鼓槌石斛化学成分的研究Ⅲ

目的:研究鼓槌石斛的化学成分。方法:采用硅胶及Sephadax LH-20凝胶柱色谱法分离化合物,运用波谱学方法确定结构。结果:从鼓槌石斛中分离得到10个化合物,分别为(+)-syringare sinol(1),5α,8-αepidioxy-24(R)-methycholesta-6,22-dien-3-βol(2),trans-3-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-acrylic acid octacosyl ester(3),defusin(4),3,4-dihydroxy-benzoic acid(5),3,4-dimethoxy-benzoic acid(6),vanillic acid(7),3,4-dimethoxy-benzoic acid methyl ester(8),3,5-dibromo-2-amino-benzaldehyde(9),heptadecanoic acid 2,3-dihydroxy-propyl ester(10)。结论:化合物1,2及6~10均为首次从鼓槌石斛中分离得到。     

鼓槌石斛组织培养研究

目的 :建立鼓槌石斛快速繁殖体系。方法 :组织培养 ,虫荧光素 荧光素酶生物发光法及苯酚 硫酸法。结果 :胚在光照及黑暗条件下均可以萌发 ,但苗的生长需要光照条件 ,MS,1/2MS ,B₅,N₆培养基对苗的生长均比较适宜 ,0.5mg·L^-1NAA与 1mg·L^-16-BA利于鼓槌石斛组培幼苗的生长与分化。三磷酸腺苷 (adenosine triphosphate ,ATP)在鼓槌石斛培养时发生节律性变化。组培苗多糖含量 7.254% ,原植物为 2.833%。结论 :光照对胚的萌发没有影响 ,分化出幼苗后 ,培养基中的激素、氮源及有机元素对苗的生长及分化有较大的影响 ,因此要及时将苗转移到附加NAA与 6-BA的MS ,1/2MS ,B₅,N₆培养基中。ATP可作为鼓槌石斛培养时的动态指标 ,反应其发育过程中对营养和能量的需求。组培苗的多糖高于原植物。     

云南药用植物鼓槌石斛化学成分研究

目的:对云南鼓槌石斛化学成分进行研究,发现活性化合物。方法:采用95%乙醇提取活性化合物,经硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化后,以波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱和质谱)鉴定其结构。结果:从石油醚萃取部分分离得到7个化合物,结构确定为:stigmasterol(1),β-sitosterol(2),3,4-dihydroxy-benzoic acid(3),stigmast-4-en-3-one(4),ergosterol(5),moscatin(6),daucosterol(7)。结论:化合物4为首次从本植物中分离得到。     

鼓槌石斛及其研究进展

简要介绍了鼓槌石斛的种属分布、原植物特征、采集、鉴定、功用等，还总结了鼓槌石斛化学成分、药理作用的研究进展。鼓槌石斛主要含有苄类、菲类、芴酮类等化合物，其中包括四种首次发现的新化合物。初步药理研究表明，这些化学成分具有抗肿瘤活性及耐药性等。     

鼓槌石斛化学成分的研究

目的 研究鼓槌石斛的化学成分,为阐明其活性成分,开发其资源提供科学依据。方法 采用胶柱层析法进行分离,根据光谱数据鉴定结构。结果 从中分得10个化合物,分别为：erianin(Ⅰ）,chrysotobibenzy(Ⅱ),chrysotoxene(Ⅲ),confusarin(Ⅳ),erianthridin(Ⅴ),dendroflorin(Ⅵ),chrysotoxone(Ⅶ),dengibsin(Ⅷ）和β-sitosterol(Ⅸ）,daucosterol(Ⅹ)。结论 化合物Ⅴ为首次从石斛属植物中分得,化合物Ⅵ为首次从该植物中分得。     

野生鼓槌石斛引种和栽培技术

鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxumLindl为兰科石斛属附生植物,以鲜茎或干燥茎入药,是我国民间习用药用石斛种类之一。鼓槌石斛除了具有生津益胃、清热养阴之功效外,传统上还用于治疗热病伤津、口干烦渴、病后虚热、阴伤目暗等。鼓槌石斛主要分布于我国云南南部至西南部。附生在海拨500~1 700 m的中海拨地区疏林中大树上或岩石上。随着鼓槌石斛的药用需求量增大,国内野生资源日趋减少。为防止重蹈像兰科石斛属其他植物,如流苏石斛....     

野生鼓槌石斛株丛调查报告

选择保存较完好的野生鼓槌石斛株丛,测量假鳞茎的长度和假鳞茎最大处的直径,并根据假鳞茎顶端明显的脱叶痕及实际叶片数,统计假鳞茎的叶片数,结果:自然条件下,鼓槌石斛常有“一母带一笋”的生长发育方式形成株丛;而且子假鳞茎比母假鳞茎逐一增大。通常鼓槌石斛从种子萌发到有一定产量及有性繁殖,需要约7~10年的时间。     

鼓槌石斛种质资源调查研究

目的:收集和保存鼓槌石斛种质资源,为筛选优良种质奠定基础材料。方法:采用文献查阅、访问和实地调查相结合的方法,对鼓槌石斛种质资源的分布、植物学性状及利用现状进行了调查,并对种质进行了收集。结果:野生鼓槌石斛种质资源在植物形态上如茎的大小、叶的形状、花唇瓣的颜色等方面存在明显差异,近10年来,调查地区鼓槌石斛野生资源蕴藏量严重下降。结论:野生鼓槌石斛种质资源生物学存在多样性,其中不乏高产种质资源。     

鼓槌石斛特异性PCR分子鉴定

目的 研究能够特异性鉴别鼓槌石斛的PCR引物,并优化PCR检测体系,确立一种快速、准确鉴别鼓槌石斛的方法.方法 从GenBank数据库中下载石斛属rDNA ITS序列170余条,运用MEGA 5.0对所有序列进行同源性比较,找出各变异位点,在非保守区设计1对特异性引物.对35份石斛属植物DNA模板进行特异性引物PCR扩增,显示阳性者为鼓槌石斛.结果 将退火温度升至58℃时,鼓槌石斛能被该引物特异性地扩增出来,而其他石斛属植物均为阴性,且该引物的灵敏度可达到0.69 ng/μL.结论 建立一种特异性鉴别鼓槌石斛的方法,运用该特异性引物可实现从同源物种中快速、准确地鉴定出鼓槌石斛,具有特异性好,操作简便、高效、准确等优点.     

鼓槌石斛快繁育苗技术的研究

目的 寻找鼓槌石斛快繁育苗的有效途径。方法 采用组织培养和野生自然栖息的鼓槌石斛诱导高位腋芽萌发等途径进行探索。结果 在组织培养中,改良1/2MS培养基对原球茎形成效果最好,调整不同浓度的N、P、K及外源激素对诱导鼓槌石斛原球增殖、生根壮苗极为明显;外源激素对诱导鼓槌石斛的高位腋芽萌发无明显效果,高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论 人工种植鼓槌石斛采用现代生物技术组培和腋芽繁殖是目前快繁育苗的最有效途径,不仅育苗量大、周期短,且生长快、成活率高,两条途径对于鼓槌石斛的产业化发展有重要意义。     

稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

铁皮石斛培养的产业化研究

目的　筛选适宜的铁皮石斛不定芽增殖与生根培养基 ,选择适合继代扩繁的不定芽高度。方法　在相同培养条件下 ,不同高度的不定芽在不同的增殖与生根培养基中生长 ,对结果所产生的不同生长状况 ,进行显著性差异检验及综合分析。结果　不同高度的不定芽之间有显著差异 ,不同的增殖与生根培养基之间有显著差异。结论　铁皮石斛继代以 (1.2± 0 .1) cm高的不定芽为宜 ,增殖培养基以 MS添加 BA1.0 m g/ L、NAA0 .2 mg/ L 为佳 ,生根培养基以 1/ 2 MS添加 NAA 0 .2 mg/ L为佳。     

金钗石斛、环草石斛挥发性成分研究

目的:研究金钗石斛、环草石斛挥发性成分。方法:利用有机溶剂-水蒸汽蒸馏提取石斛挥发性成分,用GC/MS进行分离测定,结合计算机检索技术对分离化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:金钗石斛分离出109个成分,鉴定出63个化学成分,占挥发油总量的86.26:环草石斛分离山63个成分,鉴出52个化学成分,占挥发油总量的87.48。2种石斛挥发油成分中,含有10种相同成分。结论:首次报道利用有机溶剂-水蒸汽蒸馏法提取石斛挥发性成分,并对其进行定性定量研究。     

金钗石斛中的酚性成分

目的对金钗石斛茎的化学成分进行研究。方法运用多种色谱学技术对金钗石斛的化学成分进行分离,并根据光谱数据鉴定化合物的结构。结果从该植物中分离得到12个酚性化合物,其结构分别为二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯(Ⅰ),香草醛(Ⅱ),罗布麻宁(Ⅲ),对羟基苯甲醛(Ⅳ),丁香醛(Ⅴ),丁香酸(Ⅵ),丁香乙酮(Ⅶ),α-羟基丁香丙酮(Ⅷ),松柏醛(Ⅸ),二氢松柏醇(Ⅹ),2-羟基苯丙醇(Ⅺ)和3-羟基-4-甲氧基苯乙醇(Ⅻ)。结论上述化合物均为首次报道从金钗石斛中分离得到,化合物Ⅰ,Ⅲ~Ⅻ为首次报道从石斛属植物中分离得到。     

铁皮石斛试管培养物多糖含量测定

目的:比较铁皮石斛试管培养物与原药材的多糖含量.方法:用比色法测定石斛多糖的含量.结果:铁皮石斛原药材含多糖量最高,其次是原球茎和试管苗.结论:铁皮石斛原球茎多糖含量比试管苗多糖含量高.     

金钗石斛化学成分的研究

 目的　对金钗石斛 (Dendrobium nobile Lindl)茎的化学成分进行研究。方法　使用硅胶柱色谱进行分离纯化,理化性质和光谱分析鉴定结构。结果　分离并鉴定了5个单体化合物及2个系列混合物。分别为海松二烯,3-甲氧基-4-羟基反式肉桂酸二十二烷酯,3-甲氧基-4-羟基反式肉桂酸二十四烷酯,豆甾醇,对羟基顺式肉桂酸三十烷酯,对羟基反式肉桂酸直链烷酯的4个系列化合物的混合物,直链烷醇的5个系列化合物的混合物。结论　以上成分均为首次从该种植物中分得,其中海松二烯为首次从该属植物中分得。     

束花石斛抗凝血作用的初步研究

目的：初步研究束花石斛Dendrobium chrysanthum Wall.ex Lindl.的抗凝血作用。方法：在研究比较束花石斛、金钗石斛Dendrobium nobile Lindl、球花石斛Dendrobium thyrsiflorum Rchb.f.和鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl.的乙醇提取物对小鼠全血凝血时间的影响基础上，观察束花石斛乙酸乙酯部位、生物碱部位和正丁醇部位对小鼠全血凝血时间和小鼠出血时间的影响，进一步对束花石斛乙酸乙酯部位用小鼠凝血因子和大鼠颈总动脉．颈外静脉血流旁路实验性血栓法进行测定研究。结果：在全血凝血时间实验中束花石斛乙醇提取物与其他三种石斛乙醇提取物相比对凝血时间的延长作用最为显著；而束花石斛乙酸乙酯部位与其他两个部位相比，对全血凝血时间和出血时间的延长作用最为显著，并能抑制大鼠颈总动脉．颈外静脉血流旁路实验性血栓的形成，但对凝血因子没有显著作用。结论：束花石斛乙酸乙酯部位可能主要通过抑制血小板聚集来发挥抗凝血作用的。     

环草石斛试管苗生长节律及分级标准研究

目的 对不同生长时期的环草石斛试管苗进行生长动态及分级标准的研究,为试管苗各生长发育时期合理调控技术措施的确定提供科学依据.方法 采用常规方法,测定不同生长时期试管苗的生长指标、多糖及蛋白质的量,确定试管苗出瓶时间及分级标准.结果 播种生长12个月的时间内,5～8个月是环草石斛试管苗苗高和茎粗增长最快的时期;7～8个月时的试管苗生物量积累速率最高.环草石斛试管苗根与茎叶之比(R/T)相对较小,比值小于1.生长8个月时的试管苗多糖的量和可溶性蛋白质的量较高,7～8个月时的试管苗生长代谢旺盛.从干物质积累动态、多糖及蛋白质的量变化、试管苗活力和生产成本等方面综合考虑,环草石斛生长8～10个月的试管苗出瓶移栽较为合适.试管苗出瓶后分级再利用能够切实保证移栽成活率.以苗高、茎粗和根数作为分级指标,环草石斛试管苗可以分为3个等级.结论 环草石斛的种子质量对试管苗的生长影响较大,生长8～10个月的环草石斛试管苗出瓶移栽较为合适,以苗高、茎粗和根数作为分级指标,试管苗可以分为3个等级加以利用.     

金钗石斛的位点特异性PCR鉴别研究

目的建立一种简便、实用的金钗石斛的DNA分子鉴别方法。方法根据金钗石斛及其他黄草类、枫斗类石斛的rDNA ITS序列数据库,寻找金钗石斛特异性的序列位点,设计专用于金钗石斛鉴别的PCR引物,用该引物在不同条件下扩增石斛属植物的模板DNA,建立只有金钗石斛具有阳性扩增的PCR鉴别条件。结果在66℃、40 s的复性条件下进行鉴别PCR,金钗石斛的模板DNA扩增出约300 bp的阳性扩增带,而其他39种石斛的模板DNA在同样条件下无扩增产物。结论运用位点特异性PCR能有效地从其他石斛属植物中鉴别出金钗石斛,该方法具有高效、准确、简便、省时的特点,应用前景广泛。