唾液变形链球菌浓度与年轻恒牙患龋的相关性研究

目的 探讨唾液变形链球菌浓度在11至12岁小学生中的分布情况及其与患龋状况间的相关性.方法检查365名11至12岁小学生年轻恒牙的患龋情况并收集唾液标本,用单克隆抗体法测量唾液中变形链球菌的浓度.结果随着唾液中变形链球菌浓度的升高,所对应的人数不断减少.患龋儿童的唾液变形链球菌浓度[5.53(1.50,18.00)×107个/L]显著高于无龋儿童[3.42(1.60,8.10)×107个/L](P=0.1302).唾液变形链球菌浓度与龋、失、补指数的Spearman相关系数为0.136(P=0.010).当唾液变形链球菌的浓度达到8.64 ×107个/L时,受检儿童中龋齿检出率会出现成倍的增长.结论唾液变形链球菌浓度在受检儿童中呈偏态分布,其与患龋状况间存在显著的正相关关系,这在龋风险评价中有积极的意义.     

变形链球菌特异性单克隆抗体的临床初步应用

目的:分析2～4 岁儿童唾液变形链球菌水平和患龋状况的关系. 方法:选取84 名平均年龄3.8 岁的儿童进行口腔检查;采用变形链球菌特异性单克隆抗体技术检测受试儿童唾液中的变形链球菌水平,分析变形链球菌水平和患龋情况的关系;比较25 名儿童接受干预治疗前后单克隆抗体技术检测的唾液变形链球菌水平的变化. 结果:84 名受试儿童变形链球菌检出率为100%,平均密度为1.0×106/ml.25 名儿童治疗后变形链球菌水平为2×105/ml, 低于治疗前,有统计学差异(P<0.05). 结论:变形链球菌特异性单克隆抗体技术可有效观察唾液中变形链球菌水平和龋齿的变化关系,以及追踪高水平变形链球菌儿童的龋齿发展情况.     

定量聚合酶链反应检测致龋性变形链球菌

目的 创建一种临床定量检测致龋性变形链球菌的分子生物学方法。方法 采用靶基因与参照基因同步扩增法，根据变形链球菌葡聚糖酶（dexA)基因序列，设计一对特异性引物，以pET23b质粒DNA为参照基因。对196名儿童的唾液样品进行定量PCR检测并进行常规培养法的对比研究。结果 196份唾液样品定量PCR检测致龋性变形链球菌≥10^8CFU/L，唾液的检出率为91.3%。与常规培养计量法的对比符合率为94.9%。结论 变形链球菌PCR定量检测是一种早期发现龋病活性的新方法，具有快速可靠、特异性强、符合率高等特点，有广泛的临床应用前景。     

人唾液中变形链球菌的荧光定量PCR检测

目的探讨荧光定量PCR技术对人唾液中变形链球菌进行定量检测的可行性。方法从30名受试者唾液样本中提取DNA,荧光定量PCR Taqman探针法检测变形链球菌和总细菌含量。结果受试者唾液中变形链球菌的检出率为100%,含量为3.27×104~6.31×106拷贝数/mg。结论使用荧光定量PCR技术可对人唾液中变形链球菌进行快速、批量定量。     

致龋菌、唾液缓冲能力与婴幼儿龋的相关性研究

目的探讨唾液中变形链球菌、乳酸杆菌和唾液pH值、缓冲能力与婴幼儿龋的关系。方法将178名42～54个月的儿童分为患龋组（患龋牙数≥5）87例和无龋组91人。吐唾法采集非刺激性唾液和嚼蜡法采集刺激性唾液各2ml，用选择性培养的方法检测刺激性唾液中变形链球菌、乳酸杆菌的检出率和计数水平；测定非刺激性及刺激性唾液的pH值和缓冲能力。结果患龋组唾液变形链球菌和乳酸杆菌的检出率分别为96．6％和79．3％，显著高于无龋组的63．7％和27．5％（P〈0．05）；患龋组两种细菌的计数水平比无龋组高近10倍。患龋组和无龋组刺激性唾液的初始pH值和对酸的缓冲能力均显著高于非刺激性唾液（P〈0．001）；患龋组刺激性和非刺激性唾液的初始pH值和缓冲能力均显著低于无龋组（P〈0．05）；无龋组中变形链球菌、乳酸杆菌和唾液pH值、缓冲能力之间无明显的相关性；患龋组刺激性唾液的缓冲能力与变形链球菌的计数水平显著相关（r=0．249，P〈0．05）。结论变形链球菌和乳酸杆菌是婴幼儿龋的重要致病菌；唾液的初始pH值和缓冲能力偏低可能是影响婴幼儿龋的重要因素。     

荧光原位杂交技术和流式细胞仪在菌斑中致龋性变形链球菌定量检测中的应用

目的:建立快速定量检测菌斑中主要致龋菌变形链球菌的方法,为龋齿活跃性评估提供参考数据。方法:收集无龋(caries free,CF)和高龋(caries susceptib le,CS)儿童牙菌斑各15例,将不同荧光素标记的寡核苷酸探针:细菌通用探针和变形链球菌特异性探针进行荧光原位杂交,结合流式细胞仪检测菌斑中变形链球菌所占的比例。结果:在无龋儿童菌斑中,变形链球菌在总菌中所占比例数是1.24%~3.4%(2.25±0.71),而在高龋儿童菌斑中比例为5.04%~9.7%(7.37±1.34),两组比较有着明显的统计学差异(P<0.01)。结论:流式细胞仪结合荧光原位杂交技术,可作为一种细菌定量检测方法应用于致龋性变形链球菌的定量分析中。     

高致龋变形链球菌寡脱氧核苷酸探针的设计及有效性检测

目的：设计变形链球菌ATCC25175毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针,并进行敏感性和特异性检测。方法：采用斑点杂交法,将体外合成的变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针与经PCR扩增的S.M及7种口腔常见细菌DNA进行杂交检测,然后,使用该探针测试来源于髙龋和无龋个体的唾液样本。结果：探针检测同源性序列敏感性达到1ng水平;与7株口腔常见菌种的杂交结果不存在菌株间的交叉反应,具有较高的特异性。结论：变形链球菌毒力因子gtfB寡脱氧核苷酸探针敏感性高而且特异性好,化学性质稳定。同时,观察临床唾液样本测试结果发现,其阳性率与个体龋患现状基本一致。可以进一步考察该探针检测结果与临床病例龋患风险的一致性,为今后用于大规模流行病学调查中龋高危人群的筛查奠定基础。     

唾液中放线菌与儿童龋病相关性的定量检测研究

目的建立检测内氏放线菌（Actinomyces naeslundii,An）与龋齿放线菌（Actinomyces odontolyticus,Ao）的实时荧光定量PCR（RT-PCR）。方法探讨An和Ao在唾液中的定植数量与乳牙龋失补牙面指数（dmfs）的关系。方法分别采集59名不同患龋状况儿童唾液样本,其中无龋组（dmfs=0）19名、中龋组（dmfs=4～6）21名和高龋组（dmfs﹥8）19名。提取细菌总基因组DNA,应用SYBR GreenⅡ模式的实时荧光定量PCR技术,对唾液中的内氏放线菌及龋齿放线菌进行定量检测,所得数据应用SAS9.2统计软件进行统计学分析。结果内氏放线菌占总菌的比例在三组中有显著差异（P〈0.05）,在高龋组中显著高于中龋组（P〈0.0001）,在中龋组与无龋组间无显著差异（P〉0.05）;龋齿放线菌占总菌的比例在三组中无显著差异（P〉0.05）。结论儿童唾液中内氏放线菌的数量与龋病的发生发展过程有明显相关性;龋齿放线菌与儿童龋病的发生发展无明显相关性。     

微滴数字聚合酶链反应检测婴儿唾液中变形链球菌和远缘链球菌的研究

目的 使用微滴数字PCR检测婴儿口腔内变形链球菌和远缘链球菌,评价其可行性.方法 以变形链球菌c型和远缘链球菌ATCC 27607标准菌株基因设计引物,对123名5~8个月婴儿唾液样本分别进行微滴数字PCR、巢氏PCR和常规PCR反应,检测婴儿唾液中变形链球菌和远缘链球菌.结果 微滴数字PCR定性、定量检测变形链球菌和远缘链球菌标准菌,1×10-4 ng/μl靶细菌的拷贝数达到4.8×104和3.6×104,灵敏度可达0.01%;巢氏PCR检测灵敏度为0.01%;常规PCR检测灵敏度为0.1%.用微滴数字PCR、巢氏PCR和常规PCR检测婴儿唾液中变形链球菌检出率分别为78.9%、33.3%和6.5%;远缘链球菌检出率分别为11.4%、4.1%和0,微滴数字PCR检出率明显高于常规PCR和巢氏PCR(P<0.05).结论 微滴数字PCR能早期检测婴儿口腔中变形链球菌和远缘链球菌,该方法具有较高的灵敏性和特异性,有广泛的临床应用前景.     

金银花甘草人工唾液防龋的实验研究

目的 探讨金银花甘草人工唾液对龋病发生发展的抑制效果.方法 乙醇提取金银花和甘草有效成分并加入到人工唾液中,采用液体稀释法检测其抑制变形链球菌和远缘链球菌的效果;诱导摘除腮腺后的SD大鼠致龋,建立人工龋大鼠模型,分别用金银花甘草人工唾液、甲硝唑洗必泰溶液、人工唾液和蒸馏水给4组大鼠施药,采用Keyes记分法观察金银花甘草人工唾液对大鼠口腔内龋齿发生发展的抑制效果.结果 其对变形链球菌ATCC10449株和远缘链球菌OMZ65株的最小抑菌浓度分别为25、12.5 mg/ml,最小杀菌浓度分别为200、100 mg/ml.在人工龋大鼠模型中,与蒸馏水及人工唾液组相比,金银花甘草人工唾液龋齿计分明显降低,但仍高于甲硝唑洗必泰组.结论 金银花甘草人工唾液对变形链球菌和远缘链球菌生长有明显抑制作用,并可有效抑制大鼠口腔内龋齿的发生发展.     

不同龋敏感儿童牙菌斑中4种致龋菌的动态监测分析

目的:监测无龋儿童组（caries free,CF）、低龄儿童龋组（early childhood caries,ECC）和重度低龄儿童龋组 (severe early childhood caries,S-ECC)牙菌斑中4种致龋菌的动态变化。方法:选取60名3~5岁儿童,对其进行龋病检查和牙菌斑样本收集,追踪观察1 a。采用实时荧光定量PCR技术对2次取样的4种致龋菌（变形链球菌、远缘链球菌、嗜酸乳杆菌和内氏放线菌）进行定量检测,计算各致龋菌所占总菌的比例。采用SPSS17.0软件包对实验数据进行χ²检验和配对t检验。结果:在基线及1 a后患龋率分别为66.7%和81.7%,差异无显著性（χ²=1.76,P>0.01）;龋失补牙面数分别为（5.80±2.53）和（7.90±1.76）,差异显著（t=3.51,P<0.01）。ECC、S-ECC组中,4种致龋菌所占比例在基线和1 a后有显著差异（P<0.01）。1 a后ECC、S-ECC组中变形链球菌、远缘链球菌之和所占比例显著高于基线水平（P<0.01）。变异链球菌与远缘链球菌之和所占总菌的比例与dmfs指数的变化在基线和1 a后均具有良好的线性关系。结论:菌斑中致龋菌的比例变化与低龄儿童龋密切相关,致龋菌所占总菌的比例越高,低龄儿童龋易感性就越高。     

不同龋敏感儿童菌斑中变异链球菌数量及菌群比例的定量分析

目的 比较不同龋敏感儿童口腔菌斑中变异链球菌数量及其在菌群中比例的差异。方法 采集26名3~4岁不同龋敏感的儿童牙面菌斑,运用TaqMan探针实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测有龋组和无龋组儿童菌斑中变异链球菌和总菌数量,以及变异链球菌在总菌群中所占的比例,并对结果进行分析比较。结果 有龋组和无龋组儿童每毫克菌斑中变异链球菌菌落数分别为1.33×105、1.16×103 CFU·mg-1,二者间差异有统计学意义（P=0.033）;每毫克干重菌斑中总菌落数分别为7.17×107、1.01×108 CFU·mg-1,二者间差异无统计学意义（P=0.418）;有龋组和无龋组变异链球菌在总菌中所占比例分别为0.058 6和0.018 6,二者间差异有统计学意义（P=0.008）。结论 无龋与患龋儿童牙面总菌群数量差异无显著性,但患龋儿童牙面菌斑中变异链球菌数量更多,在总菌群中所占比例更大。提示菌斑中变异链球菌与总菌的比例与儿童患龋风险密切相关,可以作为评估龋易感性和预测龋病发展趋势的新指标。     

西安市临潼区出土2200年前人龋病研究

目的:通过调查西安市临潼区出土2 200年前人牙齿的龋病流行情况,为研究龋病的发生发展规律提供依据。方法:对61例临潼区出土颅骨的999个牙齿进行详细的龋病情况观察,计算出总患龋率、不同年龄组龋齿率、不同牙位组龋齿率、不同牙面部位组龋齿率、不同年龄组龋患程度的龋齿率及不同年龄组不同性别的龋齿率进行统计学分析。结果:①本研究中有年龄标识的颅骨共43例,患龋率79.07%,龋齿率21.20%,龋均3.95。不同年龄组间龋齿率有显著性差异(P<0.05);各年龄组内不同性别间龋齿率无显著性差异(P>0.05);不同年龄组间龋患程度无显著性差异(P>0.05);②999个牙齿中共有199个龋齿,从龋患的牙位分布看,下颌第三磨牙﹥上颌第三磨牙﹥下颌第二磨牙﹥上颌第二磨牙,上颌与下颌组间龋齿率有显著性差异(P<0.05)。从龋患的牙面部位分布看,牙齿根面(颈部)龋最多,占总患龋牙面数的37.15%;其次为邻面龋,占35.37%。结论:龋病在战国中晚期至先秦时期普通人群中已经较为常见,但患龋率较现代人低,龋病的发生率随着人类不断进化和社会文明的进步而不断提高。     

龋病和牙周病主要致病菌分布的影响因素

目的 本研究分析龋病和牙周病主要致病菌的分布与研究人群人口统计学特征、口腔卫生状况和习惯及吸烟、饮酒习惯之间的关系.方法 选纽约港医疗保健系统和纽约贝勒维医疗中心2009年3月30日至2011年4月27日之间的98名应试者的人口统计学变量、口腔健康状况、口腔健康维护行为及吸烟、饮酒习惯等数据库信息及唾液和牙菌斑样本DNA进行实验研究.唾液和牙菌斑样本DNA,进行实时定量PCR,SPSS19.0统计软件分析实验所得数据,卡方检验比较不同细菌的分布情况,Kruskal-Wallis非参数检验比较不同组别DNA水平的差异.结果 性别、收入水平、受教育程度和身高体重指数不同组间,所有被测细菌均无显著性差异.口腔健康状况(包括牙齿和牙龈)较差组的人群牙龈卟啉单胞菌,牙密螺旋体,福赛斯坦纳菌,变异链球菌和远缘链球菌的检出率均高于口腔健康状况较好的2组.从不使用牙线组的牙周主要致病菌的检出率均高于其他3组,牙密螺旋体的检出率有显著性差异(P=0.023).吸烟者与饮酒者的被测细菌与不吸烟不饮酒者有所不同.牙龈卟啉单胞菌,牙密螺旋体,伴放线放线杆菌,福赛斯坦纳菌4种细菌在牙菌斑中的DNA水平均高于唾液.相关性分析结果表明,四种细菌在唾液中和龈下菌斑中的DNA水平具有显著相关性(P<0.001).结论 口腔健康状况、使用牙线、吸烟、饮酒可能影响龋病和牙周致病菌的分布,龈下菌斑中的牙周致病菌含量高于唾液,不同个体的龈下菌斑中牙周致病菌的DNA水平与唾液密切相关.     

Detection of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus on the permanent first molars of the Mosuo people in China

Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus are associated with the development of dental caries. The purpose of this study was to differentiate these bacteria by morphology, biochemical characteristics and PCR, and to compare their occurrence with the prevalence of dental caries in the Mosuo people. Plaque samples were collected from the permanent first molar in 126 Mosuo people (83 females, 43 males, aged 25-55 years, average age 36.1 +/- 7.73). Dental status was recorded as DMFT by WHO caries diagnostic criteria. Males had a significantly lower prevalence of caries and DMFT than females: 11.4 vs. 86.9% and 1.65 vs. 6.95, respectively (p<0.001). Morphological and biochemical tests gave unreliable results. The prevalence of S. mutans and S. sobrinus was 75.4 and 57.1%, respectively. 26.5% of females and 53.5% of males were positive for S. mutans alone, 18.1% of females and 16.3% of males were positive for S. sobrinus alone, while 50.6% of females and 18.6% of males were positive for both S. mutans and S. sobrinus and 4.8% of females and 11.6% of males were negative for both species. The DMFT scores of subjects positive for both S. mutans and S. sobrinus were significantly higher than of those positive for either S. mutans or S. sobrinus alone. These results indicate that subjects harboring both S. mutans and S. sobrinus have a significantly higher prevalence of dental caries than those with S. mutans or S. sobrinus alone.     

黑龙江省12岁儿童患龋状况与饮水氟浓度关系的抽样调查

目的:研究黑龙江省不同地区12岁儿童龋齿和氟斑牙的发病情况与当地饮水氟浓度的关系。方法:按照WHO《口腔健康调查基本方法》的要求,采用多阶段分层等容量随机抽样方法,抽取全省城乡6个地区的12岁年龄组792例儿童进行龋齿和氟牙症调查。采用SPSS12.0软件包进行统计学分析。结果:6个地区饮水氟浓度分别为0.29、0.40、0.68、0.77、0.80和1.14mg/L;相应的患龋率为44.7%、43.2%、41.7%、37.1%、28.0%和40.5%。除饮水氟浓度1.14mg/L组外,随着饮水氟浓度的增高,患龋率有下降趋势,两者呈负相关关系(r=-0.81)。社区氟牙症指数(CFI)与饮水氟浓度呈正相关关系(r=0.78)。结论:适当的饮水氟浓度可有效降低龋齿的发病率,在水氟过高的情况下,可能会引起龋病和氟牙症的高发。     

Lactobacillus species and genotypes associated with dental caries in Thai preschool children

Lactobacilli have been associated with the presence and progression of dental caries. Nevertheless, the relation between certain species or genotypes of Lactobacillus and caries is unclear and there are no data available for the Thai population. This study aimed to examine the distribution of species and genotypes of oral Lactobacillus among children with rather high caries prevalence, and to investigate whether certain species or genotypes were more related to caries activity than others. One hundred and sixty‐five children were examined for caries status. Saliva samples were collected and the numbers of lactobacilli were counted. A total of 357 Lactobacillus isolates from 59 children were identified to species level by 16S ribosomal RNA genes polymerase chain reaction (PCR) –restriction fragment length polymorphism and 16S ribosomal RNA gene sequencing. Furthermore, 304 isolates from 56 children were genotyped using arbitrarily primed PCR. Significant correlation was found between levels of lactobacilli and dental caries (P < 0.001). Among the 10 identified species of Lactobacillus, L. salivarius was more prevalent in children with moderate to high caries prevalence compared with children with low caries prevalence, while L. fermentum was the most predominant species in all study groups. Moreover, a genetic heterogeneity of Lactobacillus species was found among the children and those with high caries prevalence tended to be colonized with more than one clonal type. In summary, L. salivarius may be a putative caries pathogen among preschool Thai children.     

广东连南瑶族成人龋病流行病学调查

目的：调查广东连南瑶族成人（35～44岁年龄组）龋病流行情况,为连南瑶族地区开展龋病防治措施提供依据。方法采用多阶段分层等容量随机抽样的方法,抽取连南县城和各乡镇年龄在35～44岁之间的瑶族人720名,进行龋病流行病学调查。结果连南瑶族成人患龋率为58.33％,乡镇明显高于县城（c2=7.406,P=0.006）;龋均为5.63±4.92,乡镇明显高于县城（u=2.704,P=0.007）;龋齿充填率为7.20％,县城明显高于乡镇（c2=33.962,P＜0.001）;平均失牙数为3.04,乡镇明显高于县城（u=5.000,P＜0.001）。结论连南瑶族成人龋病的流行病学情况城乡差异显著,且龋齿充填率较低,平均失牙数较高。     

Prevalence of dental caries among 5-13-year-old children of Mangalore city

A study of prevalence of dental caries was undertaken in 5-13-year-old children from Mangalore city. A total of 524 children were examined. The sample consisted of 193, 160, and 171 children in the 5-7, 8-10 and 11-13 years of age group, respectively. Dental caries was examined visually and observations were recorded. Silness and L phie plaque index, L phie and Silness gingival index were used to record the periodontal status. The prevalence of dental caries was highest in 5-7-year-age group compared to 8-10 years and 11-13 years age groups. The increasing prevalence of dental caries needs dental health programmes, which target the specific segments of the population.