小肝细胞癌患者染色体1p36杂合性缺失的特点

目的: 探讨人类染色体1p36等位基因杂合性缺失在小肝细胞癌(small hepatocellular carcinoma, sHCC)发生发展中的作用及其与临床病理表现的关系。方法：采用PCR非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色技术，对140例信息性sHCC中1p36上9个多态性微卫星标志位点的杂合性缺失(lo     

肝细胞癌染色体1p36杂合子丢失及其与临床病理特征关系的研究

目的 :探讨肝细胞癌 (HCC)在染色体lp36杂合子丢失 (LOH)的特点及其与临床病理表现的相关性。方法 :采用毛细管电泳DNA分析系统 ,对 5 6例HCC中染色体 1p36上 10个微卫星的杂合子丢失进行检测。结果 :5 6例HCC在 1号染色体上 10个基因座发生LOH的总频率为 6 9 6 % (39/ 5 6 ) ,LOH以RIZ最高为 76 7% ,其次为D1S199(5 3 3% )。LOH与血清AFP、HBsAg、肿瘤大小、Edmondson分级和转移等临床病理学参数无明显关系 ;D1S2 893和D1S5 0 7基因座 ,血清HBsAg阳性患者的LOH频率显著高于HBsAg阴性者 (P <0 .0 1) ,D1S199基因座 ,血清AFP阳性者的LOH明显高于血清AFP阴性者 (P =0 0 0 1) ;D1S4 6 8基因座 ,无肝内转移者的LOH显著高于肝内转移者 (P <0 0 1)。结论 :HCC在染色体lp36上存在广泛的LOH ,其在HCC的发生和发展过程中起重要作用 ,而特定基因座的LOH与临床和病理学参数有一定的相关性。     

乳腺导管原位癌与浸润性导管癌染色体微卫星杂合性缺失的比较

目的:研究乳腺导管原位癌与浸润性导管癌染色体3p区域微卫星杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)的发生情况.方法:选取本院2005年9月至2009年2月手术切除石蜡包埋的乳腺癌组织切块43例,应用激光显微切割技术留取组织中乳腺浸润性导管癌(invasive ductal type carci...     

p57KIP2、cyclin E在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的检测p57KIP2、cyclin E蛋白在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达,探讨它们在乳腺癌发生、发展中的作用.方法采用免疫组织化学SP法检测64例IDC、15例乳腺导管内癌(DCIS)、15例癌旁正常乳腺组织中p57KIP2、cyclin E蛋白的表达情况.结果p57KIP2、cyclin E蛋白在IDC与DCIS、IDC与癌旁正常组织中阳性表达之间,cyclin E蛋白在DCIS与癌旁正常组织中阳性表达之间差异均有显著性(P≤0.05,P＜0.01).在IDC中,p57KIP2、cyclin E蛋白阳性表达均与腋窝淋巴结转移相关(P＜0.01,P≤0.05),与患者年龄无关(P＞0.05);cyclin E蛋白阳性表达与肿块大小有关(P＜0.01);p57KIP2与cyclin E之间阳性表达呈负相关(P＜0.01).结论p57KIP2蛋白低表达、cyclin E蛋白高表达可能是乳腺组织恶性转变以及乳腺癌发生淋巴结转移的重要生物学标志,cyclin E蛋白的异常表达是乳腺癌发生的早期事件.联合检测p57KIP2、cyclin E对预测乳腺癌淋巴结转移有临床意义.     

原发性肝细胞癌多染色体杂合性丢失研究

研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）５对染色体３８个位点等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）,ＬＯＨ与肝癌的临床病理改变和肝炎病毒的关系。方法：用ＰＣＲ微卫星多态性分析检测肝癌ＬＯＨ。结果发生高频率ＬＯＨ的位点有染色体１ｐ的Ｄ１Ｓ１８６（这,４８．１％）和Ｄ１Ｓ２４３（１ｐ３６．３,５１．６％）;染色体９ｎ２４的Ｄ９Ｓ５４（６１．８％）,９这的Ｄ９Ｓ１７４７（５２．％）和ＤＤ９Ｓ１７５２（５１．８％）ＷＵＧ ＨＫ     

乳腺浸润性导管癌癌周淋巴管密度及其临床意义

目的探讨乳腺浸润性导管癌(IDC)癌周淋巴管密度(LMVD)与其临床病理特征及预后的关系.方法选取65例临床病理资料完整的乳腺IDC组织,用免疫组化二步法以单克隆抗体D2-40标记淋巴管内皮细胞,光镜下观察癌周LMVD.结果乳腺IDC LMVD为13.17±2.89,明显高于乳腺纤维腺瘤组织(4.21±2.76),两者差异有统计学意义,P=0.000.LMVD与年龄、组织学分级、绝经状态以及雌激素受体状况之间差异无统计学意义,P均＞0.05;与肿瘤最大直径、腋窝淋巴结转移数目和pTNM分期之间差异有统计学意义,P均＜0.05.高LMVD组的5年DFS明显低于低LMVD组,乳腺癌LMVD与患者5年DFS呈负相关.结论MVD在乳腺IDC的扩散转移中起重要作用,可作为选择乳腺IDC治疗方式及预测其淋巴结转移及预后的重要指标.     

T细胞淋巴瘤6号染色体微卫星DNA的杂合性缺失研究

目的：对T细胞淋巴瘤（T—cell lymphoma，TCL）6号染色体上6个微卫星多态标志物进行等位基因杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）分析，以明确该区域是否存在与人类TCL发生发展相关的抑癌基因。方法：选取6号染色体上6个微卫星多态标志D6S251、D6S275、D6S287、D6S267、D6S262、D6S264，采用石蜡组织基因组DNA抽提、PCR扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳、银染法分别检测了42例TCL中肿瘤组织与相应正常组织基因组DNA的LOH状况。结果：42例TCL中13例（13／42，30．95％）至少在1个位点出现LOH，以D6D262最高（10．3％），其次为D6S287（10．0％）和D6S267（7．3％）。而不同临床病理分型的TCL其LOH发生差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：在6号染色体上的6个微卫星标志中D6S287、D6S262和D6S267周围的6q21-6q23压域发生杂合性缺失率较高，位于6q21区编码CyclinC的基因可能是此区与TCL发生发展相关的候选抑癌基因；尤其是6q21-6q22．1区域可能存在与TCL相关的抑癌基因。可能与TCL的发生发展有关。     

乳腺髓样癌与浸润性导管癌临床病理特征和预后比较

 目的　比较乳腺髓样癌（MBC）与浸润性导管癌（IDC）的临床病理特征和预后。方法　回顾性分析经手术治疗的73例MBC和112例IDC患者的临床资料,比较两者的临床病理特征和预后。结果　IDC组腋窝淋巴结转移率为35.6 %（26／73）,较MBC组的50.9 %（57／112）低（P＝0.049）;IDC组雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）阳性表达分别为13.7 %（10／73）、16.4 %（12／73）较MBC组的50.0 %（56／112）、48.2 %（54／112）低（P＝0.000）;IDC组中三阴型乳腺癌比例为68.5 %（50／73）较MBC组的20.5 %（23／112）高（P＝0.000）;MBC组中乳腺X线片摄影表现更为不典型,较多表现为良性肿块（分别为30.1 %、15.2 %,P＝0.015）;MBC组、IDC组5年无瘤生存率分别为78.1 %、83.5 %,5年总生存率分别为79.8 %、84.1 %（P＝0.451、P＝0.308）。结论　超声可能为检出MBC的主要手段,MBC预后未必好于IDC,化疗在MBC治疗中的作用不可忽视。     

乳腺浸润性导管癌Survivin和AIB-1表达及其相关性研究

目的:探讨Survivin及AIB-1蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达,分析两者与浸润性导管癌临床特征的关系以及两者相关性。方法:采用免疫组织化学SP法检测81例乳腺浸润性导管癌组织石蜡标本中Survivin及AIB-1的表达情况。结果:Survivin和AIB-1蛋白在乳腺浸润性导管癌中阳性表达率分别为77.8%(63/81)和80.2%(65/81)。Sur-vivin和AIB-1的表达与患者年龄差异无统计学意义(χ2=1.714,P=0.19;χ2=3.844,P=0.05);Survivin和AIB-1表达与腋窝淋巴结转移有关,(χ2=7.475,P=0.006;χ2=5.806,P=0.016);Survivin表达与肿瘤大小(χ2=5.495,P=0.019)、病理组织学分级(χ2=9.691,P=0.008)和临床分期(χ2=10.223,P=0.001)密切相关,而AIB-1表达与肿瘤大小(χ2=0.047,P=0.828)、组织学分级(χ2=0.579,P=0.749)及临床分期(χ2=2.123,P=0.346)无明显相关性;Sur-vivin与AIB-1表达呈明显正相关,r=0.257,P=0.021。结论:Survivin和AIB-1与乳腺浸润性导管癌侵袭和转移有关,两者联合检测有助于判断预后。     

p53和nm23杂合性缺失及表达异常在晚期胃肠癌转移中的作用

目的：研究原发胃肠肿瘤及其淋巴结转移癌和肝转移癌中p53和nm23基因的杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)及其表达情况,探讨基因杂合性缺失和蛋白表达异常在肿瘤细胞转移中的作用,验证转移进展模型的可信性。方法：用多聚酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)银染法和免疫组织化学方法分析21例原发癌、16例淋巴结转移癌和21例肝转移癌中p53和nm23基因的杂合性缺失及其表达状况。结果：原发灶、淋巴结转移组织和肝脏转移组织中,p53位点的LOH发生率分别为37.5%、50.0%和68.8%(P＞0.05)．nm23的LOH发生率分别为26.7%、36.4%和40.0%(P＞0.05)；突变型p53蛋白表达率依次为85.7%、87.5%和90.5%(P＞0.05),nm23蛋白表达率分别为76.2%、50.0%和42.9%(肝转移与原发灶相比,P＜0.05)。结论：肿瘤发展过程中,遗传学异常逐步积累,最终转移发生,本研究结果符合转移进展模型理论；p53和nm23的异常改变促进胃肠癌的发展和转移,是肿瘤发展后期的重要分子事件。     

High rates of loss of heterozygosity on chromosome 19p13 in human breast cancer

We have recently discovered that the nuclear matrix protein SAFB is an oestrogen receptor corepressor. Since it has become clear that many steroid receptor cofactors play important roles in breast tumorigenesis, we investigated whether SAFB could also be involved in breast cancer. To address this question, the gene locus was examined for structural alterations in breast cancer tissue. Laser capture microdissection was used for isolating DNA from paired primary breast tumour and normal tissue specimens, and the loss of heterozygosity (LOH) at chromosome 19p13.2-3 was determined by use of microsatellite markers. LOH was detected at the marker D19S216, which colocalizes with the SAFB locus, in specimens from 29 (78.4%) of 37 informative patients. The peak LOH rate occurred at D19S216 near the SAFB locus, with LOH frequencies ranging from 21.6% to 47.2% at other markers. The finding of a very high LOH rate at the marker D19S216 strongly indicates the presence of a breast tumour-suppressor gene locus. While preliminary findings of mutations in SAFB suggest that this indeed may be a promising candidate, other potential candidate genes are located at this locus.     

An astroblastoma case associated with loss of heterozygosity on chromosome 9p

The tumorigenesis of astroblastomas has not yet been elucidated on the basis of histopathological studies, and genetic studies may be useful for obtaining additional information regarding the tumorigenesis of these tumors. Here, we report an astroblastoma case in which a genetic analysis was performed. A 16-year-old female with a progressive headache was found to have a demarcated cystic tumor with a mural nodule in the right parietal lobe. Total removal of the tumor was achieved and a histological examination verified that the tumor was an astroblastoma. A genetic analysis using microsatellite markers revealed loss of heterozygosity (LOH) on chromosome 9p. The postoperative course was uneventful and, to date, she has been followed up for 2 years with no signs of recurrence. This is the first reported case of an astroblastoma in which LOH was detected on 9p. Based on this result, the tumorigenesis of astroblastomas is discussed.     

The clinical value of microsatellite instability and a loss in heterozygosity in sporadic breast cancers

We analyzed loss of heterozygosity (LOH) and microsatellite instability (MI) in 108 cases of sporadic breast cancers using 22 microsatellite markers on 12 chromosomes. LOH was frequently seen in 1p (13%), 6p (18%), 8p (11%), 11p (18%), 13q (21%), 16q (31%), 17p (44%) and 17q (29%). Individual patients were scored according to the degree of LOH at the above eight chromosomal markers. Patients with no LOH were scored as 1, patients with one to three LOH were scored as 2, and patients with four or more LOH were scored as 3. A high LOH score correlated with a high histological grade (p = 0.019) and a poor prognosis (p = 0.0035). Eleven (10.2%) of 108 patients with breast cancer showed MI, with 6 cases showing MI at a single locus and 5 at multiple loci. Of the 11 Mi-positive patients only one had lymph node involvement (p = 0.015), none had histological grade 3 disease, and Mi-positive patients tended to have a better prognosis than Mi-negative ones. These data suggest that MI may be an early event in mammary tumorigenesis, and that LOH occurs at a later stage. The LOH score may be a useful prognostic marker of operable breast cancer.     

胶质母细胞瘤3号染色体杂合性丢失的研究

目的　寻找胶质母细胞瘤 (GBM) 3号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失 (LOH)区域 ,为发现和定位肿瘤抑制基因 (TSG)提供线索和依据。方法　采用荧光标记的引物和 377型DNA序列自动分析仪 ,分析了 2 0例GBM 3号染色体上 2 3个微卫星多态性标记的LOH。结果　在 50 % (1 0 / 2 0例 )GBM的 3号染色体上观察到LOH ,在 2 5 .6 % (88/ 344)可提供信息位点存在LOH。其中 3q的LOH率明显高于 3p ,3q和 3p的LOH率分别为 50 % (1 0 / 2 0 )、35 % (7/ 2 0 )。在 3q上的下列位点检测到较高的LOH率 :3q2 2 2 3上的微卫星位点D3s1 569(35 .3 % )、3q2 4 2 7上的D3s1 61 4 (42 .9% ) D3s1 565(35 .3 % ) ;在3p1 4 .1 1 4 .3上D3s1 2 89的LOH率也较高 (33 .3 % )。 结论　 3号染色体可能在GBM的分子发病机制中发挥着重要作用 ,3p1 4 .1 1 4 .3上的D3s1 2 89和 3q2 2 2 3上的D3s1 569位点、3q2 4 2 7上的D3s1 61 4 D3s1 565位点间区域可能存在与GBM相关的肿瘤抑制基因     

16号染色体短臂散发性结直肠癌相关基因的精细定位

目的对散发性结直肠癌16号染色体短臂杂合缺失区间(LOH)进行精细定位,以期发现新的肿瘤相关基因.方法用覆盖16号染色体短臂的5个微卫星标记对83例散发性结直肠癌进行杂合缺失分析,初步定位候选区域后再用另5个微卫星标记对这一区域进行精细定位.PCR扩增相应位点的基因组DNA,并用ABI 377自动测序仪进行电泳.用Genescan 3.7 和Genotype 3.7软件进行遗传位点扫描及杂合缺失分析.杂合缺失与临床病理参数的关系比较采用χ2检验.结果 16号染色体短臂的平均杂合缺失率为24.58%,仅有一高频缺失位点D16S404,杂合缺失率达52.73%.对其精细定位后发现,最小杂合缺失区间应位于D16S406和D16S3126之间,约1.1 cM.而这一区间的杂合缺失与Dukes分期、肿瘤分化及淋巴结转移等无关.结论通过散发性结直肠癌16号染色体短臂杂合缺失的精细定位研究,发现了D16S406～D16S3126之间精度达1.1 cM的肿瘤相关基因候选区域.在这一区间内可能的肿瘤抑制基因为USP7基因,相邻的候选肿瘤抑制基因有EMP2.对这2个基因的深入研究可能明确新的散发性结直肠癌相关基因.     

鼻咽癌染色体3p21-26的等位基因杂合性丢失研究

目的细胞遗传学研究表明,３号染色体缺失是鼻咽癌常见的染色体异常之一。分子生物学研究表明,染色体３ｐ在鼻咽癌中出现高频率的等位基因杂合性丢失（ＬＯＨ）。本研究将进一步确定鼻咽癌３ｐ等位基因杂合性丢失的频率及范围。方法应用位于３ｐ２１２６区域１６个微卫星多态性位点,对２４例低分化鼻咽癌患者进行了ＬＯＨ分析。结果２４例患者中有１６例存在杂合性丢失（６６．７％）。丢失频率最高的两个位点是Ｄ３Ｓ１５６０（５０％,１１／２１）和Ｄ３Ｓ１６２０（５０％,９／１８）。在具有丢失的１６例患者中,８例显示为１个连续的多个相邻位点的杂合性丢失区域,５例患者存在２个或２个以上的杂合性丢失区。病例１,３,４,７,８,１０,１６,１７,１８,１９和２２在Ｄ３Ｓ１５９７和Ｄ３Ｓ１２９７之间,表现为一个不同大小的杂合性丢失区。结论最小共同丢失区位于Ｄ３Ｓ１５６０Ｄ３Ｓ１６２０（３ｐ２５．３２６．２）之间,提示该区域有一个尚未克隆的、与晚期鼻咽癌明显相关的抑癌基因。     

CD31标记的微血管密度在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义

目的：探讨CD31标记的微血管密度（ MVD-CD31）在乳腺浸润性导管癌组织中表达的临床意义。方法应用SP免疫组织化学法分别检测2012年5~10月河北医科大学第四医院乳腺中心诊治的乳腺浸润性导管癌120例及乳腺纤维腺瘤30例组织标本中的MVD-CD31的表达,并应用t检验和方差分析研究乳腺浸润性导管癌组织中MVD-CD31与临床生物学特征和Ki67的关系。结果乳腺浸润性导管癌组织中的 MVD-CD31高于纤维腺瘤组织（16．586＆#177;9．528比10．403＆#177;3．052,t=3．724, P=0．005）。乳腺浸润性导管癌组织中MVD-CD31的表达与肿瘤直径、TNM分期有关（ t=3．761,P=0．000;F=2．983, P=0．032）,与月经、有无淋巴结转移、有无脉管瘤栓、ER、PR、HER-2表达及组织学分级无关（t=0．754、-0．533、1．633、1．853、1．040、0．276, F=1．937; 〉0．05）。三阴性乳腺浸润性导管癌组中MVD-CD31表达明显高于非三阴性组（t=2．078,P=0．043）。乳腺浸润性导管癌患者Ki67＆gt;14%组的MVD-CD31表达显著高于Ki67≤14%组（t=-2．287, P=0．030）, MVD-CD31和Ki67表达呈正相关（r=0．356, P=0．011）。结论 MVD-CD31可以反映乳腺浸润性导管癌的生物学行为,其检测结果对乳腺癌患者的病情评估、判断预后具有重要意义。     

Prognostic value of p53 in breast invasive ductal carcinoma: an immunohistochemical study on 942 cases

Summary P53 immunohistochemical detection using DO7 antibody on 942 cases of previously untreated breast invasive ductal carcinoma (IDC) with a median follow up of 117.9 months (89 to 160) was performed.Three hundred and three (32%) tumors were positive. All positive tumors were taken into account, positivity ranging from 1 to 100% of tumoral cells. The Chi square test showed significant negative correlation between p53 positivity and age (p = 0.01), estrogen receptor status (p < 0.0001), and progesterone receptor status (p = 0.0005), and significant positive correlation with tumor grade according to the Scarff, Bloom and Richardson system (SBR Grade) (p < 0.0001). There was no significant association with tumor size or nodal status.Concerning the univariate analysis, in the whole group and node-positive group (n = 544) p53 positivity was highly significant for overall survival (OS) (p < 0.0001 and p = 0.0003), disease-free interval (DFI) (p = 0.0001 and p = 0.0005), and metastasis-free interval (MFI) (p < 0.0001 and p = 0.0003). In the node-negative group (n = 398), p53 was significant with respect to OS (p = 0.01) and DFI (p = 0.04). P53 positivity came out as an independent prognostic parameter in the multivariate analysis in the whole group and the node-positive group, though of minor significance compared to axillary lymph node status, SBR grade, progesterone receptor status, and tumor size.     

显微切割法对肝细胞癌抑癌基因杂合性缺失的研究

目的 通过对肝细胞癌（HCC）抑癌基因（tumor suppressor genes,TSGs)杂合性缺失（loss of heterozygosity,LOH)谱系特点的分析，进一步了解HCC发生过程中多基因变异的特点。方法 采用显微组织切割法从石蜡包埋的组织切片中提取基因组DNA直接测序，对33例信息性HCC进行了6种TSGs(APC、DCC、MCC、OGC1、p53和RBI1）的LOH检测。结果 LOH的总体发生率为36.4％,其中p53:80.0%、OGG1：50.0%、APC：41.7%、RB1:20.0%、DCC:0.0%、MCC:0.0%。结论 在HCC的发生和发展过程中有多基因变异的参与，其中p53、OGG1和APC基因在HCC的发生中起重要作用，RB1的作用次之，而DCC和MCC基因的作用可能较小。