三叶木通AFLP反应体系的建立及优化

目的 为研究三叶木通种质资源遗传多样性,建立并优化三叶木通 AFLP 反应体系。方法 以三叶木通叶片为材料,对影响 AFLP 反应体系中连接、预扩增和选择性扩增的各因素进行分析,建立优化的 AFLP 反应体系。结果 建立三叶木通 AFLP 反应优化体系：连接体系加入 T₄ 连接酶 2 U,Mse I 接头 100 pmol,EcoR I 接头 10 pmol;预扩增反应总体积 20 μL,加入连接产物 2.0 μL,E-0、M-0 各 100 ng,dNTPs 0.250 mmol/L, Mg²⁺ 1.875 mmol/L, Taq DNA 聚合酶 2 U;选择性扩增反应总体积 20 μL,加入 5 μL 稀释 100 倍的预扩增产物,E₃、M₃ 各 50 ng,dNTPs 0.250 mmol/L, Mg²⁺ 1.875 mmol/L, Taq DNA 酶 1.5 U。结论 建立适用于三叶木通种质资源遗传多样性研究的 AFLP 反应优化体系。     

探讨慢性阻塞性肺疾病患者血清中1α, 25-二羟维生素D水平及其影响因素

目的 1α, 25-二羟维生素D [1α,25(OH)₂D₃]是维生素D信号生物学功能的主要执行者,其血清水平不仅受其前体25-羟维生素D[25(OH)D]水平的调控,还受体内炎性状态的影响。本研究旨在分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中血清1α,25(OH)₂D₃水平及其影响因素。 方法 收集124例COPD患者和188名健康对照者,采用酶联免疫吸附法检测血清1α,25(OH)₂D₃及25(OH)D水平,同期收集COPD患者血清C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白量(Hb)及白蛋白(Alb)等实验室资料。 结果 经两独立样本t检验,与对照组相比,COPD组中血清1α,25(OH)₂D₃和25(OH)D平均水平明显降低,分别为:28.33±5.87 vs 30.58±6.48pg/ml, t=3.108, P=0.002; 25.73±5.44 vs 27.14±5.89ng/ml, t=2.128, P=0.034。根据患者病程分层分析,与稳定期COPD相比,急性加重期患者中血清1α,25(OH)₂D₃和25(OH)D平均水平亦显著降低,分别为:27.04±4.67 vs 29.17±5.01pg/ml, t=2.377, P=0.019; 24.31±4.22 vs 26.66±4.56ng/ml, t=2.888, P=0.005。采用Spearman相关分析法检验COPD组中血清1α,25(OH)₂D₃水平的相关影响因素,纳入的变量包括血清25(OH)D水平及CRP、WBC、Hb、Alb等血清学指标。结果显示COPD组中血清1α,25(OH)₂D₃水平与25(OH)D和CRP呈正相关(r=0.291, P=0.002; r=0.352, P=0.004),与Alb呈负相关(r=-0.346, P=0.001),而与WBC和Hb无关(P>0.05)。 结论 COPD患者中血清1α,25(OH)₂D₃水平与血清25(OH)D、CRP和Alb水平密切相关,并可能影响患者的病程。     

黄芪总苷对地塞米松和β-淀粉样肽蛋白联合诱导大鼠海马神经元损伤的影响

目的 探讨黄芪总苷 (astragalosides) 对地塞米松 (Dexamethasone, DEX) 与β-淀粉样蛋白 (Amyloid β-peptide protein, Aβ) 联合诱导大鼠海马神经元损伤的影响。方法 通过检测海马神经元细胞活性,探讨黄芪总苷能否抑制 Aβ和 DEX 引起海马神经元活力下降;通过检测海马神经元胞内 Ca²⁺浓度 (［Ca²⁺］_i),探讨黄芪总苷是否通过降低 ［Ca²⁺］_i 抑制海马神经元凋亡;通过检测 P-tau-Thr231 蛋白水平,进一步探讨黄芪总苷抗 Aβ 和 DEX 引起的海马神经元毒性机制。结果 黄芪总苷 (10、20、40 μg/mL) 对体外 DEX (10 μmo/L)+Aβ_25-35 (5 μmol/L) 引起胎鼠海马神经元的损伤有保护作用 (P＜0.01);黄芪总苷能明显降低 DEX (10 μmol/L)+Aβ_25-35 (5 μmol/L) 升高的海马神经元［Ca²⁺］_i、P-tau 蛋白水平 (P＜0.05)。结论 黄芪总苷对 Aβ和 DEX 诱导的大鼠海马神经元损伤有一定的保护作用。     

乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞INHB、FSHR mRNA及分泌功能的影响

[目的]运用血清药理学方法观察乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞抑制素(INHB)、促卵泡激素受体(FSHR)mRNA的表达及其分泌功能的影响。[方法]在大鼠卵巢颗粒细胞培养体系中加入乌萸汤、尿促卵泡激素(FSH)及正常大鼠含药血清,培养48h后,分别用酶联免疫吸附法(ELISA),逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及放免法测定颗粒细胞INHB、FSHR、mRNA及培养液中雌二醇(E₂)含量。[结果]各用药血清组E₂含量较对照组均明显升高;颗粒细胞INHB、FSHRmRNA表达量明显增多,其中乌萸汤中剂量血清组效果优于西药组。[结论]乌萸汤含药血清能明显促进卵巢颗粒细胞INHB、FSHRmRNA的表达以及E₂分泌,说明乌萸汤可以通过调控卵巢局部因子、增强FSHRmRNA的表达从而提高卵巢对促性腺激素的反应性,改善下丘脑-垂体-卵巢轴,促进E₂的分泌,以促进卵泡发育成熟及排出。     

大鼠灌服炙甘草汤后甘草次酸药动学研究

目的 建立大鼠ig炙甘草汤后体内甘草次酸的LC-MS/MS测定方法。方法 采用醋酸乙酯沉淀蛋白处理血浆样品,选用白藜芦醇为内标,采用LC-MS/MS法测定,色谱条件为ORBAX SB-C₁₈反相色谱柱（Agilent,50 mm×2.1 mm,1.8 μm）,乙腈-水（80∶20,含0.2%甲酸）为流动相,体积流量0.2 mL/min,柱温30 ℃。样品经电喷雾离子（ESI）源负离子化后,通过Agilent 6410三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测（MRM）对甘草次酸进行测定,分别选用m/z 469.4→425.4和227.1→143.0作为甘草次酸和内标物白藜芦醇的检测离子对。结果 甘草次酸在33.4～8 560.0 ng/mL线性关系良好（R²＝0.997 1）,日内（n＝6）、日间（n＝6）精密度、稳定性RSD均小于10%。甘草次酸高、中、低3个质量浓度平均提取回收率分别为75.3%、78.2%、78.5%。在此方法下得到大鼠ig炙甘草汤后血浆中甘草次酸的药动学参数分别为t_max＝（8.00±1.13）h,C_max＝（811.02±300.25）ng/mL,AUC_0～24＝（11 439.21±3 367.36）ng/mL·h。结论 该方法灵敏、准确、快速、选择性高,可用于甘草次酸血药浓度监测和药动学研究。     

大鼠静脉注射康莱特注射液的药动学研究

目的：研究康莱特注射液在正常大鼠体内的药动学。方法：采用甘油三酯试剂盒检测康莱特注射液经尾iv后大鼠血清中外源性甘油三酯的浓度变化,外源性甘油三酯浓度为测定血样中甘油三酯扣除本底后的浓度,采用3P97药代软件计算药动学参数。C_max为实测值,AUC计算采用梯形法。结果：康莱特注射液10、5 mL/kg剂量的主要药动学参数：C_max分别为（8.532±1.031）、（5.418±0.764）mmol/L,AUC_0-t分别为（13.248±3.692）、（5.339±1.219）mmol/L?h,V_c分别为（1.030±0.131）、（0.756±0.150）L²/（kg·mol）,CL_s分别为（0.838±0.319）、（0.975±0.330）L²/（kg·mol·h）,t _1/2α 分别为（0.481±0.168）、（0.322±0.109）h,t _1/2β分别为（1.452±0.776）、（1.384±0.404）h。结论：康莱特注射液经尾iv给药后在大鼠体内的药动学过程经拟合为二室模型。     

羌活中二氢呋喃类香豆素在人源肠 Caco-2 细胞单层模型的吸收转运研究

目的 研究紫花前胡苷元 (NANI)、紫花前胡苷 (ND)、前胡苷 V (DEV) 和羌活苷 (FDE) 4个线型二氢呋喃香豆素类化合物在人源肠 Caco-2 细胞单层模型中的吸收特性。方法 利用人源结肠腺癌细胞系 Caco-2 细胞单层模型测试4个香豆素类化合物从绒毛面 (AP 端) 到基底面 (BL 端)、BL 端 到 AP 端2个方向的转运过程。应用偶联紫外检测器的高效液相色谱法对上述4个香豆素进行定量分析,计算转运参数和表观渗透系数(P_app),并与阳性对照药普萘洛尔和阿替洛尔进行比较。结果 NANI 双向转运的 P_app 值在 1×10^-6 cm/s 数量级,介于在 Caco-2 细胞单层模型上呈良好吸收的普萘洛尔和难吸收的阿替洛尔的 P_app 值之间。ND、DEV 和 FDE 的P_app 值与阿替洛尔的P_app 值皆在 1×10^- cm/s 数量级。4个香豆素在 25～400 μmol/L 的转运效率与浓度呈正相关。结论 4个线型二氢呋喃类香豆素可以通过小肠上皮细胞被动吸收进入体内,NANI 属于中等吸收的化合物;ND、DEV 和 FDE 属于难吸收的化合物。     

脂多糖及TOLL样受体4阻断剂对蜕膜细胞中孕激素受体、IL-1β及COX-2的影响

目的:研究脂多糖(LPS)或拮抗剂TOLL样受体4阻断剂(Toll-like receptor 4 antagonist,TLR4 mAb)作用于体外培养的蜕膜细胞后其孕激素受体(progesterone receptor,PR)、IL-1β及COX-2的表达改变,以探讨LPS及其拮抗剂对蜕膜细胞中PR的影响,以及PR与炎症因子之间的关系。方法:分离培养早孕人蜕膜细胞,将细胞培养至第4代时随机分为6组,对照组:仅加培养液。研究1组:加入终质量浓度为100 ng/mL的LPS。研究2组:加入终质量浓度为1 μg/ mL TLR4 mAb。研究3组:加入终质量浓度为3 μg/mL TLR4 mAb。研究4组:终质量浓度为1 μg/mLTLR4 mAb预处理24 h,再加入质量浓度为100 ng/mL的LPS。研究5组:终质量浓度为3 μg/mL TLR4 mAb预处理24 h,再加入质量浓度为100 ng/mL的LPS。均培养24 h 后,采用RT-PCR半定量技术检测蜕膜细胞中PR,IL-1β及COX-2mRNA的表达情况。结果: LPS使蜕膜细胞中PR mRNA的表达下调(P<0.05),使IL-1β和COX-2 mRNA的表达上调(P<0.05);TLR4 mAb则使LPS作用后的蜕膜细胞中PR mRNA的表达上调(P<0.05)、IL-1βmRNA的表达下调(P<0.05);高质量浓度TLR4 mAb使COX-2 mRNA的表达下调(P<0.05)。结论:LPS作用于体外培养的人蜕膜细胞后,PR mRNA表达下调;IL-1β,COX-2的mRNA表达增加;使用TLR4 mAb后能拮抗LPS对蜕膜细胞中PR,IL-1β以及COX-2的作用。     

HPLC法测定国产莫匹罗星软膏的含量及有关物质

目的 建立HPLC法测定莫匹罗星软膏的含量及有关物质。 方法 有关物质采用C₈柱,流动相为四氢呋喃-7.7g/L醋酸铵(用冰醋酸调节pH值至5.7)(28∶ 72),检测波长为240nm;含量测定采用C₈柱,流动相为乙腈-0.05mol/L pH6.3磷酸盐缓冲液(28∶ 72),检测波长为230nm。 结果 在有关物质测定中,莫匹罗星线性范围为2.5~50μg/ml,R²=0.9994,莫匹罗星与杂质能完全分离;在含量测定中,平均回收率为100.5%。 结论 建立了简便、准确且适合国内常规检测的方法,可以有效地控制莫匹罗星软膏质量。     

贝母辛平喘作用及机制研究

目的 探讨彭泽贝母有效成分贝母辛平喘作用及机制。方法 在离体器官水平,采用气管条浴槽实验方法,观测不同浓度的贝母辛对乙酰胆碱 (Ach)、组胺 (His)、CaCl₂、β受体阻断剂、一氧化氮合酶抑制剂5种刺激因素诱发的气管平滑肌收缩的影响。结果 贝母辛 (0.046、0.092 mmol/L) 使 Ach 诱发的大鼠、豚鼠气管平滑肌的 EC₅₀ 增大。贝母辛 (0.092 mmol/L) 对 His 的 EC₅₀ 无影响。贝母辛 (0.092 mmol/L) 对 CaCl₂ 致气管平滑肌收缩的 EC₅₀ 均无显著性差异。贝母辛3个剂量对 Ach 引起的气管平滑肌细胞内钙的释放具有显著的抑制作用 (P＜0.05、0.01、0.001),且具有剂量依赖关系;但对细胞外钙的内流均无明显抑制作用。与普萘洛尔+DMSO 组比较,普萘洛尔+贝母辛组对气管平滑肌张力无降低作用,加入 L-NAME 后,贝母辛组3个剂量均未能抑制气管平滑肌的收缩。结论 贝母辛通过作用于 M 受体、兴奋β受体和拮抗内钙释放,促进生成和释放一氧化氮从而舒张气管平滑肌,实现平喘的作用。     

Effects of Bushen Tiaochong Recipe (补肾调冲方) containing serum on ovarian granulosa cell proliferation, steroidogenesis and associated gene expression in rats

Objective:To observe the effect of Bushen Tiaochong Recipe (补肾调冲方,BSTCR) on rats' ovarian granulosa cell (GC) proliferation,steroidogenesis and follicle-stimulating hormone receptor (FSHR),and insulin-like growth factor-1 (IGF-1) mRNA expression using serum pharmacological method.Methods:Rats' GCs were incubated with 10% blank serum (as negative control group),follicle- stimulating hormone (FSH)-containing serum (S-FSH,as positive control group),or BSTCR (in different dosages) containing serum (S-BSTCR,as the BSTCR groups) for 48 h.~3H-TdR incorporation was then performed;DNA was measured to analyze the distribution of GCs in the cell cycle and their proliferation index (PI) using a flow cytometer;estradiol (E_2) and progesterone (P) content in the culture fluid were examined by radioimmunoassay;and levels of FSHR and IGF-1 mRNA expression in GCs were measured by real-time RT-PCR.Results:A dose-dependent increase of ~3H-TdR incorporation in GC was shown in the BSTCR groups.Cells in G_0/G_1 phase had markedly less,while those in S phase had a significantly higher increase in the BSTCR groups compared with the negative control group.A high value of PI was also shown in the BSTCR groups,especially in the high dose group where the influence of cell proliferation was stronger than that in the positive control group.The levels of E_2 and P in the BSTCR groups of all dosages were significantly higher than those in the negative control group,and did not show any significant difference compared with those in the positive control group.Levels of FSHR and IGF-1 mRNA expression in the BSTCR groups increased in a dose-dependent manner at levels higher than those in the negative control group.Conclusion:S-BSTCR can obviously stimulate the proliferation and steroidogenesis of ovarian GCs.It is speculated that BSTCR could play a regulatory action on ovarian function through two different pathways of endocrine and autocrine by promoting FSHR and IGF-1 mRNA expression.     

机械法和胰酶法分离大鼠卵巢颗粒细胞的比较

目的 探讨胰酶法分离大鼠卵巢颗粒细胞的优势。方法 取3～4周龄雌性SD大鼠的卵巢,分别采用机械法和胰酶法分离颗粒细胞并进行培养。机械法：于40倍解剖显微镜下用针头刺破卵巢成熟的卵泡,将含有卵巢剩余组织及卵泡液的培养液用200目滤网过滤;胰酶法：用无菌眼科剪将卵巢剪成小于2 mm³的小碎块,然后加入0.25%胰酶,室温消化1 h后,将含有卵巢碎块的消化液用200目滤网过滤。比较这2种分离方法获得的细胞数量、细胞活力,及雌二醇和孕酮的分泌情况。结果 机械法和胰酶法这2种方法分离的原代大鼠卵巢颗粒细胞存活率均>90%。将细胞培养1～9 d,除24 h外,其余各时间点胰酶法分离的细胞增殖率均高于机械法;胰酶法细胞增殖率峰值出现时间早于机械法24 h,并且胰酶法分离的细胞最大增殖率[72 h：（210.09±0.95）%]高于机械法[96 h：（180.50±0.74）%],差异有统计学意义（P<0.05）。胰酶法分离的细胞激素的最大分泌量、每日平均分泌量及分泌总量均高于机械法,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 胰酶法分离的大鼠卵巢颗粒细胞在细胞活力和激素分泌功能方面均优于机械法,值得在卵巢早衰的研究中推广使用。     

舌针结合体针治疗围绝经期失眠及对血清E2、FSH、LH水平的影响

[目的]观察舌针结合体针对围绝经期失眠患者症状及血清雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平的影响。[方法]选取25例围绝经期失眠患者采用舌针结合体针治疗,操作时先取体针针刺穴位:百会、太阳、印堂、神门、内关等常规针刺,留针30 min,每隔10 min行针1次,然后取舌针穴位:心穴、肝穴、肾穴等,进针0.5～1 mm,进针后进行小幅度(90°)捻转3次,快速出针,不留针,尽量避免出血。针刺疗程为每日1次,5 d为1个疗程,共4个疗程。观察治疗前后患者匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)各项因子成分评分及总评分、Kupperman总评分、血清E2、FSH、LH水平的变化情况。[结果]治疗后患者PSQI各项因子成分评分及总评分、Kupperman总评分、血清FSH、LH水平均低于治疗前(P0.05),血清E2水平较治疗前升高(P0.05),总有效率为92%(23/25)。[结论]舌针结合体针针刺治疗能明显改善围绝经期失眠患者的入睡困难、睡眠质量、日间功能、围绝经期症状,同时能使血清FSH、LH水平下降,血清E2水平升高。     

长爪沙鼠动情周期血清激素水平与卵泡发育的动态研究

目的研究长爪沙鼠动情周期血清催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)、促卵泡利激素(FSH)和雌二醇(E2)水平和卵泡黄体数量的变化。方法采用直接镜检法确定长爪沙鼠的动情周期,以ELISA法测定长爪沙鼠血清PRL、E2、FSH和LH水平,并观察动情周期各时相各级卵泡和黄体数量的变化情况。结果直接镜检法计数角化细胞统计阴道脱落细胞的类型及比例,确定长爪沙鼠动情周期的四个时相,发现长爪沙鼠动情周期各级卵泡数量各时相间均差异未见显著性。动情间期黄体数量较其他各时相显著减少(P0.05)。血清PRL和LH水平从动情前期至动情间期逐渐增高,至动情间期达峰值(P0.05),而血清E2和FSH水平均在动情前期最高(P0.05),在动情间期达到最低。结论长爪沙鼠动情周期各时相卵泡和黄体数量与各时相激素的变化密切相关,动情周期各时相卵泡数量差异未见显著性。动情周期中出现的血清FSH和E2峰值的时相与小大鼠一致,而PRL和LH出现峰值的时相与大小鼠有差异,为长爪沙鼠生殖生理特性的进一步研究提供了参考。     

得生胶囊治疗气滞血瘀型月经不调的临床疗效及对FSH、LH、PRL、E2、P和T水平的影响

[目的] 探究得生胶囊治疗气滞血瘀型月经不调的临床疗效及对促卵泡生成素（FSH）、黄体生成素（LH）、催乳激素（PRL）、雌二醇（E₂）、孕酮（P）和睾酮（T）水平的影响。[方法] 选取2018年7月—2020年7月西安市中医医院收治的气滞血瘀型月经不调患者107例,采用随机数字表法分为治疗组与对照组,对照组采用西医常规治疗方案,治疗组在对照组基础上给予得生胶囊,两组均以28 d为1个治疗周期,连续治疗6个周期。观察两组患者临床疗效、月经不调症状评分、排卵率,并对比两组治疗前后双侧子宫动脉血流动力学指标及FSH、LH、PRL、E₂、P和T水平变化。[结果] 治疗组总有效率（96.30%）高于对照组（83.02%）（P<0.05）,排卵率高于对照组（P<0.05）;治疗后,治疗组月经不调症状评分低于对照组（P<0.05）,搏动指数（PI）、阻力指数（RI）及收缩期S波与舒张期D波峰值流速比值（S/D）低于对照组（P<0.05）,FSH、LH、PRL低于对照组（P<0.05）,E₂、P高于对照组（P<0.05）;治疗组不良反应发生率（3.70%）与对照组（7.55%）比较,差异无统计学意义（P>0.05）。[结论] 得生胶囊治疗气滞血瘀型月经不调疗效确切,可促进月经恢复正常,提高排卵率,改善子宫动脉高阻低速血流状态,调节性激素水平。     

Buyang Huanwu Decoction (补阳还五汤) Reduces Infarct Volume and Enhances Estradiol and Estradiol Receptor Concentration in Ovariectomized Rats after Middle Cerebral Artery Occlusion

Objective：To investigate the effect of Buyang Huanwu Decoction（补阳还五汤,BYHWD） on estradiol（E2） and estradiol receptor（ER） in serum and brain in ovariectomized rats after middle cerebral artery occlusion（MCAO）.Methods：Adult female rats were ovariectomized and focal cerebral ischemic was induced by MCAO.Rats were randomly divided into normal,ovariectomy（OVX）,MCAO,OVX＋MCAO,OVX＋MCAO＋E2,and OVX＋MCAO＋BYHWD group.Rats were administered BYHWD 5 g/kg daily,estradiol valerate 500 μg/kg per day or distilled water for 7 consecutive days.Neuronal function and infarct volume were measured on day 7 after artery occlusion,and E2 and ER concentration in serum and brain were checked by enzyme-linked immunosorbent assay.Results：BYHWD significantly improved the neurological behavior,reduced the infarction volume,increased E2concentration in serum and brain,and increased ER concentration in the brain in ovariectomized rats after MCAO.Conclusion：The neuroprotective effects of BYHWD are associated with estrogen and its receptor.     

雄激素对卵巢颗粒细胞cyclin D2 mRNA表达的影响

目的：探计是否过量雄激素可阻断FSH调节卵巢颗粒细胞cyclin D2 mRNA表达的功能，来抑制颗粒细胞增殖。方法：未发育成熟小鼠的颗粒细胞，被DHT(dihydrotesterone),forskolin和DMSO处理。Northern blot，测定细胞中Cyclin D2 mRNA的表达。结果：颗粒细胞单独被forskolin处理后， cyclin D2 mRNA的表达显著高于对照组。DHT处理后，cyclin D2 mRNA的表达明显被抑制，并随浓度的增加，其抑制作用也增强。细胞被DHT和forskolin共同处理后显示，DHT可明显抑制forskolin的作用。结论：过量的雄激素可影响颗粒细胞的正常增殖通道，即cAMP/PKA/cyclin D2的通道，使细胞内cyclin D2的表达降低，颗粒细胞的增殖速度减慢，使其功能受损。     

Comparison on the effects of three sex hormones on the fetal rat calvarial osteoblasts

Despite the overwhelming evidence of estrogenin bone preservation in postmenopausal osteoporosis, the mechanism of action of sex hormones onbone metabolism remains uncertain. In order toexplore the effect of 178--estradiol (E, ), progesterone (P ), and testosterone (T ) on rat osteoblasts proliferation and differentiation and difference of actions of these hormones, rat calvarialosteoblasts were used as culture model, since thisculture system, when cultured in a suitable environment, could mim…     

临床与生化检测及超声检查在鉴别性早熟与乳房早发育中的应用

目的 通过超声观察及相关激素水平的检测对女性性早熟（PP）与乳房早发育（PT）患儿进行鉴别诊断,为临床诊断提供证据。方法 本实验收集从2015~2016年因早期乳房增大（年龄<8岁）来笔者医院儿科就诊的女性患儿,按照诊断标准分为PP组与PT组。对所有患者进行乳房超声检查,并按照评判标准进行分级。同时检测两组间临床与各激素水平,进行组间比较。对差异性明显指标进行ROC分析。结果 本研究共纳入60例女性患儿,其中PP与PT患儿分别为30例。超声乳房分级与年龄、骨龄、乳腺芽直径、LH水平、FSH水平及E₂水平呈正相关,但与骨龄和实际年龄无相关性。且PP与PT间乳房超声分级与乳房芽直径差异无统计学意义（P<0.05）。比较两组间激素水平时发现,PP组患儿的基础LH与FSH、基础LH/FSH、LF与FSH峰值与LH/FSH峰值显著高于PT组患儿（P<0.05）。用ROC分析发现LH/FSH峰值比>0.25诊断PP的敏感度为100%且特异性为85%,基础LH>0.1的敏感度为72%且特异性为65%。两组间SHBG水平是唯一没有重叠的指标[PP：80.6（62.3~95.4）vs PT：114.5（107.6~121.5）]。kisspeptin、leptin与neurokinin B在两组间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 乳房超声检查通过分级与乳房芽测量可有效评估女性性早熟患儿的乳房发育水平,但并不能鉴别PP与PT。研究发现SHBG浓度及LH/FSH峰值比可有效鉴别PP与PT,但kisspeptin、neurokinin B与leptin不足以鉴别PP与PT。     

补肾养精颗粒调节早发性卵巢功能不全模型大鼠卵泡颗粒细胞凋亡机制研究

目的:探讨补肾养精颗粒调节早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵泡颗粒细胞凋亡的机制。方法:60只通过雷公藤多苷片造模POI大鼠,随机分为补肾养精颗粒高、中、低剂量组,空白组及非模型组。干预组给予不同剂量补肾养精颗粒连续灌胃15 d,空白组及非模型组给予生理盐水灌胃。连续观测大鼠动情周期的改变,Elise检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)水平的改变,流式细胞术检测卵泡颗粒细胞凋亡数量,Western blot检测卵泡颗粒细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路相关蛋白及凋亡相关蛋白的改变。结果:给予补肾养精颗粒干预后,大鼠动情时间较模型组明显缩短(P<0.05),血清FSH水平明显降低(P<0.05),E2水平明显升高(P<0.05),且均有剂量依赖性;同时大鼠卵泡颗粒细胞凋亡数明显减少(P<0.05),且具有剂量依赖性。补肾养精颗粒干预后,磷酸化PI3K及磷酸化Akt蛋白表达上升,抑凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达升高,促凋亡Bcl相关x蛋白(Bax)表达降低。结论:补肾养精颗粒通过PI3K/Akt信号通路调节凋亡相关基因,从而达到抑制卵泡颗粒细胞凋亡、改善卵巢功能的目的。