阴沟肠杆菌高产AmpC酶和ESBLs的检测及其耐药性研究

目的:了解本地区阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行状况及其耐药性。方法:收集154株临床分离无重复阴沟肠杆菌,通过改良三维实验检测阴沟肠杆菌高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:在154株菌中,18.83%的菌株单产ESBLs,22.73%的菌株单产AmpC酶,5.19%的菌株同时产AmpC酶和ESBLs,53.25%的菌株AmpC酶和ESBLs均不产生。产不同类型β-内酰胺酶其耐药性有所不同。结论:本地区阴沟肠杆菌产AmpC酶和ESBLs的流行处于一个相对较高的水平。高产AmpC酶菌株对一、二、三代头孢菌素、头孢西丁、酶抑制剂复合制剂等高度耐药,对头孢吡肟敏感,而产ESBLs菌株对三代头孢菌素、头孢吡肟均不同程度耐药,而对各种酶抑制剂复合制剂保持较高的敏感性,因此,产Ampc酶及ES-BLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶在阴沟肠杆菌中的表达及对其耐药性的影响

目的：研究AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBL）在阴沟肠杆菌中的流行情况及对其耐药性的影响。方法：琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）,三维试验、等电聚焦电泳、接合试验及聚合酶链反应分析耐药菌的产酶情况。结果：106株阴沟肠杆菌中,单纯高产AmpC酶者、单纯产ESBL者、高产AmpC酶并产ESBL者分别占16.0％、10.4％、13.2％。CTX-M型和SHV型ESBL的检出率分别为17.0％（18/106）和6.6％（7/106）。碳青霉烯类抗生素对阴沟肠杆菌均有很好的抗菌活性(MIC90≤2цg/ml)。单纯高产AmpC酶菌对头孢吡肟、阿米卡星、庆大霉素和环丙沙星的敏感率均超过70％;单纯产ESBL菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星和阿米卡星的敏感率均超过60％;高产AmpC酶并产ESBL菌对除碳青霉烯类外的其他抗生素的敏感率均低于25％。结论：CTX-M型ESBL已经在阴沟肠杆菌中流行。产ESBL和高产AmpC酶同样是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的重要原因。ESBL在高产AmpC酶菌株中的流行增强了此类菌株的耐药性。     

产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性研究

目的：探究产AmpC酶和ESBLs阴沟肠杆菌的临床分布与耐药性。方法：选择感染患者150例分离阴沟肠杆菌150株（同患者均提取单菌株）,采取改良式三维试验方法和K-B方法,分析AmpC酶及ESBLs的检测的临床分布和药物的敏感性情况。结果：阴沟肠杆菌产ESBLs的检出41株（27.33%）,阴沟肠杆菌产AmpC酶检出16株（10.67%）,AmpC酶及ESBLs同时不产的检出77株（51.33%）,AmpC酶及ESBLs同时产检出16株（10.67%）;亚胺培南的敏感性最高,其耐药率为0%~6.3%。结论：临床需要合理应用相关抗菌药物,并要重视阴沟肠杆菌耐性监测。     

产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、沙雷菌AmpC酶检测及耐药性分析

目的：通过检测阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、沙雷菌去阻遏持续高产AmpC酶和超广谱β－内酰胺酶（ESBL）及其耐药性分析，揭示其主要耐药机制，指导临床合理用药。方法：采用改良的酶提取物三维试验法，在常规NCCLS纸片扩散法基础上接种大肠杆菌ATCC25992，在头孢西丁和头孢曲松药敏纸片周围放射性切出琼脂小槽，待测菌的粗酶提取物在槽内扩散，分别进行AmpC和ESBL测定。结果：阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、沙雷菌AmpC酶检出率分别为21．4％、0％、45．5％；AmpC酶＋ESBL分别是10．7％、0％、45．5％。它们对青霉素类、一、二、三代头孢菌素类、头霉素类、单环β－内酰胺类、氟喹诺酮类、磺胺类及一些酶抑制剂复合抗生素耐药率60％－90％不等。哌拉西林／他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟耐药率小于50％。亚胺培南未检出耐药菌株。结论：AmpC酶及AmpC酶＋ESBL的检出以沙雷菌最高、阴沟肠杆菌次之、产气肠杆菌未检出；临床经验用药可选用碳青霉烯类如亚胺培南四代头孢菌素如头孢吡肟、复合抗生素如哌拉西林／他唑巴坦。     

表型筛选方法检测阴沟肠杆菌AmpC酶

目的建立一种新的简便易行的Ampc酶的表型筛选方法并对其进行评价。方法采用表型筛选和三维试验对144株阴沟肠杆菌进行AmpC酶检测，对检测结果进行比较。结果144株阴沟肠杆菌表型筛选结果显示，高产AmpC酶的菌株共35株，占24．31％(35／144)；表型筛选与三维试验相比总符合率为89．58％(129／144)。结论表型筛选法检测AmpC酶方法简便，结果可靠，易于在临床实验室中推广应用。     

产AmpC酶的阴沟肠杆菌检测及其基因分析研究（摘要）

目的了解昆明地区阴沟肠杆菌的耐药现状及高产AmpC酶的表达对阴沟肠杆菌耐药性的影响．探讨昆明地区阴沟肠杆菌的耐药性与AmpC酶基因的关系．方法运用K—B法（纸片扩散）分析临床分离阴沟肠杆菌的耐药情况；采用头孢西丁三维试验、五种纸片表型筛选试验、氟氯西林双抑制剂扩散协同试验检测高产AmpC酶的表型表达；并通过聚合酶链反应（PCR）法检测结构基因ampC和调节基因ampD，对部分耐药菌株行DNA测序检测基因突变．[第一段]     

ampD-ampR调节基因与阴沟肠杆菌AmpC酶表达关系的研究

为了解ampD ampR调节基因与阴沟肠杆菌AmpC酶表达的关系 ,对 58株阴沟肠杆菌采用表型筛选法初筛 ,PCR法扩增AmpC酶的调节基因ampD和ampR ,并对部分PCR产物进行克隆测序。表型筛选结果显示 :去阻遏高产突变株为 50株 ,高度诱导产酶株为 3株。PCR法扩增目的基因片段显示 ,4 9株携带ampD基因 ,51株携带ampR基因。对其中 15株细菌的ampD基因和ampR基因进行克隆测序 ,发现 3株高度诱导型中 2株ampD基因存在 95位氨基酸的突变位点 ,而ampR基因未发现突变位点 ;12株去阻遏高产型中 ,8株ampD基因存在羧基端可疑的突变位点 ,5株ampR基因存在可疑的突变位点。结果提示 :ampD蛋白羧基端的氨基酸缺失或替代可能与AmpC酶的去阻遏表达有关 ,ampR基因的突变位点可能影响AmpC酶的去阻遏表达     

阴沟肠杆菌质粒介导DHA-1型AmpC酶基因的研究

目的:研究阴沟肠杆菌质粒介导DHA-1型AmpC酶及其基因类型.方法:利用3-氨基苯酚硼酸对AmpC酶的抑制作用检测阴沟肠杆菌的AmpC酶,通过接合实验分析质粒携带ampC基因的转移,用多重PCR及DNA测序技术测定AmpC酶基因,将序列测定结果用EMBOSS软件进行分析.结果:对头孢西丁和头孢噻肟不敏感的59株临床分离的阴沟肠杆菌中,AmpC酶阳性53株,接合实验成功3株,进一步用PCR及DNA测序技术测出此3株阴沟肠杆菌及其接合子细菌的质粒ampC基因类型为DHA-1型.结论:从我院患者送检标本分离的阴沟肠杆菌中检测到AmpC酶,并成功获得3株接合子细菌,从接合子细菌的质粒中检测到DHA-1型ampC基因.     

产AmpC酶及或产超广谱β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌的检测及耐药性研究

目的 了解阴沟肠杆菌产AmpC酶或同时产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床现状,检测阴沟肠杆菌对常用13种抗生素的耐药性,以指导临床合理选择抗生素.方法 采用三维实验确证产AmpC酶和产ESBLs菌株;用纸片扩散法进行耐药性检测.结果 分离出阴沟肠杆菌120株,AmpC酶菌株检出率为20.0%(24/120),ESBLs菌株检出率为25.0%(30/120),同时产AmpC酶和ESBLs即SSBL检出率为12.5%(15/120).阴沟肠杆菌SSBL菌株对左氧氟沙星、头孢吡肟和氨曲南的耐药率高于单产AmpC酶的菌株,差异具有统计学意义(P<0.05);SSBL菌株对亚胺培南、头孢西丁、环丙沙星的耐药率高于ESBLs菌株,差异有统计学意义(P<0.05);SSBL菌株对亚胺培南、头孢吡肟、头孢曲松、环丙沙星的耐药率高于不产AmpC酶及ESBLs即SSBL阴性的菌株,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 AmpC酶和ESBLs是导致阴沟肠杆菌对第3代头孢菌素耐药的重要原因,SSBL菌株的流行增强了此类菌株的耐药性,治疗阴沟肠杆菌感染时应以耐药检测结果为依据,可根据药敏结果考虑选用碳青酶烯类、喹诺酮类抗生素.     

阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的调查近年来阴沟肠杆菌耐药性的变化情况.方法对有关阴沟肠杆菌耐药性的文献进行复习分析.结果临床阴沟肠杆菌肺部检出率最高,其耐药性非常严重.结论临床医生应严格按药敏试验结果合理使用抗生素,以提高阴沟肠杆菌感染治愈率及延缓耐药性的发展.     

78株阴沟肠杆菌耐药性分析

阴沟肠杆菌(E.cloacae)是肠杆菌科中的常见细菌,也是一种重要的条件致病菌.近年来,随着抗菌药物的广泛应用,阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率逐年上升,多重耐药菌株不断增加,给临床治疗带来极大困难,其耐药性问题越来越引起临床的重视.为了解其耐药状况,并为临床选用抗菌药物提供及时有效的实验室依据,本文对近3年本院分离的78株阴沟肠杆菌的耐药性进行了分析.     

147株阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定

目的 检测147株阴沟肠杆菌AmpC酶及ESBLs的表型测定,了解阴沟肠杆菌的耐药机制,以利于耐药性的控制与指导临床用药.方法 收集2004年1月至2006年6月广东省中医院的阴沟肠杆菌147株,用三维试验检测ESBLs 与AmpC酶.结果 147株阴沟肠杆菌中,产ESBLs 104株,占70.7%,产AmpC酶有36株,占24.5%,同时产2种酶的有3株,占2%,2种酶均不产的有4株,占2.7%.体外抗生素敏感试验显示,亚胺培南、头孢替坦、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为2.0%,61.2%,65.3%和89.1%,氨苄西林耐药率达到100%.结论 产ESBLs和AmpC酶是阴沟肠杆菌耐药的主要机制,阴沟肠杆菌主要产ESBLs,药物敏感试验表明亚胺培南敏感率最高(98.0%),头孢替坦次之(32.7%),而对其他抗菌药物敏感率较低.     

我院感染高产AmpC酶阴沟肠杆菌的调查

由于抗菌药物的广泛应用,细菌的耐药性不断增高,革兰阴性杆菌除了产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)外,AmpC酶的产生已逐渐引起临床医师的关注.特别是三代头孢菌素的应用和其对阴沟肠杆菌的选择作用,使阴沟肠杆菌迅速成为严重医院感染越来越重要的病原菌,现将我院感染阴沟肠杆菌的情况作如下总结.     

由阴沟肠杆菌引起的感染分布及其耐药性变迁

目的：探讨由阴沟肠杆菌引起感染的临床分布、阴沟肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶的携带率以及其耐药性变迁的趋势，为临床合理使用抗生素、有效控制感染提供流行病学依据。方法：采用全自动微生物分析仪Vitek—60进行细菌的鉴定，用K—B琼脂扩散法进行菌株的耐药性检测，并分别用纸片扩散法和表型筛选法检测其超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶。结果：本地区由阴沟肠杆菌引起的感染呈逐年递增趋势，感染的人群以中老年为主，感染部位主要见于呼吸道、伤口及泌尿道等。阴沟肠杆菌ESBLs的携带率由2000年的6．9％上升至2002年的10．8％，AmpC酶的携带率由2000年的25％上升至35％。药敏试验提示亚胺培南有较强的敏感性94％，依次为头孢吡肟65％、舒普深70．5％、丁胺卡那、喹诺酮类存在着交叉耐药。其他抗生素的耐药性均有不同程度的上升，其中头孢噻肟较为明显。结论：本地区存在高产AmpC酶的阴沟肠杆菌的流行；亚胺培南是治疗由阴沟肠杆菌引起的临床感染的首选药物，加强阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶ESBLs和AmpC酶的耐药性检测，对临床合理选择抗生素及控制耐药菌株的播散和流行，具有重要的指导意义。     

阴沟肠杆菌Amp C酶的诱导性及对酶抑制剂的敏感性研究

目的 探讨阴沟肠杆菌Amp C酶的特性及对酶抑制剂的敏感性,方法 用琼脂稀释法研究第四代头孢菌素头孢吡肟,第三代头孢菌素头孢他啶,头孢噻肟与β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦联合对10株头孢他啶耐药菌的体外抗菌活性。应用紫外法和反转录多聚酶链反应（RT－PCR）研究临床常用β-内酰胺类抗生素对AmpC酶的诱导作用以及3种抑制剂对Amp C酶的抑制作用。结果 舒巴坦不能增强头孢他啶的抗菌作用,第四代头也菌素头孢吡肟对头孢他啶耐药菌有较好的抗菌活性。亚胺培南对Amp C酶的诱导作用较强,酶抑制剂R0481220具有较好的抑制作用,结论 产Amp C酶的阴沟肠杆菌引起的感染可考虑选用第四代头孢菌素头孢吡肟进行治疗。     

阴沟肠杆菌耐药性观察

目的：监测阴沟肠杆菌的耐药性，探讨其变化规律，为有效控制感染和临床治疗提供依据。方法：对2001至2004年本院分离的革兰阴性杆菌使用VITEK2系统鉴定菌种，并用K-B纸片扩散法及微量肉汤稀释法（VITEK2系统测MIC）检测阴沟肠杆菌的体外耐药情况。结果：4年间阴沟肠杆菌的耐药率明显增高，头孢哌酮／舒巴坦、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟等耐药率均有不同程度增高。到2004年底，亚胺培南仍保持着对阴沟肠杆菌的100％敏感率。结论：阴沟肠杆菌耐药现象日趋严重，须引起高度重视。     

阴沟肠杆菌耐药性及其感染多重耐药阴沟肠杆菌危险因素的分析

目的 探讨阴沟肠杆菌的耐药性及感染多重耐药阴沟肠杆菌的危险因素。方法 采用全自动微生物分析仪测定192株非重复阴沟肠杆菌的药物敏感性。运用多因素logistic回归分析多重耐药阴沟肠杆菌感染的危险因素。结果多重耐药阴沟肠杆菌和耐药阴沟肠杆菌的构成比分别为34.4%(66株)和65.6%(126株)。头孢他啶、左氧氟沙星、复方新诺明、阿米卡星、四环素、氯霉素、多粘菌素在多重耐药阴沟肠杆菌组中的耐药率均明显高于耐药阴沟肠杆菌组（均P<0.05或0.01）。logistic回归分析显示,入院APACHEⅡ评分≥20分、入住ICU≥7 d、使用抗生素≥7 d、侵入性操作的P值均<0.01。结论 阴沟肠杆菌的耐药形势严峻,多重耐药阴沟肠杆菌更是不容乐观。入院APACHEⅡ评分≥20分、入住ICU≥7 d、使用抗生素≥7 d、侵入性操作是多重耐药阴沟肠杆菌的独立危险因素。     

阴沟肠杆菌感染的临床特点及耐药性分析

[目的]探讨2004-2008年我院分离的阴沟肠杆菌的耐药性及临床感染特点.[方法]采用K-B法进行了16种常用抗生素的药敏试验,用头孢西丁三维试验,头孢曲松三维试验及其酶抑制试验进行了AmpC酶及其ESBL的检测.[结果]阴沟杆菌在我院的感染以呼吸道为主,占63.1%;科室分布以脑外科（50.6%）为主,骨科（20.0%）次之.2004-2008年的药敏结果显示,以亚胺培南耐药率最低,其次是头孢哌酮,舒巴坦和哌拉西林,他唑巴坦,新型喹诺酮类药物加替沙星、左氧沙星也有较好的抗菌活性,但耐药率在逐年上升.三代、四代头孢菌素对阴沟肠杆菌的耐药率也在逐年升高,2008年均超50%.ESBL从2004年的17.8%（7/41）上升至2006年的26.1%,AmpC酶由2004年的20.0%上升至2008年的32.3%,逐年上升.[结论]为控制耐药菌株的扩散和流行,应加强细菌的检测,重视药敏结果,合理使用抗生素,做好细菌的耐药性监测.     

烧伤病房阴沟肠杆菌耐药性研究

目的探讨烧伤病房阴沟肠杆菌的耐药性。方法对我院2001年1月至2004年12月烧伤病房产阴沟肠杆菌的耐药性进行分析。结果57株阴沟肠杆菌对临床常用抗生素耐药性均不同程度增加，只对亚胺培南敏感。结论阴沟肠杆菌同样为烧伤病房常见的院内感染细菌之一，其耐药性不容乐观。临床应根据药敏试验选用抗菌药物，控制院内感染。     

医院感染阴沟肠杆菌产金属酶及耐药性分析

目的:了解临床分离的阴沟肠杆菌的耐药性及产金属β内酰胺酶的基因分布状况。方法:临床分离的40株阴沟肠杆菌用法国梅里埃公司的V ITEK-2全自动微生物分析系统鉴定,K-B法进行抗生素敏感试验,采用纸片协同法检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,并对PCR产物进行电泳后纯化,测序比对确定基因型。结果:阴沟肠杆菌对头孢他啶、头孢西丁、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率分别为52.5%、92.5%、7.5%、5.5%、65.0%、12.5%、85.0%。其中40株阴沟肠杆菌中产金属酶的3株,3株菌中有2株扩增出金属酶IMP基因。结论:院内感染标本分离的阴沟肠杆菌对临床常用的多种抗生素耐药,由于金属酶菌株的存在,阴沟肠杆菌对亚胺培南等碳青霉烯类药物的耐药性增加。