姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响

目的 探讨姜黄素对人胃癌细胞SGC-7901的影响.方法 人胃癌细胞SGC-7901接受不同浓度姜黄素处理,然后采用MTT法测定人胃癌细胞SGC-7901的增殖,Boyden chamber侵袭小室测定细胞侵袭能力,划痕实验测定细胞迁移能力.结果 姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,且作用与药物浓度有关(P＜0.05),浓度越大,抑制能力越强;姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901侵袭、迁移,且作用与药物浓度有关(P＜0.05),浓度越大,抑制能力越强.结论 姜黄素能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖、侵袭、迁移,且这种作用具有剂量依赖性.     

miR-138-5p通过靶向TCF3实现对胃癌细胞SGC-7901侵袭和迁移的调控

目的:探讨miR-138-5p 与T细胞因子3 基因（T cell factor 3, TCF3）的靶向关系及其对人胃癌细胞SGC-7901 侵袭和迁移能力的影响。方法：miR-138-5p 模拟物转染SGC-7901 细胞后,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR-138-5p 和TCF3 mRNA的相对表达;生物信息学方法预测miR-138-5p 与TCF3 基因的靶向匹配关系,采用荧光素酶报告基因系统鉴定该关系。miR-138-5p 转染正常胃癌细胞和TCF3 高表达胃癌细胞后,Western blotting 检测TCF3、神经钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、锌指转录因子（Slug）和上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）的表达,Transwell 小室检测胃癌细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力。结果：miR-138-5p 过表达抑制TCF3 mRNA的表达;生物信息学软件预测显示miR-138-5p 与TCF3 mRNA有靶向结合区域,miR-138-5p mimic 降低TCF3 野生型质粒的荧光素酶活性,不影响TCF3 突变型质粒的荧光素酶活性。miR-138-5p 抑制TCF3 蛋白表达,miR-138-5p 减弱TCF3 过表达对SGC-7901 细胞侵袭和迁移能力的促进作用,同时其下调N-cadherin、Vimentin 和Slug 蛋白表达、上调E-cadherin 蛋白表达。结论：miR-138-5p 抑制胃癌细胞SGC-7901 的侵袭和迁移,与直接靶向调控TCF3 的表达有关。     

岩舒注射液诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及其机制

目的：探讨岩舒注射液（复方苦参注射液）对体外培养人胃癌细胞株SGC7901的生长抑制和诱导凋亡作用。方法：采用MTT法检测岩舒注射液对SGC-7901细胞的生长押制作用；Annexin V-FITC＋PI双参双数检测细胞凋亡；流式细胞仪测定经不同浓度岩舒注射液处理后SGC-7901细胞周期、Fas、Bcl-2蛋白表达及其线粒体膜电位。结果：岩舒注射液对SGC-7901细胞生长有抑制作用，并呈剂量-效应关系，P〈0．01。其48h IC50值为7／200原液稀释浓度；SGC-7901细胞经岩舒注射液处理后可发生凋亡；岩舒注射液使细胞周期阻滞于G0／G1期（P〈O．01），但对于Fas、Bcl-2蛋白表达无影响；可降低线粒体膜电位（P〈0．01）。结论：岩舒注射液对人胃癌SGC-7901细胞有生长抑制和诱导凋亡作用，其诱导凋亡机制可能与细胞周期阻滞、抑制肿瘤细胞增殖、线粒体膜电位降低有关。     

复方苦参注射液对胃癌SGC-7901细胞VEGF、CXCR4表达的影响

目的:探讨复方苦参注射液(matrine injection,MI)对人胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、趋化因子受体(CXC chemokine receptor4,CXCR4)mRNA及蛋白表达水平的影响.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同浓度复方苦参注射液对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)、免疫荧光法、酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测不同浓度复方苦参注射液对人胃癌SGC-7901细胞中VEGF、CXCR4mRNA及蛋白表达水平的影响.结果:复方苦参注射液可以抑制SGC-7901细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性;不同浓度复方苦参注射液作用于SGC-7901细胞24h后,随着药物浓度的增高,细胞中VEGF、CXCR4在mRNA及蛋白表达水平逐渐降低,与对照组相比有统计学差异(P<0.05).结论:复方苦参注射液具有抑制相关肿瘤血管生成因子的作用,这可能是复方苦参注射液抗肿瘤血管生成的机制之一.     

复方苦参注射液对胃癌SGC-7901细胞VEGF、CXCR4表达的影响

目的：探讨复方苦参注射液（matrine injection,MI）对人胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、趋化因子受体（CXC chemokine receptor 4,CXCR4）mRNA及蛋白表达水平的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察不同浓度复方苦参注射液对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;采用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）、免疫荧光法、酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测不同浓度复方苦参注射液对人胃癌SGC-7901细胞中VEGF、CXCR4mRNA及蛋白表达水平的影响。结果：复方苦参注射液可以抑制SGC-7901细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性;不同浓度复方苦参注射液作用于SGC-7901细胞24h后,随着药物浓度的增高,细胞中VEGF、CXCR4在mRNA及蛋白表达水平逐渐降低,与对照组相比有统计学差异（P〈0.05）。结论：复方苦参注射液具有抑制相关肿瘤血管生成因子的作用,这可能是复方苦参注射液抗肿瘤血管生成的机制之一。     

人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901及其内源性VEGF的影响

目的 研究人参皂苷CK对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞周期的影响及其对内源性分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用。方法 以50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625μg/ml的人参皂苷CK作用于胃癌细胞株SGC-7901,通过MTT法检测人参皂苷CK对细胞的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;ELISA定量检测细胞培养液中内源性VEGF的含量变化。结果 MTT法显示人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901有抑制作用,并且呈浓度、时间依赖关系;SGC 7901细胞经人参皂苷作用后出现明显凋亡峰,且细胞周期被阻滞在G0/G1期;人参皂苷CK处理组VEGF含量低于对照组(P<0.05),高浓度组低于低浓度组(P<0.05),且随着作用时间延长,VEGF含量降低。结论 人参皂苷CK可通过诱导凋亡抑制胃癌细胞株SGC-7901生长,并可抑制SGC 7901细胞内源性分泌VEGF,人参皂苷CK可能成为一种潜在的抗胃癌药物。     

SDZ对人胃癌SGC-7901细胞的影响

[目的]观察SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞的影响。[方法]培养人胃癌SGC-7901细胞,加入不同浓度的SDZ,作用24h、48h、72h,用MTT法计算细胞生长抑制率,描绘细胞生长曲线,荧光染色和电镜检测并观察细胞凋亡情况。[结果]SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制率随作用浓度和作用时间的增加而增大。1000μg/ml、200μg/ml、40μg/ml、8μg/ml、1.6μg/mlSDZ对人胃癌SGC-7901细胞作用24h,细胞抑制率分别为38%、35%、33%、29%、20%。[结论]SDZ体外对人胃癌SGC-7901细胞有生长抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,与细胞生长抑制率呈正相关,能引起细胞凋亡。     

亚砷酸钠对人胃癌细胞株SGC-7901作用机制的研究

 目的 探讨亚砷酸钠对人胃癌细胞株SGC-7901生物学行为的影响及其作用机制。方法采用MTT法、光镜、电镜、流式细胞仪检测和免疫细胞化学方法研究亚砷酸钠对人胃癌细胞株SGC-7901生物学行为的影响。结果 不同浓度（2.50～40.00 μmol／L）的亚砷酸钠均能抑制SGC-7901细胞生长，且具有浓度和时间依赖性，其作用72 h的中效浓度为8.69 μmol／L。流式细胞仪检测发现亚砷酸钠作用48 h，72 h后， SGC-7901细胞出现G2／M期阻滞。形态学观察显示亚砷酸钠作用72 h后，细胞出现典型的凋亡和坏死形态学改变。免疫细胞化学法发现亚砷酸钠能显著上调细胞Caspase-3蛋白的表达。结论 亚砷酸钠对SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用，并可诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡和坏死，其机制可能与其抑制ROS的清除上调Caspase-3蛋白的表达有关。     

体外扩增CIK细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901

目的：观察CIK细胞增殖情况,了解扩增后的最佳应用时机,并观察体外对SGC-7901的杀伤作用。方法：健康人外周血单核细胞（PBMC）在体外条件下经过多种细胞因子的共同刺激诱导成CIK细胞,计数培养不同时间的CIK细胞,用流式细胞术检测CIK细胞的表型特征。用MTT法检测杀伤活性,对比CIK细胞与5-FU对SGC-7901的杀伤作用,并观察了两者联合应用的效果。结果：CIK细胞随体外培养时间的延长,数量及杀伤活性均增加。体外培养20d增殖124倍,CD3^＋、CD56^＋双阳性细胞的比例达66．1％,其后两者数量增长缓慢;体外实验显示CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用,最高杀伤效率为73．13％,其杀伤作用优于5-FU,P〈0．05。二者联合应用杀伤作用降低。结论：CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性;体外培养15～20d时应用较为合适;联合应用时5-FU可降低CIK细胞的杀伤效率。     

PKGⅡ对胃癌SGC-7901细胞增殖相关的MAPK/ERK下游信号分子的抑制作用

目的:探讨cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(cGMP-dependent protein kinaseⅡ,PKGⅡ)对人胃癌SGC-7901细胞增殖相关的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)下游核糖体S6激酶1(ribosomal S6 kinase1,RSK1)和原癌基因c-Jun、c-Fos的作用。方法:用腺病毒Ad-LacZ和Ad-PKGⅡ感染SGC-7901细胞,使细胞高表达PKGⅡ;用特异性PKGⅡ激活剂8-pCPT-cGMP[8-(p-chlorophenylthio)-cyclic GMP]作用于感染了腺病毒的细胞,再用表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)进行刺激。MTT法检测PKGⅡ对EGF刺激引起的SGC-7901细胞增殖的影响,RT-PCR法和蛋白质印迹法分别检测PKGⅡ对EGF引起的SGC-7901细胞中c-Jun、c-FosmRNA和p-RSK1、c-Jun、c-Fos蛋白表达的影响,免疫荧光显微镜下观察p-RSK1在SGC-7901细胞核内的分布情况。结果:8-pCPT-cGMP作用于感染了Ad-PKGⅡ的SGC-7901细胞后,EGF对SGC-7901细胞的增殖促进作用和EGF诱导的c-Jun、c-FosmRNA和蛋白的表达受到抑制,RSK1(Ser380)磷酸化水平明显降低;EGF刺激后,SGC-7901细胞核内大量累积p-RSK1,8-pCPT-cGMP作用后细胞核内p-RSK1减少。结论:激活的PKGⅡ可有效抑制EGF诱导的胃癌细胞的增殖、RSK1Ser380位点的磷酸化、p-RSK1在细胞核内的累积以及原癌基因c-Jun和c-Fos的表达。     

微缺氧对三氧化二砷抑制胃癌细胞SGC-7901生长的影响

 目的 常氧和微缺氧条件下三氧化二砷（As₂O₃）注射液对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用的对比研究。方法 运用产气袋法（GasPaK）制造微缺氧条件，实验分为微缺氧组和对照组，用MTT法检测药物效应。流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡。结果 不同浓度As₂O₃对人胃癌细胞株SGC-7901生长有抑制作用，并呈剂量一效应关系。细胞滞留于G2／M及S期。微缺氧条件下As₂O₃对人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制作用下降（P〈0．01）。凋亡细胞百分比下降。结论 As₂O₃对人胃癌细胞生长有抑制作用，但对缺氧胃癌细胞的抑制作用下降，单用As₂O₃治疗胃癌存在一定的局限性。     

甘氨酸延伸型胃泌素对人胃癌细胞株SGC-7901的体外作用

目的体外研究甘氨酸延伸型胃泌素(Glycin-extended gastrin, G-Gly)对人胃癌细胞株SGC-7901增殖以及对丝裂霉素（MMC）促凋亡作用的影响,探讨G-Gly在胃癌发生发展中的作用。方法应用MTT法检测不同浓度G-Gly对SGC-7901增殖的影响,应用流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果G-Gly能促进SGC-7901的增殖,其增殖率在一定范围内与剂量有关,在浓度0.1 nmol/L时具有最大增殖效果。其效应不能被缩胆囊肽B受体（Cholecystokinin B receptor,CCKBR）的抗体所抑制。G-Gly能抑制MMC诱导的凋亡（P<0.01）。结论G-Gly能促进SGC-7901的增殖和抑制MMC诱导的凋亡,提示G-Gly能促进胃癌肿瘤的生长。     

奥曲肽抑制胃癌细胞系SGC-7901生长的实验研究

目的　研究奥曲肽对胃癌细胞系SGC -790 1生长的抑制作用。方法　将奥曲肽注入胃癌细胞 ,采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT )法测定细胞生长抑制效应 ,将3 H -胸腺嘧啶核苷 (3 H -TdR )掺入试验测定奥曲肽对胃癌细胞DNA合成的影响 ,显微镜下观察胃癌细胞形态变化 ,应用流式细胞仪 (FCM )检测细胞周期 ,并采用TRAPPCR -ELISA法对胃癌细胞端粒酶活性进行检测。结果　奥曲肽对胃癌细胞系SGC -790 1的生长及DNA合成均有抑制作用 ,显微镜下可见细胞变圆、变小、脱落 ,FCM检测结果显示奥曲肽作用后 ,G0 /G1期细胞比例增高 ,S期、G2 /M期细胞比例下降 ,端粒酶活性显著受抑制。结论　奥曲肽能明显抑制胃癌细胞系SGC -790 1的生长 ,形成G0 /G1期阻滞 ,并抑制端粒酶活性     

重组人p53腺病毒联合奥沙利铂对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制作用

目的观察外源p53基因在胃癌细胞SGC-7901内的表达及其对胃癌SGC-7901细胞生长的影响、对胃癌细胞化疗敏感度的作用及机制。方法用重组人p53腺病毒注射液（rAd-p53）及奥沙利铂（OXA）单独及联合作用于胃癌细胞株SGC-7901不同时间后,CCT-8法检测其对体外培养SGC-7901细胞的抑制率,免疫组织化学SP法检测p53蛋白的表达情况,流式细胞仪（FCM）分析其细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达情况。 结果rAd-p53及OXA单独作用SGC-7901细胞时,随药物浓度及作用时间的增加,细胞的生长抑制率逐渐增高;两者联合作用48h,其在较低浓度时即可显著抑制细胞生长（P<005）;OXA（6.25 μg/ml）与rAd-p53(5×107、5×108、5×109vp/ml)联合作用48h后,胃癌细胞caspase-3蛋白的含量较对照组升高,但p53蛋白无明显升高。结论OXA和 rAd-p53单药可抑制胃癌细胞的生长, 两者联合对胃癌细胞的抑制作用明显增强; rAd-p53有增强OXA化疗敏感度的作用,其机制与通过线粒体途径激活下游的 caspase-3诱导细胞凋亡有关。     

MTT法研究化疗药对人胃癌细胞株（SGC-7901）的抑制作用

[目的]研究化疗药物顺铂（DDP）、长春新碱（VCR）、吉西他滨（GEM）、奈达铂（NDP）、奥沙利铂（L-OHP）、氟尿嘧啶（5-Fu）、丝裂霉素（MMC）对人胃癌细胞株（SGC．7901）抑制率及化疗药物浓度和作用时间对细胞抑制率的影响。[方法]采用M1Tr测定法观察DDP、VCR、GEM、NDP、L-OHP、5-Fu和MMC不同浓度及作用时间对SGC-7901细胞株的抑制作用。化疗药物浓度参照其在人体血浆峰值浓度（plasma peak concentration，PPC）的0．001～1倍范围，作用时间选择24h、48h、72h。[结果]SGC．7901细胞株对不同化疗药物的敏感性存在差异，对DDP、L-OHP、MMC、NDP、5-Fu敏感，最大抑制率分别为99．5％、100％、100％、100％和97．5％；对GEM次之，最大抑制率为67．6％；对VCR不敏感。DDP、L-OHP、NDP和MMC的药物浓度与抑制率密切相关，GEM、5-Fu和MMC的药物作用时间与抑制率密切相关。[结论]不同化疗药物对人胃癌细胞株（SGC-7901）的抑制作用及量效、时效关系，为临床胃癌化疗方案的制定提供实验依据。     

原子力显微镜对华蟾素作用的SGC-7901细胞的凋亡研究

目的应用原子力显微镜（AFM）研究华蟾素对胃癌SGC-7901细胞的作用,在单细胞水平上分析胃癌SGC-7901细胞超微机构的变化,为进一步探讨华蟾素对胃癌SGC-7901细胞的作用机制奠定基础。方法利用原子力显微镜高分辨率、高灵敏度的特点,观察不同浓度（0、6.25、12.5、25、37.5、50ug/ml）华蟾素对胃癌细胞的作用,以及同等浓度药物作用下,随着作用时间（24h,48h,72h,96h）的延长,观察细胞超微结构的变化。同时,利用流式细胞仪对凋亡情况进行分析。结果药物作用后,细胞开始塌陷变矮。细胞表面结构的几何参数,包括高低差（Rp-v）、均方根粗糙度（Rq）、平均粗糙度（Ra）、平均高度（Meant Ht）均出现明显变化,且加药后的细胞凋亡率明显高于对照组（5.04±1.11）%。结论通过AFM观察细胞表面超微结构的变化,从纳米尺度上研究了华蟾素对胃癌细胞的作用,从另一层面增加了对胃癌细胞的认识,从而使AFM有望成为临床肿瘤诊断的一种新仪器。     

生存素反义寡核苷酸对胃癌细胞株SGC-7901生长的影响

目的　观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC 790 1中的表达及转染不同浓度的生存素反义寡核苷酸(ASODN )对胃癌细胞SGC- 790 1生长的影响。方法　采用细胞免疫组织化学染色观察生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1中的表达。将胃癌细胞株SGC 790 1分为8个组:空白对照组,脂质体转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L无义链转染组,2 0 0nmol/L、40 0nmol/L、60 0nmol/L反义链转染组,转染48h后,采用四氮唑盐(MTT )比色法,测定各组的细胞生长抑制率,并采用流式细胞仪检测60 0nmol/L无义链转染组、60 0nmol/L反义链转染组细胞的凋亡率以及生存素蛋白表达。结果　显示生存素蛋白在胃癌细胞株SGC- 790 1的胞核和胞质中均有表达,但以胞核为主;各组生存素ASODN对胃癌细胞株SGC- 790 1有明显的抑制作用(P <0 .0 1) ,抑制作用呈浓度依赖性,60 0nmol/L反义链转染组抑制率为最高,达40 .0 % ,流式细胞仪检测表明生存素ASODN有明显的诱导细胞凋亡的作用,定量检测结果显示生存素ASODN可以下调生存素蛋白至8.8% (P <0 .0 1)。结论　不同浓度的生存素ASODN均能通过下调生存素蛋白表达来抑制胃癌细胞株SGC- 790 1的生长。     

告达庭激活Caspase-3诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡

[目的]评价告达庭体外诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用。[方法]MTT法检测细胞活性;吖啶橙染色观察核形态;流式细胞术检测细胞凋亡率：Western-blot及比色法检测Cas-pase-3表达及活性。[结果]告达庭抑制SGC-7901细胞的活性,具有浓度、时间依赖性;告达庭70μM能使SGC-7901细胞出现核染色体浓聚等典型的凋亡形态学改变,告达庭35、70μLM使细胞凋亡率升高,并使Caspase-3蛋白表达量和蛋白活性显著升高。[结论]告达庭可能通过激活Caspase-3诱导SGC-7901细胞凋亡。