MNU诱导大鼠膀胱癌的机制研究

目的:研究N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MNU)诱导膀胱癌发生的机制.方法:60只SD大鼠随机分成实验组和对照组.实验组用MNU 2 mg/次,2周1次定期作膀胱内灌注,共4次.对照组膀胱内灌以生理盐水0.2 ml/次,每2周1次,共4次.第9周未处死大鼠,随即取大鼠膀胱放入-80℃液氮中保存.采用免疫组化检测H-Ras蛋白的表达,RT-PCR检测磷脂酶C ε(PLC ε)mRNA的表达.结果:实验组50只sD大鼠36只成瘤,4只大鼠死亡,成瘤率为81.82%.对照组10只大鼠膀胱未见明显变化.免疫组化检测实验组36只成瘤大鼠中32只H-Ras蛋白阳性.对照组大鼠膀胱组织中H-Ras蛋白表达阴性.RT-PCR,检测实验组和对照组大鼠膀胱PLC ε的表达.实验组36只成瘤大鼠PLC ε阳性,对照组PLC ε表达阴性.结论:MNU可诱导大鼠膀胱黏膜发生癌变,其可能机制为引起H-Ras基因突变并且过表达,同时引起PLC ε mRNA表达增加.     

雌激素提前干预对膀胱癌动物模型影响的实验研究

目的探讨诱导大鼠原位膀胱癌动物模型早期应用雌激素干预，观察其膀胱的成瘤情况、肿瘤大小及病理分级有无影响。方法给切除卵巢的SD大鼠行N-甲基亚硝基脲（MNU）膀胱灌注，每次2mg／R，1次／2周，共4次，以制备大鼠原位膀胱癌动物模型。随机分成雌激素提前干预、雌激素非提前干预和仅灌注MNU三组相比较。结果应用雌激素干预的二组与仅灌注MNU组相比较，在成瘤率、肿瘤大小及方面差异均有统计学意义（P〈0．01）；雌激素提前干预和雌激素非提前干预二组间比较差异无统计学意义（P〉0．05），但雌激素提前干预组肿瘤发生率更低。结论化学致癌剂N-甲基亚硝基脲（MNU）经膀胱灌注可成功建立原位膀胱癌动物模型，经雌激素提前干预明显降低膀胱癌的成瘤率及抑制肿瘤生长，为膀胱癌内分泌治疗提供佐证。     

大鼠膀胱癌模型建立的实验研究

目的动态观察诱癌剂N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱发Wistar大鼠膀胱肿瘤发生发展的过程,探讨建立膀胱癌动物模型的合适方法。方法60只Wistar大鼠随机分成3组,用MNU(2mg/2周)定期作膀胱内灌注,实验周期为14周,按计划处死大鼠,观察不同阶段动物膀胱癌的发生情况。结果60只大鼠中58只完成了实验,2只中途死亡,诱癌组(MNU组)存活39只大鼠中,病理证实为膀胱癌者37只,占92.5%,2只为不典型增生,占5%。在病理确诊的39只大鼠中,有33只联合使用尿HE染色 AO染色诊断为膀胱肿瘤,阳性率89.2%。结论MNU经膀胱灌注诱发膀胱肿瘤动物模型方法简单、药物用量少、诱瘤时间短、致癌率高,其诱发的膀胱肿瘤在组织学和病理学特征上和人的膀胱肿瘤十分相似,是较理想的动物模型。在动物实验中用尿HE染色 AO染色诊断膀胱肿瘤有一定应用价值。     

N-甲基亚硝基脲诱导大鼠膀胱癌模型的动态观察

目的探讨N-甲基亚硝基脲（MNU）诱发SD大鼠膀胱癌的模型构建及动态变化。方法采用MNU进行大鼠膀胱灌注2mg／次,每2周1次,共4次。分别观察实验第3、5、7、9、12和14周的膀胱黏膜改变。结果膀胱灌注3周出现不典型增生,5周上述改变明显,7周有原位癌改变,9周膀胱内可见明显癌性肿块,12—14周证实为膀胱乳头状癌或浸润性癌,9周的致癌率为100％（6／6）,其组织学改变及病理学特征与人膀胱癌相似。结论MNU灌注诱导构建大鼠膀胱癌模型方法简便、可靠。致癌经历上皮增生、乳头状瘤形成和癌变过程,为比较理想的动物模型。     

姜黄素对N-甲基亚硝基脲诱发膀胱癌大鼠化学干预作用及机制分析

目的 分析姜黄素对N-甲基亚硝基脲（MNU）诱导的膀胱癌大鼠模型的化学干预作用及作用机制。方法 将100只SD大鼠随机分为四组,对照组（10只）、模型组（10只）、干预组（40只）和治疗组（40只）,对照组等时等量的膀胱灌注生理盐水,其他三组均对大鼠进行膀胱灌注MNU,诱发SD大鼠形成膀胱癌模型（将浓度为1 mg/mL的MNU溶液灌注入膀胱内,MNU灌注时间为第2、4、6和8周,每次2 mg,每2周1次,共4次）,模型组在诱发大鼠膀胱癌时膀胱灌注蒸馏水,干预组在膀胱灌注MNU时灌注姜黄素溶液（400 μmol/L）,即第1、3、5、7和9周膀胱灌注,第10周安乐死大鼠;治疗组在诱发大鼠膀胱癌模型后膀胱灌注姜黄素溶液（400 μmol/L）,即在第10、12、14、16、18周时间内持续膀胱灌注,在第19周时处死大鼠,获得的膀胱组织依次通过苏木精－伊红（HE）染色,观察病理变化;TUNEL末端标记法测定肿瘤组织中细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果 模型组在第10周时膀胱癌的发生率为90%（9/10）,干预组在第10周时大鼠膀胱癌的发生率为12.5%（5/40）,治疗组第10周时膀胱癌的发生率为92.5%（37/40）,比较干预组与模型组大鼠膀胱癌的发生率差异有显著性（P<0.05）,说明姜黄素对MUN诱发膀胱癌大鼠有明显的化学干预作用;在治疗组膀胱癌形成后给予姜黄素治疗,第19周膀胱癌发生率为78.4%（30/37）,与治疗前的第10周比较说明姜黄素对膀胱癌有治疗作用,可以延缓膀胱癌的恶化。TUNEL实验证实姜黄素显著促进膀胱癌细胞的凋亡,抑制膀胱癌细胞的增殖。Western blot结果发现,姜黄素抑制NF-κB的激活,有效下调NF-κB调节的基因产物的表达。结论 姜黄素对MNU诱导的膀胱癌大鼠模型有明显的的化学干预作用,且作用机制可能是通过抑制NF-κB的激活并且有效下调NF-κB调节的基因产物,来调节膀胱癌中相关蛋白的表达机制,即抑制增殖,诱导凋亡,进一步发挥抗癌的化学干预作用以及预防膀胱癌的复发。     

MNU诱导的大白鼠膀胱肿瘤模型的建立及病理学动态观察

目的观察N-甲基亚硝基脲（MNU）诱发SD大鼠膀胱癌模型的建立及病理学动态过程。方法MNU大鼠膀胱灌注每2周1次，每次2mg，共4次。随机观察实验第3、6、9、12、14周膀胱黏膜的改变，并在9、12和10周膀胱灌注^125I-UdR后行SPECT平面显像。结果膀胱灌注3周出现不典型增生，6周有原位癌改变，9周膀胱内有明显癌性肿块，12～14周膀胱内均出现乳头状癌或浸润性癌，9周的致癌率100．0％，组织学改变及病理学特征与人膀胱癌十分相似。SPECT显像见^125I-UdR膀胱灌注3d后诱癌组大鼠膀胱区放射性浓集。结论MNU灌注诱导大鼠膀胱癌模型为一理想的动物模型。致癌过程经历不典型增生、乳头状瘤形成和癌变动态过程。     

F344大鼠膀胱肿瘤模型的制备与检测

目的通过膀胱灌注N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导F344大鼠膀胱肿瘤模型。方法选取F344大鼠40只,随机分为两组第1组膀胱灌注生理盐水(对照组),第2组膀胱灌注MNU(MNU组),每2周1次,共5次;于第14周处死动物,取血清测干扰素(INF-γ),膀胱肿瘤组织测主要组织相容性抗原-I(MHC-I)及病理观察。结果MNU组出现膀胱肿瘤,对照组无1例肿瘤;对照组血清INF-γ为(9.620±7.256)pg/ml,实验组为(0.898±0.323)pg/ml,两组相比有统计学意义(P<0.001)。实验组膀胱肿瘤的MHC-I表达较高(58.60%～93.80%)。结论MNU可成功诱导F344大鼠膀胱肿瘤,该模型是肿瘤免疫治疗的理想模型。     

华蟾素对原位膀胱癌大鼠的影响

目的：建立荷人膀胱癌的原位动物模型,通过磁共振成像（MRI）监测肿瘤生长过程,并利用此模型评价华蟾素抗膀胱癌作用．方法：直视下经尿道机械BALB／c裸鼠膀胱黏膜,将人膀胱癌细胞T24经尿道种植于25只裸鼠膀胱,建立荷人膀胱癌原位动物模型．以钆-二乙三胺五乙酸作为膀胱造影剂,用MRI监测肿瘤的生长,同时取裸鼠膀胱组织标本行HE染色进行病理学检查．同法建立膀胱癌动物模型18只,分为对照组和给药组,各9只．膀胱灌注6次后,荷瘤膀胱称质量．结果：25只裸鼠在种植T24细胞后均形成膀胱肿瘤,种植后7d,裸鼠膀胱MRI检查无明显变化,14,21,28d MRI检查均可发现膀胱不同程度的充盈缺损,MRI图像与肿瘤实际大小吻合．病理检查显示,种植后7d,肿瘤生长于裸鼠膀胱黏膜或浅层肌肉,14～28d局限于肌层,35d时侵及浆膜层．华蟾素给药组抑瘤率为46．9％．结论：成功建立了裸鼠原位膀胱癌动物模型,肿瘤生长基本模拟了人膀胱癌的发生、发展过程,MRI检查可作为对裸鼠膀胱原位肿瘤动态观察的可靠方法,华蟾素确有明显的抗膀胱癌的作用．     

SD大鼠膀胱肿瘤动物模型的制备及其HER-2检测

目的：建立N-甲基-N-亚硝基脲（N—methyl—Nnitrosourea,MUN）膀胱灌注诱发的SD大鼠膀胱肿瘤动物模型,检测其肿瘤HER-2表达情况．方法：50只SD大鼠随机分两组,对照组膀胱灌注生理盐水,实验组膀胱灌注MNU,3wk／次,共4次,MNU总量为10mg;于第1次灌注后第11周切开膀胱取标本,以光镜、免疫组化及RT—PCR为观察手段,对其诱发的膀胱肿瘤进行检测．结果：第11周对照组无肿瘤,实验组诱发膀胱肿瘤率95％,其组织学形态及病理特征与人膀胱肿瘤相似,免疫组化显示部分肿瘤HER-2蛋白阳性表达,RT-PCR显示其HER-2mRNA阳性．结论：MNU膀胱灌注可成功建立HER-2阳性表达的膀胱肿瘤动物模型．     

MNU诱导SD大鼠下焦湿热证尿血(膀胱癌)模型研究

目的 探讨N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱导SD大鼠下焦湿热证尿血——膀胱癌(BC)模型的造模过程和成模率。方法 通过膀胱灌注MNU的方法在造模前、造模中、造模后共计6个时间点进行分批次样品采集,并对膀胱组织进行HE染色以了解膀胱原位癌的形成及发展过程。结果 实验过程顺利,在操作过程中大鼠未出现明显尿路损伤现象。通过本造模手法模型组大鼠膀胱内有明显的上皮增生、破损及大面积肿瘤形成和尿血现象。结论 MNU可以成功诱导SD大鼠下焦湿热证尿血模型(膀胱癌),且成模明显,死亡率低,实验数据可为膀胱癌模型的建立、改良和应用提供一定的参考。     

膀胱灌注逆转录病毒载体HSV-TK基因治疗大鼠膀胱癌

目的：研究膀胱内灌注逆转录病毒载体单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(HSVtk)基因治疗膀胱癌的作用。方法：用N-甲基-亚硝基脲(MNU)膀胱灌注诱导建立大鼠原位膀胱肿瘤模型,该肿瘤与人类膀胱肿瘤病理特点非常相似。随后经尿道膀胱灌注逆转录病毒载体HSV-TK(基因,腹腔内注射羟基无环鸟苷(ganciclovir,GCV),连续6天。结果：经尿道膀胱灌注逆转录病毒HSV-TK基因后48小时RTPCR检测出膀胱肿瘤中HSV-TK基因表达。GCV处理后．肿瘤体积以及膀胱总重量检测表明膀胱肿瘤的生长被显著抑制。肿瘤细胞DNA电泳显示诱导凋亡可能是HSV-TK／GCV系统治疗肿瘤的重要机制。结论：经尿道膀胱灌注重组逆转录病毒载体可以向肿瘤转导HSV—TK基因。HSV-TK／GCV系统能抑制鼠原位膀胱肿瘤的生长。     

大鼠原位膀胱癌模型的建立与CT诊断价值

本刊创刊于1981年,原名《上海实验动物科学》,为国内第一本实验动物科学期刊,2005年经主管部门批准更名为《实验动物与比较医学》,2008年由原来的季刊改为双月刊。经过近30年的发展,杂志为上海和全国的实验动物科学事业发挥了一定的积极作用,     

Intervention of nicotine on MNU-induced bladder cancer in rats

This study examined the effect of nicotine on the expression of mutant p53(mt-p53) in bladder cancer rats.The rat models of bladder cancer were established by infusing N-methyl-nitroso-urea(MNU,10 mg/kg every 2 weeks for 8 weeks) into the bladder.Pathological examination on the bladder was conducted to confirm the establishment of the model.All the bladder cancer rats were randomly divided into an MNU group and 3 nicotine groups.In the nicotine groups,the rats were intragastrically administered nicotine at different concentrations(25,15,5 mg/kg respectively) 3 times per week for 8 weeks.The mt-p53 expression was detected by the immunohistochemical method.The results showed that rat bladder cancer models developed histopathological changes of bladder transitional cell carcinoma.The positive rate of mt-p53 expression in the 3 nicotine groups(25,15,5 mg/kg) was 75.00%,58.33% and 41.67% by the 14th week,respectively,significantly higher than that in the MNU group(33.33%)(all P<0.05).The mt-p53 expression rate was positively correlated with the medication dose and time(P<0.05).It is concluded that nicotine may play an important role in the development of bladder cancer partially by increasing the expression of mt-p53.     

灌注华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤抑制的实验观察

目的:观察膀胱内灌注华蟾素(Cinobufagin,Cino)对SD大鼠膀胱肿瘤的影响。方法:75只SD雌性大鼠随机分成5组:空白对照组(A组)、MNU组(B组)、华蟾素处理组(C组)、阿霉素处理组(D组)、卡介苗处理组(E组),每组15只。所有SD雌性大鼠采用MNU膀胱灌注,每间隔1周灌注2 mg/0.2 ml 1次,共6次,诱导大鼠膀胱肿瘤模型。处理组分别予以华蟾素、阿霉素(ADM)、卡介苗(BCG)行膀胱内灌注。实验结束后1周处死大鼠,完整切除膀胱,膀胱肿瘤组织行HE染色,观察膀胱肿瘤病理类型,并计算各组的致癌率。结果:大鼠肿瘤组织HE染色,光镜观察A组大鼠14只大鼠均未见明显异常增生,B组13只大鼠发生膀胱移行细胞癌,C组6只大鼠发生膀胱移行细胞癌,D组7只大鼠发生膀胱移行细胞癌,E组5只大鼠发生膀胱移行细胞癌。结论:华蟾素能有效拮抗、抑制MNU诱导膀胱肿瘤的发生。     

经膀胱灌注阳离子脂质体介导的HVS-TK基因对大鼠膀胱癌的杀伤作用

目的观察阳离子脂质体介导的HSV—TK基因经尿道膀胱灌注对大鼠膀胱肿瘤体内杀伤作用。方法N-甲基亚硝基脲(MNU)膀胱灌注诱导雌性Wistar大鼠膀胱肿瘤。经尿道HSV—TK基因膀胱灌注后，RT—PCR检测肿瘤组织中TK基因表达；TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡；荷瘤膀胱总重量测定。结果HSV—TK基因经尿道膀胱灌注后．RT—PCR检测膀胱肿瘤组织有TK基因mRNA表达；TUNEL法凋亡检测，荷瘤膀胱总重量测定，提示治疗组与对照组差异有显著性。结论经尿道膀胱灌注阳离子脂质体-TK复合物可转导TK基因；联合GCV治疗，肿瘤生长被抑制；诱导肿瘤细胞凋亡可能是HSV—TK／GCV系统作用机理之一。     

逆转录病毒载体介导HSV-tk基因经尿道膀胱灌注对大鼠膀胱癌的杀伤作用

目的探讨经尿道膀胱灌注由逆转录病毒介导的HSV-tk基因对大鼠膀胱肿瘤的治疗作用.方法 N-甲基亚硝基脲(MNU)膀胱灌注诱导雌性Wistar大鼠膀胱肿瘤.经尿道HSV-tk基因膀胱灌注后,RT-PCR 检测肿瘤组织中tk基因表达;TUNEL 法检测肿瘤细胞凋亡;荷瘤膀胱总重量检测. 结果 HSV-tk基因经尿道膀胱灌注后,RT-PCR 检测膀胱肿瘤组织有tk 基因mRNA表达;TUNEL 法凋亡检测,荷瘤膀胱总重量测定,提示治疗组与对照组有显著差异.结论经尿道膀胱灌注逆转录病毒载体/HSV-tk可转导tk基因;联合GCV治疗,肿瘤生长被显著抑制;诱导肿瘤细胞凋亡可能是其作用机理之一.     

乌体林斯膀胱灌注对大鼠血清白细胞介素-6的影响

目的:探讨乌体林斯膀胱灌注对大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)和膀胱肿瘤生长的影响。方法:制作N-甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型,于第8周行单次或连续(每周1次,共4次)膀胱灌注乌体林斯后,进行病理观察、测量膀胱总重量和检测血清IL-6的水平。结果:单次膀胱灌注乌体林斯的膀胱癌大鼠血清IL-6的水平高于对照组(P<0.05),连续4次膀胱灌注乌体林斯的膀胱癌大鼠血清IL-6的水平高于对照组(P<0.01),膀胱总重量小于对照组(P<0.01),表明膀胱肿瘤的生长被抑制。结论:经尿道膀胱灌注乌体林斯不但可引起局部免疫反应,还能调节外周血的免疫状态,可能起到抑制膀胱肿瘤的生长,达到抗肿瘤作用。