氯乙烯接触工人的染色体损伤状况及其影响因素

[目的]3年随访观察氯乙烯接触工人的染色体损伤状况,并探讨其与性别、年龄、氯乙烯暴露时间、吸烟、饮酒、氯乙烯代谢酶多态等因素间的关系。[方法]从2004年4月至2007年4月对某化工厂77名氯乙烯接触工人进行随访,采用外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核（CBMN）试验检测染色体损伤状况,比较3年内微核细胞率变化情况;采用PCR-RFLP法检测CYP2E1、CYP2D6基因多态;采用PCR法检测GSTT1、GSTM1基因缺失情况。[结果]2007年所检测的微核细胞率高于2004年,两者相差3.63％。（P〈0.05）;多因素Poisson回归分析表明,微核细胞率有随工龄的延长而升高的趋势,CYP2E1（CG／CC）基因型和CYP2D6（CG／GG）基因型为危险因素,两者的相对危险度（frequency ratio,FR）分别为1.29（95％CI：1.02-1.63）和1.40（95％CI：1.12-1.77）;未见GSTT1和GSTM1基因型对微核细胞率变化有明显影响。[结论]氯乙烯作业工龄、CYP2E1和CYP2D6基因等因素与氯乙烯致染色体损伤进程有关。     

氯乙烯作业工人染色体损伤及其遗传易感性

目的 探讨氯乙烯(VCM)致染色体损伤与DNA修复基因和代谢酶基因多态间的关系.方法 收集上海某化工厂402名VCM接触工人健康体检资料、人口学资料(年龄和性别)、生活方式(吸烟、饮酒)和职业接触等因素,评估个人VCM累积接触剂量并分组.采集静脉血3 ml,采用外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核试验(CBMN)检测染色体损伤,采用聚合酶链式反应(PCR)检测GSTT1、GSTM1基因缺失情况,采用PCR-限制性片段长度多态性技术(RFLP)检测其他基因多态.结果 多元Poisson回归分析结果表明,中(4000～40000 mg)、高(＞40000 mg)VCM接触剂量组染色体损伤的风险明显高于低剂量组,调整后的FR值分别为1.19(1.06～1.34)和1.20(1.06～1.38),差异有统计学意义(P值分别为0.003和0.01);携带CYP2E1和XRCC1 Arg280His突变型基因的个体微核率明显高于野生型个体,调整后的FR值分别为1.12(1.02～1.23)和1.13(1.02～1.25),差异有统计学意义(P值均为0.02);携带GSTP1Val/Val和ALDH2 Glu/Glu基因型个体微核率明显高于其他基因型个体,调整后的FR值分别为0.74(0.59～0.94)和0.87(0.79～0.95),差异有统计学意义(P值分别为0.01和0.003).结论 VCM致染色体损伤与VCM累积接触剂量增高及GSTP1 Val/Val、CYP21E1 c1c2/c2c2、ALDH2 Glu/Glu、XRCC1 280His/His 或Arg/His基因型多态性等因素有关.开展VCM致染色体损伤与遗传易感性方面的研究,有助于VCM致癌机制的阐明,而研究中易感性多态位点的发现也可以为识别易感人群提供理论依据.     

氯乙烯遗传毒性及其基准剂量在职业接触限值中的应用

目的探讨氯乙烯累积暴露造成的遗传毒性效应及其可能的影响因素,建立氯乙烯接触与遗传损伤效应间的剂量-反应关系,并估算氯乙烯致遗传毒性的基准剂量值。方法选择上海某氯碱化工厂氯乙烯作业工人为氯乙烯接触组(229人),对照组138人,使用调查问卷收集个人健康信息,采用胞质分裂阻滞微核评价外周血淋巴细胞DNA损伤;计算基准剂量(BMD),推算基准剂量的95%低限水平(BMDL)。结果对照组微核计数值为(1.23±0.11)‰,接触组微核计数值为(3.73±0.16)‰,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);氯乙烯累积接触量与微核率之间存在剂量-反应关系,得到BMD10的范围在7.20～9.64 mg/(m3.年),基准剂量下限值介于1.71～3.614mg/(m3.年)之间[2.86 mg/(m3.年)]。将工作年限按40年计,氯乙烯的时间加权平均阈限值应为0.072 mg/(m3.年)。结论氯乙烯作为确定的致癌物质,氯乙烯累积接触量与氯乙烯作业工人微核率之间存在相互关联;基于遗传毒性的职业接触限值的研究,有助于推动以保护职业有害物质接触人群为目标的职业安全制度的修订。 更多还原     

一种多观察终点的生物检测方法-胞质分裂阻滞微核试验

应用于职业暴露人群早期遗传损伤的生物监测要求灵敏、快速、简便、易行和费用低。但迄今为止,还没有一种方法能完全满足这些要求。目前应用较多的用于检测DNA损伤和染色体损伤方法均为一种方法观察一个试验终点。而观察多个终点时需将几种方法组合,从而增加了工作量。目前发展     

氯乙烯接触工人DNA损伤与代谢酶基因多态关系研究

目的探讨氯乙烯(VCM)所致DNA损伤与VCM代谢酶多态间的关系。方法彗星实验测DNA损伤,并按DNA损伤情况将工人分为DNA损伤组和对照组,采用病例-对照设计,PCRRFLP测CYP2E1c1c2、mEH4His139Arg基因多态;PCR法测GSTT1、GSTM1缺失情况。结果CYP2E1c1c2和c2c2基因型与DNA损伤显著相关(P<0.01)。累积接触剂量高和低的个体同时具CYP2E1c1c2c2c2基因型,其DNA损伤发生率均显著高于对照,差异具统计学意义(OR4.92,95%CI1.35～13.85和OR2.57,95%CI1.01～6.59)。结论VCM累积接触剂量和代谢酶CYP2E1基因型与VCM诱导的DNA损伤有关。     

砷暴露对淋巴细胞的遗传损伤

以不同浓度砷(50、100、200、400μg/L)对正常人淋巴细胞进行染毒后,采用胞质分裂阻滞微核试验和染色体畸变试验研究砷暴露对淋巴细胞的遗传损伤。砷染毒72 h后,双核淋巴细胞微核率、核分裂指数、核质桥、核芽与砷暴露浓度均呈剂量-反应关系。提示在本研究染毒剂量下,亚砷酸钠对人正常淋巴细胞有一定的遗传损伤作用。     

1,3-丁二烯作业工人XRCC4基因多态性与染色体损伤的关系

目的探讨DNA双链断裂修复酶XRCC4基因多态性与1,3-丁二烯(BD)作业工人染色体损伤易感性的关系。方法选取189名BD作业工人和83名行政人员作为研究对象,采用(CBMN)评价个体外周血淋巴细胞染色体损伤水平,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析XRCC4基因3个单体型标签单核苷酸多态性位点(A245G、T1394G和C1475T),Clark运算法确定个体XRCC4基因的单体型等位基因和单体型对,协方差分析校正相关影响因素,比较具有不同XRCC4基因型或单体型对的个体外周血淋巴细胞CBMN率的差异。结果在校正年龄、性别、吸烟、饮酒影响因素后,BD作业工人CBMN率为(7.17±5.41)‰、核质桥(NPB)率为(1.20±1.43)‰、核芽(NBUD)率为(2.87±2.44)‰,对照组的CBMN率为(3.10±2.56)‰、NPB率为(0.24±0.66)‰、NBUD率为(1.68±1.92)‰,差异有显著性(P0.01);暴露组中XRCC4A245G位点AA基因型个体NPB率显著高于AG基因型或GG基因型个体(P0.05);按年龄分层39岁组中XRCC4T1394G位点TT基因型个体CBMN率高于GG基因型个体(P0.01)。结论 XRCC4A245G和T1394G位点的多态性能影响职业性BD暴露导致的外周血淋巴细胞染色体损伤的易感性。     

淋巴细胞胞质分裂阻滞微核法与常规法的对比

人外周血淋巴细胞微核作为检测人群遗传毒性影响的指标,在国内应用较多。在射线接触中胞质分裂阻滞微核试验（ＣＢ）法已有成功的应用,但对于化学因素,ＣＢ法能否提高这一指标的敏感性和稳定性,则报道不多。为此,我们进行了本研究。一、材料与方法１．血样：取自３例...     

DNA损伤修复基因与遗传易感性

美国国家环境卫生科学研究所在人类基因组计划 (ＨＧＰ)顺利进展后 ,于 1997年底启动了“环境反应基因及其对人类健康的影响”的研究项目 ,即环境基因组计划 (ＥＧＰ) ,旨在阐明基因和环境对疾病的影响和它们之间的相互作用。该计划列举了11大类共 76种再测序的环境应答基因 ,ＤＮＡ修复基因被列为第一位 ,其中 2 1种ＤＮＡ修复酶基因被列为重点研究对象。人类基因组与其他物种的基因组的功能一样均是编码信息从而保护遗传信息的完整性[1] 。ＤＮＡ修复酶始终监视染色体并校正癌基因和有细胞毒性的化学物所致的核苷酸残基的破坏 ,若没有ＤＮ…     

铅暴露工人相关基因甲基化与遗传损伤关系的研究

目的研究铅暴露工人相关基因甲基化与遗传损伤的关系,从而探讨铅致遗传损伤的机制。方法选择50名铅暴露工人和30名非铅暴露工人,应用胞质分裂阻滞微核试验(CBMN)和彗星试验检测工人遗传损伤情况,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测ALAD、MGMT、hMLH1、BRCA1 4个基因启动子区的甲基化状态。结果铅暴露组微核细胞率、彗尾长度均大于对照组,差异有统计学意义(P0.05),且微核细胞率有随着血铅水平升高而升高的趋势(P0.05);彗星发生率在血铅400～600μg/L组及600μg/L组与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。铅暴露组ALAD、MGMT、hMLH1、BRCA1基因启动子区甲基化阳性率均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.001);上述4个基因发生甲基化者的微核细胞率显著高于未发生甲基化者(P0.05)。结论铅暴露可引起工人遗传损伤,且血铅水平越高损伤越重。上述4个基因甲基化阳性率与铅暴露工人的遗传损伤程度有明显关联性。     

XRCC1、hOGG1和MGMT基因多态性与氯乙烯接触工人染色体损伤的关系

[目的]探讨DNA损伤修复基因X线修复交叉互补基因（1X-ray repair cross complementing gene 1,XRCC1）、人8-羟基鸟苷糖苷酶1基因（human 8-oxoguanine DNA glycosylase-1,hOGG1）以及O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因（O6-methyl-guanine DNA methyltransferase,MGMT）的多态性与氯乙烯致人外周血淋巴细胞染色体损伤的关系。[方法]采用胞质阻滞微核试验方法（CBMN）评价313名氯乙烯接触工人和141名对照工人染色体损伤水平,应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）对接触工人XRCC1基因Arg194Trp、Arg280His和Arg399Gln 3个位点和hOGG1基因Ser326Cys位点及MGMT基因Leu84Phe位点进行多态性检测。采用SAS软件包进行统计分析,计算率比（frequency ratio,FR）及其95%可信限（95%confidence interval,95%CI）。[结果]本研究表明,氯乙烯接触工人的微核率为（4.86±2.80）‰,显著高于对照人群的微核率（1.22±1.24）‰（P〈0.01）。携带hOGG1 326 Ser/Cys基因型（FR=1.21,95%CI：1.02~1.46;P〈0.05）、XRCC1 194Arg/Trp基因型（FR=1.12,95%CI：1.00~1.25;P〈0.05）和XRCC1 280 Arg/His和His/His基因型（FR=1.12,95%CI：1.00~1.26;P〈0.05）的个体均易发生染色体损伤。在易感性的双体型中,携带CGA/CAG的个体相比携带野生型CGG/CGG的个体微核率明显升高（FR=1.67,95%CI：1.19~2.23;P〈0.05）。接触组人群的微核率随着年龄的增长显著升高（FR=1.13,95%CI：1.00~1.28;P〈0.05）。对XRCC1基因型进行联合分析,发现随着剂量增加和携带突变等位基因数目增多,其染色体损伤风险增大。[结论]胞质阻滞微核可以作为氯乙烯接触工人早期健康损害的敏感指标,基因型XRCC1 Arg194Trp、Arg280His、hOGG1 Ser326Cys和双体型CGA/CAG以及年龄增长可能对氯乙烯致工人染色体损伤的过程产生影响。氯乙烯累积接触水平与XRCC1基因型也可能存在一定的交互作用。     

氯乙烯暴露工人代谢酶基因多态性与DNA损伤的关系研究

目的探讨氯乙烯(VCM)暴露工人代谢酶基因多态性与外周血淋巴细胞DNA损伤的关系。方法应用彗星实验测定145名VCM暴露工人外周血淋巴细胞DNA损伤情况,并按DNA损伤情况将工人分为DNA损伤组和对照组,采用病例-对照设计,PCR-RFLP测GSTP1A/G、CYP2E1c1/c2、CYP2D6LG/C基因多态;PCR法测GSTT1、GSTM1缺失情况。同时,通过问卷调查的方式了解被调查者的年龄、性别、吸烟、饮酒和个人职业暴露史。结果GSTP1 AA和AG GG基因型在DNA损伤组和对照组间的分布频率分别为60.7%,39.3%和78.7%,21.3%,经检验,两组间的分布差异有统计学意义(P<0.05);GSTT1、GSTM1、CYP2E1和CYP2D6L各基因型的分布频率在DNA损伤组和对照组间的差异无统计学意义(P>0.05)。多元Logistic回归分析的结果表明,GSTP1多态在氯乙烯所致DNA损伤中的作用与单因素研究结果一致,携带GSTP1 AG GG基因型的个体较携带GSTP1 AA基因型个体DNA损伤的风险性升高(OR=2.48,95%CI:1.11~5.53,P<0.05);其他因素两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论代谢酶GSTP1基因型与VCM诱导的DNA损伤有关,携带GSTP1 AG或GG基因型个体可能为氯乙烯致DNA损伤的易感人群。     

焦炉作业工人芳烃受体单核苷酸多态性及其单体型与染色体损伤的关系

目的研究芳烃受体(AHR)基因多态性与焦炉作业工人外周血淋巴细胞染色体损伤易感性的关系。方法选取89名焦炉作业工人(暴露组)和60名无职业性多环芳烃及射线暴露的工人(对照组)为研究对象。测定尿中1-羟基芘反映多环芳烃暴露内剂量,用双核淋巴细胞微核评价个体外周血淋巴细胞染色体损伤,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析AHR基因rs6960165及rs2282885位点多态性,利用PHASE2.1软件经Bayesian法计算单体型。用协方差统计方法分析不同基因型及单体型对与染色体损伤水平的关系。结果暴露组尿1-羟基芘水平显著高于对照组(P<0.01),暴露组外周血淋巴细胞微核率显著高于对照组(P<0.01)。在校正年龄和自然对数转换后的1-羟基芘后,暴露组AHR基因rs6960165位点多态性与微核率有关联(P=0.014),未发现对照组AHR基因rs6960165位点多态性与微核率有关联(P=0.586);未发现暴露组和对照组的AHR基因rs2282885位点多态性与微核率有关联(P=0.308和P=0.415)暴露组AHR基因不同单体型对与微核率有关联(P=0.007),未发现对照组AHR基因不同单体型对与微核率有关联(P=0.768)。结论AHR基因rs6960165位点多态性及AHR基因单体型是影响焦炉作业工人外周血淋巴细胞染色体损伤水平易感性的可能因素之一。     

氯乙烯致大鼠DNA损伤与DNA损伤修复酶和p53蛋白的表达

目的研究氯乙烯（VC）对大鼠原代肝细胞DNA的损伤作用,及对DNA损伤修复酶（rMSH2和XPD）和抑癌蛋白p53表达的影响;探索VC所致DNA损伤的修复和调控机制。方法大鼠腹腔注射VC,隔日染毒,染毒剂量分别为5,10和20mg／kg。单细胞凝胶电泳测肝细胞DNA损伤,免疫组化法测肝脏DNA损伤修复酶的表达。结果彗星细胞数目随染毒剂量增加而增加,彗星发生率与VC染毒剂量问存在明显的相关关系。rMSH2表达随染毒剂量增加而减少．XPD和p53的表达随染毒剂量增加而增加。VC致DNA损伤与XPD表达具有相关关系。结论VC可导致肝细胞DNA发生损伤,且存在剂量一反应关系;DNA损伤修复酶和p53蛋白参与修复VC所致的DNA损伤。     

焦炉作业工人核苷酸剪切修复酶基因多态性与染色体损伤的关系

目的研究核苷酸剪切修复酶基因多态性与焦炉作业工人外周血淋巴细胞染色体损伤易感性的关系。方法以140名焦炉作业工人(暴露组)和66名医务人员(对照组)作为研究对象,测定尿中1羟-基芘浓度反映多环芳烃暴露内剂量,用双核淋巴细胞微核评价个体外周血淋巴细胞染色体损伤,采用聚合酶链-限制性片段长度多态性方法分析ERCC1、ERCC2、ERCC4、ERCC5、ERCC6基因多态性,多元统计方法分析不同基因型与染色体损伤水平的关系。结果在校正年龄、性别、mEH基因型、自然对数转换后的尿1羟-基芘水平后,暴露组中ERCC1基因19007位点CC基因型个体微核率[(1.05±0.68)%]显著高于CT基因型[(0.81±0.66)%](P=0.01),或TT[(0.66±0.37)%](P=0.05),或CT+TT基因型个体[(0.75±0.63)%](P=0.004)。ERCC6基因3368位点AA基因型个体微核率[(1.00±0.69)%]显著高于AG[(0.67±0.42)%](P=0.05),或AG+GG基因型个体[(0.66±0.41)%](P=0.02)。进一步按焦炉工年龄均数(39.1岁)分层,发现在高年龄组ERCC1 C19007T和ERCC6 A3368G位点多态性与染色体损伤水平相关联;另外,高年龄组中ERCC2 G23591A位点GA基因型个体微核率[(1.40±0.63)%]高于GG基因型个体[(0.98±0.59)%](P=0.01)。结论ERCC1 C19007T、ERCC6 A3368G以及ERCC2 G23591A位点的多态性能够影响职业性多环芳烃暴露导致的外周血淋巴细胞染色体损伤水平。     

Inhalative Exposure to Vanadium Pentoxide Causes DNA Damage in Workers: Results of a Multiple End Point Study

Background

Inhalative exposure to vanadium pentoxide (V₂O₅) causes lung cancer in rodents.

Objective

The aim of the study was to investigate the impact of V₂O₅ on DNA stability in workers from a V₂O₅ factory.

Methods

We determined DNA strand breaks in leukocytes of 52 workers and controls using the alkaline comet assay. We also investigated different parameters of chromosomal instability in lymphocytes of 23 workers and 24 controls using the cytokinesis-block micronucleus (MN) cytome method.

Results

Seven of eight biomarkers were increased in blood cells of the workers, and vanadium plasma concentrations in plasma were 7-fold higher than in the controls (0.31 μg/L). We observed no difference in DNA migration under standard conditions, but we found increased tail lengths due to formation of oxidized purines (7%) and pyrimidines (30%) with lesion-specific enzymes (formamidopyrimidine glycosylase and endonuclease III) in the workers. Bleomycin-induced DNA migration was higher in the exposed group (25%), whereas the repair of bleomycin-induced lesions was reduced. Workers had a 2.5-fold higher MN frequency, and nucleoplasmic bridges (NPBs) and nuclear buds (Nbuds) were increased 7-fold and 3-fold, respectively. Also, apoptosis and necrosis rates were higher, but only the latter parameter reached statistical significance.

Conclusions

V₂O₅ causes oxidation of DNA bases, affects DNA repair, and induces formation of MNs, NPBs, and Nbuds in blood cells, suggesting that the workers are at increased risk for cancer and other diseases that are related to DNA instability.     

短期苯暴露对工人外周血象及淋巴细胞染色体的损伤

[目的]探讨短期苯暴露对鞋厂工人外周血象及淋巴细胞染色体的损伤。[方法]测定作业场所空气中苯浓度,检查203名苯暴露工人（暴露组）与当地未暴露苯和其他有毒有害物质的178名健康工人（对照组）的血常规指标。应用外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核（CBMN）试验结果评价研究对象外周血淋巴细胞染色体损伤。[结果]暴露组外周血红细胞计数（RBC）、血细胞比（HCT）、血小板计数（PLT）、红细胞分布活力（RDW）降低的阳性率和平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）异常率与对照组比较,差异均有统计学意义,χ2值分别为38．21、21．37、18．02、22．17、36．59、41．23,P均〈0．01;将暴露组按接苯工龄分为≤8个月、9～15个月和16～24个月3组,中性粒细胞（GRAN）减少的阳性率随着工龄的增长而有增高的趋势,且差异具有统计学意义（F=7．47,P〈0．05）;进一步按性别分类,发现暴露组女工HCT、平均红细胞体积（MCV）、PLT、血红蛋白含量（HGB）、RDW异常率明显高于男工,矿值分别为21．04、36．26、6．94、71．62、12．91,P均〈0．01。暴露组CBMN率[（2．98±1．49）‰]明显高于对照组[（0．39±0．72）‰],P〈0．001。[结论]短期苯暴露对作业工人的血液系统及染色体损伤有一定影响,并且上述指标的改变早于白细胞的异常,在职业性苯中毒的早期诊断中具有一定意义。     

1，3-丁二烯致染色体损伤的遗传易感性与CYP2E1和GSTs基因多态性关系

[目的]探讨代谢酶基因CYP2E1和GSTs的基因多态性与1,3-丁二烯致外周血淋巴细胞染色体损伤易感性的关系。[方法]采用胞质分裂阻滞微核试验方法（CBMN）评价166名丁二烯接触工人和41名对照组染色体损伤水平,应用PCR-RFLP测CYP2E1 clc2基因多态,PCR法测GSTT1和GSTM1缺失情况。[结果]接触组和对照组的微核发生率分别为（3．23±2．49）％。和（1．22±1．19）％。,差别有统计学意义（P〈0．01）。多因素Poisson回归分析发现CYP2E1 c1c2／c2c2基因型和GSTMl非缺失型与染色体损伤相关（分别为矿=14．39,P〈0．01和χ^2=4．23,P〈0．05）。没有发现年龄、工龄、性别、吸烟和饮酒等与微核率之间的关系。[结论]双核淋巴细胞微核数可以作为1,3．丁二烯接触早期健康损害的指标。CYP2E1 c1c2／c2c2基因型、GSTM1非缺失型与1,3-丁二烯诱导的染色体损伤有关。     

DDB2基因单核苷酸多态性与焦炉工外周血淋巴细胞DNA损伤的关联

[目的]探讨DDB2基因单核苷酸多态性与焦炉工外周血淋巴细胞DNA损伤的关联。[方法]选取焦化厂在岗焦炉工325名作为接触组,选择同厂无职业多环芳烃暴露者150人作为对照组,使用反向高效液相色谱法测定尿1-羟基芘含量,采用碱性单细胞凝胶电泳技术检测淋巴细胞DNA损伤情况,应用TaqMan探针荧光标记聚合酶链反应方法对DDB2基因进行分型。[结果]接触组尿1-羟基芘含量[（4.41±1.06）μmol/mol肌酐]高于对照组[（3.33±1.03）μmol/mol肌酐],差异有统计学意义（P〈0.05）;接触组外周血淋巴细胞彗星尾距（olive tail moment,OTM）[0.41（0.08～4.28）]也高于对照组[0.31（0.08～3.16）],差异有统计学意义（P〈0.05）。两组中DDB2基因SNPs的不同基因型携带者OTM差异均无统计学意义。分层结果表明,对照组年龄〈39岁个体中,启动子区rs2029298位点AA基因型携带者DNA损伤高于GG基因型携带者,差异有统计学意义（P〈0.05）;其他差异均无统计学意义。[结论]DDB2基因多态性对焦炉工外周血淋巴细胞DNA损伤程度无影响,在对照组低年龄个体中rs2029298位点AA基因型携带者的DNA损伤程度高于GG基因型携带者。