高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的建立高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法学。方法色谱柱为D iscovery C18(15cm×4.6mm,5μm),流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nm o.lL-1-磷酸二氢钾(70∶23∶7),75nm o.lL-1磷酸二氢钾中含1%三乙胺。流速为1.0m.lm in-1,柱温为40℃,荧光检测波长为λex363nm和λem 530nm。结果该方法的线性范围为13.7656~1957.4468ng.mL-1(r=0.9993)。提取回收率和方法回收率分别为80.90%~103.59%,102.72%~108.16%.日内RSD 7.49%,日间RSD 9.40%。最低检测限为5.2ng.mL-1。结论该方法专属性强,重现性好,操作简便,适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。     

HPLC法测定兔血浆中羟基喜树碱浓度

建立测定兔血浆中羟基喜树碱浓度的高效液相色谱-紫外检测法.色谱柱:Lichrospher C18柱(250mm×4.6mm,5μm),C18预柱(10mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.075mol·L-1醋酸铵缓冲液(pH6.4)(30:70),含5mmol的三乙胺;流速:1.0ml·min-1;检测波长:384nm.羟基喜树碱保留时间为5.0min,线性范围为40～1600ng·ml-1,最低检测限为25ng·ml-1.血浆中羟基喜树碱的回收率为96.32%～106.1%.本法简便实用,定量准确,可用于羟基喜树碱药代动力学研究.     

高效液相—荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的建立高效液相—荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法。方法色谱柱为Discovery C18(15.0mm×4.6mm,5μm),流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nmol/L磷酸二氢钾(70:23:7),75nmol/L磷酸二氢钾中含1%三乙胺,流速为1.0ml/min,柱温为40℃,荧光检测波长为363nm和530nm。结果该方法的线性范围为13.7656～1957.4468ng/ml(r=0.9993)。萃取回收率和方法回收率分别为80.90%～103.59%、102.72%～108.16%,日内RSD≤7.49%,日间RSD≤9.40%。最低检测限为5.2ng/ml。结论该方法专属性强,重现性好,操作简便,适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。     

反相高效液相色谱法测定环孢素A血药浓度

目的采用RP-HPLC法测定环孢素A血药浓度.方法色谱柱为HypersilBDSC18柱(4.6mm×150mm,5μm),乙腈-水(62∶38)为流动相,柱温70℃,流速1.8ml*min-1,检测波长205nm.结果CsA血药浓度在50～1200ng*ml-1范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系,最低检测浓度为10ng*ml-1.平均回收率为(97.5±5.8)%(n=15).日内RSD≤6.8%,日间RSD≤9.6%.结论方法简单、快速、准确,可用于环孢素的临床药动学研究.     

RP-HPLC法测定加替沙星血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定血浆中加替沙星浓度.方法:血浆用二氯甲烷提取,色谱柱为ZorbaxC18(4.6mm×250mm),流动相为0.01mol*L-1磷酸二氢钾-甲醇-三乙胺(65∶34.8∶0.2),检测波长292nm,流速1.0ml*min-1,以司帕沙星为内标.结果:加替沙星浓度线性范围0.01～5μg*ml-1,最低检测浓度0.01μg*ml-1,绝对回收率为85.1%,相对回收率为100.6%.日内,日间RSD分别为3.0%和3.7%.结论:该方法适用于人体药物动力学研究.     

HPLC-FLD测定大鼠血浆中的10-羟基喜树碱方法学研究

目的 建立一种简单、准确的测定大鼠血浆中10-羟基喜树碱含量的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD).方法 用1%冰醋酸-甲醇溶液处理血浆样品,采用高效液相色谱-荧光检测器,以喜树碱为内标.色谱柱:Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:以5%乙腈为流动相A,乙腈为流动相B,流速为1.2 mL·min-1,荧光检测器激发波长和发射波长分别为Ex=380 nm,Em=515 nm.采用室温梯度洗脱,进样体积为50μL.结果 本试验采用两条分段函数,大鼠血浆中10-羟基喜树碱在1.25~20 ng·mL-1及20~320 ng·mL-1范围内线性良好,线回归系数分别为0.9998和0.9995.方法 准确度为98.9%~103.8%,10-羟基喜树碱高、中、低3个浓度的提取回收率均大于80%.日内精密度RSD<4.2%,日间精密度RSD<4.8%.结论 该方法 操作简便,灵敏度高,精密度和准确度好,适用于大鼠血浆中10-羟基喜树碱含量的测定.     

反相高效液相色谱法测定人体内氟比洛芬含量

目的建立人血浆中氟比洛芬反相高效液相色谱测定法.方法采用外标法,样品处理采用溶剂萃取法,色谱柱Irregular-HC18柱,流动相甲醇-7.42mmol*L-1磷酸液(75∶25),流速1.0ml*min-1,检测波长247nm,灵敏度0.01AUFS,进样量20μl.结果本法线性范围0.05～20.0μg*ml-1,最低检测限0.2ng,绝对回收率91.01%,相对回收率98.31%,日内和日间差分别为2.93%和5.73%.结论本测定方法简便易行,符合分析测定要求.     

反相高效液相色谱法测定人血浆中阿替洛尔的浓度

目的:建立反相高效液相色谱法测定血浆中阿替洛尔浓度.方法:以乙酸乙酯-异丙醇(8:1)为提取溶剂,液-液萃取法处理血浆样品.色谱柱:Phenomenex C18;流动相:0.05 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(pH 3.2)-乙腈(90:10).检测波长:λex=230 nm,λem=310 nm.流速:1.0ml·min-1.结果:线性范围4.6～883.2 ng·ml-1;最低检测浓度为2.3 ng·ml-1;绝对回收率为95.1%;日内RSD小于3.9%,日间RSD小于5.5%.结论:方法灵敏准确,简便可行,适于阿替洛尔的治疗药物浓度监测.     

HPLC-荧光法测定人血浆中羟基喜树碱的两种构型及其相互间的转化

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定人血浆中羟基喜树碱两种活性成分盐型羟基喜树碱(C-HCPT)和酯型羟基喜树碱(L-HCPT)含量的方法,并且对两者之间的相互转化进行了初步研究。方法采用HPLC-荧光法,Lichrospher C18色谱柱,流动相为乙腈-0.075 mol.L-1醋酸铵缓冲液(32∶68,pH 6.4),流量1.0 ml.min-1,检测器激发波长为363 nm,发射波长为530 nm,内标法计算药物浓度。结果人血浆样品中C-HCPT、L-HCPT峰分离良好,内源性杂质不干扰样品峰,最低检测浓度均为5 ng.ml-1。C-HCPT、L-HCPT浓度范围在15~2000 ng.ml-1间呈线性相关,回归方程分别为Y1=9.393×10-4X1-9.1×10-6和Y2=1.0207×10-3X2-3.4×10-6,相关系数分别为r1=0.9997和r2=0.9998,相对回收率分别为96.79%~119.64%和100.23%~112.93%,日内和日间变异均小于10%。两者之间的转化具有一定规律性;C-HCPT标准血样-20℃冻存20 d稳定,L-HCPT标准血样的稳定性有待进一步研究。结论本方法专属性强,灵敏、可靠,适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的监测和体内的药代动力学特征研究;有关两者相互转化的机制及L-HCPT稳定性问题尚待进一步深入研究。     

反相离子对色谱-荧光检测器同时检测两种形式的羟基喜树碱

目的建立同时检测两种形式羟基喜树碱的反相离子对色谱-荧光检测器方法。方法色谱柱:Kromasil ODS-C18柱(4.6×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.075 mol.L-1乙酸铵缓冲液(含0.005 mol.L-1四丁基溴化铵,pH 6.4)(30∶70);流速:1.0ml.min-1;柱温:30℃;检测器激发波长:363 nm,发射波长:550 nm。结果羟基喜树碱内酯和羧酸盐的保留时间分别是5.118min和6.600 min,理论塔板数分别是4587和5410,分离度为3.803。结论两种形式羟基喜树碱的保留时间、理论塔板数和分离度均达到了《中国药典》的要求,方法简单可靠。