大鼠三叉神经节及尾侧亚核内PPTAmRNA在伤害性刺激条件下的…

将福尔马林注入大鼠一侧口以下的时程变化用原位杂交法观察三叉神经一叉神经脊束核尾侧亚核内ＰＰＴＡｍＲＮＡ表达的时变化。证明：ＰＰＴＡｍＲＮＡ的表达及变化主要限于Ⅰ、Ⅱ层，其时程变化琚三叉神经节中的变化相似。     

面口部炎症刺激增强CGRP mRNA、PPTA mRNA及NOS在大鼠三叉神经节中的表达

为了研究ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ在伤害性刺激后大鼠ＴＧ中合成和表达的变化，将４％鹿角菜胶（ＣＡＲ）溶液注射到大鼠一侧口周皮下作为伤害性刺激模型，用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法结合ＣＧＲＰ、ＰＰＴＡｍＲＮＡｓ原位杂交组织化学法对此进行了观察。结果显示：对照组大鼠ＴＧ中约有３２．２％、１６．２％和１０％的神经元分别呈ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性。ＣＡＲ刺激后，在刺激侧ＴＧ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元的数量均增多，其阳性率分别达到了３８．６％、２２．８％和１４．２％。ＴＧ中约有６．８％和７．３％的神经元同时呈ＮＯＳ和ＣＧＲＰｍＲＮＡ或ＮＯＳ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ阳性，ＣＡＲ刺激使得两种双标神经元的数量也明显增多，双标细胞占ＴＧ细胞总数的百分比分别达到了１１．０％和１０．９％，而且刺激后增加的ＮＯＳ阳性神经元主要为双标神经元。上述结果提示ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ阳性神经元，尤其是共存神经元可能在面口部伤害性信息的传递和调节中起重要作用，伤害性刺激所诱导的ＮＯＳ合成的增加与ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＴＡｍＲＮＡ表达的增强可能有密切的关系。     

大鼠三叉神经半月神经节内一氧化氮合酶阳性神经元的分布、投射及其与CGRP、SP的关系

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学方法观察了大鼠三叉神经半月神经节内一氧化氮合酶阳性神经元的分布．结果发现约５～８％的节细胞呈一氧化氮合酶阳性，几乎均是中、小细胞，弥散地分布在神经节各处．结合荧光金逆行追踪技术观察，发现荧光金注入三叉神经脊束核尾侧亚核浅层后，约９０％的一氧化氮合酶阳性节细胞被逆行标记，提示半月神经节内的一氧化氮合酶阳性神经元主要投射于三叉神经脊束核尾侧亚核浅层．用一氧化氮合酶组织化学反应结合荧光金逆行追踪技术及ＣＧＲＰ、ＳＰ免疫荧光技术进行重合处理的结果显示，在向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的一氧化氮合酶阳性半月节神经元中，约６０％呈ＣＧＲＰ样免疫阳性，约６５％呈ＳＰ样免疫阳性．结合文献及本文结果，可以认为半月神经节向三叉神经脊束核尾侧亚核浅层投射的一氧化氮合酶与ＣＧＲＰ或ＳＰ共存的神经元可能在面口部伤害性信息的传递和调控中起重要作用．     

大鼠三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核的 …

为研究三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核的分支投射，用荧光素逆行追踪双标记方法，Ｆａｓｔ ｂｌｕｅ和Ｎｕｃｌｅａｒ ｙｅｌｌｏｗ分别注射入三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核后，荧光是微镜下可见三叉神经节内的多种逆行标记神经元，ＦＢ显示明亮的蓝色标记胞浆，而ＮＹ标记则为黄绿色的圆形胞核。     

面口部炎症刺激增荂GRPmRNA,PPTAmRNA及NOS在大鼠三叉神经？…

为了研究ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ＰＰＴＡｍＲＮＡ和ＮＯＳ在伤害性刺激后大鼠ＴＧ中合成和表达的变化，将４％鹿角莱胶溶液注射到大鼠一侧口周皮下作为伤害性刺激模型，用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学法结合ＣＧＲＰ、ＰＰＴＡｍＲＮＡｓ原位组织化学对此进行了观察。结果显示：对照组大鼠ＴＧ中约有３２．２％、１６．２％和１０％的神经元分别呈ＣＧＲＰｍＲＮＡ、ｐｐｔａＭｒｎａ和ＮＯＳ阳性。ＣＡＲ刺激后，在刺激侧ＴＧ、ＣＧＲＰｍＲ     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内PPTA、CGRP和PPEmRNA及其相应蛋白在面口部炎性刺激时的变化

利用原位杂交技术和免疫组化技术，观察完全福氏佐剂致炎大鼠的三叉神经脊柬核尾侧亚核和／或三叉神经节内SP、CGRP和L-ENK样阳性结构及它们相应的前体PPTAmRNA、CGRPmRNA和PPEmRNA分布状况的动态变化。原位杂交结果显示：PPTAmRNA在三叉神经节与三叉神经脊束核尾侧亚核浅层神经元中的表达于致炎刺激后12h明显增强，分别于1d和4d时达到高峰，21d后恢复正常;CGRPmRNA在三叉神经节神经元中的表达变化与PPTAmRNA者相似;在三叉神经脊束核尾侧亚核浅层PPEmRNA阳性神经元的数量于刺激后12d明显增多，8d到达高速，28d时仍高于正常水平.免疫组织化学结果显示：尾侧亚核浅层SP样阳性纤维和终末的密度在致炎刺激后12h至4d降低，然后逐渐回升到正常水平;而CGRP样阳性纤维和终末的密度在佐剂注射后1d明显降低，8d后恢复正常，14d后又明显高于正常水平;佐剂刺激后1d，L-ENK样阳性纤维和终末的密度明显增加，以后维持正常水平，21d和28d时又低于正常水平.在三叉神经节，SP和CGRP样阳性神经元的数量在致炎刺激后早期明显减少，以后恢复至正常水平且再无明显变化。上述结果表明，在完全福氏佐剂的致炎条件下，SP、CGRP和L-ENK样阳性结构及其相应的mRNA在尾侧亚核浅层和／或三叉神经节存在着不同的时程变化，反映了它们在     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内PPTA mRNA在伤害性刺激条件下的时程变化

将福尔马林注入大鼠一侧口周皮下，用原位杂交法观察三叉神经节和三叉神经脊束核尾侧亚核内PPTAmRNA表达的时程变化。证明：PPTAmRNA在三叉神经节内的表达于刺激后4h有明显增加，24h达到高峰，48h后恢复至正常；在尾侧亚核中，PPTAmRNA的表达及变化主要限于Ⅰ、Ⅱ层，其时程变化与在三叉神经节中的变化相似。PPTAmRNA表达的增加仅出现于刺激侧的三叉神经节和尾侧亚核，而对侧和对照组则无明显变化。提示伤害性刺激可直接或跨突触增强尾侧亚核PPTAmRNA的表达，意味着PPTA在西口部伤害性信息的传递和调控中起重要作用。     

大鼠三叉神经节细胞向三叉神经脊束核各亚核的分枝投射

本文应用荧光素双标记与免疫荧光结合方法研究了单个含ＳＰ或ＣＧＲＰ的三叉神经节细胞向三叉神经脊束核的尾侧亚核、极间亚核和吻侧亚核的分枝投射。将ＤｉａｍｉｄｉｎｏＹｅｌｌｏｗ（ＤＹ）注入尾侧亚核，ＦａｓｔＢｌｕｅ（ＦＢ）分别注入吻侧亚核或极间亚核，发现ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节内标记细胞总数的１３．２％（ＦＢ注入吻侧亚核例）和２．３％（ＦＢ注入极间亚核例）；双标细胞中含ＳＰ者分别为７４．４％和６９．６％；含ＣＧＲＰ者分别为７２．１％和６４．３％。将ＤＹ注入极间亚核，ＦＢ注入吻侧亚核时，ＤＹ／ＦＢ双标细胞占同侧三叉神经节标记细胞总数的１．６％，双标细胞中有６７．９％为ＳＰ阳性，７３．９％为ＣＧＲＰ阳性。多数的双标且呈ＳＰ或ＣＧＲＰ阳性的三叉神经节细胞直径约为２５～５０μｍ，为中、小型节神经元，而直径大于５０μｍ的大型细胞较少见。以上结果提示，三叉神经初级传入纤维进入脑干后的下降支分枝投射向三叉神经脊束核的各亚核，它们可能与面口部的痛信息传递有关。ＳＰ和ＣＧＲＰ是这些分支投射神经元的重要神经活性物质。     

大鼠三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核的分支投射

为研究三叉神经节神经元向三叉神经脊束核尾侧亚核（ＶＣ）和孤束核（ＮＴＳ）的分支投射，用荧光素逆行追踪双标记方法，Ｆａｓｔｂｌｕｅ（ＦＢ）和Ｎｕｃｌｅａｒｙｅｌｏｗ（ＮＹ）分别注射入三叉神经脊束核尾侧亚核和孤束核后，荧光显微镜（３６０ｎｍ激发波长）下可见三叉神经节内的多种逆行标记神经元。ＦＢ显示明亮的蓝色标记胞浆，而ＮＹ标记则为黄绿色的圆形胞核。虽大多数神经元为单标记，但部分也呈黄色胞核，蓝色胞浆的双标记细胞。双标记细胞多为直径３０μｍ以下的中、小型，鲜见大型细胞。分支投射神经元可能扩散传递口、舌伤害性痛觉信息并在ＶＣ和ＮＴＳ内与其他来源的内脏、躯体感觉传入信息相互影响。     

大鼠三叉神经半月神经节内一氧化氮合酶阳性神经元的分布,投射及其与...

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学方法观察了大鼠三叉神经半月神经节内一氧化氮合酶阳性神经元的分布。结果发现的５￣８％的节细胞呈一氧化氮合酶阳性，几乎均是中、小细胞，弥散地分布在神经节各处。结合荧光金逆行追踪技术观察，发现荧光金注入三叉神经脊束核尾侧亚核浅层后，约９０％的一氧化氮合酶阳性节细胞被逆行标记，提示半月神经节内的一氧化氮合酶阳性神经元主要投射于三叉神经脊束核尾侧亚核浅层。用一氧化     

大鼠口舌部粘膜伤害性刺激信息的感受及传导通路

本文采用以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）注入丘脑腹后内侧核区的逆行追踪技术结合用盐酸溶液刺激大鼠口、舌粘膜的方法，观察了ＦＯＳ、ＨＲＰ单标记和双标记神经元在三叉神经脊束核尾侧亚核内的分布．证明脑干内除臂旁核、孤束核、延髓腹外侧网状结构等脑区外，大量ＦＯＳ样阳性神经元聚集于三叉神经尾侧亚核Ⅰ、Ⅱ层，三叉旁核（间质核）有中等量分布而Ⅳ、Ⅴ层内仅见散在标记细胞．ＨＲＰ逆行标记细胞主要位于注射对侧的三叉神经感觉主核和脊束核．三叉神经尾侧亚核内的逆行标记细胞局限于背外侧部Ⅰ层，多为沿外缘呈切线方向走行的圆形、椭圆形和梭形细胞．在三叉神经脊束核尾侧亚核背外侧部浅层内，可见到一些胞浆内含ＨＲＰ反应产物、核为ＦＯＳ样阳性的双标记神经元．本文结果提示三叉神经尾侧亚核浅层内存在大量对口、舌粘膜伤害性刺激起反应的痛感受神经元，其中部分神经元将伤害性感觉传入信息传递至丘脑．     

一氧化氮合酶阳性结构在大鼠三叉神经感觉核簇内的分布及其与面部伤害性刺激诱发的FOS蛋白表达的关系

用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学技术与ＦＯＳ免疫组化（ＡＢＣ法）相结合的方法，观察了大鼠三叉神经感觉核簇内一氧化氮合酶阳性神经元和纤维的分布及其与面部伤害性刺激诱发的ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达的关系．证明，浓密的一氧化氮合酶阳性纤维和终末分布于三叉神经脊束核尾侧亚核的Ⅰ和Ⅱ层，阳性成分呈蓝黑色的带状分布，而在三叉神经感觉核簇的其余核区内很稀疏．一氧化氮合酶阳性神经元胞体与面部伤害性刺激诱发的ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达的阳性神经元在此核簇内的分布节段非常相似，都主要存在于与伤害性传入传递和调控有关的三叉神经脊束核尾侧亚核，并且二者都主要分布于与痛觉调控有关的浅层．约有１０～１５％的一氧化氮合酶阳性神经元同时呈ｃ－ｆｏｓ原癌基因蛋白表达．在三叉脊束核尾侧亚核的Ⅲ～Ⅴ层仅出现散在的阳性细胞，除在吻侧亚核的背内缘与孤束核交界处有少量一氧化氮合酶同性神经元外，在三叉神经感觉核簇的其余核区两者均几无表达．本文及文献结果提示，一氧化氮可能对面部伤害性信息的传递和调控起重要作用．     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内代谢型谷氨酸受体的分布及谷氨酸样阳性终末的来源

本文用抗磷酸激活的谷氨酰胺酶的单克隆抗体和抗代谢型谷氨酸受体五种亚型（1，1α，2／3，5）的4种抗体，研究了三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样免疫反应阳性神经元和终末以及五种代谢型谷氨酸受体的分布，同时结合HRP逆标技术对三叉神经脊束核尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的来源进行了观察．发现磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性胞体和终末主要集中在三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层；半月节内仅有它的阳性胞体。半月节内HRP逆标神经元中呈磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性者占71．4％，这些双重反应阳性神经元占半月节内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性神经元的33．2％．五种代谢型谷氨酸受体亚型中，只有5型密集地分布于三叉尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层。以上结果说明：（1）三叉尾侧亚核内的磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末主要位于其浅层，它们主要来源于三叉神经的初级传入；（2）三叉尾侧亚核的代谢型谷氨酸受体五种亚型中，只有5型可能参与西口部伤害性刺激信息的传递；（3）三叉尾侧亚核内磷酸激活的谷氨酰胺酶样阳性终末的分布与代谢型谷氨酸受体5型的分布互相匹配。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅱ层内CB样、PV样阳性终末与向臂旁核投射神经元的突触联系

为了观察三叉神经脊束核尾侧亚核 层神经元与向臂旁核投射神经元的突触关系 ,选用 Calbindin D-2 8k和 Parvalbu-min作为标志物 ,采用 HRP逆行追踪与免疫组织化学技术相结合的双重反应技术对 层内的 Calbindin D-2 8k样和 Parvalbumin样阳性神经元与三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射神经元之间的突触联系进行了观察。HRP注入臂旁核后 ,逆标神经元主要位于同侧三叉尾侧亚核 层至 层。Calbindin D-2 8k和 Parvalbumin样阳性胞体、纤维和终末主要集中在 层内侧带。电镜下观察 ,此二者的阳性反应产物呈弥散分布 ;两者的阳性终末与 HRP逆标神经元的胞体和树突之间主要形成轴 -树突触 ,偶见轴 -体突触 ;Calbindin D-2 8k样阳性终末与 HRP逆标神经元的树突形成的非对称性突触占 83% ,Parvalbumin样阳性终末与 HRP逆标神经元的树突形成的对称性突触占 85 %。此外 ,还观察到参与突触小球组成的初级传入纤维终末与 HRP逆标神经元的树突形成突触联系。以上结果提示 :(1)三叉神经脊束核尾侧亚核 层的 Calbindin D-2 8k样或 Parvalbumin样阳性神经元可通过突触传递机制对三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神经元进行调控 ,影响外周伤害性信息向上位脑结构的传递 ;(2 )三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投?     

大鼠三叉神经节及尾侧亚核内降钙素基因相关肽在面口部伤害性刺激时的动态变化

为了探讨降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）在面口部伤害性刺激条件下合成、运输和释放的规律，将福尔马林注入大鼠一侧口周皮下，分别于刺激后不同时间取材，用原位杂交和免疫组织化学方法观察ＣＧＲＰｍＲＮＡ及ＣＧＲＰ样阳性结构（ＣＧＲＰ－ＬＩ）在三叉神经节（ＴＧ）和三叉神经尾侧亚核（Ｖｃ）内的动态变化。原位杂交结果显示：ＴＧ内表达ＣＧＲＰ的两种亚型α－ＣＧＲＰ和β－ＣＧＲＰｍＲＮＡｓ神经元的数量分别于福尔马林刺激后２ｈ和４ｈ有明显增加，８ｈ达到高峰，然后渐下降，至４８ｈ后恢复至正常。免疫组织化学结果显示：Ｖｃ浅层ＣＧＲＰ－ＬＩ的含量在刺激后１ｈ内明显减少，２ｈ后渐增，１２ｈ达到高峰，２４ｈ后趋向正常。ＴＧ内ＣＧＲＰ－ＬＩ神经元的数量在刺激后１ｈ内也明显减少，此后逐渐回升至正常并有轻度增加，但与正常间无明显差异。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅱ层内CB样、PV样阳性终末与向臂旁核投身射神经元的突触联系

为了观察三叉神经脊束核尾亚核Ⅱ层神经元与向臂旁核投射神经元的突触关系,选用Calbindin D-28k和Parvalbu-min作为标志物,采用HRP逆行追踪与免疫组织化学技术相结合的双重反应技术对Ⅱ层内的Calbindin D-28k样和Parvalbumin要位于同侧三叉尾侧亚核Ⅰ屋至Ⅲ层。Calbindin D-28k和Parvalbumin样阳性胞体、纤维和终末主要集中在Ⅱ层内侧带,电镜下观察,此二者的阳性反应产物呈弥散分布;两者的阳性终末与HRP逆标神经元的胞体和树突之间主要形成轴－树突触,偶见轴体突触;CalbindinD-28k样阳性终末与HRP逆标神经元的树突形成的对称性触占85％。此外,还观察到参与突触小球组成的初级传入纤维终末与HRP逆标神经元的树突形成突触联系。以上结果显示：（1）三叉脊束核尾侧亚核Ⅱ层的Calbindin D-28k样或Parvalbumin样阳性神经元可通过突触机制对三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神经元进行调控,影响外周伤害性信息向上位脑结构的传递;（2）三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神圣凶可能参与面口部伤害性信息的直接传递。     

大鼠中缝大核下行投射纤维与三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑投射神经元之间的突触联系

本研究分别用逆行和顺行追踪相结合及逆行追踪与免疫组织化学反应相结合的双标记技术对中缝大核下行投射纤维和５ ＨＴ 样阳性终末在三叉神经脊束核尾侧亚核内的分布及其与向丘脑投射神经元之间的突触联系进行了观察。将ＨＲＰ注入丘脑腹后内侧核,证明ＨＲＰ逆标神经元主要见于三叉神经脊束核尾侧亚核的Ⅰ、Ⅲ层;将顺行标记物ＰＨＡ Ｌ 注入中缝大核,证明ＰＨＡ Ｌ顺标纤维和终末也主要见于尾侧亚核的Ⅰ层,Ⅱ层内仅有少量ＰＨＡ Ｌ 顺标终末;免疫组织化学反应的结果显示５ ＨＴ 样阳性终末也主要存在于尾侧亚核的Ⅰ和Ⅱ层,其它部位仅散在分布。在电镜下观察到：（１）三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅰ层的ＨＲＰ逆标神经元的胞体和树突分别与ＰＨＡ Ｌ顺标终末形成轴 体突触和轴 树突触,其中大部分为对称性突触,非对称性突触较少;（２）尾侧亚核Ⅰ层ＨＲＰ逆标神经元的胞体和树突也分别与５ ＨＴ 样阳性终末形成轴 体突触和轴 树突触,这些突触联系也以对称性突触为主。本研究的结果表明：中缝大核的下行投射纤维主要终止于三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅰ层,对此层内向丘脑投射的神经元可能主要发挥抑制作用,而５ ＨＴ 是中缝大核下行投射纤维的主要神经活性物质。     

大鼠中缝大核下行投射纤维与三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑投 …

本研究分别用逆行和顺行追踪相结合及逆行追踪与免疫组织化学反应相结合 标记技术对中缝大核下行投射纤维和５－ＨＴ样阳性终末在三叉神经脊束核属侧亚核内的分布及其与向丘脑投射神经元之间的突触联系进行了观察。将ＨＲＰ注往后在脑腹后内侧核,证明ＨＲＰ逆标神经元主要见于三叉神经脊束核尾侧亚的Ⅰ,Ⅱ层;将顺行标记物ＰＨＡ－Ｌ注入中缝大核,证明ＰＨＡ－Ｌ顺标纤维和终末也主要见于尾侧亚核的Ⅰ层, 内仅有少量ＰＨＡ－Ｌ     

大白鼠三叉神经核至小脑核的纤维投射

本实验用微电泳方法将HRP分别导入20只大白鼠的小脑核,研究三叉神经各核至小脑核的纤维投射。结果表明,三叉神经各核均向小脑核发出纤维投射。其中以三叉神经脊束核极间亚核和吻侧亚核最多,三叉神经脊束核尾侧亚核和三叉神经感觉主核次之,三叉神经中脑核和三叉神经运动核最少。此外,在三叉神经运动核的腹外侧和三叉神经根内也有向小脑核投射的起源细胞。来自中脑核的纤维多终于顶核和间位核前部,来自脊束核和感觉主核的纤维较多地终止于间位核后部和齿状核。运动核的纤维终止于顶核、间位核前部和齿状核。起源于三叉神经运动核腹外侧,三叉神经根内细胞群的纤维,在小脑核中有和三叉神经感觉核簇相似的终止。三叉—小脑核的纤维投射是双侧性的,但以同侧为主。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内谷氨酸能,γ—氨基丁酸能和 …

三叉神经脊束核尾侧亚核浅层（Ｉ、Ⅱ层）内有较密集的谷氨酸样、γ－氨基丁酸样和甘氨酸样阳性终末。这些终末除分别来自外周初级传入或局部神经元外，还可能来自脑干的核团。为了探讨这些阳性终末的脑干起源部位，本研究用荧光金逆行追踪与免疫荧光组织化学染色相结合的双标技术对三叉尾侧亚核浅层内谷氨酸能、γ－氨基丁酸能和甘氨酸能终末在脑干的起源部位进行了追踪。结果表明：大鼠脑干向三叉尾侧亚核发出谷氨酸能、γ－氨基丁