D1-like dopamine receptor suppresses neuropeptide Y-induced proliferation in vascular smooth muscle cells

目的 探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y( neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley (SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响.方法 以NPY( 10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类多巴胺受体激动剂Fenoldopam( 10-8 mol/L)存在的情况下,神经肽Y促VSMCs增殖作用的变化.细胞增殖的检测采用[3H]胸腺嘧啶核苷([ 3H]-TdR)掺入率的变化表示及MTT方法.结果 NPY呈浓度依赖性促进SD大鼠VSMCs的异常增殖,最高增殖幅度达(77±9)％(P＜0.05),该增殖作用由NPY Y,受体亚型介导.多巴胺D1类受体激动剂Fenoldopam对VSMCs无增殖影响,但Fenoldopam可抑制NPY Y1亚型受体介导VSMCs的增殖作用,该作用通过PKA途径发挥作用.结论 多巴胺D1类受体激活抑制NPY受体介导的促VSMCs增殖作用,可能参与心血管疾病的发生、发展过程.     

多巴胺D3受体对醛固酮介导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察多巴胺D3受体对醛固酮介导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响.方法 以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)为研究对象,观察在醛固酮10-10 ～ 10-7 mol/L、多巴胺D3受体激动剂(PD128907) 10-10 ～ 10-7moL/L分别单独作用,醛固酮10-7mol/L、PD128907 10-10～10-7mol/L共同作用以及D3受体拮抗剂(U99194A)、PD128907 10-7mol/L和醛固酮10-7 mol/L共同作用的情况下,A10细胞增殖幅度的变化,细胞增殖用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定.Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2表达.结果 醛固酮呈浓度依赖性地促进A10细胞的增殖,其最大促增殖作用幅度达(65±6)％(P＜0.05).PD128907本身对A10细胞增殖无影响,但PD128907可通过D3多巴胺受体减弱醛固酮(10-7mol/L)介导的A10细胞增殖,在10-7 mol/L浓度时可使促增殖幅度降低至(12±6)％(P＜0.05),应用D3受体阻断剂U99194A后该抑制作用丧失.PD128907能够降低醛固酮(10-7mol/L)对ERK1/2信号的磷酸化激活效果.结论 多巴胺D3受体激活对醛固酮介导的促VSMCs增殖有明显抑制效应.     

多巴胺D_4受体对血管紧张素Ⅱ介导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察多巴胺D4受体对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)介导的血管平滑肌细胞(vascular smoothmuscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)、原代的Wistar-Kyoto(WKY VSMCs)和自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉血管平滑细胞(VSMCs)为研究对象,观察刺激D4受体对AngⅡ促增殖作用的影响以及D4受体特异性阻断剂L745870对该作用的阻断效应。细胞增殖采用MTT和细胞计数方法测定。结果 AngⅡ(10-7mol/L)可促进A10细胞增殖,最大增殖幅度为64%。D4受体激动剂PD168077本身对A10细胞无增殖影响,但D4受体特异激动剂PD168077可抑制AngⅡ(10-7mol/L)介导的血管平滑肌细胞的增殖作用,最大抑制幅度为40%;应用D4受体阻断剂L745870后该抑制作用丧失;D4受体对AngⅡ介导血管增殖的作用在SHR和WKY大鼠的VSMCs之间并无区别。结论 D4受体对AngⅡ介导的血管平滑肌细胞增殖具有抑制作用,该作用可能在一定程度上抑制了高血压病所伴发的血管平滑肌细胞增殖。     

神经肽Y刺激的大鼠VSMCs增殖中CaN活性及c-fos表达水平的变化

目的观察神经肽Y(neuropeptideY ,NPY)刺激的大鼠血管平滑肌细胞 (VSMCs)增殖中钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)活性及c fos表达水平的变化。方法采用组织贴块法 ,体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞 ;NPY刺激培养的大鼠VSMCs增殖 ;CaN特异性抑制剂环孢素A(cyclosporinA ,CsA)阻断NPY刺激的大鼠VSMCs中CaN依赖的信号转导通路 ;观察各因素对CaN活性、细胞增殖活度、核内原癌基因c fos表达水平的变化。结果在一定范围内 ,NPY(10 7～ 10 5mol L)以浓度依赖性方式增加VSMCs的CaN活性 ,同时细胞增殖活度(AMTT值 )增高 ,与对照组相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1或P <0 .0 0 1)。CsA(1μmol L)抑制CaN活性后 ,明显降低NPY(10 6 mol L)刺激的VSMCs增殖活度及核内c fos表达水平 (OD值 ) ,与NPY组相比较 ,差异显著 (P <0 .0 0 1)。结论CaN参与了NPY刺激的VSMCs增殖 ,激活早期立即反应基因的转录表达 ,促进细胞增殖。     

烟碱对脑单胺类受体功能及基因表达的调节作用

目的研究烟碱对多巴胺受体、肾上腺素受体、5-羟色胺受体功能及基因表达的影响.方法 (1)昆明种小鼠给予生理盐水或烟碱(2mg/kg, i.p., 3/日, 10天).第11日分别腹腔注射烟碱(2mg/kg), 阿扑吗啡(3mg/kg),可乐定(1mg/kg), 8-OH-DPAT(1mg/kg),记录给药前、后自主活动各15min;(2)SD大鼠注射生理盐水或烟碱(1.2mg/kg, 2/日,SC,14天),第15天取脑作基因芯片,分析单胺类受体mRNA表达的改变.结果反复给予烟碱可诱导小鼠对烟碱降低自主活动的作用产生耐受,在对烟碱产生耐受的小鼠上,多巴胺受体激动剂阿扑吗啡增加自主活动的作用增强; α2-肾上腺素受体和5-HT1A受体激动剂可乐定和8-OH-DPAT抑制自发活动的作用减弱.在大鼠上, 反复给予烟碱可增加脑多巴胺D1 受体mRNA表达,降低多巴胺D3受体mRNA表达,不影响α2-肾上腺素受体、5-HT1A受体mRNA的表达.结论反复给予烟碱诱导烟碱耐受,脑N受体功能失敏时, 单胺类受体及其亚型功能或/和受体mRNA表达发生变化.     

SiRNA对大鼠钙调神经磷酸酶活性及VSMCs增殖的影响

目的:观察神经肽Y(NPY)刺激的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中钙调神经磷酸酶(CaN)活性和c-fos表达水平的变化,以及RNA干扰抑制CaN活性的作用.方法:采用组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞;NPY刺激培养的大鼠VSMCs增殖;RNA干扰特异性抑制CaN的活性及其mRNA的表达,阻断NPY刺激的大鼠VSMCs中CaN依赖的信号转导通路,观察对CaN活性、细胞增殖、核内原癌基因c-fos表达水平的变化.结果:NPY可增加VSMCs的CaN活性,加快细胞增殖及增加核内c-fos表达水平.RNA干扰抑制CaN活性后,明显降低NPY刺激的VSMCs增殖及核内c-fos表达水平.结论:CaN参与了NPY刺激的VSMCs增殖,RNA干扰通过抑制CaN的活性可阻断NPY诱导的VSMCs增殖作用.     

NPY受体在急性束缚应激大鼠mPFC和下丘脑中的表达及其与炎性因子的相关性

目的观察神经肽Y(NPY)受体及炎性因子在急性束缚应激(RES)大鼠前额叶内侧皮层(mPFC)和下丘脑中的表达,探讨NPY受体Y5R在急性RES大鼠mPFC中可能的作用机制。方法将SD雄性大鼠随机分为对照组(CTL组)和模型组(RES组)。采用专业大鼠固定器束缚RES组大鼠2 h制备急性RES模型,CTL组不进行处理。造模结束后处死大鼠,实时定量PCR检测各组大鼠mPFC及下丘脑NPY受体及炎性因子mRNA表达情况;蛋白质印迹检测NPY受体Y5R及炎性因子IL-1β的蛋白表达情况;免疫荧光染色检测NPY受体Y5R及小胶质细胞标志物Iba-1的分布和定位。结果与CTL组相比,RES组大鼠mPFC NPY受体Y5R的mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);炎性因子mRNA水平显著升高(P<0.05),蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05)。RES组大鼠下丘脑NPY受体Y5R及炎性因子mRNA和蛋白水平与CTL组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色检测结果显示NPY受体Y5R及小胶质细胞标志物Iba-1不存在共定位。结论NPY受体Y5R参与了急性束缚应激大鼠mPFC的病理过程,但其作用机制与小胶质细胞神经炎性反应无相关性。     

神经肽Y对成年大鼠睡眠的影响

目的 :探讨神经肽Y(NPY)与睡眠 -觉醒周期的关系。方法 :4 4只成年雌性SD大鼠 ,随机分为 6组 ,分别为侧脑室微量 (5 μl)注射NPY(1g/L)、α - 1受体阻断剂育亨宾 (30 μmol/L) ,育亨宾 +NPY ,α - 2受体阻断剂哌唑嗪 (30 μmol/L) ,哌唑嗪 +NPY及生理盐水 (对照组 )。采用多导描记技术观察大鼠在清醒状态下 ,统计给药后各组大鼠 6h的慢波睡眠 (SWS)、快眼动睡眠 (REMS)及总睡眠 (TS)时间。结果 :单独注射NPY可以促进大鼠的SWS ;先给予育亨宾再给予NPY ,大鼠SWS、REMS及TS时间较生理盐水对照组显著降低 (P <0 .0 1 )。单独给予育亨宾、哌唑嗪或哌唑嗪 +NPY ,对大鼠睡眠无明显影响。结论 :NPY具有一定的促眠作用 ,且与α- 2受体有关     

烟碱对脑单胺类受体功能及基因表达的调节作用

目的 研究烟碱对多巴胺受体、肾上腺素受体、5-羟色胺受体功能及基因表达的影响。方法 (1)昆明种小鼠给予生理盐水或烟碱(2mg／kg，i．p．，3／日，10天)。第11日分别腹腔注射烟碱(2mg/kg)，阿扑吗啡(3mg/kg)，可乐定(1mg／kg)，8-OH-DPAT(1mg/kg)，记录给药前、后自主活动各15min;(2)SD大鼠注射生理盐水或烟碱(1．2mg/kg，2／日，SC，14天)，第15天取脑作基因芯片，分析单胺类受体mRNA表达的改变。结果 反复给予烟碱可诱导小鼠对烟碱降低自主活动的作用产生耐受，在对烟碱产生耐受的小鼠上，多巴胺受体激动剂阿扑吗啡增加自主活动的作用增强；α2-肾上腺素受体和5-HTlA受体激动剂可乐定和8-OH-DPAT抑制自发活动的作用减弱。在大鼠上，反复给予烟碱可增加脑多巴胺D1受体mRNA表达，降低多巴胺D3受体mRNA表达，不影响α2-肾上腺素受体、5-HTlA受体mRNA的表达。结论 反复给予烟碱诱导烟碱耐受，脑N受体功能失敏时，单胺类受体及其亚型功能或/和受体mRNA表达发生变化。     

犬冠状动脉和脑动脉多巴胺受体亚型对比研究

目的 :对比分析犬冠状动脉和脑动脉多巴胺 (DA)受体亚型类别与反应特性。方法 :利用离体血管微量生物反应检测技术 ,测定多巴胺 1(DA1)受体激动剂非诺多泮 (Fenoldopam ,FODA)和多巴胺 2 (DA2 )受体激动剂propy lbutyl dopamine(PBDA)对冠状动脉和脑动脉血管环的舒张反应。结果 :①冠状动脉和脑动脉均有DA1受体分布 ,但其分布密度存在明显差别 ;②脑动脉内既有DA1受体又有DA2 受体分布 ;③用 6 羟多巴胺 (6 OHDA)处理后的实验进一步证实脑动脉存在有DA2 受体。结论 :冠状动脉和脑动脉DA受体亚型存在明显的异质性 ,阐明这种异质性将有助于了解多巴胺受体对冠脉循环和脑循环的不同生理反应。     

多巴胺D1样受体在介导调节CD4^＋T淋巴细胞功能中的作用

目的：从分子水平揭示CD4^＋ T淋巴细胞表达D1受体和D5受体mRNA的现象,探讨这些受体在调节CD4^＋ T淋巴细胞功能中的作用.方法：采用免疫磁珠分离和纯化小鼠淋巴结CD4^＋ T淋巴细胞.用抗CD3/CD28抗体刺激活化CD4^＋ T淋巴细胞,并用D1样受体激动剂SKF38393、拮抗剂SCH23390分别作用于CD4^＋ T淋巴细胞,然后采用real-time PCR法检测CD4^＋ T淋巴细胞上D1受体和D5受体mRNA的表达,Th1细胞特异性转录因子（T-box expressed in T cells,T-bet）和细胞因子干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）的表达,Th2细胞特异性转录因子GATA binding protein 3（GATA 3）和细胞因子白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）的表达,Th17细胞特异性转录因子（retinoid acid-related orphan receptor gammat,RoR γt）和细胞因子IL-17、IL-22的表达.结果：D1样受体激动剂SKF38393（10^-8和10^-7 mol/L）作用于CD4^＋ T淋巴细胞后,CD4^＋ T淋巴细胞表达D1样受体mRNA增高,IFN-γ的表达降低,GATA 3、IL-4的表达增高,但T-bet、RoR γt、IL-17和IL-22的表达没有变化,SCH23390（10^-7 mol/L）能阻断SKF38393的这些作用.结论：CD4^＋ T淋巴细胞能表达多巴胺D1样受体,CD4^＋ T淋巴细胞上D1样受体的激活可促进CD4^＋ T淋巴细胞向Th2细胞分化、抑制Th1细胞功能及增强Th2细胞功能.     

NPY-Y1受体激动剂对SHR脑血管平滑肌细胞的促增殖作用

目的探讨NPY-Y1受体激动剂[Leu31,Pro34]-NPY对体外培养的自发性高血压大鼠(SHR)脑血管平滑肌细胞增殖周期的影响及其跨膜信号传递途径。方法植块法培养SHR血管平滑肌细胞,流式细胞仪检测不同药物干预下S期细胞的百分比;激光共聚焦扫描显微镜定量分析细胞内游离钙离子浓度。结果随着[Leu31,Pro34]-NPY浓度的增加,S期细胞所占百分比增加,10-5、10-6mol/L NPY组与对照组相比有显著差异(P<0.05)。[Leu31,Pro34]-NPY(用正常细胞外液稀释)干预细胞时,细胞内游离钙离子浓度先明显升高,随后下降(P<0.01);[Leu31,Pro34]-NPY 硝苯地平组细胞内钙离子浓度变化不明显,而硝苯地平组细胞内钙离子浓度呈下降趋势(P<0.01)。结论通过细胞膜上L型钙离子通道进行跨膜信号传递,NPY-Y1受体介导促血管平滑肌细胞增殖作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对高糖促血管平滑肌细胞增殖的抑制效应

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制效应及其作用机制。方法以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)和细胞计数方法测定细胞增殖状况,免疫印迹检测EGCG对高糖促增殖中的1-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号途径的影响。结果不同浓度高糖(15、30、50mmol/L)可以促进A10细胞增殖;50μmol/L EGCG对A10细胞具有一定的抑制增殖作用;EGCG(50μmol/L)与高糖(30mmol/L)共作用A10细胞后,可明显抑制高糖促VSMCs增殖作用;EGCG(50μmol/L)能够降低高糖(30mmol/L)对PI3K/AKT信号的激活效果。结论 EGCG对高糖促VSMCs增殖具有明显抑制效应,该作用可能与PI3K/AKT信号途径有关。     

神经肽Y Y1受体拮抗剂促进大鼠BMSCs成骨分化和股骨缺损修复

目的探索神经肽Y Y1受体拮抗剂（PD160170）对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化以及骨缺损修复的影响。方 法第三代大鼠BMSCs成骨分化诱导培养,随机分为4组,对照组（等体积PBS）,终浓度分别为10-6、10-7、10-8 mol/L Y1受体拮抗 剂三浓度梯度组,在干预7、14 d时,分别进行碱性磷酸酶（ALP）和茜素红染色;在干预7、21 d时,采用q-PCR和Westen blot检测 I 型胶原（COLI）、骨钙素（OCN）和Runt相关转录因子2（Runx2）基因和蛋白的表达。采用300±20 g 雄性SD大鼠构建股骨髁 上骨缺损模型,直径为2.5 mm,随机分为3 组,每组6 只,分别每日局部注射0.2 mL溶液等体积PBS（对照组）、10-6 mol/L 和 10-8 mol/L Y1受体拮抗剂溶液,28 d后处死,Micro-CT检测观察骨缺损修复情况。结果ALP和茜素红染色发现,Y1受体拮抗 剂组细胞胞浆内棕色颗粒、细胞外周基质矿化结节均高于对照组,且具有浓度特异性,以10-8 mol/L最为明显;q-PCR及Westem blot检测发现,在成骨分化诱导第7天,10-8 mol/L Y1受体拮抗剂组COLI mRNA和蛋白表达水平均显著高于对照组,差异具有 统计学意义（P<0.05）;在第21天,10-8 mol/L Y1受体拮抗剂组OCN、Runx2 mRNA和蛋白表达明显高于对照组（P<0.05）。通过 micro-CT分析发现,在局部注射10-6 Y1受体拮抗剂28 d后,骨缺损BV/TV、骨密度、骨小梁数量高于对照组,差异均具有统计学 意义（P<0.05）;而骨小梁厚度（P=0.07）、骨体积（P=0.35）在各组之间差异无统计学意义。结论神经肽Y Y1受体拮抗剂可促进 BMSCs成骨分化以及骨缺损的修复,提示阻断Y1受体信号传导具有预防或治疗骨折、骨质疏松症等潜力,为临床药物研究提 供一定的实验依据。     

姜黄素通过抑制ERK1/2磷酸化减弱ET-1诱导的大鼠VSMCs增殖

目的观察姜黄素（curcumin）对内皮素-1（ET-1）诱导培养的离体大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖及p44/42丝裂原活化蛋白激酶（p44/42 MAPK,ERK1/2）表达的影响。方法组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs。分别以ET-110-8 mol/L,ET-110-8 mol/L联合浓度为10-6 mol/L、10-5 mol/L、10-4 mol/L的姜黄素作用于体外培养的VSMCs 24 h,采用细胞计数检测VSMCs的增殖,3H-胸腺密啶掺入（3H-TdR）法测定VSMCs的DNA合成,western bolt法检测VSMCs磷酸化ERK1/2的表达。结果与对照组比较,ET-1能显著刺激VSMCs增殖,姜黄素能显著抑制ET-1诱导的VSMCs增殖,且呈剂量依赖关系;ET-1能显著刺激VSMCs磷酸化ERK1/2的表达,该作用可被姜黄素所抑制。结论姜黄素能抑制ET-1刺激的VSMCs的增殖,其作用可能与抑制磷酸化ERK1/2的表达相关。     

雌马酚对大肠癌细胞增殖的影响

目的：检测大豆异黄酮代谢产物雌马酚对大肠癌细胞增殖的影响,并探讨其分子作用机制。方法：培养大肠癌细胞 DLD1、HCT15、COLO205、LOVO和SW480,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐［3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT］法检测雌马酚对大肠癌细胞增殖的影响,用逆转录PCR和蛋白免疫印迹法分别检测雌激素受体和核因子红系2相关因子2［nuclear factor (erythroid derived 2)-like 2,Nrf2］表达状况。用MTT法检测雌激素受体抑制剂和激动剂对大肠癌细胞增殖的影响。结果：DLD1、HCT15、COLO205、LOVO和SW480均表达雌激素受体（estrogen receptor, ER）β,但只有DLD1和HCT15有ERα弱表达。MTT试验显示不同剂量雌马酚（0、0.5、1、5、10 μmol/L）不仅能够显著抑制ERα和ERβ均表达的大肠癌细胞HCT-15的增生,且呈现明显的剂量效应关系,而且能够抑制只有ERβ表达的大肠癌细胞LOVO和SW480的增生,且呈现明显的剂量效应关系。此外,逆转录PCR发现不同剂量雌马酚刺激后,HCT-15的雌激素受体ERα和ERβ表达明显增加,呈剂量效应关系。蛋白免疫印迹法进一步证实雌激素受体ERα和ERβ蛋白表达随雌马酚剂量的增加而增加,蛋白免疫印迹法发现Nrf2随干预剂量的增加而表达明显增加。采用ERβ激动剂、雌激素受体抑制剂和特异性雌激素受体ERα激动剂对SW480、LOVO、HCT-15细胞刺激后,只发现不同剂量ERβ激动剂能够显著抑制大肠癌细胞SW480、LOVO、HCT-15的增生,且呈明显的剂量效应关系,但是,雌激素受体抑制剂和特异性雌激素受体ERα激动剂对SW480、LOVO和HCT-15细胞没有呈现显著的影响。结论：雌马酚能够通过雌激素样作用和抗氧化活性抑制大肠癌细胞的增殖。     

葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的观察葛根素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,对原癌基因c-fos和bc l-2蛋白质以及凝血酶受体(TR)mRNA表达的作用。方法以细胞计数法,流式细胞仪测定DNA含量,细胞周期分析法观察凝血酶及葛根素对VSMC增殖和DNA合成的影响。在凝血酶及葛根素作用24 h后,用W estern印迹法检测c-fos和bc l-2蛋白表达,以半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TR mRNA的表达。结果凝血酶对VSMC有明显促增殖作用,促增殖效应在24 h末达峰值(细胞计数凝血酶组8.64×104/m l±0.12×104/m l,对照组4.20×104/m l±0.11×104/m l,P<0.05),且凝血酶浓度在0.1~1.0 U/L之间呈剂量依赖关系;葛根素呈剂量依赖性地抑制凝血酶诱导的细胞增殖、DNA合成以及VSMC c-fos和bc l-2蛋白的表达(葛根素浓度为1.5×10-3mol/L时,抑制率分别为42.6%±5.2%、58.2%±7.9%、44.5%±7.5%和39.6%±6.4%,均P<0.05);高浓度(1.5×10-3mol/L)的葛根素可显著抑制凝血酶诱导的TR mRNA上调(抑制率为17.6%±1.7%,P<0.05)。结论葛根素能抑制凝血酶诱导的VSMC增殖,这可能与其抑制c-fos和bc l-2蛋白有关,并部分与其抑制TR mRNA表达有关。     

Effects of different subtypes of histamine receptors on proliferation and differentiation of murine colony forming unit granulocyte-macrophage and colony forming unit megakaryocyte.

Ｅｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｓｕｂｔｙｐｅｓｏｆｈｉｓｔａｍｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｍｕｒｉｎｅｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅａｎ...     

Mfn2介导缬沙坦抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

目的 研究缬沙坦对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响,并探讨其新的作用机制.方法 体外培养VSMCs,采用AngⅡ诱导其增殖,用不同浓度的缬沙坦(10-5、10-6、10-7mol/L)进行干预,细胞计数及四氮唑盐试验(MTT)检测VSMCs增殖情况,Western blot检测各组线粒体融合素基因-2(mitofusin-2,Mfn2)、Raf、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signalregulated kinase 1/2,ERK1/2)表达水平的变化.结果 AngⅡ能够明显促进VSMCs的增殖,下调Mfn2的表达、增强Raf和ERK1/2的表达;缬沙坦10-5、10-6mol/L可以拮抗AngⅡ的上述作用,而缬沙坦10-7mol/L无此作用;缬沙坦对无AngⅡ刺激的VSMCs增殖无明显影响.结论缬沙坦能有效抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖,其机制与调节Mfn2的表达、抑制Ras-Raf-ERK/MAPK信号通路有关.