小鼠支气管哮喘模型的研究现状

支气管哮喘（简称哮喘）是一种慢性气道炎症性疾病,近年来用小鼠实验模型进行哮喘的研究越来越多,涉及哮喘免疫发病机制特别是相关的细胞因子的研究以及药物疗效等。成功的小鼠哮喘模型的建立在哮喘研究中具有重要作用,模型的复制涉及到分类、诱导物及其发展等各方面,理想的小鼠哮喘模型建立至今仍有很多方面有待进一步探究。     

卵清白蛋白诱导小鼠建立哮喘模型的研究现状

哮喘动物模型是研究哮喘发病机制及防治方法的主要工具之一,在哮喘动物模型的建立过程中,卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导小鼠建立哮喘模型的方法最为常见。本文回顾了近十年来的国、内外文献,对用该方法建立的哮喘模型的分类,建模过程中小鼠种属、性别及饲养环境的选择,模型制备过程中致敏、激发等主要环节的处理方式,以及哮喘模型的评价方法等问题作一综述。     

支气管哮喘动物模型的研究现状

支气管哮喘(哮喘)是一种常见多发病,哮喘实验动物模型的建立在研究其病因、发病机制以及制定防治方案等方面有着重要意义.通过对近年来国内外哮喘动物实验研究文献进行总结,从实验动物的选择、制备模型的方法及模型的应用等方面进行综合分析,为进一步开展哮喘研究提供帮助.     

CD39/ATP轴调控哮喘小鼠肺泡巨噬细胞炎症小体活化的研究

目的 探讨CD39/ATP轴与哮喘肺泡巨噬细胞炎症小体活化之间的关系.方法 采用OVA致敏和激发模式建立Th2优势哮喘小鼠模型;采用LPS联合OVA致敏和OVA激发模式建立Thl7优势哮喘小鼠模型;将CD39抗体经鼻滴入至Th2优势哮喘小鼠,建立CD39阻断的哮喘小鼠模型.实验设立正常对照组、Th2优势哮喘组、Th17优势哮喘组以及CD39阻断组,每组小鼠各10只,共40只.分离各组小鼠肺泡巨噬细胞,采用流式细胞仪检测各组肺泡巨噬细胞CD39的表达,Western Blot检测巨噬细胞炎症小体分子NLRP3和caspase-1的表达,ELISA方法检测肺泡灌洗液中ATP、IL-1β的含量.结果 Th17优势哮喘组以及CD39阻断组小鼠肺泡巨噬细胞CD39表达明显下调,与之对应的是：炎症小体中NLRP3和caspase-1的蛋白表达上调和肺泡灌洗液中ATP、IL-1β含量显著增加.结论 哮喘小鼠肺泡巨噬细胞CD39表达与炎症小体活化之间存在着相关性,推测CD39/ATP轴在调控哮喘小鼠肺泡巨噬细胞炎症小体活化之中发挥重要作用.     

不同内型哮喘小鼠模型中的小气道功能研究及其机制初探

目的 探讨不同内型哮喘小鼠模型中,小气道功能是否存在异常及其相关机制.方法 卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立T2型哮喘模型,OVA联合臭氧暴露(OVA+ozone)建立非T2型哮喘模型.模拟强迫振荡系统检测小鼠小气道功能,激发试验检测气道反应性.酶联免疫吸附试验法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞因子;苏木精-伊...     

β-arrestin2对急性支气管哮喘小鼠模型脾CD4+T细胞T-bet表达的影响

目的 探讨β-arrestin 2在急件支气管哮喘(简称哮喘)小鼠模型脾CD4+T细胞可的表达及对T-bet表达的影响.方法 建立急性哮喘小鼠模型,免疫磁珠分离小鼠脾源性CD4+T细胞,RNA干扰β-arrestin 2的表达后,检测CD4+T细胞β-arrestin 2、T-bet mRNA和蛋白的表达.结果 siR...     

小鼠哮喘模型中补体C5a对IL-17表达的调节作用

目的 探讨小鼠哮喘模型中补体C5a对IL-17表达的调节作用.方法 用卵清蛋白(OVA)致敏、激发的方法 建立Balb/C小鼠哮喘模型.用体内抗体中和试验,观察致敏前中和炎症介质补体C5a的功能是否影响小鼠肺泡灌洗液中IL-17细胞因子的表达水平,并探讨其机制.结果 病理结果 显示模型组小鼠的肺组织出现肺泡腔扩张、腔内大量炎性细胞的浸润.小鼠致敏前给予抗C5a抗体干预上调了肺部IL-17及IL-6 的表达,导致肺炎症明显加重.结论 小鼠哮喘模型中体内C5a分子对IL-17表达具有负调节作用.     

支气管哮喘动物模型的研究现状

支气管哮喘（简称哮喘）是一种常见多发病,哮喘实验动物模型的建立在研究其病因、发病机制以及制定防治方案等方面有着重要意义。通过对近年来国内外哮喘动物实验研究文献进行总结,从实验动物的选择、制备模型的方法及模型的应用等方面进行综合分析,为进一步开展哮喘研究提供帮助。     

支气管哮喘小鼠模型应用评价

支气管哮喘(简称哮喘)是由嗜酸粒细胞(EOS)、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎性细胞参与的气道慢性炎症性疾病，并伴有气道高反应性(AHR)、可逆性气流受限及黏液高分泌，晚期还可出现气道重塑。哮喘发病机制复杂，鉴于人体试验的局限性，目前对哮喘病因、发病机制及治疗等方面的研究很大程度上需要通过动物模型来进行。曾用于制作哮喘模型的动物很多，包括：猫、马、狗、猴、兔、羊、豚鼠、大鼠、小鼠等，其在反映人类哮喘方面各有优点及相应的局限性。其中小鼠模型是近年来采用最多的哮喘动物模型。     

急性期和慢性期哮喘小鼠模型在哮喘致病过程中的对比研究

目的 比较卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的急性期和慢性期哮喘小鼠模型在气道炎症、气道重塑和气道高反应方面的差异,明确在哮喘致病过程中肺组织的病理变化.方法 48只BALB/c小鼠随机分为急性组和慢性组,其中急性组包括正常对照组(A1组)和急性哮喘组(A2组),慢性组包括正常对照组(B1组)和慢性哮喘组(B2组).OVA致敏和激发方法分别构建急性早期哮喘模型和慢性期哮喘模型后,测定气道阻力,BALF细胞计数和分类计数,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-4、IL-5、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ).HE染色观察气道炎症,AB-PAS和Masson染色测定气道重塑.结果 与正常小鼠相比,A2组和B2组小鼠气道阻力均明显升高,但B2组小鼠气道阻力在基础值即发生明显改变.相比于慢性组哮喘小鼠,急性组哮喘小鼠BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞数,IL-4、IL-5和IFN-γ水平,肺组织气道血管周围炎症细胞聚集,以及气道黏液分泌水平等炎症性改变更为明显.相比于A2组,B2组哮喘小鼠BALF中TGF-β1和VEGF水平,气道平滑肌增厚,上皮下胶原沉积,上皮下纤维化等改变更为显著.结论 在急性早期哮喘中主要是以炎症性改变为主,但在哮喘早期即开始出现轻度的重塑性改变;而在慢性期哮喘中虽然存在炎症性改变,但影响哮喘症状的因素却主要以器质性改变为主.     

Mouse models of severe asthma: Understanding the mechanisms of steroid resistance,tissue remodelling and disease exacerbation

Severe asthma has significant disease burden and results in high healthcare costs. While existing therapies are effective for the majority of asthma patients, treatments for individuals with severe asthma are often ineffective. Mouse models are useful to identify mechanisms underlying disease pathogenesis and for the preclinical assessment of new therapies. In fact, existing mouse models have contributed significantly to our understanding of allergic/eosinophilic phenotypes of asthma and facilitated the development of novel targeted therapies (e.g. anti‐IL‐5 and anti‐IgE). These therapies are effective in relevant subsets of severe asthma patients. Unfortunately, non‐allergic/non‐eosinophilic asthma, steroid resistance and disease exacerbation remain areas of unmet clinical need. No mouse model encompasses all features of severe asthma. However, mouse models can provide insight into pathogenic pathways that are relevant to severe asthma. In this review, as examples, we highlight models relevant to understanding steroid resistance, chronic tissue remodelling and disease exacerbation. Although these models highlight the complexity of the immune pathways that may underlie severe asthma, they also provide insight into new potential therapeutic approaches.     

Aligning mouse models of asthma to human endotypes of disease

Substantial gains in understanding the pathophysiologic mechanisms underlying asthma have been made using preclinical mouse models. However, because asthma is a complex, heterogeneous syndrome that is rarely due to a single allergen and that often presents in the absence of atopy, few of the promising therapeutics that demonstrated effectiveness in mouse models have translated into new treatments for patients. This has resulted in an urgent need to characterize T helper (Th) 2‐low, non‐eosinophilic subsets of asthma, to study models that are resistant to conventional treatments such as corticosteroids and to develop therapies targeting patients with severe disease. Classifying asthma based on underlying pathophysiologic mechanisms, known as endotyping, offers a stratified approach for the development of new therapies for asthma. In preclinical research, new models of asthma are being utilized that more closely resemble the clinical features of different asthma endotypes, including the presence of interleukin‐17 and a Th17 response, a biomarker of severe disease. These models utilize more physiologically relevant sensitizing agents, exacerbating factors and allergens, as well as incorporate time points that better reflect the natural history and chronicity of clinical asthma. Importantly, some models better represent non‐classical asthma endotypes that facilitate the study of non‐Th2‐driven pathology and resemble the complex nature of clinical asthma, including corticosteroid resistance. Placing mouse asthma models into the context of human asthma endotypes will afford a more relevant approach to the understanding of pathophysiological mechanisms of disease that will afford the development of new therapies for those asthmatics that remain difficult to treat.     

支气管哮喘的体内和体外动物模型的研究现状

通过对近年来国内外建立的支气管哮喘体内外动物模型的研究进行总结,从常用动物的选择、模型的分类到模型的应用及仍然存在的问题等方面进行综合分析,强调在实际运用时,不应该拘泥于某一种模型,而应该根据实验目的选择最能敏感地反映出研究指标的动物模型.     

结核杆菌转录组学研究进展

自1998年结核分枝杆菌H37Rv菌株的全基因组测序完成以后,结核杆菌转录组学的研究就变得异常活跃,特别是随着高通量的基因芯片技术应用于结核菌转录组学的研究,结核杆菌转录组学的进展更加迅猛.结核杆菌转录组学研究经历了由体外分离株到巨噬细胞吞噬体内结核杆菌,从结核杆菌在体外的表达到在宿主体内表达,而宿主由以小鼠为模型到以人体为模型的研究过程.由于以动物为模型的便利性,当前结核杆菌转录组学研究以基因突变小鼠为模型或药物作用后的小鼠结核感染模型为主.这些研究为抗结核药物研究和临床诊断提供必要的基础信息.本文对结核杆菌的转录组学研究作一综述.     

哮喘小鼠HMGB1表达和中性粒细胞计数、IL-17水平的相关性研究

目的探讨哮喘小鼠肺组织中HMGB1表达和中性粒细胞计数、IL-17水平相关性的研究。方法采用OVA致敏和激发模式建立Th2优势哮喘小鼠模型;采用LPS联合OVA致敏和OVA激发模式建立Th17优势哮喘小鼠模型;将HMGB1拮抗剂rHMGB1-Abox经鼻滴人至Th17优势哮喘小鼠,建立HMGB1阻断的哮喘小鼠模型。实验设立正常对照组、Th2优势哮喘组、Th17优势哮喘组以及HMGB1阻断组,每组小鼠各10只,共40只。应用免疫组织化学SP法检测肺组织HMGB1的表达,收集肺泡灌洗液进行中性粒细胞计数,ELISA法检测肺组织匀浆中IL-17含量。采用SPSS13．0软件分析HMGB1表达和中性粒细胞数目、IL-17表达的相关性。结果Th17优势哮喘组小鼠HMGB1表达增强,并定位于气道上皮中。Th17优势哮喘组小鼠HMGB1表达、中性粒细胞计数和IL-17水平的表达与对照组、Th2优势哮喘组相比,均显著升高（P均〈0．01）;HMGB1阻断组小鼠HMGB1表达、中性粒细胞计数和IL-17水平与Th17优势哮喘组相比,均明显降低（P均〈0．05）。HMGB1表达与中性粒细胞计数呈正相关（r=0．82,P〈0．05）,HMGB1表达与IL-17水平呈正相关（r=0．74,P〈0．05）。结论Th17优势哮喘小鼠气道上皮HMGB1表达增强,并和中性粒细胞计数、IL-17水平呈正相关,HMGB1可能在调节哮喘Th17极化中发挥重要作用。     

水通道蛋白敲除对支气管哮喘小鼠气道黏蛋白谱表达的影响

目的 水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)敲除对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道黏蛋白(MUC)谱表达的影响.方法 用卵白蛋白致敏和激发制备AQP5敲除鼠的哮喘高分泌模型.用苏木精-伊红染色观察气道及血管周围炎性细胞浸润.阿辛兰-过碘酸雪夫检测显示气道上皮细胞总黏液分泌,免疫组织化学检测气道上皮MUC5AC,MUC5B,MUC2的表达情况.结果 哮喘小鼠气道和血管周围可见大量中性粒细胞,淋巴细胞和嗜酸粒细胞浸润,气道上皮有大量的紫红色中性黏液分布,其中以AQP5敲除鼠总黏液分布更多.免疫组织化学显示小鼠哮喘高分泌模型中MUC谱主要为MUC5AC和MUC5B,未见MUC2分布.与野生型哮喘小鼠比较,MUC5AC、MUC5B在AQP5敲除鼠中表达更丰富.结论 AQP5基因缺失可能使小鼠气道对过敏原的应激性提高,从而促进黏液高分泌.     

水通道蛋白敲除对支气管哮喘小鼠气道黏蛋白谱表达的影响

目的水通道蛋白5（aquaporin5,AQP5）敲除对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠气道黏蛋白（MUC）谱表达的影响。方法用卵白蛋白致敏和激发制备AQP5敲除鼠的哮喘高分泌模型。用苏木精-伊红染色观察气道及血管周围炎性细胞浸润。阿辛兰-过碘酸雪夫检测显示气道上皮细胞总黏液分泌,免疫组织化学检测气道上皮MUC5AC,MUC5B,MUC2的表达情况。结果哮喘小鼠气道和血管周围可见大量中性粒细胞,淋巴细胞和嗜酸粒细胞浸润,气道上皮有大量的紫红色中性黏液分布,其中以AQP5敲除鼠总黏液分布更多。免疫组织化学显示小鼠哮喘高分泌模型中MUC谱主要为MUC5AC和MUC5B,未见MUC2分布。与野生型哮喘小鼠比较,MUC5AC、MUC5B在AQP5敲除鼠中表达更丰富。结论AQP5基因缺失可能使小鼠气道对过敏原的应激性提高,从而促进黏液高分泌。