生存素的表达与胃癌细胞凋亡和生物学行为的关系

背景:生存素是新近发现的凋亡蛋白抑制因子家族成员之一,其再表达于大多数人类肿瘤组织中,可能成为恶性肿瘤诊断和治疗的新靶点。目的:探讨生存素的表达与胃癌细胞凋亡和生物学行为的关系。方法:分别以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测胃癌和癌旁组织中生存素mRNA和蛋白的表达;以原位末端标记(TUNEL)法检测胃癌细胞凋亡。结果:生存素mRNA和蛋白在胃癌组织中高表达,在癌旁组织中不表达。其表达与肿瘤大小、部位、浸润深度和淋巴结转移无明显相关性,但与肿瘤分化程度相关。所有胃癌组织中均能检测到凋亡细胞,但生存素蛋白表达阳性者的凋亡指数(AI)显著低于表达阴性者(2.5%±2.2%对5.2%±2.7%,P<0.05)。结论:生存素在胃癌组织中表达上调,其表达与胃癌分化程度相关,并可抑制胃癌细胞凋亡,可作为评价胃癌分化程度和估计预后的参考指标。     

生存素在恶性肿瘤中的作用和意义

生存素(survivin)是一种具有抑制凋亡作用的多效蛋白,调节细胞分裂并促进血管生成.它在成熟的高度分化的组织(除胸腺、造血干细胞、分泌期子宫内膜等)中不表达,却在大多数恶性肿瘤中发现其选择性表达[1].因为在恶性组织和相对正常组织中表达的巨大差异性,生存素成为研究肿瘤标记和抗肿瘤治疗的热点.近期开展了有关生存素靶向治疗潜力的研究,亦有探讨生存素可作为肿瘤标记物的研究.现就生存素在恶性肿瘤中作为生物学标记物的意义作一综述.     

survivin和PTEN蛋白在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨生存素(survivin)和磷酸脂酶(PTEN)蛋白表达与大肠癌浸润转移的关系及相关性。方法应用免疫组织化学技术,检测90例大肠癌组织中survivin和PTEN蛋白表达。结果90例大肠癌中survivin和PTEN蛋白阳性表达率分别为65.6%(59/90)和46.7(42/90)。survivin高表达及PTEN低表达与大肠癌Dukes分期、浆膜浸润、淋巴结转移、肝脏转移均呈正相关(P<0.05)。大肠癌中survivin表达与PTEN表达呈负相关(r=-0.50,P<0.05)。结论survivin和PTEN表达与大肠癌浸润转移密切相关。检测survivin和PTEN蛋白表达可作为判断大肠癌预后的客观指标。     

生存素在胃癌及其癌前病变中的表达和临床意义

背景:生存素(survivin)是凋亡抑制蛋白家族的成员,在胃癌和癌前病变中可能有一定程度的表达,对胃癌和癌前病变的诊断有相当重要的意义。目的:探讨生存素在不同胃黏膜病变中的表达,以及胃癌组织中生存素的表达与胃癌临床病理参数的关系,以阐明生存素在胃癌发生中的作用和临床意义。方法:分别应用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)和免疫组化法检测生存素mRNA和蛋白在慢性非萎缩性胃炎、胃癌前病变和胃癌组织中的表达,分析胃癌组织中生存素的表达与胃癌临床病理参数的关系。结果:慢性非萎缩性胃炎、胃癌前病变和胃癌组织中生存素mRNA的表达率分别为2.5%、25.0%和59.6%,生存素蛋白的表达率分别为0%、15.0%和51.9%,三组间差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤累及浆膜层、有局部淋巴结转移和TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌患者癌组织中生存素mRNA和蛋白的表达率分别显著高于肿瘤未累及浆膜层、无淋巴结转移和TNM分期Ⅰ～Ⅱ期者(P<0.05)。结论:生存素在胃癌中有较高的表达率,其表达与胃癌的浸润深度、局部淋巴结转移和TNM分期相关。生存素基因可能参与了正常胃黏膜、癌前病变至胃癌的转化过程,可作为胃癌的独立预后指标。     

大肠癌中Twist、C-myc表达及临床意义

目的探讨上皮间质转化因子Twist及C-myc在人大肠癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测大肠癌及正常大肠黏膜组织中Twist、C-myc的表达,并分析两者之间的相关性及其与临床生物学行为之间关系。结果 Twist、C-myc蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率均明显高于正常大肠黏膜组织(P0. 05);Twist与C-myc在大肠癌中的表达呈正相关(r=0. 454,P0. 05); Twist蛋白表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、病理组织学类型及Dukes分期有关(P0. 05),而与患者的年龄、性别及肿瘤大小无关(P 0. 05),而C-myc蛋白除与分化程度无关,其余结果与Twist蛋白结果一致。结论 Twist、C-myc蛋白表达与大肠癌的发生发展及侵袭转移存在相关性,可为肿瘤的预后判断提供参考价值。     

生存素反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞株凋亡的实验研究

背景:生存素(survivin)是凋亡抑制蛋白家族的成员之一,在肿瘤组织和人类胚胎组织中有高水平表达,在分化成熟的组织中不表达或低水平表达。有研究显示,64.5%～85%的结肠癌组织中存在生存素基因表达,其表达与结肠癌患者的不良预后有关。目的:观察生存素反义寡核苷酸对结肠癌细胞株凋亡的影响。方法:通过基因工程技术构建生存素反义寡核苷酸质粒pcDNA3鄄sur鄄As,以脂质体转染的方法将质粒DNA转入结肠癌细胞株。应用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)和蛋白质印迹法(Westernblot)检测结肠癌细胞株中生存素mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪和碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡,比色测定检测caspase鄄3活性的变化。结果:SW1116、COLO205、HT鄄29和SW1417四株结肠癌细胞株中均有生存素mRNA和蛋白表达。瞬时转染生存素反义寡核苷酸后,4株结肠癌细胞株的细胞凋亡率均明显增加,并呈剂量依赖性(P<0.01);结肠癌细胞株SW1116在荧光显微镜下呈现典型的凋亡细胞形态,细胞中生存素蛋白表达水平明显降低,caspase鄄3活性显著增加(P<0.01)。结论:应用生存素反义寡核苷酸抑制生存素基因的表达能诱导结肠癌细胞株凋亡,以生存素为靶基因的治疗方案可能有助于结肠癌患者的治疗。     

Survivin基因与肺癌关系的研究现状及进展

生存素(survivin)是新近发现的凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的独特成员,具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂等功能.Survivin主要在胚胎发育组织表达,在成人终末分化组织低表达或不表达,而在绝大多数肿瘤组织中高表达,与肺癌的发生、发展有着密切关系.因此,研究survivin基因与肺癌的关系具有重要的理论和临床意义.     

大肠癌组织中STAT3及其相关生长调控基因的检测与分析

目的 探讨转录信号传导子与激活子3(STAT3)及其相关生长调控基因在大肠癌发生发展过程中的作用.方法 采用RT-PCR方法检测42例大肠癌患者STAT3及其相关生长调控基因c-myc、p53、生存素(survivin)、血管内皮生长因子(VEGF)的 mRNA表达水平,并比较它们在大肠癌组织、癌旁组织及正常组织中的差异性;采用Western印迹法及免疫组化方法检测STAT3蛋白的表达水平,并分析STAT3蛋白的表达情况与临床病理的关系.结果 STAT3、c-myc、survivin、VEGF mRNA在大肠癌及癌旁组织中的表达较正常组织中的表达增强,差异有统计学意义(P＜0.01);而p53 mRNA在大肠癌及癌旁组织中的表达较正常组织中的表达减弱,差异亦有统计学意义(P＜0.01);大肠癌组织及癌旁组织中STAT3蛋白水平的表达均高于正常组织,差异有统计学意义(P＜0.01),且癌组织中STAT3蛋白表达与临床分期及淋巴结转移有关.结论 STAT3基因的异常表达与大肠癌的发生发展密切相关,可能通过调节其靶基因的表达而发挥致癌作用.     

老年非小细胞肺癌生存素基因表达与微血管密度

目的探讨老年非小细胞肺癌中生存素(Survivin)基因表达及其与微血管密度(MVD)的关系。方法应用免疫组织化学方法(SP法)检测36例非小细胞肺癌(NSCLC)中生存素基因表达水平及其与临床病理特征的关系,分析生存素基因表达与MVD的相互关系。结果肺癌患者生存素蛋白表达水平639%(23/36)明显高于癌旁组织(P<005),随着生存素表达强度的增加MVD逐渐增高,生存素表达与MVD明显相关(F=9691,P<0005)。结论肺癌组织中生存素蛋白表达显著增高,可以作为肺癌临床诊断的可靠指标,生存素基因的过度表达与肺癌组织的微血管密度有关,生存素基因参与了肿瘤的血管生成。     

TGF-β1在大肠侧向发育型肿瘤中的表达及意义

目的 探讨TGF-β1在大肠侧向发育型肿瘤中的表达情况及其临床意义.方法 对于12例经内镜下黏膜切除的侧向发育型肿瘤(laterally spreading tumor,LST)组织、12例腺瘤性息肉组织标本以及16例经外科手术切除的大肠癌组织标本采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TGF-β1基因表达,蛋白印迹(Western blotting)法检测TGF-β1蛋白表达,并分析其在大肠不同病变中差异性表达的意义.结果 qRT-PCR结果提示,TGF-β1 mRNA在侧向发育型肿瘤组织中表达水平显著高于腺瘤性息肉组织,但明显低于大肠癌组织.Western blotting结果显示TGF-β1在正常肠黏膜及腺瘤性息肉组织中几乎不表达,而在大肠癌中表达量明显升高.LST组织中的TGF-β1蛋白表达量较正常肠黏膜及腺瘤性息肉高,但明显低于大肠癌组织.结论 TGF-β1在LST中的表达水平明显高于正常肠黏膜及腺瘤性息肉组织,同时又与大肠癌组织中的显著高表达有所区别,提示其可能成为判断LST恶变倾向及指导随访治疗方案的重要参考指标.     

E-cadherin、MMP-9及TIMP-1表达与大肠癌生物学行为及预后的关系

目的 探讨E-钙粘素(E-cadhefin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂(TIMP-1)表达与大肠癌生物学行为及预后的关系.方法 采用免疫组化染色法检测54例大肠癌组织标本中E.钙粘素、MMP-9及TIMP-1的表达情况,经结肠镜活检的大肠腺瘤组织标本15例作为正常对照.结果 E-cadherin的表达率在大肠腺瘤中为86.7%,显著高于大肠癌中55.6%的表达率,两者存在显著性差异(P<0.05).E-cadherin的表达与大肠癌的大体类型有关,且随着大肠癌分化程度的降低而减少.与浸润深度、淋巴结转移呈负相关(P<0.05).其表达率越高,患者的预后越好.大肠癌MMP-9和TIMP-1蛋白表达存在显著正相关(r=0.374,P<0.01).MMP-9的表达率在大肠腺瘤中为33.3%,显著低于大肠癌中的70.4%(P<0.05).其表达与大肠癌的浸润深度、Dukes分期、淋巴结转移及生存期均密切相关(P均<0.05).TIMP-1的表达在大肠腺瘤及大肠癌组织中没有显著性差异(P>0.05),但其表达与大肠癌组织学类型、分化程度、淋巴结转移密切相关,对预后无显著性影响(P>0.05).结论 E.钙粘素、MMP-9及TIMP-1对大肠癌生物学行为均有明显影响.E-钙粘素的正常表达将显著降低大肠癌的浸润和转移能力.MMP-9蛋白阳性表达促进大肠癌浸润和转移,患者预后欠佳.E-钙粘素、MMP-9和TIMP-1的检测可以成为临床判断大肠癌的生物学行为及预后的重要参考指标.     

钙网蛋白在大肠癌组织的表达及意义

目的探讨钙网蛋白(CRT)在大肠癌与癌旁组织中的表达及其意义。方法采用二维色谱与质谱联用技术检测20例大肠癌患者肿瘤组织及癌旁组织CRT的表达情况。结果通过二维色谱与质谱联用技术对大肠癌肿瘤组织及癌旁组织进行分析,对有差异的蛋白质点进行质谱鉴定,发现CRT在癌组织中较癌旁组织中表达升高,并通过免疫印迹进一步验证了其准确性。结论 CRT蛋白的高表达可能与大肠癌的发生、发展有一定的关系。     

细胞周期蛋白E和生存素在结直肠癌中表达意义的探讨

目的研究结直肠癌中细胞周期蛋白E和生存素基因的表达,探讨其与结直肠癌的临床病理因素间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测67例结直肠癌组织石蜡切片中细胞周期蛋白E和生存素蛋白的表达情况。结果①细胞周期蛋白E和生存素蛋白在结直肠癌中阳性表达率分别为44.77%(30/67)和49.25%(33/67);②细胞周期蛋白E和生存素蛋白的表达率及表达强度均分别与结直肠癌的细胞分化和淋巴结转移密切相关(P均<0.05);③结直肠癌中细胞周期蛋白E和生存素蛋白的表达未见明显相关性(P>0.05)。结论①细胞周期蛋白E可能作为一种细胞周期调节蛋白在结直肠癌细胞中特异性表达,其高表达的癌细胞常分化差,进展快且易发生转移,常为TNM晚期,因此细胞周期蛋白E具有癌基因的性质;②生存素作为一种癌蛋白,特异性表达于结直肠癌细胞中,与肿瘤的分化和转移密切相关,其高表达的癌细胞常分化差,易转移,预后差;③结直肠癌形成发展多步骤过程是多因素协同作用的结果,癌基因生存素和细胞周期蛋白E激活并上调蛋白的表达;④生存素和细胞周期蛋白E表达强度间无显著相关性,细胞周期蛋白E过表达导致结直肠癌细胞的细胞周期从G1期转化为S期,DNA合成增加,而生存素过表达则使DNA合成后的细胞从G2期转化为M期,癌细胞分裂活跃,两者的协同作用反映在癌生长和浸润转移的生物学表型特征上。     

大肠癌组织中PTEN和NDRG-1的表达及其相关性

目的探讨磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)和分化相关基因(NDRG)-1在大肠癌中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测114例大肠癌组织及80例正常大肠组织中PTEN和NDRG-1的表达。结果大肠癌组织中PTEN蛋白表达显著低于正常大肠组织(P<0.01),与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。NDRG-1在大肠癌中的表达显著低于正常大肠黏膜(P<0.01),与淋巴结转移及Dukes分期相关(P<0.05),而与大肠癌组织分化程度不相关(P>0.05)。PTEN在大肠癌中的表达与NDRG-1呈正相关(P<0.05)。结论 PTEN蛋白表达降低与大肠癌淋巴结转移及Dukes分期相关,且与NDRG-1呈正相关。抑癌基因PTEN和NDRG-1在大肠癌的发生发展过程中起重要作用。     

Smad4在大肠癌发生中的作用及意义

目的探讨Smad4基因在大肠癌中的表达及其生物学意义.方法应用免疫组织化学(ABC)法观察60例大肠癌患者的癌组织和10例正常组织中Smad4蛋白的表达.结果大肠癌组织Smad4的阳性表达相对含量(PU)值(28.75±8.56)明显低于正常组织(58.76±10.14),差异存在显著性(P＜0.05),正常大肠黏膜中Smad4蛋白呈高表达:Smad4蛋白的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P＞0.05),与癌组织的分化程度、淋巴结转移和Ducks分期相关.低分化、有淋巴结转移和DucksC/D期的Smad4蛋白表达显著低于相关组别.结论Smad4基因在大肠癌组织中表达下调,Smad4的表达与大肠癌的恶性生物学行为有关.     

大肠癌潜在标志物-热休克蛋白27

目的:探讨大肠癌特异性标志物,为大肠癌的早期诊断、预后判断和治疗提供帮助,同时为理解大肠癌的发病机制提供线索.方法:收集6例大肠癌患者,应用高灵敏的二维凝胶电泳和MALDI-TOF-MS技术检测出肿瘤黏膜和邻近正常结肠黏膜之间差异表达的蛋白.对其中之一热休克蛋白27(HSP27)进行Western blot和免疫组织化学验证.结果:筛选出42个具有明显表达差异的蛋白质点,质谱鉴定出10个差异表达蛋白,包括HSP27、二硫异构酶、核不均一核糖核蛋白A2/B1、磷酸丙糖异构酶、丙酮酸激酶等.Western blot和免疫组织化学结果证实HSP27在大肠癌中有过度表达,提示其可能为重要的肿瘤标志物.结论:大肠癌肿瘤组织与大肠正常黏膜之间存在差异表达蛋白,HSP27在大肠癌中有异常表达,可能作为大肠癌发生、发展的候选生物标志物.     

腺瘤样结肠息肉易感基因蛋白截短与大肠腺瘤及大肠癌早期诊断关系

目的探讨腺瘤样结肠息肉(APC)易感基因截短表达水平在大肠腺瘤及大肠癌早期诊断中的价值。方法 34例大肠癌病理标本作为大肠癌组、28例大肠腺瘤标本作为大肠腺瘤组及同期正常大肠组织标本15例作为正常组。3组分别采用蛋白截短检测技术,比较APC基因蛋白截短表达差异。结果正常组APC蛋白截短(+)为0%,大肠腺瘤组42.86%,大肠癌组47.06%,大肠腺瘤组和大肠癌组差异不显著(P0.05);正常组与大肠腺瘤、大肠癌组差异显著(χ2=8.917、P=0.003,χ2=10.481、P=0.001);管状腺瘤组织的APC蛋白截短(+)(75.00%),显著高于绒毛腺瘤组织(20.00%)和混合腺瘤组织(16.67%)(P0.05)。结论 APC蛋白截短(+)表达在不同大肠组织中表达具有一定的差异性,在大肠肿瘤的早期阶段APC蛋白截短(+)表达就存在差异,对早期诊断大肠肿瘤病变具有一定的意义。     

大肠癌患者肠黏膜的蛋白质组学研究

目的 应用蛋白质组学技术分析大肠癌组织黏膜和正常组织黏膜之间的差异表达蛋白,以发现有助于大肠癌早期诊断的分子标记物.方法 收集6例大肠癌肿瘤黏膜和距肿瘤10 cm以上的正常肠黏膜组织,提取蛋白质,应用二维凝胶电泳技术选取表达有显著差异的13个蛋白点进行质谱检验和生物信息学分析.结果 10个点鉴定出9种差异表达蛋白;包括热休克蛋白27、核不均一核糖核蛋白A2/B1、磷酸丙糖异构酶、丙酮酸激酶、二硫异构酶、α-肌动蛋白、平滑肌蛋白,角蛋白9、角蛋白复合体1.这些蛋白在肿瘤黏膜组织和正常黏膜组织中的表达有显著差异,除平滑肌蛋白外,其他8种蛋白均在肿瘤粘膜中呈过度表达.结论 大肠癌患者肿瘤黏膜组织和正常肠黏膜组织间存在差异表达蛋白,这些蛋白可作为大肠癌早期诊断和判断预后的分子标记物.     

大肠癌PTEN蛋白的表达及与血管形成的关系

目的探讨PTEN基因在大肠癌中的表达规律以及在血管形成中的作用。方法采用免疫组化SP法检测72例大肠癌PTEN的蛋白表达以及微血管密度(MVD)。结果大肠癌组织PTEN的表达率明显低于正常结肠黏膜组织(P<0.01)。低分化大肠癌PTEN的表达率显著低于中分化和高分化大肠癌(P<0.01)。PTEN的表达与肿瘤大小、有无淋巴结和肝转移、浸润深度以及Dukes分期无明显关系(P>0.05)。此外,PTEN阳性表达组大肠癌的MVD数量明显低于阴性组(P<0.01)。结论大肠癌中存在PTEN基因的失活,PTEN的表达和大肠癌的分化程度密切相关,并且在肿瘤的血管形成中起一定作用。     

大肠肿瘤中编码区域决定区结合蛋白的表达及意义

大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，目前治疗效果仍不十分理想，编码区域决定区结合蛋白（coding region determinantbinding protein，CRD-BP）是近年来肿瘤学研究热点之一。研究表明CRD—BP在大肠癌等多种肿瘤中表达，而在成人正常、炎性组织中无表达，提示其可能成为一个高特异性的肿瘤标志物。由于多数大肠癌是由大肠腺瘤演变而来，我们拟应用半定量RT-PCR方法榆测其在正常大肠黏膜、不同阶段大肠腺瘤及大肠癌中表达，并比较其差异，以了解其在大肠腺瘤到大肠癌发展各阶段的表达情况，评价CRD—BP成为一个肿瘤标志物的可能性以及在大肠肿瘤的诊断中的价值。