纤维粘连蛋白和层粘连蛋白对原代培养血管平滑肌细胞胶原基…

为了研究纤维粘连蛋白（Ｆｎ）和层粘连蛋白（Ｌｎ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胶原基因表达的影响。我们应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交的方式观察不同剂量的Ｆｎ和Ｌｎ处理的ＶＳＭＣｓＩ、Ⅲ型前胶原［Ｐｒｏα１（Ｉ）、Ｐｒｏα１（Ⅲ）］基因ｍＲＮＡ的改变。发现Ｆｎ能明显地促使Ｐｒｏα１（Ｉ）基因的转录，Ｆｎ的这种作用与剂量呈正比，α１（Ⅲ）基因的５．８ｋｂ ｍＲＮＡ在Ｆｎ４．０μｇ组比对照组增加明显，４．８ｋｂ     

层粘连蛋白γ2链基因在纤维化大鼠肝组织中的原位表达

目的：了解层粘连蛋白γ２链基因（Ｌｎγ２）是否在正常大鼠肝组织中表达及其在肝纤维化过程中的作用。方法：以皮下注射四氯化碳（ＣＣｌ４）诱发大鼠肝纤维化模型，采用地高辛原位杂交技术对Ｌｎγ２ｍＲＮＡ在肝组织中表达进行检测，并与Ⅳ型前胶原α１链（α１（ＩＶ）基因表达进行比较，结果：正常大鼠肝组织无Ｌｎγ２ｍＲＮＡ表达，纤维化早期肝组织即有Ｌｎγ２ｍＲＮＡ的异常表达，其表达细胞肝内分布与α１（ＩＶ）相似，     

HCV基因型和病毒量与干扰素疗效的关系

用α１型基因工程干扰素（ＩＦＮ－α１）治疗２６例慢性丙型肝炎（丙肝），观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型和ＨＣＶＲＮＡ量和疗效的关系。其中２０例作ＨＣＶ的基因型，结果表明ＨＣＶⅠ型中病毒清除反应属Ａ级（完全清除）为４／６，Ⅱ型为０／６，Ⅲ型为５／７，提示Ⅰ、Ⅲ型较Ⅱ型易于清除病毒（Ｐ＜０．０５）；基因型和ＡＬＴ反应关系不明显。２６例作ＨＣＶＲＮＡ，半定量结果表明病毒含量低者，病毒清除反应佳（Ｐ＜０．０５），而和ＡＬＴ关系不明显。作者认为ＨＣＶ基因型和血清病毒量可作为预测干扰素疗效的参考指标，定量检测血清中ＨＣＶＲＮＡ在评价ＩＦＮ疗效中十分重要。     

大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达及PDGF的影响

目的观察大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达及ＰＤＧＦ对其表达的影响．方法应用原位杂交技术检测分离培养的ＳＤ大鼠肝细胞（ｎ＝３０）内Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．同时观察１０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）和３０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）ＰＤＧＦ促进前胶原基因表达的作用．测定基因表达颗粒总面积占细胞总面积的百分比，并作比较分析．结果无论正常肝细胞或是在两种浓度的ＰＤＧＦ存在时，肝细胞内均可见到Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．正常肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达面积的百分比（％）为７７±１９和７５±２１；加１０μｇ／ＬＰＤＧＦ后为１１５±１９和１１２±１０，而加３０μｇ／Ｌ后为１５２±３４及１８１±２８，且在后者中表达明显增强（Ｐ＜００５及Ｐ＜００１）．结论ＰＤＧＦ在转录水平上促进肝细胞胶原的合成．     

HCV基因型和病毒量干扰素疗效的关系

用α１型基因工程干扰素（ＩＦＮ－α１）治疗２６例慢性丙型肝炎（丙肝），观察丙肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型和ＨＣＶＲＮＡ量和疗效的关系。其中２０例作ＨＣＶ的基因型，结果表明ＨＣＶＩ型中病毒清除反应属Ａ级（完全清除）为４／６，Ⅱ型为０／６，Ⅲ型为５／７，提示Ⅰ、Ⅲ型较Ⅱ型易于清除病毒（Ｐ〈０．０５）；基因型和ＡＬＴ反应关系不明显。２６例作ＨＣＶＲＮＡ，半定量结果表明病毒含量低者，病毒清除反应佳（Ｐ〈０．０     

褐藻胶对大鼠实验性肝纤维化的防治作用

目的研究褐藻胶对大鼠实验性肝纤维化的防治作用．方法用４０％四氯化碳（ＣＣｌ４）制备大鼠肝纤维化模型，实验分组为正常对照组（ｎ＝８），ＣＣｌ４组（ｎ＝８），秋水仙硷（ＣＯＬ）组（ｎ＝６）和褐藻胶组（ｎ＝６）（２００ｍｇ／ｋｇ，ｉｇ，３次／周×４）．观察肝脏组织学和血清Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）及透明质酸（ＨＡ）水平的变化．结果褐藻胶组ＰＣⅢ（１４２８μｇ／Ｌ±７６１μｇ／Ｌ）和ＨＡ水平（２６５５μｇ／Ｌ±９３１μｇ／Ｌ）显著低于ＣＣｌ４组（２９３５μｇ／Ｌ±７８３μｇ／Ｌ，５１９８μｇ／Ｌ±１１８３μｇ／Ｌ，Ｐ＜００１），而褐藻胶组与ＣＯＬ组间无显著差异．病理学观察显示，ＣＣｌ４组肝纤维化程度重于褐藻胶组和ＣＯＬ组．结论褐藻胶对实验性肝纤维化有防治作用．     

心肌缺血时血管内皮生长因子的基因表达

目的：研究缺血对心肌血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因表达的影响。方法：提取正常兔（ｎ＝２）、假手术兔（ｎ＝２）及冠状动脉左旋支结扎后不同缺血时间的兔（ｎ＝６）心肌总核糖核酸（ＲＮＡ），用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ＶＥＧＦ信使核糖核酸（ＶＥＧＦｍＲＮＡ）的表达。结果：正常及缺血兔心肌中均有３．９ｋｂ的ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达，但缺血心肌中表达明显高于正常心肌，心肌缺血３０分钟ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达即已明显增高，并持续增高达４小时。结论：兔心肌中有ＶＥＧＦ基因的基础表达，缺血可致其表达增加。关键词血管内皮生长因子心肌缺血信使核糖核酸表达     

人结肠癌HCT_（V2000）细胞系耐药机制的初步研究

目的研究人结肠癌耐药细胞系的耐药机制．方法采用抗Ｐ糖蛋白单抗ＪＳＢ１和ＭＲＫ１６以免疫细胞化学染色法（ＡＢＣ）检测ＨＣＴＶ２０００及亲本ＨＣＴ８细胞的Ｐ糖蛋白表达；提取两种细胞的ＤＮＡ和ＲＮＡ，与探针ＰＨＤＲ５Ａ杂交检测耐药基因ｍｄｒ１的表达和扩增；ＭＴＴ法测定ＶＣＲ对两种细胞的细胞毒作用．结果细胞系ＨＣＴＶ２０００对抗Ｐ糖蛋白单抗呈阳性反应，编码Ｐ糖蛋白的多药耐药基因ｍｄｒ１过度表达，但未见扩增或重排．异博定（１０μｇ／ｍｌ）使ＨＣＴｖ２０００细胞内３ＨＶＣＲ蓄积增加将近４倍，对ＶＣＲ的敏感性提高８４倍，可部分逆转耐药．结论多药耐药基因ｍｄｒ１ｍＲＮＡ过度表达是ＨＣＴＶ２０００细胞耐药的重要原因，但还有其他机制参与     

慢性HCV感染者IFN治疗前后血清HCV RNA水平

目的评价ＩＦＮ对丙肝患者病毒血症水平的作用．方法竞争性逆转录聚合酶链反应（ＣＲＴＰＣＲ）法定量检测１２例慢性ＨＣＶ感染者（男８例，女４例，ＨＣＶＲＮＡ阳性，ＡＬＴ异常持续６个月以上）ＩＦＮ治疗（ＩＦＮａ２ｂ３ＭＵ，肌注，３次／周，疗程３个月）前后（随访６个月）血清ＨＣＶＲＮＡ水平．结果慢性ＨＣＶ感染者１２例，３例呈完全反应，６例呈部分反应，另外３例无反应．９例有反应者中４例复发，有反应者治疗结束时血清ＨＣＶＲＮＡ水平明显下降（５１７±０４０８ｖｓ２０６±１５５，１０ｃｏｐｉｅｓ／５０μｌｓｅｒｕｍ，ｘ±ｓ，Ｐ＜００５），无反应者血清ＨＣＶＲＮＡ水平未见明显下降（５６７±０５８ｖｓ４５±０８７，ｘ±ｓ，Ｐ＞００５）．３例完全反应者仅１例血清ＨＣＶＲＮＡ持续阴性，３例无反应者２例血清ＨＣＶＲＮＡ水平略有下降．结论ＩＦＮ治疗丙肝有效，但ＩＦＮ不能有效清除病毒，仅抑制病毒复制，未见治疗前血清ＨＣＶＲＮＡ水平与复发与否有关．     

虫草多糖对大鼠Ito细胞增殖及胶原基因表达的影响

目的　研究虫草多糖（ＣＰ）对大鼠Ｉｔｏ细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因ｍＲＮＡ表达的影响,探索ＣＰ抗肝纤维化的作用机制。方法分离、培养大鼠Ｉｔｏ细胞,采用~３Ｈ－胸腺嘧啶（~３Ｈ－ＴｄＲ）和~３Ｈ－脯氨酸（~３Ｈ－Ｐｒｏ）掺入法测定Ｉｔｏ细胞增殖及胶原合成;用原位杂交法检测Ｉｔｏ细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原基因ｍＲＮＡ含量。结果　在０．１～８０μｇ／ｍ剂量范围内,ＣＰ可明显抑制Ｉｔｏ细胞~３Ｈ－ＴｄＲ和~３Ｈ－Ｐｒｏ的掺入。当ＣＰ浓度为１０μｇ／ｍｌ时,抑制率分别为２７．９％和４５．４％（Ｐ均＜０．０５）。随着浓度的增加和作用时间的延长,其抑制作用逐渐加强,１０μｇ／ｍｌ ＣＰ可显著抑制Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,抑制率分别为３２．６０％和３７．３２％（Ｐ均＜０．０１）。结论 ＣＰ在体外可抑制Ｉｔｏ细胞的增殖和胶原合成,下调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达,并呈剂量和时间依赖性,提示ＣＰ对Ｉｔｏ细胞增殖和胶原合成的抑制可能是其体内抗肝纤维化作用的主要途径。