呼吸道合胞病毒感染与细胞凋亡的研究进展

呼吸道合胞病毒感染和细胞凋亡的关系是错综复杂的，既可以表现为抗凋亡作用，以利于病毒在感染细胞内复制；也可以表现为促凋亡作用，此可能是机体对病毒感染的防御反应，亦可能是病毒感染导致宿主组织细胞严重损伤的重要机制。研究呼吸道合胞病毒感染与细胞凋亡关系及凋亡的可能机制，将有助于进一步认识呼吸道合胞病毒感染发生、发展及转归机制，为RSV感染的防治提供一些新的思路。     

呼吸道合胞病毒感染与细胞凋亡的研究进展

呼吸道合胞病毒感染和细胞凋亡的关系是错综复杂的,既可以表现为抗凋亡作用,以利于病毒在感染细胞内复制;也可以表现为促凋亡作用,此可能是机体对病毒感染的防御反应,亦可能是病毒感染导致宿主组织细胞严重损伤的重要机制.研究呼吸道合胞病毒感染与细胞凋亡关系及凋亡的可能机制,将有助于进一步认识呼吸道合胞病毒感染发生、发展及转归机制,为RSV感染的防治提供一些新的思路.     

呼吸道合胞病毒感染对细胞凋亡及FasL、Fas、Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的：研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染与细胞凋亡的关系及对凋亡相关基因FasL、Fas、bcl-2和bax表达的影响。 方法： 采用A549细胞，在RSV感染后不同时点收集细胞，流式细胞仪和透射电镜检测细胞凋亡，免疫组织化学法检测凋亡相关基因FasL、Fas、Bcl-2和Bax表达情况。 结果： 流式细胞仪检测结果RSV感染后72 h（6.61%）、120 h（10.94%）的细胞凋亡指数明显高于对照组（4.32%、5.31%）；免疫组化法检测结果对照组FasL、Bax基因呈现无表达或局部弱表达；随着RSV感染时间的延长，bax、 Fas、 FasL基因的表达均高于对照细胞，bcl-2基因呈现弱表达或无表达。 结论： RSV在感染后期能诱导宿主细胞发生凋亡，促凋亡基因FasL、Fas 、Bax和抗凋亡基因Bcl-2表达水平的差异是RSV诱导凋亡的机制之一。     

呼吸道合胞病毒诱导人上皮细胞趋化因子差异表达

本研究采用分离野生型（wt）和标准株RSV感染上皮细胞，对宿主细胞mRNA差异表达进行检测，研究病毒复制与细胞趣化因子表达关系。     

呼吸道合胞病毒感染患儿的血锌及免疫功能改变

<正> 呼吸道合胞病毒(RSV)是引起婴幼儿呼吸道感染的主要病原之一。为观察血锌及T细胞亚群与RSV感染的关系,本文对42例患儿血锌、细胞及体液免疫作了检测,以了解其变化及相互关系。     

人巨细胞病毒感染诱导宿主细胞凋亡的实验研究

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)活动性感染可以通过胎盘垂直传播 ,导致流产、畸形、死胎、新生儿神经系统及其他脏器的损害 ,已成为影响胎儿及新生儿生长发育的常见病原。现已证实 ,许多病毒性疾病 (如病毒性肝炎和艾滋病等 )的发生与凋亡失常有关〔1〕 。但目前有关ＨＣＭＶ与细胞凋亡的关系报道尚少。我们采用流式细胞技术对ＨＣＭＶ感染细胞进行细胞周期和凋亡分析 ,以探讨ＨＣＭＶ对宿主细胞的影响及机理。1　材料和方法1 1　病毒和细胞　ＨＣＭＶＡＤ16 9毒株由湖北省病毒研究所提供 ,按常规方法传代 ,滴定 ,其滴度为 10 3 ＴＣＩＤ5 0 0 .1…     

人巨细胞病毒感染诱导宿主细胞凋亡的实验研究

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)活动性感染可以通过胎盘垂直传播 ,导致流产、畸形、死胎、新生儿神经系统及其他脏器的损害 ,已成为影响胎儿及新生儿生长发育的常见病原。现已证实 ,许多病毒性疾病的发生与凋亡失常有关〔1〕。我们采用流式细胞技术对ＨＣＭＶ感染细胞进行细胞周期和凋亡分析 ,以探讨ＨＣＭＶ对宿主细胞的影响及机理。1　材料和方法1 1　病毒和细胞　ＨＣＭＶＡＤ16 9毒株由湖北省病毒研究所提供 ,按常规方法传代 ,滴定 ,其滴度为 10 3ＴＣＩＤ5 0 0 .1ｍｌ;人胚肺成纤维细胞 (ＨＥＬ)由同济医科大学附属同济医院儿科病毒室提供 ,…     

γδ T细胞参与呼吸道合胞病毒感染对气道变态炎症反应的影响作用

目的 证实γδ T细胞在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)不同感染时间所致哮喘鼠不同气道炎症反应中的作用.方法 建立致敏前后不同时间感染RSV的哮喘动物模型,HE染色观察哮喘鼠肺炎症反应;real-time RT-PCR法检测γδ T细胞Th1/Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4 mRNA表达;流式细胞仪分析脾及肺组织中γδ T细胞数量;γδ T细胞过继回输进一步明确其功能.结果 致敏前感染RSV显著减轻哮喘鼠肺炎症;减少脾及肺组织细胞中γδ T细胞总数及其活化细胞数量;增加γδ T细胞IFN-γ mRNA表达;降低IL-4 mRNA表达,但致敏后感染RSV对哮喘鼠肺炎症反应及ΥδT细胞数量和生物学活性无明显影响.尾静脉回输γδ T细胞导致模型鼠肺炎症反应明显增强,提示γδ T细胞参与哮喘鼠气道炎症的发生发展.结论 致敏前RSV感染可能通过影响γδ T细胞数量及其生物学活性改变变应原诱发的气道炎症反应.     

人巨细胞病毒感染对宿主细胞凋亡影响的研究进展

人巨细胞病毒（HCMV）属B疱疹病毒亚科，在人群中普遍感染。研究表明HCMV感染导致临床病症与细胞凋亡有密切关系，HCMV感染与细胞凋亡关系具有多样性和复杂性，在不同的阶段表现为不同的作用。研究HCMV与细胞凋亡的关系不仅有助于阐明HCMV感染细胞及细胞对其反应的分子机制和研发新的抗病毒制剂，而且能为HCMV引起临床疾病的治疗提供新的方案。     

γδT细胞与呼吸道合胞病毒感染后支气管哮喘的研究进展

根据T细胞受体(TCR)不同T淋巴细胞分为αβT淋巴细胞和γδT淋巴细胞,γδT细胞在支气管哮喘的发病中起着重要作用。呼吸道合胞病毒(RSV)是一种单股负链非节段性的RNA病毒,其感染与哮喘的发病和加重存在明显的相关性。本文综述了γδT细胞与RSV感染后支气管哮喘的关系。     

人巨细胞病毒感染对宿主细胞凋亡影响的研究进展

人巨细胞病毒(HCMV)属β疱疹病毒亚科,在人群中普遍感染。研究表明HCMV感染导致临床病症与细胞凋亡有密切关系,HCMV感染与细胞凋亡关系具有多样性和复杂性,在不同的阶段表现为不同的作用。研究HCMV与细胞凋亡的关系不仅有助于阐明HCMV感染细胞及细胞对其反应的分子机制和研发新的抗病毒制剂,而且能为HCMV引起临床疾病的治疗提供新的方案。     

呼吸道合胞病毒感染细支气管炎患儿外周血树突状细胞的数量及其与临床症状的相关性

目的 检测呼吸道合胞病毒(RSV)感染细支气管炎患儿外周血髓样树突状细胞(mDC)及浆细胞样树突状细胞(pDC)的数量,并分析它们与疾病严重程度之间的关系.方法 采用PCR方法检测鼻咽部分泌物的呼吸道合胞病毒.通过流式细胞仪检测71例RSV感染(轻度、中度和重度)细支气管炎患儿及48例正常婴幼儿外周血mDC及pDC的数量.结果 RSV感染细支气管炎患儿外周血mDC数量明显高于正常婴幼儿(P＜0.01),pDC数量明显低于正常婴幼儿(P＜0.01).重度RSV感染细支气管炎患儿入院时外周血mDC、pDC数量均明显低于轻度组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 RSV感染细支气管炎患儿早期外周血mDC明显升高、pDC降低.mDC数量越高,提示其病情越轻;pDC数量越低,提示喘息越重.     

人截短型凋亡诱导因子的表达对HeLa细胞的促凋亡作用

目的：观察人截短型AIF基因的表达对HeLa细胞的促凋亡作用。方法：用RT-PCR法分段克隆全长人AIF基因，经改造截去其N-端线粒体定位信号及部分Spacer区域（1-120位氨基酸）的编码序列，从而获得人截短型AIF（AIF△1-120）基因。将其克隆入pIRES2-EGFP绿色荧光蛋白（EGFP）共表达载体，用脂质体法转染HeLa细胞，通过荧光显微镜观察。免疫组织化学检测，间接免疫荧光检测，电镜观察等方法。检测目的基因在转染细胞中的表达，以及对转染细胞的形态及生长状况的影响。结果：成功地构建了人截短型AIF（AIF△1-120)基因的真核表达载体。转染HeLa细胞后，可检测到人截短型AIF分子的表达，随着转染后时间的延长，可观察到表达人截短型AIF分子的HeLa细胞呈现典型的凋亡特征。结论：人截短型AIF基因的表达可诱导HeLa细胞凋亡。     

呼吸道合胞病毒下呼吸道感染对机体细胞免疫的影响

为研究呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）急性下呼吸道感染（ＡＬＲＩ）的细胞免疫变化，对２５例病儿外周血白细胞介素２（ＩＬ－２）和可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平、Ｔ细胞白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达率和Ｔ细胞亚群百分率进行检测。结果显示，急性期病儿外周血ＩＬ－２水平明显低于恢复期和正常对照组，Ｔ细胞ＩＬ－２Ｒ表达率亦明显降低，而ｓＩＬ－２Ｒ水平却显著增高。急性期病儿ＩＬ－２水平与Ｔ细胞ＩＬ－２Ｒ表达率和ＣＤ＋４细胞百分率呈正相关，与ｓＩＬ－２Ｒ水平和ＣＤ＋８细胞百分率呈负相关；ｓＩＬ－２Ｒ水平与Ｔ细胞ＩＬ－２Ｒ表达率呈负相关，与临床严重程度呈正相关。上述各项免疫指标异常均提示ＲＳＶ感染时机体存在细胞免疫功能紊乱。     

CpG ODN佐剂对呼吸道合胞病毒重组疫苗诱导的细胞免疫应答的作用

目的:研究CpG2216佐剂对呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白疫苗诱导的细胞免疫应答的作用。方法:重组RSV疫苗G1F/M2与CpG2216佐剂混合,或与CpG2216及常规佐剂Al(OH)3混合,鼻腔(i.n.)或腹腔注射(i.p.)免疫BALB/c小鼠三次,最后一次免疫后2周杀小鼠,取脾细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测脾细胞特异性杀伤活性;用ELISPOT法检测分泌IFNγ-和IL-4的细胞;用流式细胞仪检测CD4+/CD8+效应及LDH记忆细胞。结果:与G1F/M2相比,CpG+G1F/M2鼻腔或腹腔注射免疫均诱导了显著的杀伤活性;而且G1F/M2+Al+CpG(i.p.)诱导的杀伤活性显著高于CpG+G1F/M2(i.p.)。ELISPOT结果显示:CpG+G1F/M2鼻腔免疫和腹腔注射免疫组的分泌IFNγ-和IL-4的淋巴细胞数量明显多于G1F/M2组;CpG+Al+G1F/M2(i.p.)组的细胞数显著多于CpG+G1F/M2(i.p.)组;且各组分泌IFNγ-的淋巴细胞数显著多于分泌IL-4的淋巴细胞,即均诱导了Th1型优势应答,有利于宿主抗病毒。流式细胞仪检测结果表明:CpG+G1F/M2(i.n.)仅诱导CD44+单阳性的细胞,而CpG+G1F/M2(i.p.)和CpG+Al+G1F/M2(i.p.)既诱导产生了CD44+单阳性细胞,也产生了CD44+CD62L+双阳性的记忆细胞。结论:CpG2216作为RSV重组疫苗G1F/M2的佐剂,可显著增强细胞免疫应答。     

喜炎平治疗儿童呼吸道合胞病毒肺炎的临床疗效及对血清炎性因子的影响

目的探讨喜炎平治疗儿童呼吸道合胞病毒肺炎的临床效果和安全性,以及喜炎平对血清炎性因子的影响。方法选择呼吸道合胞病毒肺炎患儿60例,随机分至喜炎平治疗组和利巴韦林治疗组,每组各30例。喜炎平治疗组在常规治疗基础上加用喜炎平,利巴韦林治疗组在常规治疗基础上加上利巴韦林,比较两组患儿临床症状及血清炎性因子（IL-6、IL-8及TNF-α）水平变化。结果喜炎平治疗组患儿发热、咳嗽、鼻塞、流涕、肺部啰音和X线胸片病灶消失时间、住院时间均短于利巴韦林治疗组患儿,差异有统计学意义（P〈0．05）。喜炎平治疗组的临床治疗效果明显优于利巴韦林治疗组,差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗7d后,两组血清炎性因子（IL-6、IL-8及TNF-α）水平较入院时均下降（P〈0．05）,但是喜炎平组治疗后的血清炎性因子水平较利巴韦林组更低（P〈0．05）。两组患儿治疗期间均未发生严重不良反应。结论与利巴韦林相比,喜炎平治疗儿童呼吸道合胞病毒肺炎的效果更佳。     

呼吸道合胞病毒感染患儿免疫功能变化及PBL体外表达IL—2R的…

探讨７２例确诊呼吸道合胞病毒特异性血清抗体及鼻咽分泌微生物 脱落细胞中ＲＳＶ抗原阳性患儿急性期及恢复期Ｔ淋巴细胞亚群，血清ＩｇＧ，ＩｇＭ，Ｉｇ及ＩＬ－２Ｒ的活性表达，动态观察了呼吸道合胞病毒感染患儿急发型型，恢复期和正常对照组外周血淋巴细胞以ＰＨＡ刺激后，于不同时间细胞膜上ＩＬ－２Ｒ的活性表达。     

地塞米松对呼吸道合胞病毒感染哮喘加重小鼠气道TSLP分泌及炎症的影响

目的:探讨地塞米松(DEX)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)分泌及气道炎症的影响。方法:雌性BALB/c小鼠32只,随机分成4组,分别为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、鸡卵白蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/DEX组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘,地塞米松1mg/kg肌肉注射;无创肺功能检测各组小鼠气道反应性;ELISA法检测小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFNγ-和气管灌洗液(BALF)TSLP含量;小鼠肺组织病理观察炎症反应,免疫组化观察小鼠气道上皮细胞TSLP表达水平。结果:无创肺功能检测显示地塞米松抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道反应性的增高,OVA/RSV/DEX组小鼠Penh值明显低于OVA/RSV组(P<0.01);OVA/RSV/DEX组小鼠血清IL-4、IL-5、IL-13、IFNγ-浓度[分别为(86.78±27.04)、(227.66±40.87)、(194.65±73.27)和(17.33±3.06)pg/ml]和BALF中TSLP浓度[(1 873±10)pg/ml],均明显低于OVA/RSV组[分别为(274.2±103.7)、(293.3±46.1)、(330±93.5)、(30.1±5.7)、(2 127±46)pg/ml](P<0.01);病理观察显示地塞米松显著减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症细胞浸润;免疫组化染色证实地塞米松抑制RSV感染哮喘小鼠气道上皮细胞TSLP表达。结论:地塞米松可以抑制RSV感染哮喘加重小鼠气道上皮细胞表达TSLP,减轻RSV感染哮喘加重小鼠气道炎症反应。     

呼吸道合胞病毒感染对豚鼠肺组织β、M受体的影响

目的 研究呼吸道合胞病毒（RSV）感染豚鼠后肺组织β肾上腺素能受体（β受体）和M胆碱能受体（M受体）的变化。方法 应用放射性配基结合分析法，测定病毒接种组和对照组豚鼠肺组织β、M受体密度和亲和力的变化。结果 ①RSV接种后豚鼠肺组织均出现毛细支气管炎、肺炎的病理改变。②β受体最大结合容量（Bmax）在RSV接种后无明显改变。β受体平衡解离常数（Kd）在RSV接种后3d增高，5～7d达高峰，以后逐渐下降，接种后14、21 d与对照组比较差异无统计学意义。③高亲和力M受体亚型的Bmax和Kd值在感染前后无明显变化。低亲和力M受体亚型在RSV接种后3d出现Bmax增高，Kd值降低，5—7d达高峰，第21天与对照组差异有统计学意义。结论RSV感染可使β受体亲和力下降，低亲和力M受体密度增加、亲和力上升，两种受体系统之间的平衡失调是引起气道高反应性的机制之一。     

呼吸道合胞病毒感染对豚鼠β肾上腺素能受体的影响

目的:研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染豚鼠后不同时期, 豚鼠肺组织肾β上腺素能受体数量及亲和力的变化。方法:病毒接种组与对照组分别于接种后不同时间进行肺组织光镜、电镜检查, 并用放射性配基结合分析法测定肺组织β受体的变化。结果:(1)RSV接种后5-7 d, 豚鼠肺组织均出现毛细支气管炎、肺炎的病理改变, 14d基本恢复正常。(2)病毒接种组受体平衡解离常数(Kd)在RSV接种后3 d高于对照组(P<0.01), 5-7 d达高峰(P<0.01), 以后逐渐下降, 接种后14、21 d与对照组无显著差异(P>0.05)。受体最大结合容量(Bmax)在RSV接种后无明显改变。结论:(1)豚鼠鼻腔接种RSV病毒悬液可以建立毛细支气管炎、肺炎的动物模型。(2)受体亲和力下降是RSV感染引起气道高反应性及喘息性疾病的机制之一。