胸(腹)水免疫细胞化学方法改进

免疫组织化学技术,已成为组织学诊断中不可缺少的辅助手段,特别是在肿瘤的组织学诊断、鉴别诊断中发挥了重要的作用.但在细胞学诊断中,特别是浆膜腔积液标本,却因易脱片、细胞涂片面积大,耗费试剂多、标本制作重复性差等方面的原因,不能像病理组织学作免疫组织化学那样常规开展.我们在临床细胞学检验中,对浆膜腔积液标本在做免疫细胞化学(ICC)前,进行必要的处理,克服以上影响其开展的因素,使之能像病理组织学作免疫组织化学一样成为病理科的常规工作,并获得了满意的结果.     

浆膜腔积液中SMARCA4缺失胸部未分化肿瘤的细胞病理学特点

目的探讨浆膜腔积液中SMARCA4缺失胸部未分化肿瘤的细胞病理学特点, 及浆膜腔积液细胞学结合免疫组织化学在该肿瘤的诊断价值。方法收集河北大学附属医院2018年1月至2023年7月以浆膜腔积液细胞学为首次诊断依据的SMARCA4缺失胸部未分化肿瘤11例的临床及病理学资料, 分析浆膜腔积液细胞形态、免疫组织化学特征, 并分析患者相应的原发或转移病灶的组织学标本病理特征, 对部分病例进行二代测序基因检测。结果患者均为男性, 年龄54～77岁, 中位年龄64岁, 9例有长期吸烟史。多伴咳嗽、发憋、胸痛症状, 均伴胸腔或心包积液。影像学提示原发部位肺部9例, 纵隔1例, 肺及胸壁均累及1例。其中3例有外院肺肿瘤手术史, 1例有对侧肺腺癌手术史。浆膜腔积液肿瘤细胞大且异型性明显, 核质比增大, 核大圆形, 核仁明显, 部分核形不规则, 胞质嗜酸性。免疫组织化学SMARCA4/BRG1均失表达, 广谱细胞角蛋白、细胞角蛋白7均阴性, SMARCB1/INI1均阳性;7例CD34阳性, 4例突触素弱阳性, 2例SALL4弱阳性。组织学标本瘤细胞黏附性差, 不规则片状或巢状排列, 横纹肌样, 核分裂象...     

原发性心脏血管肉瘤临床病理及遗传学特征

目的探讨原发性心脏血管肉瘤(primary cardiac angiosarcoma, PCAS)临床病理及遗传学特点。方法收集河南省人民医院确诊的PCAS共9例, 采用免疫组织化学和二代测序技术检测蛋白和基因突变情况。结果本组患者男性7例, 女性2例;年龄18～53岁;6例位于右心房, 2例位于心包, 1例位于右房室沟。9例伴心包积液, 3例伴胸腔积液, 4例伴肺多发转移。细胞学见肿瘤细胞呈腺样、乳头状排列, 上皮样形态, 酷似腺癌细胞;组织学见肿瘤组织呈高-中等分化, 见不规则血管腔样结构, 瘤细胞鞋钉样或乳头状, 部分区域呈片状、束状排列, 细胞胖梭形, 核深染不规则, 异型性明显, 病理性核分裂象易见;免疫标记显示肿瘤细胞强表达CD34、CD31、ERG。伴多发肺转移结节和浆膜腔积液病例存在TP53错义突变(p.R273C), 且肿瘤细胞p53蛋白强阳性。结论 PCAS早期即存在浆膜腔积液和肺多发转移, 组织形态呈高-中等分化, 细胞学极易误诊为腺癌, 免疫组织化学有助于鉴别诊断;且TP53突变可能与肿瘤的高侵袭性生物学行为相关。     

细胞DNA定量分析在脱落细胞学诊断中的应用

目的 探讨自动细胞DNA定量分析系统在良恶性胸水、腹水、心包积液及乳腺包块诊断中的价值.方法 297例浆膜腔积液(胸水185例、腹水94例、心包积液18例),经细胞采集器处理,每例制成4张薄层细胞片,2张细胞片做巴氏染色,用于常规细胞学检查.另2张经Feulgen染色,用自动细胞DNA定量分析系统检测.122例乳腺包块住院患者,诊断医师进行针吸穿刺后每例制成2张薄层涂片,1张涂片做巴氏染色,用于常规细胞学检查.另1张经Feulgen染色,用自动细胞DNA定量分析系统检测.每例均有病理结果证实.结果 297例浆膜腔积液标本常规检测138例(44.5%)异常,而同样的标本中DNA定量检测131例(44.1%)异常.常规细胞学诊断为癌及可疑癌细胞84例中100%出现异倍体细胞,常规诊断为找到异型细胞的54中有47例(87%)出现异倍体细胞.122例乳腺肿物经病理证实,41例为乳腺良性肿瘤,81例为恶性.常规细胞学方法对良恶性乳腺包块的诊断阳性率分别为92.7%、91.4%,AICM的诊断阳性率分别为100%、90.1%.结论 应用自动细胞DNA定量分析系统可弥补常规形态学工作的不足,二者协同诊断,可发现早期癌变的细胞,提高诊断率,为临床制定治疗方案提供有价值的信息,使细胞学检查工作更完善、客观.     

免疫组化标志物在鉴别浆膜腔积液恶性肿瘤细胞中的应用价值

目的探讨免疫组化标志物鉴别浆膜腔积液中恶性肿瘤来源及分类的临床价值。方法细胞学筛选恶性浆膜腔积液105例,分别采用常规细胞学涂片、薄层液基细胞技术制片、薄层液基细胞技术制片+常规细胞学涂片以及细胞蜡块切片结合免疫组化检测分析。结果对105例浆膜腔积液恶性肿瘤细胞来源及类型进行鉴别:胸水60例中腺癌58例,分别来源:肺42例、乳腺10例、卵巢4例及胃肠道2例;鳞癌1例;恶性间皮瘤1例。心包积液9例,均为腺癌,分别来源:肺6例,乳腺3例。腹水36例,其中腺癌35例,22例来源于卵巢,胃肠道12例,肺来源1例,弥漫大B细胞淋巴瘤1例。薄层液基细胞技术制片、薄层液基细胞技术制片+常规细胞学涂片以及细胞蜡块切片联合免疫组化检出率明显优于常规细胞学涂片(P0.05)。细胞蜡块切片联合免疫组化检测能准确鉴别浆膜腔积液中恶性肿瘤的来源及分类。结论常规细胞学涂片、薄层液基细胞技术制片、薄层液基细胞技术制片+常规细胞学涂片以及细胞蜡块切片结合免疫组化检测分析,在疑难恶性浆膜腔积液鉴别诊断及分类中具有重要的价值,值得临床推广应用。     

浆膜腔积液细胞学诊断间皮瘤的临床病理学分析

目的探讨通过免疫细胞化学染色检测的几种标志物以及荧光原位杂交(FISH)检测CDKN2A基因缺失在浆膜腔积液间皮瘤诊断中的价值。方法收集2019—2022年14例发生于胸腔及腹腔弥漫性间皮瘤的浆膜腔积液细胞学标本及活检组织学标本, 应用免疫细胞/组织化学方法检测BRCA相关蛋白1(BAP1)和甲基硫腺苷磷酸化酶(MTAP), 以及FISH检测CDKN2A的缺失。同时14例均检测了常规用于间皮瘤鉴别诊断的抗体组合, 包括Calretinin、细胞角蛋白(CK)5/6、WT1、D2-40、上皮细胞膜抗原(EMA)、结蛋白、GLUT1。另收集20例良性间皮细胞反应性增生的浆膜腔积液作为阴性对照。结果免疫细胞/组织化学染色结果显示, 14例间皮瘤中9例显示BAP1蛋白表达缺失(9/14);5例MTAP表达缺失(5/14);12例表达EMA(12/14), 11例表达GLUT1(11/14);4例表达结蛋白(4/14), 其中3例为局灶阳性;Ki-67阳性指数5%～40%(平均为20%);FISH检测CDKN2A结果显示:1例(1/14)纯合性缺失, 6例(6/14)杂合性缺失, 7例(7/14...     

提高浆膜腔积液细胞学制片质量的体会

浆膜腔积液细胞学制片方法有:离心沉淀法、细胞采集器制片法、液基细胞学制片法、细胞块制片法等,采取何种方法制片,需视标本性质及科室配备的仪器而定.作者多年来不断探索提高浆膜腔积液细胞学制片质量的方法,得到一些心得体会,现介绍如下.     

染色体检查鉴别良恶性浆膜腔积液

良恶性浆膜腔积液的鉴别诊断以前主要依赖细胞学和病理学检查，总的检出率为30％-60％。前者检出率较高；后者需做胸膜活检，有一定创伤性，患者不易接受。已有资料表明，恶性肿瘤所致浆膜腔积液大多有染色体异制（检出率为60％～80％），因而浆膜腔积液的染色体检查为其良恶性鉴别提供了可靠的依据。近年来我们对62例良恶性浆膜腔积液作了染色体分析，现将有关资料总结如下，以供参考。     

超敏C-反应蛋白检测对小儿浆膜腔积液性质鉴别的应用

目的探讨超敏C-反应蛋白（hs-CRP）对小儿浆膜腔积液性质鉴别的价值。方法收集2008—2009年本院43例浆膜腔积液标本,使用日立7600全自动生化分析仪检测积液和血清的LDH及蛋白含量,采用免疫荧光双抗体夹心法检测积液中的hs—CRP含量。结果hs-CRP检测对于浆膜腔积液性质鉴别的灵敏度为92％,特异度为93％。结论与常规方法相比,hs-CRP在小儿浆膜腔积液的鉴别诊断方面也具有较好的灵敏度、特异性,可作为临床小儿浆膜腔积液性质鉴别的指标。     

细胞蜡块结合免疫细胞化学在浆膜腔积液病理诊断中的应用

正近年来,随着恶性肿瘤发病率的升高,肿瘤的早期发现及诊断已成为肿瘤防治领域的重点问题~([1])。浆膜腔积液是多种疾病的常见临床表现,传统方法采用脱落细胞学检查鉴别良、恶性。但由于多种因素限制细胞学诊断阳性率较低,易漏诊~([2])。此外,细胞形态学诊断在鉴定肿瘤细胞来源和肿瘤细胞类型方面有一定局限性,而免疫细胞化学的检测对鉴别诊断非常有价值~([1])。采用浆膜腔积液离心后的细胞制作     

非小细胞肺癌中小活检和细胞学标本PD-L1检测的应用价值

目的探讨PD-L1蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)小活检、细胞学以及手术标本中的表达,并分析其表达在三者中的一致性,以期了解小活检及细胞学标本检测的可靠性。方法采用免疫组化法检测766例NSCLC中PD-L1(22C3抗体)蛋白表达,结合临床病理资料进行统计学分析;应用Kappa一致性检验分析PD-L1在73对匹配的小活检与手术标本、57对匹配的细胞学与组织学标本中表达的一致性。结果 NSCLC中男性、鳞状细胞癌、晚期、EBUS-TBNA细胞块和淋巴结转移灶中PD-L1更易高表达(P0.05);当以TPS≥50%为阈值时,小活检与匹配的手术标本中PD-L1的表达一致性适中(Kappa=0.483,P0.05),以TPS≥1%为阈值时,两者的一致性适中(Kappa=0.618,P0.05);以TPS≥50%为阈值时,EBUS-TBNA细胞块与匹配的组织学标本中PD-L1的表达一致性适中(Kappa=0.679,P0.05),以TPS≥1%为阈值时,两者PD-L1的表达一致性较好(Kappa=0.795,P0.05);当以TPS≥50%为阈值时,浆膜腔积液细胞块与匹配的组织学标本中PD-L1的表达一致性适中(Kappa=0.465,P0.05),当以TPS≥1%为阈值时,两者的一致性较差(Kappa=0.176,P0.05)。结论 PD-L1在NSCLC小活检、EBUS-TBNA细胞块以及以高阈值(TPS≥50%)评估的浆膜腔积液细胞块标本中的检测结果可靠,可作为免疫治疗的循证学依据;采用较低阈值评估(TPS≥1%)时,浆膜腔积液细胞块标本可能会错误的分类PD-L1表达,需要进行谨慎的重复评估。     

细胞块技术在淋巴造血组织肿瘤诊断及鉴别诊断中的意义

传统细胞学涂片诊断方法有微创、简便、迅速的优点,但其对于淋巴造血组织肿瘤的诊断有一定的缺陷,不仅易误诊为其他恶性肿瘤,而且还难以进一步分型.在临床难以实施骨髓或淋巴结活检的情况下,应用细胞块技术及免疫组织化学检测能弥补这一不足,不仅可以明确肿瘤来源,还可进一步分型,细胞学诊断对于以浆膜腔积液及淋巴结肿大为首发症状的病例尤为重要.我们收集了由细胞学首先诊断为淋巴造血组织肿瘤的病例进行分析,探讨细胞块技术在淋巴造血组织肿瘤诊断及鉴别诊断中的意义.     

浆膜腔积液CEA与其脱落细胞学相关性比较

体内是否患有恶性肿瘤，检测肿瘤标志物往往习惯用血清标本，本文除了用血清标本外，同时测定其浆膜腔积液中CEA浓度，并与其脱落细胞学进行了相关性的比较，现报告如下。     

肾上腺皮质癌18例临床病理及免疫组织化学分析

目的：探讨肾上腺皮质癌临床病理组织学及免疫组织化学特征，重点在诊断与鉴别诊断。方法：常规10％福尔马林液固定标本，HE染色或LSAB法免疫组织化学染色，光镜观察，结果：肾上腺皮质癌标本18例，其中男性11例，女性7例，年龄6－65岁，平均40岁，功能性8例，无功能性10例，病理组织学特点，肿瘤体积大，可有包膜，出血坏死常见，核异型，核分裂象多见，嗜酸细胞＞70％，有包膜，血管及周围组织浸润，远处转移，免疫组织化学染色，未发现肾上腺皮质癌特异性标记抗体。结论：对于肾上腺皮质癌的诊断，应将临床和病理组织细胞形态学主要特征与肿瘤浸润及转移的生物学行为相结合，免疫组织化学具有重要的鉴别诊断作用。     

琼脂石蜡双包埋切片在胸水细胞学诊断中的应用

目的探讨胸水琼脂石蜡双包埋切片在肿瘤细胞学诊断中的意义。方法对44例胸水沉淀物分别进行常规涂片和琼脂石蜡双包埋切片,并对琼脂石蜡双包埋切片进行免疫组织化学染色。结果在确诊的21例恶性胸水中,琼脂石蜡双包埋切片法检测癌细胞的阳性率为90.48%,显著高于涂片法52.38%。11例涂片法阳性的标本中,只有5例做出了病理分类诊断,而19例琼脂石蜡双包埋切片阳性的标本均做出了病理分类诊断。琼脂石蜡双包埋切片的免疫组织化学染色阳性结果定位准确,图象背景清晰。结论琼脂石蜡双包埋切片细胞集中,可以提高恶性胸水癌细胞的检出率和做出分型的病理诊断,利于以及进行免疫组织化学检测。     

血清、浆膜腔积液多项肿瘤标志物检测的诊断价值

多种疾病均可引起浆膜腔积液 ,判断积液的性质对临床的治疗及预后有着重要的意义 ,临床上常抽取积液作常规、生化、找脱落细胞等检查以明确积液的性质 ,但由于这些检查都有局限性 ,难以达到理想的目的 ,近年来应用检测血清及浆膜腔积液中糖链抗原 (ＣＡ5 0、ＣＡ12 5、ＣＡ19- 9) ,癌胚抗原(ＣＥＡ) ,甲胎蛋白 (ＡＦＰ)的含量 ,提高了对积液性质诊断率 ,但单项使用时均有不足 ,我院应用该方法联合检测血清及浆膜腔积液 (指腹水、胸水、心包积液 )中的肿瘤标志物 ,并计算浆膜腔积液 /血清 (ｄ/ｓ)值 ,旨在探讨该方法浆膜腔积液的诊断价值。对…     

中美临床病理技术室现状比较北大核心CSCD

临床病理技术室（clinical pathotechnology laboratory）是医学院校教学医院、各类临床医院及独立诊断实验室临床病理诊断工作的重要组成部分．其任务是应用常规组织学、免疫组织化学、分子病理学等技术,对人体组织、细胞、血液以及其他体液标本进行精细加工．为专业病理医师的正确诊断提供技术保障。     

肺恶性潜能未定血管球瘤1例临床病理观察

目的探讨肺恶性潜能未定血管球瘤(glomus tumor,GT)的临床病理特征及其鉴别诊断。方法对1例肺恶性潜能未定GT的活检标本、术中冷冻标本、术中细胞学刮片及术后标本进行常规病理组织学检查及免疫组化标记,探讨其临床病理特征,并复习相关文献。结果瘤细胞丰富,圆形或卵圆形,密集围绕血管,胞质均匀透明淡染,核圆,较一致,位于中央,部分区细胞增生活跃,偶见核分裂象。免疫表型:瘤细胞SMA和vimentin均阳性,Syn、CD56、Cg A、CK、CK7、Napsin A和TTF-1均阴性,Ki-67增殖指数约10%。结论肺GT非常罕见,活检、冷冻及细胞学诊断困难,确诊主要依据临床病理组织学及免疫表型特征。通过对肺GT进行观察,为进一步提高GT的诊断准确率并分析治疗方案提供临床病理资料。     

细胞病理学在经支气管镜超声引导针吸活检术中的作用

目的 探讨细胞病理学检查在经支气管镜超声引导针吸活检术(EBUS-TBNA)诊断中的作用及用于表皮生长因子受体(EGFR)基因突变分析的可行性.方法 回顾性分析复旦大学附属肿瘤医院2009年4月至2010年9月行EBUS-TBNA的连续病例200例,可取得细胞块的部分标本进行免疫组织化学染色(EnVision法),22例阳性病例还用细胞学标本进行EGFR基因突变分析.结果 200例中140例有组织学对照.细胞学诊断标本不充足24例(12.0％,24/200).良性病变42例(23.9％,42/176),可疑12例(6.8％,12/176),恶性肿瘤122例(69.3％,122/176).与组织学及临床共同诊断对照,细胞学的敏感度94.4％,特异度100％.细胞块及免疫酶标对准确分型及胸腔外转移性肿瘤的诊断有帮助.细胞学标本检测EGFR突变率36.4％ (8/22).结论 EBUS-TBNA细胞学是一种诊断肺癌及其纵隔淋巴结转移的准确、敏感和特异的方法.EBUS-TBNA细胞学标本是进行分子病理学检测的重要材料.     

SysmexXS-800i血细胞分析仪在浆膜腔积液细胞计数及分类中的应用

目的探讨SysmexXS-800i血细胞分析仪检测浆膜腔积液白细胞计数及分类的可行性。方法使用SysmexXS-800i血细胞分析仪和显微镜计数两种方法,测定60例患者浆膜腔积液白细胞总数,对31例血细胞分析仪能分类标本进行染色镜检分类,并比较两种检测结果的关系。结果 SysmexXS-800i血细胞分析仪测定浆膜腔积液中白细胞数的线性好;白细胞数的携带污染率为0.9%;SysmexXS-800i血细胞分析仪在浆膜腔积液细胞计数时精密性较好;两种方法对于测定白细胞总数和分类有良好的相关性（P均〈0.01）。结论 SysmexXS-800i血细胞分析仪能直接用于浆膜腔积液标本的细胞计数及分类,简便、快速、精密、准确,为浆膜腔积液细胞计数分类提供了一种可行性方法,但不能完全替代显微镜计数。