中国新疆维吾尔族Rh血型系统RHCE基因分型的研究

本研究目的旨在探讨新疆维吾尔族RHCE基因分型特点。根据文献设计RHCE基因检测的引物,采用序列特异性引物-聚合酶链反应(SSP-PCR)检测非血缘关系RhD阴性样本维吾尔族89例、汉族233例及RhD阳性样本汉族109例。结果表明,维吾尔族及汉族无论RhD阴性或RhD阳性全部样本中RHE/e基因分型结果与血清学检测结果一致;89例维吾尔族RhD阴性样本RHC/c等位基因分型结果与其血清学检测结果一致,而233例汉族RhD阴性及109例汉族RhD阳性样本中RHC/c基因错误定型率为5.05%。结论:本研究方法适合用于维吾尔族RHE/e基因分型,在本研究中用于维吾尔族RHC/c基因分型中未发现有错误,但今后仍需进一步验证。     

中国江苏地区汉族RhD阴性个体RHCE基因型多样性研究

本研究探究中国江苏地区血清学RhD阴性献血者中,含有RHD基因的献血者和不合RHD基因献血者中的RHCE基因型.采用聚合酶链式反应-序列特异性引物（PCR-SSP）方法分析337例血清学RhD阴性无偿献血者的RHCE基因型;同时采用PCR-SSP扩增这些献血者RHD基因特异性位点.结果表明：337例血清学RhD阴性,其中RHD基因阳性献血者RHCE＊ C/C 20例,RHCE＊ C/c 62例,RHCE＊ c/c 24例,RHCE＊C及RHCE＊c基因频率分别为0.4811和0.5189;RHCE＊ E/E 0例,RHCE＊ E/e 25例,RHCE＊ e/e 81例,RHCE＊E及RHCE＊e基因频率分别为0.1179和0.8821.231例RHD基因阴性献血者中RHCE＊ C/C 3例,RHCE＊ C/c 34例,RHCE＊ c/c 194例,RHCE＊C及RHCE＊c基因频率分别为0.0866,0.9134;RHCE＊ E/E 0例;RHCE＊ E/e 15例;RHCE＊ e/e 216例;RHCE＊E及RHCE＊e基因频率分别为0.0325,0.9675.结论：在中国江苏地区RHD基因阴性人群中,RHCE基因主要以RHCE＊ ccee为主.中国江苏地区血清学RhD阴性的献血者中,RHCE基因型在含有RHD基因组和不合脚基因组存在统计学差异.     

中国汉族人群RHCE和RHD基因结构研究

目的 研究中国汉族RhD(-)个体Rh血型系统RHCE基因4种外显子和RHD基因8种外显子的构成情况。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对80名汉族RhD(-)个体的RHD基因及RHCE基因进行研究。扩增RHD基因的第2、3、4、5、6、7、9、10外显子和内含子4以及RHCE基因的第1、2、4、5外显子和内含子4。结果 80名RhD(-)供者的Rh表型为ccdee38人,ccdee34人,ccdEe4人,ccdEe4人。在表型为ccdee和ccdEe的42人中,D基因8种外显子全部缺失。在表型为ccdee和ccdEe的38人中,RHD基因则表现出多态性,16人存在全部D基因8种外显子,11人缺失全部D基因8种外显子,8人存在D基因第2外显子,3人存在D基因第2、10外显子。结论 中国汉族RhD(-)个体D基因外显子具有多态性。Rh表型为cc的个体D基因8种外显子全部缺失,在表型为cc的个体中观察到4种D基因多态性。中国汉族人群D基因结构不同于高加索人种,故应用RHD基因定型时,临床医生应慎重对待。     

Rh基因结构之谜

在目前正式命名的２３个人类红细胞血型中，最复杂的当属Ｒｈ血型。不仅因为它含有４０余种变异体，而且对其认识充满争议。虽然Ｒｈ基因已被克隆，但人们似乎还远未揭开它的神秘面纱。１９３９年Ｌｅｖｉｎｅ等人在一名ＡＢＯ同型输血而产生溶血性输血反应的产妇中，发现...     

RHCE(1)-D(2)-CE(3-10)基因引起RhD--表型1例

<正>Rh血型系统是人类红细胞抗原中最复杂的血型系统,其在临床输血中的重要性仅次于ABO血型。Rh抗原缺失是非常罕见的,目前报道的有D--、Dc-、DCw-[1,2,3]等,其分子基础也不尽相同,包括基因删除、基因突变等。本实验室收到一份疑难配血样本,患者的RhCE抗原缺失,为D--表型,血清中含有针对高频抗原的抗体。本文对患者及其家系的Rh系统表型和基因型进行了分析研究。并通过中国     

河南省部分RhD（—）献血者RHD基因对C基因表达影响的观察

Rh血型系统是一个复杂的血型系统 ,其重要性仅次于ABO血型。由于 Rh D抗原的免疫原性强 ,非同型的输血可引起严重的溶血性输血反应 ,Rh血型系统 D抗原母婴血型不合可引起严重的新生儿溶血病 (HDN) [1 ] 。近年来 Rh血型的研究倍受人们关注 ,《中国输血技术操作规范》也明确规定 :输血前要进行 Rh血型 D抗原检测 [2 ]。Rh血型系统主要有 D、C、E、c、e五个抗原组成 ,由位于 1号染色体短臂上的 RHD基因和 CE基因控制[3] ,研究发现 RHD基因存在多态性 ,不同人种的多态性存在差异 [4 ] ,作者采用 PCR- SSP方法对河南部分 Rh D(- )…     

河北省汉族RhD阴性献血者RHD基因结构研究

目的 研究河北地区RhD阴性汉族献血者RHD基因外显子构成情况.方法 应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法检测100例常规血清学RhD阴性样本D基因的10个外显子.结果100例RhD阴性样本中63例D基因外显子全部缺失,20例样本D基因外显子全部存在,17例样本中D基因外显子部分存在;21例Del型中有19例RHD基因外显子全部存在.结论 河北地区RhD阴性汉族献血者中D基因存在着全部缺失、无缺失和部分缺失这3种多态性.     

6例Rho（D）阴性的家系调查结果分析

笔者对无锡市 3495 1人Ｒｈｏ(Ｄ)抗原进行调查 ,并对 2例Ｒｈｏ(Ｄ)阴性供血者 ,4例Ｒｈｏ阴性孕妇的家系进行了调查 ,调查中发现 1例供血者血型为Ｏ ,ｃｃｄｅｅ,妻子为Ａ ,ＣＣＤＥｅ ,女儿Ｒｈ血型为弱Ｄ(Ａ ,ＣｃＤｕｅｅ) ,其余 5例Ｒｈｏ(Ｄ)阴性者的父母Ｒｈｏ(Ｄ)表现型均为Ｄ阳性。现报告如下 :1　材料与方法1 1　调查对象　无锡市健康供血者 3172 1人 ,孕妇 3 2 30人 ,共计 3495 1人。1 2　方法及试剂　抗 Ｄ采用盐水法 ,如盐水抗 Ｄ阴性者 ,再用另一厂家盐水抗 Ｄ和抗球蛋白试验进行确证。抗 Ｃ、ｃ、Ｅ、ｅ采用抗球蛋白法。…     

RhD基因检测方法在Rh阴性血型基因鉴定中的应用

目的：探讨RhD基因检测方法在中国汉族人Rh阴血型鉴定中的应用价值。方法：对于68例各种表型的Rh阴性中国汉族样本,用扩增RhD基因外显子3,4,5,7,10的5种方法,检测RhD基因的存在与否。结果：68例样本,总阴性率为52．95,其中29例含有C抗原的Rh阴样性本,5种方法鉴定皆为阴性的仅有1例（3．4％）,而表型为C阴性的38例样本,34例（89．5％）为阴性。结论：以检测RhD基因存在与否为基础的Rh阴性血型基因鉴定方法,不适用于C抗原阳性的中国汉族Rh阴性血型基因鉴定,仅有扩增RhD外子3,4,10的方法,适用于含C抗原的Rh阴性血型的基因鉴定。     

Rh复合体的结构与功能

Rh血型系统发现距今已有60多年,在临床输血医学中是一个复杂且具有多型性的血型系统,由两个同源性很高的RHD和RHCE基因编码的具有12次跨膜的RhD和RhCE蛋白,RHAG基因编码Rh有关糖蛋白RhAG,这些蛋白和其他膜蛋白(LW,IAP,GPB,Duffy,带3)在红细胞膜上形成一个核心复合物,参与氨的转运.在临床输血中,Rh血型系统可引起胎儿和新生溶血病(HDN)和输血反应.RH基因遗传背景存在种族差异,同时也存在多种类型的RhD变异体,现将Rh血型系统的分子遗传情况及其在临床的应用综合如下.     

云南红河哈尼族ABO、Rh血型分布规律及基因频率调查

目的了解云南红河哈尼族无偿献血人群ABO及Rh血型分布规律以及基因频率。方法采用血站ABO血型正反2次定型及Rh(D)筛查及鉴定程序,对云南红河哈尼族6 817例无偿献血人群进行血型鉴定。结果云南红河哈尼族A型、B型、O型及AB型构成比分别为25.08%、27.92%、39.81%及7.19%;期望值构成比为25.19%、28.08%、40.02%及6.73%,基因频率P=0.1749,q=0.1925,r=0.6326,观察值与期望值无显著差异(P0.05),分布符合Hardy-Weinberg平衡。ABO血型分布为O型B型A型AB型。6 817例云南红河哈尼族共检出Rh D(-)23例,占0.37%,其中CCdee为21.74%,Ccdee为47.83%,ccdee为30.43%,其期望值构成比为20.87%、49.57%及29.57%,基因频率Cde为0.4566,cde为0.5434,观察值与期望值无显著差异(P0.05),分布符合Hardy-Weinberg平衡。结论对哈尼族无偿献血人群ABO及Rh血型分布规律以及基因频率的研究对本地区采供血计划的制定及安全用血均有重要的指导意义。     

1例新的弱D型的鉴定

目的分析1例新的Rh血型弱D型个体的RHD等位基因及其红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,并分析D抗原表位;序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,然后分析RHD编码区全长序列,并检测RHD杂合型。结果血清学显示该个例为D抗原弱表现型,Rh因子为D+C+c+E-e+,PCR-SSP检测RHD基因显示与正常Rh(D)阳性对照相同。RHD编码区序列分析发现第9外显子存在1 212C>A碱基突变,其余外显子序列则与正常RHD基因一致(GenBank EF103573),RHD合子型鉴定为RHD+/RHD-杂合型,提示该个体基因型为CDe/cde。红细胞D抗原表位分析显示其具有基本完整D抗原表位。结论该个例为RHD1 212C>A碱基突变形成弱D72型。     

基因扫描技术在ABO血型基因型鉴定中的应用

目的 建立基因扫描（GeneScan）技术鉴定ABO血型基因型的方法。方法根据O1基因在261位G缺失而非O1基因无缺失，B基因第803位核苷酸与A基因不同的特点，设计4对引物，分别在上游引物5’端标记荧光基团，PCR-SSP扩增后，用基因扫描技术鉴定ABO血型基因型。结果129例样本用Genescan技术鉴定的ABO血型结果与血清学结果完全符合，A、B、O基因频率分别为0．198、0．159、0．643。其中AA基因型8例（6．2％），AO基因型29例（22．5％），AB基因型6例（4．7％），BB基因型6例（4．7％），BO基因型23例（17．8％），OO基因型57例（44．2％）。结论Genescan技术鉴定ABO血型基因型具有可行性，提供了一种可选择的方法。     

多重连接探针扩增技术在2例罕见Rh部分D表型等位基因检测中的应用

目的 探讨多重连接依赖探针扩增(MLPA)技术在2例罕见Rh部分D表型等位基因检测中的应用.方法 选择2012年4月和9月外院送广州血液中心进行RhD血型鉴定的2例受检者全血样本作为研究对象.对其进行常规血清学方法鉴定RhD血型后,提取全血标本的DNA.采用MLPA技术对上述2例受检者的RHD和RHCE基因进行检测,分析RHD和RHCE基因的外显子拷贝数、点突变、基因缺失及杂交融合情况,并将MLPA技术检测结果与常规血清学及序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)检测结果进行对比.结果 受检者全血标本MLPA结果显示其RHD、RHC、RHc基因拷贝数均为1.0,RHE基因拷贝数为0,RHe基因拷贝数为3.0,D03-380T、D03-455A、D04-602C、D05-667T、D04-514A、D05 787G基因外显子拷贝数均为0,即RHD基因外显子3～5完全缺失.PCR SSP结果亦显示受检者RHD基因外显子3～5缺失,检出C、c、e基因;血清学结果显示受检者红细胞与2种单克隆抗D在试管中均有2+的凝集,Rh血型其他抗原分型为C+ c+E e+.2例受检者全血标本MLPA技术,常规血清学及PCR-SSP检测结果基本一致.结论 2例受检者属中国人群中首次发现的Rh部分DⅥtype 4型血型;MLPA技术作为检测基因点突变、基因缺失、等位基因杂交融合和基因拷贝数的新技术,可用于Rh血型D抗原变异型的等位基因检测.     

聚合酶链式反应技术检测Rh血型Del表型

目的　探讨采用DNA技术鉴定Del基因型。方法　根据文献和GenBank报道的中国人Del等位基因序列 ,设计一对特异性引物 ,再引入一对内对照引物 ,建立聚合酶链反应 (PCR)检测Del基因型 ,用此法检测 10名Rh阴性、10名Rh阳性和 2 0名经血清学吸收放散试验鉴定的Del表型个体的样品。结果　 10份Rh阳性和 10份Rh阴性样品PCR检测均为阴性 ,2 0份Del样品则均为阳性 ,显示此法能特异性检测Del等位基因 ,且与吸收放散试验结果一致。结论　与吸收放散试验比较 ,PCR方法简便、快速 ,可用于临床常规实验室鉴定中国人群Del表型个体