抗体捕捉酶联免疫吸附法在流行性乙型脑炎早期诊断上的应用

用MacELISA测定了138份临床疑似乙脑病人的血清标本,并与HI试验进行了比较。MacELLSA能特异、敏感地检出乙脑患者发病第2天的IgM抗体,阳性率为55.56％。第4、5病日,IgM抗体阳性率高达92.86％。10例正常人和10份流行性出血热病毒抗体阳性的血清标本无一份阳性。     

三种ELISA试剂盒检测猪流行性乙型脑炎病毒血清IgG抗体比较

目的 比较国内常用商品化ELISA试剂盒检测猪流行性乙型脑炎病毒血清IgG抗体的诊断效果。方法 选用3种猪乙脑病毒血清IgG抗体ELISA检测试剂盒(Keqian,Lvshiyuan,Tianchen),以微量中和试验为金标准,对90份猪血清进行检测分析。结果 中和试验的阳性检出率为34.4%(31/90),Keqian,Lvshiyuan和Tianchen阳性检出率分别为50.0%(45/90), 47.8%(43/90)和 38.9%(35/90)。灵敏度最高的是Keqian,为90.32%,但其特异度只有71.19%;Tianchen的灵敏度和特异度分别为83.87%和79.66%;Lvshiyuan的灵敏度和特异度分别仅为41.94%和16.95%。与中和试验比较,Tianchen试剂盒的κ系数最高为0.63,其次是Keqian为0.57,Lvshiyuan仅为0.04。显示3种试剂盒具稳定性。结论 目前国内商品化猪乙脑病毒血清IgG抗体ELISA检测试剂盒诊断结果差异较大,与中和试验相比存在较高的假阴性,质量有待提高。     

酶联免疫吸附试验检测猪血清的乙型脑炎抗体的评价

本文报告用酶联免疫吸附试验捕获法和间接法分别检测猪血清乙型脑炎IgM和IgG抗体。酶标法测得的IgM和IgG滴度与血凝抑制试验滴度显著相关。但前者可测出70％的IgG型抗体和63.3％的IgM型抗体,而后者仅56.7％阳性。在乙脑流行季节,两种类型的乙脑抗体出现几乎同样快。IgG可持续终身。IgM仅在短期内检测到,当表示猪乙脑新感染。     

上海市猪感染流行性乙型脑炎病毒的血清学监测

流行性乙型脑炎 (以下简称乙脑 )是一种人兽共患的急性病毒性传染病 ,猪是乙脑最重要的传染源和乙脑病毒传播的主要宿主 ,在乙脑的流行环节上起重要作用〔1〕。因此 ,对猪感染乙脑病毒时间的血清学监测可反映乙脑病毒在自然界的循环情况 ,预测人群乙脑的流行趋势。猪感染乙脑病毒的情况可通过乙脑抗体阳转时间和乙脑抗体阳转率来反映。上海市分别在 1975年 4～ 10月、1985年 6月～ 1986年 8月和 1987年 6～ 12月对猪感染乙脑作了血清学监测。间断十几年后 ,我们于 1999年 4～11月对上海市猪感染乙脑的情况进行血清学监测 ,以了解目前乙脑病…     

抗流行性乙型脑炎病毒药物的研究进展

流行性乙型脑炎(Japanese Encephalitis,JE)是由黄病毒科(Flaviridae)黄病毒属(Flavivirus)流行性乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)引起的,在自然界中主要以猪为宿主,经蚊传播的一种蚊媒性人兽共患传染病。该病主要流行于亚洲及西太平洋地区,严重威胁着人类健康,已成为人类脑炎疾病最主要的病因之一,并影响养猪业的发展,引起了世界性的广泛关注,因此,流行性乙型脑炎的防治研究有着重要的实际应用意义。到目前为止,尚无治疗流行性乙型脑炎特效药面市,但对抗流行性乙型脑炎病毒药物的研究已有一定的进展,而我国在这方面的系统介绍较少,本文就近10年来抗流行性乙型脑炎药物及其作用机制的研究进展做一综述,旨在为流行性乙型脑炎的预防和治疗提供参考。     

流行性乙型脑炎患者血清IgG抗体对乙脑病毒蛋白的识别

目的：了解流行性乙型脑炎病毒各蛋白成分在刺激机体免疫应答方面所起的作用，给亚单位疫苗研制提供理论依据，进行该项研究。方法：建立乙脑病毒免疫转印方法，应用该法检查乙脑病人血清IgG抗体对乙脑病毒蛋白的反应情况，分析正常人群中筛选出的乙脑病毒隐性感染者血清IgG对乙脑病毒蛋白的反应性，并比较二者的差异。结果：经检测，绝大部分病人血清IgG可识别E蛋白，部分病人尚可识别NS5，NS3，NS1蛋白，而隐性感染者血清IgG对98kd（NS5）乙脑病毒蛋白的反应性显著低于乙脑患者。结论：研究结果显示，E蛋白是乙脑病人血清IgG识别的主要蛋白，在免疫保护方面起着主要作用。隐性感染者对NS5蛋白的反应机率明显低于显性感染者，提示NS5蛋白在乙脑病毒的致病过程中起重要作用。     

2002-2006年开江县健康儿童流行性乙型脑炎血清抗体监测

目的了解开江县健康儿童乙脑抗体阳性率动态变化情况，为乙脑防制提供科学依据。方法2002—2006年每年5月在乙脑流行地区采集1～9岁健康儿童静脉血2ml并分离血清，进行乙脑抗体IgG检测，2002—2003年采用反向被动血凝抑制试验（RPHI），2004—2006年采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。2006年调查全县接种乙脑疫苗情况。结果2002—2006年取健康儿童血清455份，乙脑抗体阳性270份，阳性率为59．34％，2002—2006年抗体阳性率依次为48．33％、54．35％、62．00％、63．08％及63．77％，各年度差异无统计学意义（X2=5．75，P〉0．05）。男女抗体阳性率各为56．65％和63．02％，两者差异无统计学意义（X^2=1．86，P〉0．05）。各年龄组抗体阳性率以2岁组最低（32．35％），8岁最高（82．76％），各年龄组之间差异有统计学意义（X^2=25．17，P〈0．05）。2002—2006年全县接种乙脑疫苗75496人，平均每年在15000人以上。调查1～7岁儿童169名，有乙脑疫苗接种的79名，接种率为46．75％，1～4岁接种率42．15％，低于5～7岁的58．33％，两者差异无统计学意义（X^2=3．62，P〉0．05）。结论加强低年龄组，特别是0～4岁儿童乙脑疫苗的预防接种，能有效地控制乙脑的发生和流行。     

乙型脑炎病毒抗体捕获ELISA检测方法的初步建立

目的 建立检测乙型脑炎病毒抗体的抗体捕获ELISA方法.方法 以乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异的单克隆抗体包被ELISA板,吸附乙型脑炎减毒活疫苗株SA14-14-2病毒粒子,再以吸附的病毒粒子捕获乙型脑炎病毒抗体,建立抗体捕获ELISA方法:同时与以乙型脑炎病毒细胞培养上清包被的间接ELISA方法进行对比,并检测临床血清样品105份.结果 间接ELISA方法背景无法消除,1:10、1:100、1:1000各稀释度的阳性血清与阴性血清吸光度(A)值相近,A阳性血清/阴性血清分别为1.02、0.99、1.13,均<2.1.而抗体捕获ELISA方法1:10、1:100稀释度的A阳性血清/阴性血清分别为3.57、2.94,均>2.1;1:1000稀释度的A阳性血清/阴性血清为1.42,<2.1,表明血清稀释度为1:100时可以显著区别乙型脑炎病毒感染的阳性血清与阴性血清,明显消除间接ELISA方法中背景过高的问题.抗体捕获ELISA方法检测105份临床血清样品,A阳性血清/阴性血清为0.257～0.321(0.262±0.050),均<2.1,为乙型脑炎病毒抗体阴性血清.结论 初步建立了乙型脑炎病毒抗体捕获ELISA方法,该方法特异性较高,对于建立乙型脑炎病毒群的快速鉴别诊断方法具有重要意义.     

流行性乙型脑炎患儿血清及脑脊液SIOOB蛋白检测的临床意义

1965年，S100蛋白由Moore等人首先在牛脑组织中发现。因其在中性饱和硫酸铵中可完全溶解而得名，后被证实，该蛋白其实是S100A1和S100B的混合物。我们对流行性乙型脑炎（简称乙型脑炎）患儿血清及脑脊液（CSF）中S100B的含量进行检测，探讨其变化的发生机制及临床意义。     

Mac ELISA测定乙脑患者血清和脑脊液中特异性IgM的评价

用抗体捕捉ELISA法(Mac ELISA)检测临床疑似流行性乙型脑炎(下称乙脑)病人脑脊液88份,阳性51份,阳性率57.95％;血清91份,阳性56份,阳性率为61.53％,两者无显著性差异(X~2=0.238 P>0.05);包括取自同一患者的脑脊液和血清各72份,阳性率分别为61.11％和68.05％;而分析其中14例IgG呈4倍以上增高,乙脑患者脑脊液IgM阳性13例,而血清IgM阳性却只有8例,提示在疫区流行季节内仅仅血清学IgM阳性有时可能为乙脑隐性感染的同时还伴其它有关病毒感染。     

开江县306例流行性乙型脑炎流行病学调查分析

目的 探讨乙型脑炎发病规律和临床特征,为乙脑防制提供科学依据.方法 对开江县1985～2005年临床诊治的乙脑患者306例进行流行病学个案调查及分析,取2002～2005年乙脑病人血清,采用反向被动血凝抑制试验(RPHI)进行乙脑IgM抗体检测.结果 306例乙脑患者,分布于开江县20个乡镇168个村和居委会,农村发病是城镇的37.25倍,病死率为3.27%(10/306),发病高峰集中在8月,占63.73%(195/306),2～6岁儿童病例占78.43%(240/306),男女发病之比为1.41∶1,以散居儿童发病最多,占57.19%(175/306).临床上体温≥39℃占88.56%(271/306),患者以中、重型为多,占71.90%(220/306),随着年龄增大重型和极重型有增多的趋势.接种过乙脑疫苗占10.46%(32/306),家庭中有防蚊措施的占52.81%(47/89).临床病例血清学确诊率为63.33%(19/30). 结论 乙脑的防制策略,以农村2～6岁散居儿童为重点,采取防蚊灭蚊及全程足量接种乙脑疫苗,是控制乙脑发生和流行的有效措施.     

Dengue Hemorrhagic Fever in a Japanese Traveler with Pre-existing Japanese Encephalitis Virus Antibody

An adult Japanese man who had just returned from Thailand developed dengue hemorrhagic fever (DHF). A primary infection of dengue virus (DENV) was confirmed, specifically DENV serotype 2 (DENV-2), on the basis of the detection of the virus genome, a significant increase in the neutralizing antibody and the isolation of DENV-2. DHF is often observed following a secondary infection from another serotype of dengue virus, particularly in children, but this case was a primary infection of DENV. Japan is a non-endemic country for dengue disease. In fact, only Japanese encephalitis (JE) is known to be a member of the endemic flavivirus family. In this study, IgG antibody against Japanese encephalitis virus (JEV) was detected. JEV belongs to the family of dengue virus and prevails in Japan, particularly Kyushu. Among many risk factors for the occurrence of DHF, a plausible candidate could be a cross-reactive antibody-dependent enhancement (ADE) mechanism caused by JEV antibody. This indicates that most Japanese travelers who living in dengue non-endemic areas, particularly Kyushu, should be aware of the occurrence of DHF.     

乙脑病毒经三带喙库蚊卵传递的实验研究

本文用乙脑病毒-蔗糖-人红细胞混合物摄食法感染雌性三带喙库蚊,共感染18组(1166只),其中13组感染成功,并从2组子代蚊检出乙脑病毒。传递到子代蚊的乙脑病毒仍保持毒力。     

Molecular Mechanism and Role of Japanese Encephalitis Virus Infection in Central Nervous System-Mediated Diseases

The Japanese encephalitis virus (JEV) is the most common cause of neurodegenerative disease in Southeast Asia and the Western Pacific region; approximately 1.15 billion people are at risk, and thousands suffer from permanent neurological disorders across Asian countries, with 10–15 thousand people dying each year. JEV crosses the blood-brain barrier (BBB) and forms a complex with receptors on the surface of neurons. GRP78, Src, TLR7, caveolin-1, and dopamine receptor D2 are involved in JEV binding and entry into the neurons, and these receptors also play a role in carcinogenic activity in cells. JEV binds to GRP78, a member of the HSP70 overexpressed on malignant cells to enter neurons, indicating a higher chance of JEV infection in cancer patients. However, JEV enters human brain microvascular endothelial cells via an endocytic pathway mediated by caveolae and the ezrin protein and also targets dopamine-rich areas for infection of the midbrain via altering dopamine levels. In addition, JEV complexed with CLEC5A receptor of macrophage cells is involved in the breakdown of the BBB and central nervous system (CNS) inflammation. CLEC5A-mediated infection is also responsible for the influx of cytokines into the CNS. In this review, we discuss the neuronal and macrophage surface receptors involved in neuronal death.     

Isolation and Genetic Characterization of Japanese Encephalitis Virus Two Decades after Its Elimination in Singapore

Japanese encephalitis virus (JEV) is an important arbovirus in Asia that can cause serious neurological disease. JEV is transmitted by mosquitoes in an enzootic cycle involving porcine and avian reservoirs, in which humans are accidental, dead-end hosts. JEV is currently not endemic in Singapore, after pig farming was abolished in 1992; the last known human case was reported in 2005. However, due to its location along the East-Asian Australasian Flyway (EAAF), Singapore is vulnerable to JEV re-introduction from the endemic regions. Serological and genetic evidence in the last decade suggests JEV’s presence in the local fauna. In the present study, we report the genetic characterization and the first isolation of JEV from 3214 mosquito pools consisting of 41,843 Culex mosquitoes, which were trapped from April 2014 to May 2021. The findings demonstrated the presence of genotype I of JEV (n = 10), in contrast to the previous reports of the presence of genotype II of JEV in Singapore. The genetic analyses also suggested that JEV has entered Singapore on several occasions and has potentially established an enzootic cycle in the local fauna. These observations have important implications in the risk assessment and the control of Japanese encephalitis in non-endemic countries, such as Singapore, that are at risk for JEV transmission.     

从云南省宾川县蝙蝠体内分离到乙型脑炎病毒

１９９１年９月，从捕自云南省宾川县的１３２只双色帝蝙蝠和棕果蝙蝠体内分离到４株病毒。经电镜观察、血凝抑制试验和单克隆抗体免疫荧光试验证实为乙型脑炎病毒。结果表明蝙蝠在乙型脑炎病毒保存和传播中起重要作用。     

1976～2007年云南省流行性乙型脑炎流行病学特征分析

目的分析云南省流行性乙型脑炎（简称乙脑）流行病学特点,提供防制参考。方法收集全省乙脑疫情资料,用Excel建立数据库,用SPSS13．0统计软件进行统计分析。结果1976—2007年云南省共报告乙脑发病29693例,死亡3326例,年均发病率为2．46／10万,年均死亡率为0．29／10万,病死率为11．2％。发病率和病死率在20世纪70,80年代较高,90年代以来逐步下降,2007年发病率略有上升;发病地区主要集中在德宏、大理、保山、文山、红河、曲靖、昭通和西双版纳州（市）;全年均有发病,主要流行季节为7～10月,其中8月为高峰;报告病例中80．33％为≤15岁儿童。结论乙脑在云南省广泛分布,但主要流行地区为滇中、滇西和滇南地区;防制工作成效显著,但仍应加强高发地区儿童的预防接种和蚊虫控制工作。     

1949-2018年石家庄市流行性乙型脑炎发病趋势分析

目的 分析流行性乙型脑炎(简称乙脑)流行特征的长期趋势。方法 对石家庄市疫情资料汇编((1949-2018年)、国家传染病报告信息管理系统(2004-2018年)与急性脑炎脑膜炎监测合作项目(2007-2018年)中的乙脑资料,采用年度变化百分比(annual percent change,APC)和圆形分布定量评估乙脑疫情变化特征。结果 1949-2018年,石家庄市累计报告乙脑病例5 884例,病死率为19.02%。职业中,农民占51.16%。2001-2018年,流动人口病例占40.85%。年发病率范围为0.03/10万~72.43/10万,年均发病率1.72/10万,APC为-2.57(t=6.38,P<0.001)。1949-1993年的1~14岁病例占62.59%,而2016-2018年的50岁及以上病例占76.56%。每20年左右出现一次明显的流行高峰。病例主要集中在7-9月份。1949-1999年的发病高峰为8月24日(8月1日-9月17日)(z=4712.17,P<0.001),2000-2018年的发病高峰为8月6日(7月18日~10月25日)(z=146.10,P<0.001),两阶段的发病高峰期差异具有统计学意义(t=2.03,P<0.05)。结论 石家庄市乙脑疫情明显下降,高发人群年龄呈上升趋势,流动人口成为新的易感人群,严格的季节性发病高峰特征有所减弱,高峰日提前,高峰期间增宽。     

Japanese Encephalitis Virus Upregulates the Expression of SOCS3 in Mouse Brain and Raw264.7 Cells

Japanese encephalitis virus (JEV) is one of the pathogens that can invade the central nervous system, causing acute infection and inflammation of brain. SOCS3 protein plays a vital role in immune processes and inflammation of the central nervous system. In this study, Raw264.7 cells and suckling mice were infected with JEV, and SOCS3 expression was analyzed by the gene expression profile, semiquantitative RT-PCR, qRT-PCR, immunohistochemistry (IHC) and Western blot. Results indicated that 520 genes were found to be differentially expressed (fold change ≥ 2.0, p < 0.05) in total. The differentially regulated genes were involved in biological processes, such as stimulus response, biological regulation and immune system processes. JEV early infection could induce SOCS3 expression, upregulating both the mRNA and protein levels in Raw264.7 cells in a time-dependent manner. The SOCS3 expression was much lower in Raw264.7 cells infected with inactivated JEV than wild-type JEV. In vivo, SOCS3 protein was also found to upregulate the expression of mRNA and protein in JEV-infected mouse brain. Taken together, our data showed that JEV early infection could induce the upregulation of SOCS3 expression, both in vitro and in vivo, providing the basic theoretical foundation for future research on the invasion mechanism of JEV.