缺血预适应对肢体缺血-再灌注后骨骼肌损伤和细胞凋亡的影响

目的 探讨缺血预适心(IPC)对肢体缺血-再灌注(LI-R)损伤后骨骼肌的保护机制.方法 雄性Wistar大鼠24只随机分为对照(C)组,缺血-再灌注(I-R)组和缺血预适应(IPC+I-R)组,每组8只.分别测定血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)的含量;测定竹骼肌组织中ROS、MDA、Ca~(2+)、Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_x)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达.采用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡指数(AI).结果 与I-R组比较,IPC+I-R组血浆LDH,CK、ROS、MDA及骨骼肌组织中ROS、MDA、Ca~(2+)含量下降,骨骼肌组织中Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(26)-ATP酶、GSH-Px、GSH、水平升高,骨骼肌组织Bax、Caspase-3表达明显减弱,Bcl-2表达增强,Bcl-2/Bax比值升高,AI下降.结论 IPC可能通过减少自由基生成和提高自由基清除酶的活性,降低钙超载抑制骨骼肌细胞的凋亡对LI-R后骨骼肌产生保护作用.     

缺血预适应对肢体缺血再灌注后肺组织细胞凋亡的影响

目的观察并探讨缺血预适应对大鼠肢体缺血再灌注后肺组织细胞凋亡的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、肢体缺血再灌注组(LIR)、缺血预适应组(IPC),每组8只。各组大鼠均于肢体缺血4h再灌注4h后处死,分别测定其动脉血氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2)、肺湿干比(W/D)、肺系数(LI),检测肺组织细胞凋亡情况,检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达情况,结合计算机自动图像分析系统对其结果进行定量分析,在光学显微镜下观察肺组织的形态学改变。结果 LIR组大鼠的PaO2明显下降,光镜下可见肺间质充血,肺泡腔内有渗出液,支气管上皮细胞脱落坏死。TUNEL法显示,肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞呈凋亡改变。而与LIR组比较,IPC组PaO2明显增加,凋亡细胞数也明显减少,肺组织损伤性改变明显减轻。免疫组化结果显示,LIR组肺组织Caspase-3、Bax抗原表达明显上调,Bcl-2表达亦上调,但不如前几项明显。IPC组肺组织Caspase-3、Bax的表达情况与LIR组相比明显减轻,Bcl-2表达明显增强,Bcl-2/Bax比值增大。各组大鼠PaCO2的变化无显著性。结论 IPC可以减少LIR后肺组织细胞凋亡,可能是通过影响细胞凋亡相关蛋白的表达而实现的。     

缺血后适应对家兔缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的探讨缺血后适应对兔短期缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法32只新西兰大白兔随机分成4组：对照组、假手术组、缺血再灌注组（IR组）、缺血后适应组。IR组左冠状动脉前降支15min阻断和30min再灌注,缺血后适应组在15min缺血后接受连续3次每次再灌注30s,缺血30s的后适应。TUNEL法检测心肌组织的细胞凋亡情况。结果TUNEL检测结果：缺血后适应组心肌细胞凋亡指数为（23.5%）,与IR组（36.2%）相比,显著降低差异有统计学意义（P〈0.01）。结论缺血后适应显著减轻了兔缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡,具有心肌保护作用。     

腺苷预适应对缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察预适应（缺血及腺苷）对大鼠下肢缺血再灌注后心、肺损伤的保护作用。方法：雄性SD大鼠随机分4组,每组8只。行腹主动脉下端阻断及再灌注各120min。组I为手术对照组。组Ⅱ在缺血再灌注前先行阻断腹主动脉5min后开放5min,共4次。组Ⅲ麻醉后经颈静脉持续滴注 腺苷生理盐水溶液。组Ⅳ为假手术对照组。4组均于麻醉后经舌静脉注入伊文氏兰（Evank's blue dye)溶液,动脉插管测定再灌注后的平均动脉压（MAP）。实验终点取心、肺组织行病理检查,心肌ATP酶,心、肺组织丙二醛（malonyldiadehyde,MDA)含量及Evan氏兰含量测定。结果：组Ⅰ、Ⅲ再灌注后MAP均显著低于组Ⅱ、组Ⅳ（P＜0．05）,组Ⅰ、Ⅲ间,组Ⅱ、Ⅳ间无显著性。组Ⅰ心肌ATP酶（包括Na^ K^ ATPase,Mg^2_ATPase及Ca^2 ATPase)活力均低于余3组,余2组间2,2比较均无显著差异。组Ⅰ心,肺组织MDA含量显著高于余3组,余3组间2,2比较均无显著差异。组Ⅰ肺Evan氏兰含量显著高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,组Ⅱ、Ⅲ高于组Ⅳ,组Ⅱ、Ⅲ间无显著差异。结论：缺血和腺苷预适应能改善大鼠下肢缺血再灌注后心,肺组织和功能损伤。     

缺血预适应对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

自 198 6年Ｍｕｒｒｙ等[1] 在犬心模型上证实预先给予几次短暂心肌缺血 /再灌注 (Ｉ/Ｒ)能提高心肌对随后长时间冠脉阻断所致损伤耐受力 ,并称此现象为缺血预适应 (ｉｓｃｈｅｍｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ,ＩＰ )。在随后人们大量的研究中发现多次短暂Ｉ/Ｒ不仅对心脏随后长期Ｉ/Ｒ损伤有保护作用 ,而且对肝脏及其它器官Ｉ/Ｒ损伤同样有保护作用。ＩＰ对肝脏Ｉ/Ｒ损伤的保护作用机制尚未完全明确 ,目前认为与腺苷、蛋白激酶Ｃ以及热休克蛋白等多种因素密切相关。本文就ＩＰ对肝脏Ｉ/Ｒ损伤的保护作用主要机制作一综述。1　腺苷受体的激…     

缺血后适应减轻急性下肢缺血再灌注损伤的实验研究

目的 观察缺血后适应(IPC)减轻急性下肢缺血(AU)再灌注损伤的疗效并探讨其机制.方法 将45只新西兰大白兔采用高脂饮食与动脉内膜球囊损伤结合的方式建立下肢动脉粥样硬化狭窄动物模型,随机分为对照组、缺血再灌注组(IR组)、缺血后适应组(IPC组),每组各15只.检测三组大白兔阻断股动脉前、持续再灌注2h后血液中肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)水平,观察再灌注后下肢骨骼肌组织学改变,并采用原位末端标记法(TUNEL)分析三组大白兔下肢再灌注后骨骼肌细胞凋亡情况.结果 与IR组比较,IPC组兔血浆CK、MDA明显降低[(7.49±0.84) U/L与(8.19±1.06) U/L,P＜0.05],[(3.67±0.36) nmol/L与(4.06±0.55) nmol/L,P＜0.05],而SOD则显著升高[(420.40±30.94)μmol/L与(384.73±44.12) μmol/L,P＜0.05],骨骼肌细胞凋亡指数降低[(12.27±2.11)％与(16.62±1.44)％,P＜0.01],差异有统计学意义,并且组织形态学观察IPC组兔骨骼肌损伤、坏死程度较IR组减轻.结论 急性下肢缺血应用IPC能显著减轻下肢缺血再灌注损伤,其机制与减少自由基生成、增强抗氧化及减轻缺血再灌注诱导的骨骼肌细胞凋亡有关.     

无创性延迟肢体缺血预适应对大鼠脑缺血再灌注皮层的保护作用

目的：研究无创性延迟肢体缺血预适应（NDLIP）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：通过连续3d,每天1次3个循环左后肢无创性5min缺血、5rain再灌注,建立NDLIP模型。实验分4组：假手术组（sham）、缺血再灌注组（I／R）、早期脑缺血预适应＋I／R组（ECIP＋I／R）、NDLIP＋I／R组。观察其对脑缺血／再灌注的神经缺损症状,脑梗死范围,超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活力,黄嘌呤氧化酶活力（XOD）,丙二醛（MDA）含量影响。结果：与I/R组相比,ECIP＋I／R组及NDLIP＋I／R组缺血1h,再灌注24h后评分有非常显著的降低;脑梗死范围显著减小。与I／R组比较,ECIP＋I／R组和NDLIP＋I／R组的T-SOD和Mn—SOD活力、GSH—PX活力均升高;XOD活力明显降低,MAD含量明显减少;ECIP＋I／R组和NDLIP＋I／R组间差异无统计学意义。结论：NDLIP可降低I／R对神经的损伤、减小脑梗死范围、提高脑组织抗氧化能力,减少I／R对脑组织的损伤。     

缺血预适应对大鼠肢体缺血再灌注后肝损伤的影响

目的:观察缺血预适应(IPC)对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肝脏损伤和细胞凋亡的影响,以进一步探讨IPC对肢体缺血再灌注后肝脏功能的保护作用.方法:将实验用雄性Wistar大鼠18只,随机分为对照组、缺血再灌注(IR)组和缺血预适应加再灌注(IPC+IR)组,每组6只.测定各组动物血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)和乳酸脱氢酶(LDH);检测肝组织细胞的DNA双链百分率;利用原位脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)检测各组肝细胞凋亡情况;采用免疫组织化学方法检测各组动物肝组织Bcl-2和Bax比值及Caspase-3.结果:大鼠LIR后血浆中ALT、AST、HA、LDH含量均明显增加;LIR后肝组织细胞DNA双链百分率降低,凋亡细胞百分率增高.Bcl-2/Box蛋白比值减小,Caspase-3蛋白表达明显增强.IPC+IR组上述各指标较IR组改善,但与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:肢体缺血再灌注可以导致肝脏的损伤,缺血预适应可以减轻损伤的发生,其保护效应可能与其抑制肝细胞凋亡有关.     

无创性肢体缺血预适应增强大鼠缺血/再灌注损伤后心肌抗氧化能力

目的研究无创性肢体缺血预适应对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用,并从氧化-抗氧化角度初步探讨其作用机制。方法大鼠被随机分为缺血/再灌注(I/R)、心脏缺血预适应(CIP)和肢体缺血预适应(LIP)3组。LIP组连续3d经历左后肢缺血预适应。d4,各组动物均经历心肌缺血/再灌注损伤,CIP组于缺血前行心肌缺血预适应。连续监测心电图变化,检测心肌梗死范围,测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、黄嘌呤氧化酶(XOD)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果与I/R组比较,LIP及CIP组ST-段抬高幅度降低,室早出现时间推迟,持续时间缩短,室性心律失常发生率降低,心肌梗死范围缩小,SOD、GSH-PX活性升高,XOD活性降低,MDA含量减少。结论LIP具有与CIP相似的心脏保护作用,其机制与增强心肌抗氧化能力有关。     

骨骼肌缺血再灌注损伤的研究现状

骨骼肌缺血再灌注损伤是临床常见的病理过程。目前对骨骼肌缺血再灌损伤的病理机制尚不十分清楚,为此,不少学者就骨骼肌缺血再灌注损伤的发病机制及其防治方法进行了广泛深入的研究。本文就骨骼肌缺血再灌注损伤的研究现状综述如下。1　骨骼肌缺血再灌注损伤的病理机制骨骼肌代谢活跃,对缺血反应比较敏感。在缺血再灌注过程中,骨骼肌损伤不仅发生在缺血期间,而且还发生在再灌注时期。缺血再灌注损伤的程度与缺血时间有关。当骨骼肌缺血缺氧时,细胞代谢转化为无氧酵解。细胞能量大量消耗,代谢产物聚集,从而引起骨骼肌在代谢、结构和功能等方…     

雌激素对骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨17β-雌二醇对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的作用。方法：制作右后肢缺血再灌注模型，30只大鼠随机分为3组，假手术组；缺血再灌注对照组：骨骼肌缺血再灌注＋生理盐水；雌激素干预组：骨骼肌缺血再灌注＋雌激素干预。用全自动生化分析仪测定血浆肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH），用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛（MDA），用比色法测定小腿三头肌组织中髓过氧化酶（MPO）活性；高倍显微镜观察小腿三头肌组织结构变化。结果：缺血再灌注对照组、雌激素干预组与假手术组比较，血浆CPK、LDH、MDA及MPO含量明显升高（P〈0.01），雌激素干预组与缺血再灌注对照组相比血浆CPK、LDH、MDA及MPO含量明显降低（P〈0.01）；缺血再灌注对照组、雌激素干预组均可见骨骼肌损伤，缺血再灌注对照组明显重于雌激素干预组。结论：雌激素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤具有保护作用，其作用与抑制中性粒细胞的效应有关。     

臭氧氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注细胞凋亡的影响

【】目的：观察臭氧氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注后细胞凋亡的影响,探讨臭氧对肝脏的保护作用及其可能的作用机制。方法：将18只SD大鼠(雄性,6～8周龄,250～280g)随机分为3组：臭氧预处理组(OP+IR组,n=6)、单纯缺血再灌注组(IR组,n=6)和假手术组(S组,n=6)。臭氧预处理组每天同一时间点行腹腔注射O₃/O₂混合气体(臭氧浓度为50ug/ml,1mg/kg/d),连续注射5天。假手术组和单纯缺血再灌注组则注射相等容积(ml)的氧气。缺血45min后恢复灌注3小时建立70%肝脏缺血再灌注模型(S组仅开腹不阻断肝血流),取左肝叶组织, HE染色观察肝组织形态学变化,TUNEL法测定肝细胞凋亡指数(AI),免疫组化法测定凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化,并计算Bcl-2/Bax比值。结果：(1)与S组比较,(OP+IR)组与IR组的肝组织超微结构皆有损伤,(OP+IR)组的损伤程度较IR组减轻。(2)与S组相比,(OP+IR)组和IR组的肝细胞凋亡指数增加,Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值下降(均P＜0.05)。(3)与IR组相比,(OP+IR)组的肝细胞凋亡指数降低,Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白减少,Bcl-2/Bax比值增加(均P＜0.05)。结论：臭氧氧化预处理可以减轻大鼠肝脏缺血再灌注后肝细胞的凋亡,其机制可能与Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达减少和Bcl-2/Bax比例上调有关。     

黄芪注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后JNK3基因表达的影响

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑缺血/再灌注损伤后细胞凋亡和c-jun氨基末端激酶(JNK3)表达的影响。方法应用线栓法经左侧颈外-颈内动脉插线建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)模型,经腹腔注射黄芪注射液(3 mL/kg)干预治疗。Longa法评分标准评价大鼠神经行为功能,流式细胞术检测海马区神经元凋亡,Western blot检测JNK3蛋白表达,RT-PCR检测JNK3 mRNA表达。结果经黄芪注射液治疗后,大鼠海马区神经元JNK3蛋白和JNK3 mRNA表达较对照组显著减低,凋亡细胞数量显著减少,而动物神经行为功能显著改善。结论黄芪注射液可通过下调神经元JNK3基因表达而抑制细胞凋亡,改善动物的神经行为功能。     

血塞通注射液对缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨血塞通注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将24只Wistar大鼠随机分为三组:心肌缺血再灌注组(MIR,n=8):术前给予生理盐水干预;血塞通治疗组(X,n=8):术前给予血塞通注射液600 mg/(kg·d)腹腔注射给药3天;假手术组(S,n=8):术前处理同MIR组.MIR和X组大鼠在结扎左前降支30分钟后行再灌注240分钟.S组所有操作同MIR组,大鼠仅穿线不结扎左前降支.分别于缺血再灌注240分钟采血,S组取相同时点采血.检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肌钙蛋白I(cTnI)含量变化.结果 与X组和S组比较,MIR组血清SOD活性显著降低(P＜0.001),MDA、cTnI含量显著升高(P＜0.001);与S组比较,X组血清SOD、MDA浓度差异无显著性(P＞0.05),而血清cTnI显著升高(P＜0.01).结论 血塞通可能通过减少MDA的产生,增加SOD活性,减轻心肌缺血再灌注损伤.     

热休克预处理在大鼠脊髓损伤后细胞凋亡中的作用

目的探讨大鼠脊髓损伤后热休克蛋白70(HSP70)和氧化氮合酶(iNOS)在细胞凋亡中的作用。方法将96只大鼠分为对照组、损伤组和热休克预处理组。采用静压型脊髓损伤模型,分别在伤后6h,12h,1天,2天,3天,1周,2周和3周处死动物。用原位杂交技术检测HSP70mRNA在以上各时点的表达。同时用免疫组化法检测HSP70、iNOS在各时点的表达。运用TUNEL法检测凋亡细胞。另外,用CBS评分来评估神经功能。结果CBS评分显示,热休克预处理组的神经功能明显好于损伤组(P<0.05)。凋亡细胞数在损伤组显著高于热休克预处理组(P<0.05)。通过原位杂交和免疫组化发现,HSP70mRNA和蛋白水平在热休克预处理组明显高于损伤组(P<0.05)。免疫组化的结果还显示,iNOS的量在热休克预处理组明显低于损伤组(P<0.05)。结论热休克预处理能减轻脊髓损伤后的细胞凋亡,其机理可能同HSP70合成增加,并进一步抑制iNOS的表达有关。     

双后肢缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

在兔肝脏缺血再灌注 ( I/R)模型基础上建立动物双后肢缺血预处理 ( IPC)及肝脏 IPC模型 ,观察其对肝脏保护作用。结果发现 ,双后肢 IPC组及肝脏 IPC组与单纯肝脏 I/R组比较 ,代表肝脏功能的血清肝酶 ( AL T、AST、ALP、γ-GT)均降低 ,P<0 .0 5 ;而双后肢 IPC与肝脏 IPC组比较无统计学意义 ,P>0 .0 5     

大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法封闭群SD大鼠24随机分为对照组与实验组,每组12只。2组均切除右肾,实验组左肾实施冷缺血再灌注。2组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测。透射电镜检查肾组织形态学,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡。结果①超微结构检查（透射电镜）：对照组肾脏组织形态结构正常,实验组呈现损伤,部分细胞核可见凋亡迹象。②细胞凋亡检测：对照组偶见肾小管上皮细胞凋亡,实验组显著增多,细胞凋亡指数实验组均显著大于对照组（P〈0.05）。结论大鼠肾脏冷缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡明显增加。     

Kinetic Changes of COX-2 Expression during Reperfusion Period after Ischemic Preconditioning Play a Role in Protection Against Ischemic Damage in Rat Brain

A brief ischemic insult induces significant protection against subsequent massive ischemic events. The molecular mechanisms known as preconditioning (PC)-induced ischemic tolerance are not completely understood. We investigated whether kinetic changes of cyclooxygenase (COX)-2 during reperfusion time-periods after PC were related to ischemic tolerance. Rats were given PC by occlusion of middle cerebral artery (MCAO) for 10 min and sacrificed after the indicated time-periods of reperfusion (1, 2, 4, 8, 12, 18 or 24 h). In PC-treated rats, focal ischemia was induced by occlusion of MCA for 24 h and brain infarct volume was then studied to determine whether different reperfusion time influenced the damage. We report that the most significant protection against focal ischemia was obtained in rats with 8 h reperfusion after PC. Administration of indomethacin (10 mg/kg, oral) or rofecoxib (5 mg/kg, oral) 48 h prior to PC counteracted the effect of PC. Immunohistochemical analysis showed that COX-2 and HO-1 protein were induced in PC-treated rat brain, which was significantly inhibited by rofecoxib. Taken together, we concluded that the kinetic changes of COX-2 expression during the reperfusion period after PC might be partly responsible for ischemic tolerance.