作用。     

非小细胞肺癌患者外周血LUNX mRNA表达及临床意义

目的：通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗前后外周血中肺特异性X蛋白（LUNX）mRNA的表达,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对54例NSCLC患者化疗前后、非肺癌恶性肿瘤患者36例、肺良性疾病患者16例及健康志愿者15例的外周血进行LUNX mRNA检测。结果：54例NSCLC患者化疗前后外周血LUNX mRNA的阳性表达率分别是48.1%（26/54）和25.9%（14/54）,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;非肺癌恶性肿瘤患者、肺良性疾病患者及健康志愿者外周血LUNX mRNA的阳性表达率均为0,与NSCLC组比较均有统计学意义（P〈0.01）;LUNX mRNA的阳性表达率在化疗前后均随TNM分期增加而升高（P〈0.05）,与患者年龄、性别、病理类型及分化程度无明显相关性（P〉0.05）;NSCLC外周血LUNX mRNA表达与化疗近期疗效无关（P〉0.05）。结论：LUNX mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移较好的特异性标志物;化疗后NSCLC外周血LUNX mRNA的表达比化疗前显著降低,表明有效化疗可消灭NSCLC患者的微转移癌细胞。     

人原发性食管癌组织中多种抑癌基因的研究

应用ＰＣＲ扩增与直接测序技术，分析１０例食管癌和癌旁组织标本中多个抑癌基因ｐ５３、Ｒｂ、ＡＰＣ和ＭＣＣ的突变与丢失。结果：１０例中６例有ｐ５３基因突变；５例有Ｒｂ基因改变；３例有ＡＰＣ改变；３例有ＭＣＣ基因改变；８例食管癌标本中至少有一种抑癌基因有改变；６例至少有两种或多种抑癌基因改变，１例癌旁组织中也有两个抑癌基因改变。结果表明，食管癌癌变与多个抑癌基因变化的累积有关。     

AKT和PTEN基因在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨AKT／mTOR信号转导途径中AKT和PTEN基因在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达和临床意义。方法外科手术中获取72例NSCLC组织及30例癌旁组织．逆转录聚合酶链反应C（RT—PCR）技术检测NSCLC组织及癌旁组织中AKT和PTEN基因的表达水平。结果AKT在NSCLC组织的表达量（0．24±0．15）显著高于癌旁组（0．11±0．08）,PTEN在NSCLC组织中表达量（0．18±0．27）显著低于癌旁组（0．54±0．27）,P均〈0．05。AKT和PTEN与患者的性别、年龄、病理类型、淋巴结转移情况无关,与肿瘤直径有关。结论AKT通路的激活和PTEN表达缺失在NSCLC发生、发展中起到一定作用。