蛇葡萄根软膏提取工艺的研究

目的研究蛇葡萄根软膏中虎杖和蛇葡萄根的提取工艺。方法以干膏收率、虎杖中大黄素含量和蛇葡萄根中没食子酸含量为指标,以乙醇浓度、乙醇用量、生药粒径及渗漉流速为考察因素,采用L9(34)正交试验法,优选乙醇渗漉提取的工艺。结果虎杖优选的提取工艺为40目生药粒径的药材,以12倍处方量90%乙醇、4mL/m in.kg流速渗漉提取;蛇葡萄根优选的提取工艺为:60目生药粒径的药材,以10倍量70%乙醇、4mL/m in.kg流速渗漉提取。结论优选得到的提取工艺稳定可行。     

蛇葡萄素的抑菌作用研究

目的 对瑶族藤茶中主要成分蛇葡萄素的体外抗菌活性进行评价。方法 以两倍稀释法测定了蛇葡萄素对五个实验菌株的抑菌效果,并与相同实验条件下盐酸黄连素的抑菌效果相比较,另外还研究了培养基pH值和菌液浓度对蛇葡萄素抑菌使用的影响。结果 蛇葡萄素对实验菌株有较好的抑菌作用,其抑菌作用较盐酸黄连素相当或略强。菌液浓度增高,其MIC和MBC随之增高,对试验菌株,酸性、碱性条件下蛇葡萄素的抑菌作用显著增强。     

蛇葡萄素药理活性研究进展

蛇葡萄素亦称二氢杨梅素,化学名3,5,7,3’,4’,5’-六羟基-2,3-双氢黄酮醇,主要存在于葡萄科蛇葡萄属的显齿蛇葡萄、粤蛇葡萄、白蔹等藤本植物中,在于北枳椇、朱砂杜鹃等植物中也有发现[1-2]。在我国西南民间,自古就有将显齿蛇葡萄或粤蛇葡萄等的茎叶炮制成类茶饮品的记载,俗称“藤茶”、“无莿根”等,多用于治疗感冒发热、皮肤疮疖及黄疸肝炎等症。近年来,随着国内外对中草药认识的不断提升及生化技术的日益进步,不少学者对蛇葡萄素的药理活性进行了深入而广泛的研究,多集中于抗炎镇痛、抗氧化、保肝护肝、抗肿瘤及降糖减脂等方面的作用。     

显齿蛇葡萄化学成分的研究

显齿蛇葡萄AmpelopsisgrossedentataW T Wang系葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物 ,为粤蛇葡萄的变种A cantoniesis (H etA )Pl var grossedentataHand Mazz [1] 。主要分布于广东、广西、云南、贵州、湖南、湖北、江西、福建等省区[1] 。其味甘、淡、性凉 ,具清热解毒、祛风湿、强筋骨等功效 ,用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、疱疔等症 ,已有数百年应用历史[2 ] 。前人已从该植物体中分离了二氢杨梅素 (ampelopsin/dihy dromyricetin)、杨梅素 (myricetin )、槲皮素(quercetin)、棕榈酸、龙涎香醇 (ambrein)、β 谷甾醇(β…     

蛇葡萄素对体外人大肠癌细胞株LoVo细胞增殖的抑制作用

目的研究蛇葡萄素对体外人大肠癌细胞株LoVo的抑制作用。方法采用体外直接给药的方法,把蛇葡萄素直接加入含有大肠癌细胞株LoVo的培养液中,通过MTT和流式细胞仪等方法,观察其对LoVo细胞增殖的抑制。结果蛇葡萄素均能抑制LoVo细胞的生长（P〈0.01）。蛇葡萄素高（160μg/ml）、中（40μg/ml）、低（20μg/ml）三个剂量组之间,高、中剂量组与低剂量组比较有统计学意义（P〈0.01）;蛇葡萄素高、中剂量组浓度之间比较,则增值抑制率无统计学意义（P〉0.05）。结论蛇葡萄素浓度在一定范围内产生最大增殖抑制率,且在此范围内,与剂量无明显量效关系。     

中药粤蛇葡萄的研究 1.质量分析和黄酮类成分的分离鉴定

从中药粤蛇葡萄的炮制品中分得两种黄酮醇类结晶成分,经光谱数据和理化性质,分别鉴定为蛇葡萄素(Ampelopsin)和杨梅素(Myricetin)并测定了生药和炮制品中宏量和微量元素的含量,研究了炮制品的质量控制指标。     

蛇葡萄素对人膀胱癌T_(24)细胞株凋亡的作用研究

目的:研究蛇葡萄素对体外人膀胱癌细胞株T24的凋亡作用。方法:以不同浓度的蛇葡萄素作用于体外培养的人膀胱癌细胞株T24应用MTT的培养检测凋亡率。结果:浓度为80μg/ml、40μg/ml的蛇葡萄素对体外人膀胱癌细胞株T24的凋亡率率明显高于浓度为20μg/ml、10μg/ml的蛇葡萄素。结论:蛇葡萄素可促进体外人膀胱癌细胞株T24凋亡,在一定范围内的浓度达到最大的凋亡率,不会因浓度增加而使凋亡率增加。浓度为80μg/ml、40μg/ml更能有效的促进人膀胱癌细胞株T24的凋亡。     

蛇葡萄素对肾癌786-O细胞增殖和凋亡的作用

目的 探讨蛇葡萄素(AMP)对人肾癌786-O细胞株增殖与凋亡的作用.方法 将不同浓度的AMP作用于体外培养的肾癌786-O细胞株,采用MTT法检测不同浓度的AMP对肾癌786-O细胞增殖的作用的影响;采用Annexin V/PI双染法检测不同浓度的AMP对肾癌786-O细胞凋亡的作用.结果 MTT结果显示AMP能显著抑制肾癌786-O细胞增殖,半数抑制浓度(IC50)为17.23 μg/mL;经不同浓度的AMP作用7h后,肾癌786-O细胞凋亡率明显增加,AMP浓度为10 μg/mL和20 μg/mL作用于肾癌786-O细胞后,细胞凋亡率升高(P＜0.05);而AMP浓度为40μg/mL和80 μg/mL作用细胞后,细胞凋亡率显著升高(P＜0.01).结论 AMP在体外能显著抑制肾癌786-O细胞增殖,且能促进肾癌786-O细胞凋亡.     

蛇葡萄素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响

目的研究蛇葡萄素对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响。方法用MTT比色法检测蛇葡萄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用,绘制量效曲线并计算IC50,流式Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果蛇葡萄素能明显抑制MCF-7细胞增殖,IC50为19.15μg/mL;蛇葡萄素对MCF-7细胞作用6 h后,细胞凋亡率显著增加,且呈量效关系。结论蛇葡萄素能显著抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

白藜芦醇对恶性黑色素瘤生长抑制作用的体外及体内研究

目的:研究白藜芦醇在体外和体内对恶性黑色素瘤的抗肿瘤效果.方法:采用MTT法测定白藜芦醇对小鼠B16及人A375细胞的增殖抑制率;用Western blot方法检测白藜芦醇对B16细胞中p-Akt蛋白表达的影响;建立B16皮下种植瘤小鼠模型,观察不同剂量的白藜芦醇对小鼠皮下瘤的生长抑制作用.结果:体外实验发现在白藜芦醇对B16及A375细胞均显示了良好的浓度依赖性;Western blot显示了不M浓度的白藜芦醇有效的抑制了p-Akt蛋白的表达,提示其抗肿瘤机制可能与此有关;体内实验证实不同浓度的白藜芦醇对恶性黑色素瘤的生长产生了明显的抑制作用.结论:体外和体内实验证实白藜芦醇有效的抑制了恶性黑色素瘤的生长,并且发现其抗肿瘤机制可能通过抑制p-Akt蛋白的表达来实现.这为白藜芦醇在恶性黑色素瘤的临床治疗的可能应用提供了实验基础,也为我国中草药的抗肿瘤效果的开发提供了具体思路.     

PPARγ激活在蛇葡萄素抑制乳腺癌细胞增殖和诱导凋亡中的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖激活物受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)的激活在蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)抑制乳腺癌细胞增殖和诱导细胞增殖凋亡中的作用.方法 以不同浓度AMP(20、40、60、80 μmol/L)分别处理人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞24 h后,荧光素酶报告基因法检测AMP对PPARγ的激活作用,CCK-8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达,Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3活性.结果 与PPARγ激动剂罗格列酮一样,AMP剂量依赖性地增强报告基因荧光素酶活性,同时显著抑制乳腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡(P＜0.05);Western blot检测结果显示,AMP在显著上调乳腺癌细胞凋亡相关蛋白Bax、PTEN、活化Caspase-3表达的同时下调Bcl4蛋白及Bcl-2/Bax比值;激酶活性检测结果显示,AMP可显著增强Caspase-3激酶活性,以上作用均可被PPARγ特异性拮抗剂GW9662显著削弱.结论 AMP可能是PPARγ的天然激动剂,其通过激活PPARγ信号途径抑制乳腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.     

小叶蛇葡萄根化学成分的研究—结晶Ⅱ的结构测定

从小叶蛇葡萄根中分离出两个同分异构体的五环三萜酸,通过理化性质和光谱分析等确定其一为齐墩果酸;另一酸之乙酰化物。进一步用X射线单晶衍射确定结构及其绝对构型。此酸为白桦脂酸,两者均首次从该植物根中分离出。     

蛇葡萄属植物有效成分对中枢神经系统的作用研究

目的:探讨蛇葡萄有效成分双氢杨梅素对中枢神经系统的影响。方法:采用戊巴比妥钠建立小白鼠催眠状态模型,观察双氢杨梅素对戊巴比妥钠催眠作用的影响,并用乙醇灌胃观察双氢杨梅素的解酒作用。结果:双氢杨梅素可显著延长戊巴比妥钠催眠作用的潜伏期,缩短戊巴比妥钠的催眠作用时间,并能明显降低乙醇所致酒醉反应。结论:双氢杨梅素可减弱戊巴比妥钠或乙醇的作用,作用机理可能与诱导肝药酶,促进戊巴比妥钠或乙醇的代谢有关。     

特异性免疫核糖核酸对内毒素诱导的实验性葡萄膜炎的抑制作用

目的：探讨特异性免疫核糖核酸（iRNA）对内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎（EIU）是否有抑制作用。方法：用大肠杆菌（E．Coli)免疫家兔后,提取特异性iRNA,将其用于大肠杆菌内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎模型,通过生化检测、细胞计数评价其对实验性葡萄膜炎的影响。结果：在内毒素注射后30min及3h,分别经腹腔注射iRNA,可以使EIU的发生推迟3h,炎症的严惩程度明显下降,尤其表现为炎症高峰期,前房内白细胞 出量下降27．62％,蛋白渗出量减少58．34％。结论：特异性iRNA对内毒素诱导的大鼠葡萄膜炎有明显的抑制作用。     

RP—HPLC法测定显齿蛇葡萄中杨梅素的含量

目的 测定显齿蛇葡萄中杨梅素的含量。方法 采用RP-HPLC法测定，色谱柱为Nova-PakC18不锈钢柱，检测波长为254nm，用甲醇-水=40：60为流动相。结果 方法的变异系数为2.763%，平均回收率为97.4%，最低检测量为15ng。湖南显齿蛇葡萄植物中不同部位的杨梅素含量为1.57%-2.17%。结论 方法简单、快速、精确，可作为显齿蛇葡萄植物质量检测方法之一。     

正交试验法优选藤茶参口含片的提取工艺

目的 优选藤茶参口含片的最佳提取工艺.方法 采用正交试验设计,以提取液中蛇葡萄素含量及浸膏得率为指标,用高效液相色谱法进行测定,优选藤茶参口含片的提取工艺.结果 最佳提提取工艺为8倍量的水浸泡1.5h,提取2次,每次1h.结论 该提取工艺稳定,安全,简便易行.