严重急性呼吸综合征的临床病理及发病机制研究

目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)的病理学特征及临床治疗的病理学基础 ,并探讨SARS的发病机制。方法　采用光、电镜观察 ,对 2例SARS系统尸检病例和 4例多器官多部位穿刺标本进行病理学观察 ;应用免疫组化标记并分析肺组织及免疫器官中各淋巴亚群的分布及数量变化 ;核酸原位杂交结合电镜观察 ,作SARS冠状病毒 (SARS CoV)在体病原学定位及定量检测。结果　 6例SARS肺组织均呈弥漫性肺泡上皮损伤 ,2例尸检肺组织呈急性间质性炎和区域性肺水肿 ,2例尸检和1例穿刺肺组织中肺泡腔内透明膜形成 ,1例尸检和 2例穿刺肺组织呈脱屑性终末细支气管炎及肺泡炎 ,2例穿刺病例见早期肺纤维化及肺泡腔机化。SARS肺外器官 ,2例病程 <12dSARS病例免疫器官呈较广泛的出血坏死性炎 ,组织细胞及单核细胞样免疫母细胞反应性增生 ,骨髓组织内单核 粒细胞系统相对抑制 ,而 4例病程 >2 1dSRAS病例脾脏中央动脉周围T淋巴细胞增生 ,骨髓像大致正常。体内SARS CoV存在多种感染靶细胞和靶器官 ,其中肺脏为主要靶器官 ,支气管、肾、肾上腺、心肌、胃肠道、淋巴组织及睾丸等也为靶器官。肺组织内以CD8+ 细胞浸润为主 ,杂以少数CD4 + 细胞 ;淋巴结及脾脏中CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 和CD2 0 + 淋巴细胞亚群呈不同程度减少及比例失衡 ,而     

SARS患者特异性SARS-CoV抗体变化的观察

目的　研究SARS患者特异性SARS CoV抗体IgG、IgM动态变化规律 ,探讨机体感染SARS CoV后免疫应答的可能模式及流行病学意义 ,为科学的防治SARS提供理论依据。方法　ELISA测定北京地区最早感染SARS CoV的 3条传播链的SARS患者 4 7例 ,12 4份血清中SARS CoV特异性抗体IgG、IgM。其中 ,山西链 9人 ,13份血清 ;香港链 31人 ,84份血清 ;北京链 7人 ,2 7份血清。结果　 3条传播链SARS患者IgM阳性率 73% ,IgG阳性率 86 %。IgM最早于发病第 6天出现 ,阳性率高峰在病程 2～ 3周 ;持续时间短 ,1月后 6 0 %患者IgM逐渐阴转。IgG最早也可在发病第 6天出现 ,阳性率高峰在病程 3～ 4周 ,3月后IgG抗体阳性率减少。机体感染SARS CoV后 ,抗体出现有 3种模式。结论　机体感染SARS CoV后 ,近 90 %患者可出现特异性IgG ,病程 3～ 4周阳性率最高 ;特异性IgM抗体在病程2～ 3周阳性率最高 ,但多数只持续 2 0～ 30d。特异性IgG抗体表现 3种免疫应答模式。     

SARS患者脾淋巴细胞免疫组织化学的定量分析

目的对严重急性呼吸综合征（SARS）患者脾淋巴细胞进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞及CD20^＋B细胞的分布进行观察,并进行图像分析。结果SARS患者脾内的脾小体及动脉周围淋巴鞘（白髓）均遭到严重损害。动脉周围淋巴鞘的数量减少90．39％;脾小体减少80％左右,有的甚至完全消失;脾红髓广泛出血坏死。红髓内的CD3^＋T细胞平均数较正常减少71．76％,有的甚至完全消失,CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞分别平均减少86％和84％。CD20^＋B细胞减少80％以上。结论定量分析显示,SARS死亡患者脾中T细胞和B细胞普遍严重减少,提示SARS患者免疫系统遭到严重破坏,并可能是疾病的原发性损伤。     

SARS-CoV核衣壳蛋白抗原性鉴定和基因免疫研究

目的　了解SARS冠状病毒 (SARS CoV)核衣壳蛋白 (N蛋白 )的抗原性及其基因疫苗的免疫原性。方法　用大肠杆菌表达SARS CoV的N蛋白 ,用SARS患者恢复期血清对其进行抗原性鉴定。再构建N蛋白基因疫苗 ,肌肉注射接种小鼠 ,检测小鼠血清中的抗N蛋白IgG抗体、脾细胞增殖和迟发型超敏反应。结果　大肠杆菌重组表达的SARS CoVN蛋白具有强抗原性 ,其基因疫苗能在小鼠有效诱导N蛋白特异性抗体和CD4 、CD8 T淋巴细胞免疫应答。结论　SARS CoV的N蛋白可作为重要的SARS血清学诊断抗原 ,并对于SARS的特异性预防和治疗有潜在的应用价值。     

恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达

目的 :探讨SARS的免疫发病机理 ,研究恢复期SARS患者T淋巴细胞凋亡相关基因蛋白表达。方法 :流式细胞仪测定 15例恢复期SARS患者的T淋巴细胞及其亚群和凋亡相关基因蛋白———CD95、Bcl 2、DR5及人冠状病毒 2 2 9E受体—CD13表达 ;并以 10例高危、健康的医务人员为对照。结果 :恢复期SARS患者外周血T淋巴细胞亚群 (CD3、CD4、CD8)均恢复正常 ;CD4 DR5、CD13,CD8 DR5、CD13表达均阴性 ,与对照组无明显差异。但是 ,恢复期SARS患者CD4、CD8阳性细胞仍明显表达Fas和Bcl 2 ,其阳性细胞的百分数较对照组明显增多 (P <0 0 1)。结论 :Fas FasL途径导致T淋巴细胞凋亡可能是SARS患者的免疫发病机理之一 ,而恢复期Bcl 2表达增多对抑制T淋巴细胞的进一步凋亡、T淋巴细胞亚群恢复正常可能具有重要作用。SARS患者T淋巴细胞凋亡不通过Trail DR5 细胞凋亡途径。     

慢性再生障碍性贫血患者免疫功能改变及意义

目的　观察慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者红细胞和淋巴细胞免疫功能的改变 ,探讨红细胞和T淋巴细胞免疫功能之间及机体免疫功能和CAA发病之间的关系。方法　采用免疫酶标比色法、免疫比浊法、单克隆抗体免疫萤光法、流式细胞仪检测分析等 ,观察比较CAA患者和对照组的各项免疫指标。结果　与对照组相比较 ,CAA患者IgG、IgA、IgM、CD5 8、RBC C3bRR等显著降低 (P <0 .0 1) ,CD3、CD4、CD8、CD4 /CD8比值等明显异常。结论　CAA患者表现多种免疫功能改变 ;主要在骨髓内分化、增生的红细胞、B淋巴细胞的免疫功能明显低下 ,在骨髓外分化、增生的T淋巴细胞亚群的表达多异常升高。     

普通/合并基础疾病SARS患者各免疫学指标的不同及意义

目的:研究基础疾病对严重急性呼吸综合征(SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)患者免疫学指标的影响,为探讨SARS患者的发病机制、预测病情变化及为治疗提供依据。方法:收集1291例SARS患者的临床资料,建立病历数据库,记录普通合并基础疾病SARS患者发病1～5周各周的白细胞计数,淋巴细胞记数,CD3+、CD4+及CD8+T淋巴细胞绝对值,C3、C4、血沉及C反应蛋白等数据,研究各免疫学及炎性指标在普通合并基础疾病SARS患者中的不同及意义。结果:合并基础疾病SARS患者的白细胞、淋巴细胞、CD3+、CD4+及CD8+T细胞绝对值明显低于普通患者(P<0.01或P<0.05),而CRP水平明显高于普通患者(P<0.01)。结论:合并基础疾病SARS患者的T细胞免疫功能明显弱于普通SARS患者,对此类患者进行免疫支持治疗可能对改善预后具有一定意义。     

SARS的肺部病理研究

SARS是一种新型的带有全球性冲击的传染性疾病。目前认为一种来自冠状病毒科 (Coronaviridae)的病毒是其元凶 ,但其发病机理仍不甚明了。本病的临床特征为发热、呼吸困难、淋巴细胞减少 ,以及X线方面的急性改变 ;上呼吸道症状并不明显 ,但据报道一些病人出现腹泻 ;抗生素治疗无效。人们一贯认为本病与SARS相关的冠状病毒 (SARS CoV)有关。虽然这种病毒似乎与SARS的发生有关 ,但它并不局限于肺部。Poutanen及其同事发现人间质肺炎病毒 (HMPV)在SARS病人中成为第二种病原体 ,由此假设HMPV增强了冠状病毒感染的进程或严重程度。…     

肠道菌群在自身免疫性疾病中的研究进展

自身免疫性疾病(autoimmune disease,AID)通过自身产生抗体,导致免疫耐受失衡,而引起的一系列慢性炎症反应,甚至对机体组织造成损伤。目前AID发病率逐渐升高,而其确切的发病机制尚不明确。肠道菌群作为人体最大的"免疫器官",参与机体代谢,形成肠粘膜屏障,维持免疫功能正常。随着对人体肠道菌群研究的深入,越...     

SARS患者脾树突状细胞和巨噬细胞的免疫组织化学观察

目的 对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾树突状细胞、巨噬细胞数量和巨噬细胞大小进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据.方法 通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾S-100 、CD68 、 HLA-DR 、CD83 细胞的分布进行观察,并采用图像分析系统对阳性细胞数量或体积进行分析.结果 SARS死亡患者脾内白髓中S-100 树突状细胞数较正常平均减少80.49%,有的甚至完全消失;脾红髓中CD68 巨噬细胞数量较正常平均减少39.48%,体积是正常平均值的2.21倍.脾白髓中HLA-DR 抗原呈递细胞明显减少.SARS死亡患者脾与正常脾中均无CD83 成熟树突状细胞.结论 SARS患者免疫系统中抗原呈递系统遭到严重破坏,支持SARS是一种病毒性免疫缺陷病.SARS病毒不能引发树突状细胞成熟.巨噬细胞的体积增大处于激活状态,提示巨噬细胞在SARS发病机制中起一定作用.     

恢复期SARS患者淋巴细胞亚群分布及其与T淋巴细胞Ag-NOR含量相关性的初步分析

目的　通过检测恢复期SARS患者外周血淋巴细胞亚群分布及其与T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (Ag NOR)含量的相关性分析 ,探讨恢复期SARS患者的免疫状态及淋巴细胞亚群与活性状态改变的关系。方法　以流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞亚群 ,用KL型免疫图像分析系统检测外周血T淋巴细胞Ag NOR ,对两者进行相关分析。结果　恢复期患者T淋巴细胞总数及CD4 +亚群基本正常 ,而CD8+亚群偏高 ,CD4 +/CD8+降低 ,CD4 +/CD8+<1的比例占 37.4 % ,激活T细胞中以CD8+细胞为主。B细胞比例正常。NK细胞明显低于对照组。重症患者CD4 +、CD4 +/CD8+、CD1 9+CD5+降低及CD8+、CD3+HLA DR+升高。 50岁以上及使用大剂量激素患者CD3+HLA DR+升高。淋巴细胞Ag NOR的含量 (IS % )在正常范围 ,但患者IS值呈偏态分布 ,低于正常范围者占 4 4.99%。淋巴细胞Ag NOR的含量与CD3+、NK、CD3+HLA DR+、CD3+CD2 5+在统计学上具有相关性。结论　恢复期SARS患者免疫功能趋于恢复正常 ,但部分患者的淋巴细胞亚群数量及淋巴细胞活性仍未恢复正常 ,这些病人在临床症状得到改善之后 ,尚需一定时间的观察随访 ,以了解SARS病毒对人体免疫机能的长期影响。     

CD4+T淋巴细胞的活化在HIV-1感染长期非进展者及典型进展者之间差异的研究

目的了解CD4 T淋巴细胞的活化在长期感染非进展者(LTNP)及典型进展者(TP)之间的差异,探讨HIV感染的免疫基础。方法收集24例HIV-1感染患者(7名LTNP患者,17名TP患者)及15例健康对照的抗凝血标本,流式细胞术检测CD4 T淋巴细胞的活化标志物CD38并检测其CD4计数等指标;bDNA方法检测患者体内的病毒载量。结果与正常人相比,LTNP患者的CD4 T淋巴细胞的活化的差异无统计学意义(P>0.05)而TP患者的活化程度明显增高(P<0.01);HIV感染者CD4 T淋巴细胞CD38的表达水平与CD4计数呈正相关,与病毒载量呈负相关。结论随着疾病的进展,CD4 T淋巴细胞的活化程度逐渐增高;LTNP患者CD4 T淋巴细胞的活化程度没有明显增高可能是其疾病长期不进展的原因之一。     

SARS康复者特异性细胞免疫和免疫记忆T细胞功能的研究

目的　观察完全康复期严重急性呼吸综合征 (SARS)患者外周血针对SARS冠状病毒(SARS CoV)S抗原多肽的特异性细胞免疫反应。方法　分离外周血单个核细胞 (PBMC) ,经混合S抗原多肽刺激后 ,采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和酶联免疫斑点试验 (ELISPOT)检测 ,分析完全康复期SARS患者抗原特异性T淋巴细胞应答反应。结果　当SARS CoV的S抗原混合多肽刺激后 ,只有SARS康复期患者的PBMC分泌大量的IFN γ。同时 ,IFN γ产生细胞的阳性率也显著高于健康对照组 (P <0 .0 5)。此外 ,当用多克隆刺激剂 (PMA +ionomycin)刺激后 ,正常人和康复期SARS患者的PBMC产生等量的IFN γ及IFN γ产生细胞 ,两者经统计学处理 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5)。结论SRAS CoV不仅能诱导中和抗体的产生 ,而且还可诱导抗原特异性细胞免疫应答反应 ,并可在体内长期维持免疫记忆功能。     

Graves病患者治疗前后血清CD30水平的观察

<正> Graves病(GD)是一种器官特异性自身免疫性疾病,其特点是甲状腺内有淋巴细胞的浸润,疾病活动期血循环中存在激活的T细胞和自身抗体,然而,具体的发病机制不详。本文通过对GD患者治疗前后血清CD30水平的测定,探讨CD30分子在GD发病机制中的作用。     

肠黏膜Th17细胞在HIV/AIDS病理过程中的作用

人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)主要利用CD4为受体、CCR5和CXCR4为辅助受体感染人CD4+T淋巴细胞,并在大多数感染者中引发获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)[1].肠相关淋巴组织(gut-associated lymphoid tissue,GALT)具有丰富的CD4+ CCR5+T淋巴细胞,是HIV感染的主要靶组织.现已有研究表明,CD4+T细胞缺失和持续的免疫活化是HIV感染的主要免疫病理特征.病毒感染导致肠道免疫系统结构和功能的损伤、黏膜屏障破坏,从而导致机体慢性免疫活化,这可能是HIV-1致病的重要机制[2-3].     

HIV/AIDS患者CCR5、CXCR4的表达与疾病进展的关系

目的　了解HIV AIDS患者淋巴细胞表面第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,分析其与疾病进展的关系 ,探讨HIV感染的免疫基础。方法　收集 33例HIV AIDS患者及 13例健康对照的抗凝全血 ,用流式细胞仪检测第二受体CCR5、CXCR4的表达 ,并分析第二受体表达与病毒载量、CD4 + T淋巴细胞绝对值及T淋巴细胞活化 (HLA DR+ CD38+ )的相关性。结果　艾滋病组CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5表达高于无症状HIV 1感染组及健康对照 (P <0 .0 0 1) ;艾滋病组CD8+ T淋巴细胞表面CXCR4表达低于健康对照 (P <0 .0 1)。HIV AIDS患者CD4 + 、CD8+ T淋巴细胞表面CCR5的表达与病毒载量明显正相关 (P <0 .0 1) ;与CD4 + T淋巴细胞绝对值明显负相关 (P <0 .0 1) ,与T淋巴细胞活化(HLA DR+ CD38+ )水平明显正相关 (P <0 .0 0 1)。结论　HIV 1感染者第二受体CCR5的表达与机体对HIV的免疫反应及疾病进展密切相关。     

激素应用与SARS-CoV在患者体内存留的相关性探讨

探讨糖皮质激素的应用及使用时间与剂量是否与SARS患者体内SARS CoV存留有关。对象和方法 :标本来源 :2 0 0 3年 3～ 5月发病的 177例恢复期 (发病 2 8d以上 )SARS患者 ,平均病程为 (37 3± 0 7)d ,SARS CoV抗体检测阳性。检测 :收集患者咽漱液、尿、粪便标本 ,使用达安基因股     

淋巴肝的新概念及自身免疫性肝病的免疫损伤机制

人们都知道肝脏是人体最大的消化和代谢器官 ,由于其特殊的解剖位置和血液供应系统以及其在胚胎期的造血功能 ,使得肝脏在多种免疫细胞的分化及免疫应答中起着重要的调节作用 ,并维持肝脏的重要生理功能。由于免疫应答而导致的肝脏病理损伤也是多种肝脏疾病尤其是自身免疫性肝病的发病机制。但是尽管如此 ,直到新近有人提出淋巴肝的概念以前 ,肝脏一直未被定义为免疫器官[1] 。1　肝脏的免疫细胞和干细胞1 1　淋巴细胞　肝脏的淋巴细胞以CD3+ T细胞为主 ,B细胞仅占 5 %。肝脏中 15 %的CD3+ T细胞表达γδT细胞受体 ,但外周血中的T细胞几…     

BALB/c小鼠滴鼻免疫灭活SARS病毒对全身性免疫的影响

目的　了解灭活SARS病毒滴鼻免疫小鼠对全身性免疫的影响。方法　将 5周龄雌性BALB c小鼠随机分为两组 ,每组 10只 ,免疫组小鼠每只免疫 5 0 μg的灭活病毒悬液 ,对照组注射等体积PBS。分别在免疫的 8d和 14d处死小鼠 ,分离脾细胞和外周血淋巴细胞 ,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型 ;间接ELISA法测定其血清中抗SARS病毒特异性抗体IgM和IgG。结果　第 8天脾脏的CD4 T细胞的构成比增加 (P =0 .0 2 7)。外周血淋巴细胞表型在第 8天即开始发生改变 ,在第 14天变化明显 ,与对照组差异有显著性 ,CD4 ,CD8 ,CD3 T细胞构成比和T B比值显著降低 (P <0 .0 5、0 .0 1、0 .0 1、0 .0 1) ,同时CD4 5R B2 2 0 细胞 (B细胞 )构成比显著增加 (P =0 .0 0 0 )。但是此时血清中特异性抗体未能被检测到。结论　在未应用佐剂的情况下 ,小鼠滴鼻接种灭活SARS病毒虽然可以导致诱导机体免疫细胞表型的变化 ,却未能诱导抗体的产生。     

SARS愈后2年T淋巴细胞亚群的研究

严重急性呼吸综合症(SARS)是由冠状病毒的一个新的变种引起的严重的高致病的病毒性传染病,传染性强、发病快,病情严重威胁人类的健康和生命。其发病早期出现CD3~ 、CD4~ 、CD8~ T淋巴细胞下降,随病情好转多数患者的细胞免疫功能指标逐渐回升,为了解SARS患者愈后2年的细胞免疫功能的状态,我们于2005年5月对100例SARS确诊病例(SARS血清抗体阳性)愈后2年进行随访调查,对其T淋巴细胞亚群进行分析研究,探讨SAILS愈后2年T淋巴细胞亚群现状及影响因素。