缺血再灌注对大鼠细胞黏附分子和单核细胞趋化蛋白-1表达的影响及硫酸镁的作用

目的：探讨缺血再灌注(I—R)对血小板P—选择素(Ps)、白细胞CDllb及心肌组织单核细胞趋化蛋白—1(MCP—1)基因表达的影响及硫酸镁对I—R损伤的保护作用。方法：建立在体大鼠I—R模型，然后把大鼠随机分成3组：假手术组(sham组)、缺血再灌注组(I—R组)、硫酸镁组(Mg^2 组)。用流式细胞仪及逆转录聚合酶联反应(RT—PCR)分别测定I—R组大鼠术前、再灌注(R)5、30、60、180、360min血小板Ps和白细胞CDllb表达及心肌组织MCP—l mRNA表达。结果：I—R组血小板Ps表达在R5开始上升，在R60达高峰(P＜0．01)；白细胞CD11b表达显著增高(P＜0．0l及P＜0．05)；心肌组织MCP—l mRNA在R60开始上升，至R360达高峰(P＜0．01)；血清Ca^2 浓度均显著增高(P＜0．0l及P＜0．05)。Mg^2 组血小板Ps、MCP—l mRNA的表达及血清Ca^2 浓度均降低，但对白细胞CDllb的表达无影响。结论：I—R促进大鼠细胞黏附分子、趋化因子的表达；硫酸镁可能通过抑制血小板Ps及心肌组织MCP—l mRNA的表达，降低血清Ca^2 浓度，从而起到心脏保护作用。     

硒对大鼠血管平滑肌细胞表达细胞间黏附分子-1的影响

目的：观察抗氧化剂亚硒酸钠(Se)对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)细胞间黏附分子(ICAM)—1表达的影响，以探讨TNF—α介导单核细胞与VSMC黏附，致动脉粥样硬化及硒抗动脉粥样硬化的可能机制。方法：体外培养大鼠VSMC，分别为TNF—α(20ng／m1)及TNF-α(20ng／ml) Se(0.5-2.0μmol/L),孵有24h，采用细胞黏附实验、流式细胞术和RT—PCR测定ICAM—1蛋白及mRNA水平表达。结果：TNP—α可诱导VSMC ICAM—1表达增强；而硒可降低TNF—α诱导的ICAM—1mRNA水平及蛋白表达，且呈浓度依赖性。结论：抗氧化剂硒可抑制TNF—-α诱导的VSMC中ICAM—1的表达，减少单核细胞与VSMC黏附，这可能对延缓动脉粥样硬化的发生发展起一定作用。     

益气化瘀方对腰神经根损伤大鼠神经细胞黏附分子的作用

目的:探讨益气化瘀方对大鼠神经再生修复过程中神经肌肉接头部神经细胞黏附分子(neuralcelladhesionmolecule,NCAM)的作用。方法:大鼠L5神经根损伤后,予以益气化瘀方分别治疗10、20和30d。采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术,观察大鼠比目鱼肌神经肌肉接头部NCAM的分布变化。采用α金环蛇毒萤光结合剂显示乙酰胆碱受体(acetylcholinereceptor,AChR),NIH图像分析系统定量测定NCAM与AChR的重叠面积。结果:益气化瘀方组NCAM在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸以及与AChR的重叠面积均明显优于模型组。结论:NCAM的表达与AChR的神经支配情况密切相关。益气化瘀方可促进神经的再生修复。     

固本化痰通脉方对痰阻血脉大鼠主动脉巨噬细胞和黏附分子表达的影响

目的:观察固本化痰通脉方对痰阻血脉大鼠主动脉巨噬细胞和黏附分子表达的影响,探讨痰邪的致病机制。方法:7周龄正常雄性Wistar大鼠50只随机分为正常对照组、模型组、固本化痰通脉方低剂量组、固本化痰通脉方高剂量组、辛伐他汀对照组5组,在高脂饮食基础上建立痰证模型,比较各组大鼠血脂代谢的改变,免疫组化方法观察主动脉内皮巨噬细胞和细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascularcelladhesionmolecule-1,VCAM-1)、P-选择素、E-选择素的表达,并经图像分析定量。结果:与正常对照组相比,模型组血脂水平、巨噬细胞和黏附分子的表达差异有统计学意义(P<0.01);各治疗组与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:固本化痰通脉方能降低血清胆固醇、甘油三酯,升高高密度脂蛋白水平,抑制主动脉内皮巨噬细胞、ICAM-1、VCAM-1、P-选择素和E-选择素的表达。     

氚照射对大鼠海马神经细胞黏附分子 L1、NCAM 表达的影响

目的：探讨低剂量氚照射对大鼠海马神经细胞黏附分子 L1、神经细胞黏附分子(NCAM)表达的影响。方法取24 h 新生鼠脑海马细胞培养,培养第7天以3．7×102、3．7×103、3．7×104、3．7×105、3．7×106 Bq/ ml 终浓度氚水照射细胞24 h,并设对照组(0 Bq/ ml),活细胞工作站测定各处理组细胞的迁移距离;Western blot 法、免疫细胞化学法检测各浓度氚水照射下神经细胞黏附分子 L1及 NCAM 蛋白的表达情况。结果神经细胞迁移距离测定结果显示,与对照组相比,受照组细胞迁移距离明显缩短,且随着氚水浓度的不断增加而逐渐缩短(P <0．05);Western blot 法、免疫细胞化学法检测显示受照组神经细胞黏附分子 L1、NCAM 蛋白表达含量均低于对照组,并随氚水浓度的升高表达量呈递减趋势(P <0．05)。结论氚照射可致神经细胞黏附分子表达量减少进而可影响神经细胞的正常迁移。     

小细胞肺癌组织中神经细胞黏附分子、嗜铬蛋白A及突触素的表达及临床相关分析

目的检测神经细胞黏附分子(NCAM/CD56)、嗜铬蛋白A(CgA)及突触素(Syn)在小细胞肺癌(SCLC)组织中的表达,探索其在SCLC组织中表达的意义与价值。方法应用组织反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测CD56、CgA及Syn在15例SCLC、15例非小细胞肺癌(NSCLC)和10例正常组织中的表达,并应用Fisher确切概率法检验分析表达结果。结果 CD56、CgA、Syn基因在SCLC组织中表达的阳性率高于NSCLC及正常组织,差异均有统计学意义(P<0.05);3项指标联合检测SCLC的敏感性为93.3%,特异性为96.0%,准确性为90.0%;CgA基因在SCLC广泛期的表达(77.8%)高于局限期的表达(0.0%),在有淋巴结转移组织的表达(70.0%)高于无淋巴结转移组织的表达(0.0%)。CD56和Syn蛋白在SCLC组织中的表达高于NSCLC组织和正常组织(P<0.05);但是CgA蛋白在SCLC、NSCLC及正常组织中表达的阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CD56、CgA、Syn的检测对SCLC的诊断具有重要意义,CgA基因的表达水平可以间接反映SCLC分期。     

消痰散结方对MKN-45人胃癌细胞黏附分子CD_(44)V_6表达的影响

目的 :观察消痰散结方对体外培养的 MKN- 45人胃癌细胞黏附分子 CD44 V6表达的影响 ,初步探讨了消痰散结方抑制胃癌细胞转移的作用环节。方法 :制备消痰散结药物血清 ,体外培养 MKN- 45人胃癌细胞 ,拟消痰散结方药物血清干预培养细胞 ,采用免疫组化 ABC法检测胃癌细胞中 CD44 V6的表达。结果 :中药组胃癌细胞中CD44 V6表达水平明显低于空白对照组。结论 :消痰散结方抑制胃癌细胞转移的环节可能和影响黏附分子的表达 ,从而影响细胞的黏附性机制有关     

遗尿方对肾阳虚多尿大鼠抗利尿激素含量和环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷比例的影响

目的：探讨遗尿方对肾阳虚多尿大鼠的影响。 方法：40只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、去氨加压素（弥凝）组、小剂量遗尿方组和大剂量遗尿方组,每组8只。空白组予生理盐水0.2 mL肌注,其余组给予氢化可的松25 mg/kg肌注造模,1次/d,连续21 d;造模第8天起分别给予双蒸水、弥凝、大剂量遗尿方、小剂量遗尿方灌胃30 d。观察治疗前后24 h尿量改变,治疗后血清抗利尿激素——精氨酸加压素（arginine vasopressin,AVP）含量,血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）含量,cAMP/cGMP比值及肾组织的形态学改变。 结果：与空白对照组比较,模型组24 h尿量明显增多,血清AVP含量及血浆cAMP/cGMP比值明显降低;与模型组比较,各用药组尿量减少,血清AVP含量及血浆cAMP/cGMP比值明显升高（P〈0.05,P〈0.01）。各组肾组织病理改变不明显。 结论：遗尿方治疗肾阳虚多尿大鼠的作用机制可能与升高血清AVP含量和血浆cAMP/cGMP比值有关。     

急性冠脉综合征患者细胞黏附分子和C反应蛋白的变化

目的：检测急性冠脉综合征（ACS）患者血清中血管细胞黏附分子（VCAM-1）、细胞间黏附分子（ICAM-1）及C反应蛋白（CRP）水平,探讨其变化在冠心病（CHD）发病及诊断中的意义。方法：检测50例经冠脉造影证实为ACS患者血清中VCAM-1、ICAM-1和CRP的水平,以50例经冠脉造影正常者作对照。结果：ACS患者血清中VACM-1、ICAM-1和CRP水平明显高于对照组,分别为(701±54.6)和(556±42.2)μg·L^-1（P<0.01）、(389±23.7)和(271±34.6)μg·L^-1（P<0.01）及(7.05±3.13)和(4.22±1.41)mg·L^-1（P<0.01）;急性心肌梗塞（AMI）与不稳定心绞痛（UA）患者VCAM-1和ICAM-1无统计学差异［（699.12±62.77)和(706.57±53.65)、(390.39±42.34)和(372.63±32.59μg·L^-1］(P>0.05);AMI患者CRP含量明显高于UA 患者［（8.06±2.78)和(6.33±2.01)mg·L^-1］(P<0.05)。结论：动脉粥样斑块所致的动脉狭窄和闭塞病变伴随着介导血管炎症的VCAM-1、ICAM-1及CRP水平的增高,并且与病变严重程度相关,其过度表达可能是动脉粥样硬化（AS）发生的重要因素之一,有望成为动脉粥样硬化发生发展和病情监测指标。     

金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育模型大鼠精子质量与性激素含量的影响

目的:观察金匮肾气丸对腺嘌呤致雄性不育大鼠精子质量及性激素含量的影响。方法:30只SD大鼠随机分为空白对照组、腺嘌呤组、金匮肾气丸组。应用自动精子质量分析仪检测实验大鼠的精子质量(精子密度、活率及活动度);同时应用放射免疫法测定血清睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量;透射电镜观察实验大鼠睾丸组织精子鞭毛密度,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞等结构。结果:与腺嘌呤组比较,金匮肾气丸组大鼠肾阳虚症状显著改善,精子密度、活率及活动度明显提高(P<0.05);金匮肾气丸组大鼠血清T含量明显提高(P<0.05),LH、FSH含量降低(P<0.05);电镜下金匮肾气丸组大鼠精子数量明显增多,大鼠睾丸组织受损的支持细胞明显改善。结论:金匮肾气丸可提高腺嘌呤致不育模型大鼠的精子质量,其机制之一可能是通过提高血清中T的含量及保护受损的支持细胞这一间接作用实现的。     

脾虚1号方对脾虚证功能性消化不良大鼠小肠葡萄糖转运蛋白1的影响

目的探讨脾虚型功能性消化不良(FD)大鼠小肠组织葡萄糖转运体蛋白1(GLUT1)蛋白与mRNA表达及脾虚1号方的干预作用。方法 70只7日龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、FD模型组(单模型组,n=10)、脾虚型FD模型组(n=50)。正常组给予2%蔗糖溶液灌胃,FD模型组和脾虚型FD模型组均给予0.1%蔗糖碘乙酰胺蔗糖溶液灌胃,0.2 m L/只·d,连续6d。脾虚型FD模型组正常饲料喂养至6周龄后叠加改良小平台站立,连续14 d;造模结束后随机分为双模型组、多潘立酮组和脾虚1号方低、中、高剂量组,每组10只,连同正常组、单模型组,每日分别给予蒸馏水10 m L/kg、多潘立酮3.125 mg/kg和脾虚1号方1.275、2.55、5.1 g/kg和灌胃14d。采用免疫组化、Western-blot和RT-PCR方法检测小肠组织GLUT1蛋白与mRNA表达。结果与正常组相比,双模型组大鼠小肠黏膜GLUT1蛋白平均光密度值、小肠组织GLUT1蛋白和mRNA表达量均降低(P0.05,P0.01);与双模型组相比,脾虚1号方低剂量组大鼠小肠黏膜GLUT1蛋白平均光密度值、小肠组织GLUT1蛋白和mRNA表达量均升高(P0.01)。结论脾虚型FD大鼠存在GLUT1 mRNA及蛋白的表达量降低,脾虚1号方能够上调GLUT1 mRNA及蛋白的表达量。     

结合黏附分子家族A表达水平与鼻咽癌细胞株放疗敏感性的关系研究

目的 研究结合黏附分子家族A(JAMA)表达水平与鼻咽癌细胞株放疗敏感性的关系.方法 过表达或干扰CNE2和HONE1细胞株中JAMA的表达,然后采用不同剂量X射线进行照射,24 h后检测细胞克隆形成能力及细胞凋亡变化,了解JAMA在鼻咽癌放疗中的作用.通过Western blot检测JAMA不同表达水平细胞株放疗后的相关信号通路蛋白.结果 JAMA低表达细胞株对放疗更敏感:JAMA低表达后,D0值在CNE2细胞株中从3.26±0.78下降为1.92±0.23;Dq值从46.51±4.27下降至32.12±3.19.放疗诱导的凋亡在JAMA低表达细胞株中显著增加,JAMA低表达后,细胞凋亡率从6.9％±0.9％上升至13.7％±1.3％;HONE1细胞凋亡率从6.5％±1.1％上升至12.3％±1.7％;JAMA过表达细胞株中显著减少.结论 JAMA表达水平与鼻咽癌细胞株放疗敏感性密切相关,JAMA能增加鼻咽癌细胞株放疗抵抗.     

补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法观察补阳还五汤不同剂量对血瘀证大鼠血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)和诱生型-氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。结果模型组ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOS高表达，补阳还五汤能减少造模动物ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNOs的表达，而且随着药物剂量的减少，各分子表达呈递增趋势，具有明显的量效关系。结论补阳还五汤能显著降低血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子高表达，且量效关系明显。     

益精汤治疗气滞血瘀型少弱精症疗效观察

目的：探讨益精汤治疗少弱精症（气滞血瘀型）的机理,为中医药治疗少弱精症提供理论依据。方法：将60例少弱精患者随机分成两组。治疗组30例,予益精汤口服,每日1剂,早晚分服。对照组30例,予左卡尼汀口服液10 mL,口服,2次/d。两组均以4周为1个疗程,观察3个疗程。观察患者在治疗前后的精液量、精液密度及活动力等指标。结果：治疗后两组精子参数各项指标中精液量、密度、成活率和活力均有改善,与治疗前比较,差异有显著性意义。结论：益精汤对于少弱精症（气滞血瘀型）患者精液参数的各项指标均有较好的改善,总有效率及各项精液参数均优于左卡尼汀口服液组。     

脾虚1号方对功能性消化不良脾虚证大鼠胃体组织MLC蛋白与基因表达的影响

目的探讨功能性消化不良(FD)脾虚证大鼠胃体组织肌球蛋白轻链(MLC)蛋白与mRNA表达及脾虚1号方的干预作用。方法 60只7 d龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、FD脾虚证模型组(n=50)。正常组给予2%蔗糖溶液灌胃,FD脾虚证模型组给予0.1%蔗糖碘乙酰胺溶液灌胃,0.2 m L/(只·d),连续6 d。FD脾虚证模型组正常饲料喂养至6周龄后叠加改良小平台站立,连续14 d。造模结束后随机分为模型组、多潘立酮组、脾虚1号方低、中、高剂量组,各10只,连同正常组,分别给予蒸馏水10 m L/(kg·d)、多潘立酮3.125 mg/(kg·d)、脾虚1号方1.275、2.550、5.100 g/(kg·d),灌胃14 d。采用免疫组化、蛋白质印迹(Western blot)和RT-PCR方法检测胃体组织MLC蛋白及mRNA表达量。结果与正常组相比,免疫组化检测模型组大鼠胃体肌层MLC蛋白定位表达降低;Western blot检测模型组胃体组织MLC蛋白表达量降低;RT-PCR检测模型组大鼠胃体组织MLC mRNA表达量降低,差异均有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,免疫组化检测脾虚1号方低、中、高剂量组大鼠胃体肌层MLC蛋白定位表达增加,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);Western blot检测脾虚1号方中、高剂量组大鼠胃体MLC蛋白表达量增加,差异均有统计学意义(P0.01);RT-PCR检测脾虚1号方高剂量组MLC mRNA表达量升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论 FD脾虚证模型大鼠存在胃体组织MLC蛋白及基因表达的降低,而脾虚1号方能够上调MLC蛋白及基因的表达。     

超氧化物歧化酶对骨骼肌I/R后粘附分子表达的影响

目的：探讨超氧化物歧化酶（SOD）在骨骼肌缺血再灌注（I／R）后对白细胞表面粘附分子CD11b/CD18和骨骼肌血管中细胞间粘附分子（ICAM）－1表达的影响。方法：建立大鼠后肢缺血再灌注模型,102只大鼠随机分为假手术组（Ⅰ组,n=6)、缺血组（Ⅱ组,n=6)、缺血再灌注组（Ⅲ组,n=30）、生理盐水组（Ⅳ组,n=30),SOD组（Ⅴ组,n=30)。Ⅱ组在缺血4h末,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别于再灌注1、2、4、8、12h末,测定血浆中的丙二醛（MDA）、骨骼肌组织中的髓过氧化物酶（MPO）,白细胞上粘附分子CD11b/CD18和骨骼肌血管中ICAM－1的表达情况及各组的组织学改变。结果：Ⅲ组各时相点MDA、MPO、CD11b/CD18、ICAM－1的表达与Ⅰ组比较,差异有非常显著意义,骨骼肌组织损伤也随再灌注时间的延长而逐渐加重,Ⅴ组中则这种变化明显抑制（P＜0．05）。Ⅳ组和Ⅲ组之间比较,差异无显著意义。结论：粘附分子CD11b/CD18和ICAM－1与骨骼肌I／R损伤密切相关,SOD不仅可以清除I／R时产生的氧自由基,还可以抑制粘附分子的表达,减少白细胞在骨骼肌组织中的浸润,从而减轻骨骼肌I／R损伤。     

利多卡因对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞间黏附分子-1表达的影响

目的观察利多卡因对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因表达的影响,探讨利多卡因脑保护作用的机制。方法雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、利多卡因大剂量组(C组)和利多卡因小剂量组(D组),缺血前10 min腹腔注射。脑缺血10 min再灌注24 h时,断头处死大鼠。用RT-PCR技术检测海马组织ICAM-1的表达,用免疫组织化学、蛋白印记(Western blot)方法检测ICAM-1蛋白表达情况。结果脑缺血再灌注后海马组织ICAM-1 mRNA及蛋白表达水平增高,利多卡因可下调ICAM-1表达,缺血再灌注后,海马区神经元细胞出现明显坏死,利多卡因可减轻海马区神经元损伤。结论利多卡因可能通过抑制ICAM-1表达而对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

Effect of Yishen Huayu Fang on kidney tissue E-cadherin expression in unilateral ureter ligation in rats

OBJECTIVE:To observe E-calcium sticky protein(E-cadherin) expression in kidney tissues in a rat model of unilateral ureter ligation and the effect of Yishen Huayu Fang(formula of tonifying the kidney and dissolving accumulated blood stasis) on the expression.METHODS:A total of 150 clean grade male rats were randomly divided into a control group,model group,low-dose Yishen Huayu Fang group(low-dose group),high-dose Yishen Huayu Fang group(high-dose group),and Lotensin group.A renal fibrosis model was established with unilateral ureteral obstruction(UUO).Pathological changes of rat renal tissue were observed with light microscopy on days 3,7,14,21,and 28 after UUO.Changes in kidney tissue E-cadherin expression were observed with immunohistochemistry.RESULTS:Three days after modeling,kidney edema appeared followed by gradual inflammatory cell infiltration,and part of the small tubules disappeared while the renal cortex thinned.Meanwhile,the E-cadherin expression level dropped,which was negatively correlated with the obstruction time.After intervention,E-cadherin expression was increased in all treatment groups(P<0.01 or P<0.05),while there were no significant differences between the high-dose and Lotensin groups.CONCLUSION:Yishen Huayu Fang delays the renal fibrosis process by promoting E-cadherin expression in renal tissues and reducing extracellular matrix deposition.     

肺纤方提取物对肺间质纤维化大鼠肺微血管VEGF、VEGFR2、PAI-1、VCAM-1mRNA表达的影响

目的通过观察肺纤方提取物干预体外培养肺微血管的血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR 2)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)基因表达的影响,探讨肺纤方干预肺纤维化微血管生成的机制。方法从肺纤维化模型大鼠分离培养肺微血管内皮细胞,将其等量分为模型组,氯沙坦组,泼尼松组,肺纤方大、中、小剂量组。模型组加入含20%胎牛血清的DMEM培养基,氯沙坦组加入含20%胎牛血清及10 mg/L氯沙坦的DMEM培养基,泼尼松组加入含20%胎牛血清及5 mg/L泼尼松的DMEM培养基,肺纤方大、中、小剂量组分别加入含20%胎牛血清及100、60、20 mg/L肺纤方提取物的DMEM培养基,分别作用24 h。双链嵌合荧光染料SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测VEGF、VEGFR 2、PAI-1与VCAM-1的mRNA转录水平。结果与模型组比较,肺纤方大、中、小剂量组VEGF基因表达水平均显著降低,而VEGFR2无显著差异;肺纤方大剂量组PAI-1 mRNA表达显著降低;肺纤方大、中剂量组VCAM-1 mRNA表达显著降低(P0.05)。结论肺纤方可通过抑制肺微血管VEGF、PAI-1及VCAM-1的表达改善血凝及纤溶,抑制血管形成而发挥抗肺纤维化作用。