肿瘤干细胞的研究进展

随着对肿瘤研究的不断深入,以及对干细胞了解的日益加深,越来越多的证据提示肿瘤中某些细胞具有干细胞特性,并提出了肿瘤干细胞的学说,认为肿瘤的生长、转移以及耐药等均于肿瘤干细胞的关系密切.该文综述了肿瘤干细胞的发现、特点,以及在肿瘤的诊断、治疗和预后判断中的作用.     

肿瘤干细胞的研究新进展

近年来随着肿瘤干细胞（Gamer stem cells，CSC；或Tumour stem cells，TSC）在肿瘤组织中分离成功，并提出了肿瘤于细胞学说，为肿瘤研究提供了新的思路。肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体，均具有自我更新能力和不定向分化潜能，并可导致肿瘤发生。现认为肿瘤干细胞是肿瘤形成及其不断生长的根源。     

肿瘤干细胞及其潜在影响实体瘤的治疗

有越来越多的证据表明,多种人类癌症细胞中包含小部分具有干细胞特性的癌细胞,称为肿瘤干细胞.肿瘤干细胞维持肿瘤的生长;可能引发转移.本篇文章的目的是评估肿瘤干细胞存在的证据,及其对现行治疗实体肿瘤的影响.在评估中我们发现肿瘤干细胞具有与正常干细胞相似的两个主要特征,自我更新和分化.肿瘤干细胞的存在与癌症治疗方面具有广阔的临床意义.肿瘤干细胞的靶向治疗,对肿瘤干细胞进行表面标记,在实体瘤中对肿瘤干细胞的鉴别和分离,逆转肿瘤干细胞对放化疗的抵制.临床试验表明肿瘤干细胞能够驱使和维持人类多种类型恶性肿瘤生存.然而,多年的肿瘤干细胞靶向治疗仍然面临多方面困难.     

肿瘤干细胞的耐药性及其治疗策略

随着对肿瘤研究的不断深入,以及对干细胞了解的日益加深,越来越多的证据表明肿瘤中某些细胞具有干细胞特性,由此提出了肿瘤干细胞学说。这一学说,不仅认为肿瘤的生长、转移与肿瘤干细胞的关系密切,而且传统的化疗方法不能根治肿瘤的原因可能也与肿瘤干细胞耐药有关。已有研究表明, ABC转运体能够保护肿瘤干细胞免受药物的毒性作用,因此更深入的理解肿瘤干细胞耐药机制对我们找到行之有效的肿瘤治疗方法以及新的治疗靶点有十分重要的意义。     

干细胞的可塑性与皮肤再生医学

干细胞具有稳定的存活、增殖和保持多向分化潜能的特性,在皮肤再生医学和未来组织工程皮肤领域具有广泛的研发潜力。在成年动物皮肤、神经系统、骨髓造血系统和肝脏等多种组织中存在着增殖和分化能力强的干细胞。本文主要就干细胞的分类、干细胞的可塑性、成熟细胞向干细胞逆分化、干细胞基因治疗与皮肤再生医学,以及干细胞临床应用的安全性等内容系统地进行了概述。     

ABCG2在腺样囊性癌的表达及意义

目的以腺样囊性癌肺高转移细胞株(adenoid cystic carcinoma cell clones highly me-tastatic to the lung,ACC-M)为研究对象,探讨ABCG2在ACC-M的表达情况及意义,为今后分离ACC-M的肿瘤干细胞提供一定的实验依据及理论数据。方法用流式细胞计数检测ABCG2在ACC-M的表达情况。结果流式检测显示ABCG2的表达率为8.64%±0.68。结论ACC-M细胞也象多数实体瘤一样含有SP细胞。在后续的研究中,可考虑利用SP细胞的特异性表型标记"AB-CG2",将SP细胞从肿瘤中分离出来,进一步探讨肿瘤干细胞的生物学特性。     

宫颈癌干细胞相关研究进展

宫颈癌是威胁全球女性健康的主要恶性肿瘤之一.近年,随着宫颈癌筛查的开展、早期诊断及不断改良的治疗方案,早期宫颈癌死亡率呈下降趋势,但宫颈癌的复发与转移,对放化疗敏感度不高,严重影响了患者的预后.肿瘤干细胞(CSCs)是肿瘤中一小部分具有肿瘤起源、自我更新能力及异质性的细胞.肿瘤干细胞的这些特性认为与肿瘤的维持生长、复发及远处转移有关,并且对于常规的放化疗普遍耐受.目前的研究不仅证实了肿瘤干细胞的存在,并且探索其异于正常细胞的机制,发现了肿瘤干细胞相关标志物.而新兴的肿瘤干细胞靶向免疫治疗对于宫颈癌治疗来说既是机遇也是挑战.本文就宫颈癌干细胞相关研究进展及肿瘤干细胞免疫治疗进行系统分析及综述.     

肿瘤干细胞miRNA及miRNA作为肿瘤标志物的研究和临床应用进展

肿瘤干细胞(CSCs)理论为肿瘤的研究开辟了一个新的方向,CSCs学说认为肿瘤细胞具有异质性,肿瘤中存在干细胞样细胞,该群细胞是一种增殖失控、可形成肿瘤的细胞,只占肿瘤细胞很少部分,具有干细胞特性,是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤增长、复发及转移的根源。微小核糖核酸(miRNA)是广泛存在的非编码小RNA,调节着人类1/3的基因,越来越多的证据显示miRNA在肿瘤的发生发展中起着重要的作用,作为重要的转录后调控因子,广泛参与肿瘤相关基因调控的生物程序,使不同类型的肿瘤表现出特异的miRNA表达谱。近年来,CSCs的miRNA研究日益成为热点,已经发现多种CSCs中存在特异性表达的miRNA,对CSCs的生物学行为有了更进一步的认识。有研究发现肿瘤患者血浆中表达某些特异的miRNA,这些miRNA可以作为肿瘤的标志物对患者的病情及预后进行预测和判断。本文就近来CSCs中miRNA研究进展及miRNA作为肿瘤标志物研究进展进行综述。     

肿瘤干细胞研究进展

<正>肿瘤干细胞是肿瘤组织中存在的极少量(1%)具有自我更新、无限增殖能力及多向分化潜能的细胞,是肿瘤发生、发展、侵袭、转移的根源[1]。因此,分离鉴定这类细胞对于进行肿瘤干细胞(cancerstemcell,CSC)靶向治疗,彻底摧毁肿瘤的母体,以及恶性肿瘤的最终治愈,有着深远意义。一个多世纪前Cohnheim首先提出肿瘤起源于干细胞,随后更多的生物学实验也证实了这个观点。肿瘤干细胞假说也随之被提出,具有肿瘤干细胞特性的细胞在1994年被发现,研究人员在人     

对肿瘤干细胞的认识和可调控的意义

恶性肿瘤严重地威胁着人类的健康，是危害人类生命的重要原因之一。尽管有关研究报告很多，遗憾的是其机制尚不清楚，至今尚无确切有效的抗癌、控癌措施。局部复发和远处转移一直是导致最终治疗失败的主要问题。WHO提出的新目标和理念——肿瘤属于可调控的慢性疾病。新的研究发现在肿瘤组织中有一类具有自我更新及分化潜能的细胞亚群，而且是肿瘤复发及转移的根源。这部分细胞被称马肿瘤干细胞。国内外相继从血液系统肿瘤及多种实体瘤中分离、鉴定了肿瘤干细胞。随着肿瘤干细胞学说的提出及确认，人们对肿瘤复发、转移机制和对策有了新的认识和期望，从而为恶性肿瘤治疗後的复发转移的预防提供了一个全新的途径。现综述如下。     

亚低温联合载神经干细胞的纤维蛋白支架对颅脑创伤的修复作用

目的 研究大鼠颅脑创伤 （TBI） 后原位移植神经干细胞 （NSCs） 治疗的可能性, 探讨载有 NSCs 的纤维蛋白支架及与亚低温（MHT）联合对 TBI 的治疗作用。方法 从孕 14 d SD 大鼠皮质组织中分离 NSCs, 与纤维蛋白支架共培养, 应用扫描电镜观察支架及 NSCs 的形态, 并通过免疫荧光检测细胞类型。将 48 只雄性 SD 大鼠随机分成 TBI 组 （A 组）、 TBI+NSC 组 （B 组）、 TBI+MHT 组 （C 组）、 TBI+NSC+MHT 组 （D 组）, 每组 12 只。A 组通过液压损伤仪行 TBI 造模; B 组 TBI 后接受 NSCs 移植治疗; C 组 TBI 后接受 MHT 治疗; D 组 TBI 后接受 NSCs 与 MHT 联合治疗。分别在第 14、 28 天通过神经功能缺陷评分 （mNSS） 和水迷宫实验对大鼠进行神经功能评价; 28 d 后取脑组织切片, 行细胞免疫荧光检测, 观察移植后的 NSCs 在体内分化情况。结果 电镜扫描显示, NSCs 与纤维蛋白支架共培养 3 d 后形态无明显改变; 免疫荧光提示 NSCs 特异性标志物 Nestin 阳性表达, 表明神经干细胞在纤维蛋白支架上存活; D 组大鼠的 mNSS 在第 14 天和第 28 天均低于 A、 B、 C 各组; 水迷宫结果显示, D 组大鼠逃避潜伏期短于 A、 B、 C 各组; D 组 28 d 后脑组织取材可追踪到 BrdU 标记的神经干细胞分化为了神经元。结论 纤维蛋白支架与 NSCs 生物相容性良好, 具有可降解性。亚低温与载 NSCs 的纤维蛋白支架对大鼠 TBI 后的神经功能修复具有协同作用。     

从PC-3细胞中富集前列腺癌干细胞的实验研究

目的从PC-3人前列腺癌细胞中分离并富集前列腺癌干细胞。方法体外无血清悬浮培养PC-3细胞,通过传代更新、诱导分化验证PC-3悬浮成球细胞具有强增殖性、自我更新及分化潜能,实时荧光定量核酸扩增检测系统检测CD44和CD133mRNA的表达,流式细胞术检测CD44+CD133+细胞和侧群(SP)细胞比例。结果 PC-3成球细胞可以在无血清培养液(SFM)中生存并形成可以稳定传代的悬浮细胞球。PC-3成球细胞具有自我更新和分化能力,其前列腺癌干细胞标志物CD44和CD133mRNA的相对表达量分别是PC-3贴壁细胞的41.83倍和10.48倍(P<0.05)。PC-3悬浮成球细胞中CD44+CD133+细胞比率为13.94%,SP细胞含量为3.10%,均显著高于PC-3贴壁细胞的0.77%和0(P<0.05)。结论通过无血清悬浮聚球培养可以从PC-3细胞中简便、高效地富集前列腺癌干细胞。     

抗衰片对电离辐射损伤后小鼠骨髓造血作用的影响

摘要： 目的 探讨抗衰片对电离辐射损伤后小鼠造血重建的调控影响。方法 9~10 周龄雄性 C57BL/6 小鼠随机分为照射对照组、 低剂量组、 中剂量组和高剂量组, 每组 10 只。后 3 个剂量组分别按 0.75、 1.5、 3.0 g/kg 体质量灌服抗衰片水溶液, 照射对照组给予同体积生理盐水, 1 次/d, 连续给药 11 d。第 4 天对 4 组小鼠进行 6.0 Gy 137 Cs-γ射线单次全身照射。照射后第 8 天, 观察小鼠内源性脾结节 （即脾集落形成单位, CFU-S）、 小鼠骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位 （CFU-GM） 和骨髓成纤维细胞集落形成单位 （CFU-F） 的生成情况。同时, 体外扩增的骨髓间充质干细胞（MSC） 与正常供体小鼠的造血干细胞 （HSC） 进行二维共培养 （2D CFU-GM）, 通过 2D CFU-GM 检测辐射损伤后药物作用的 MSC 促进 HSC 的增殖能力。结果 与照射对照组相比, 3 个剂量组的 CFU-GM 数目显著增多, 中剂量组及高剂量组 CFU-S、 CFU-F、 2D CFU-GM 增殖能力显著提高 （均 P＜0.05）。结论 抗衰片可以促进电离辐射损伤后小鼠造血系统重建。     

人脐血干细胞经外周静脉移植治疗失代偿期肝硬化的临床研究

摘要： 目的 探讨人脐血干细胞经外周静脉移植治疗不同程度肝硬化患者的疗效及安全性。方法 失代偿期肝硬化患者 65 例, 分为干细胞组 34 例, 其中 Child-Pugh A 级 13 例、 B 级 14 例、 C 级 7 例, 在常规保肝治疗的基础上给予脐血干细胞移植治疗; 对照组 31 例, 其中 Child-Pugh A 级 11 例、 B 级 13 例、 C 级 7 例, 给予常规保肝治疗。于治疗后 2、 4、 12 及 24 周观察不同程度肝硬化患者肝功能和凝血功能变化, 并观察临床症状改善以及不良反应发生情况。结果 （1） 临床症状改善情况： Child-Pugh A、 B 级患者干细胞组临床症状较对照组明显改善。Child-Pugh C 级患者 2 组临床症状改善程度差异无统计学意义。（2） 肝功能和凝血功能改善情况： Child-Pugh A、 B 级患者干细胞组白蛋白 （ALB）、 凝血酶原活动度 （PTA） 治疗后 2、 4、 12、 24 周均较治疗前升高, 且干细胞组于 12、 24 周均较对照组升高; 干细胞组胆碱酯酶 （CHE） 治疗后 4、 12、 24 周均较治疗前升高, 但与对照组比较差异无统计学意义; 2 组丙氨酸转氨酶 （ALT）、 天冬氨酸转氨酶 （AST）、 总胆红素 （TBIL） 比较差异均无统计学意义。干细胞组 Child-Pugh C 级患者治疗后 ALT、 AST、 TBIL、 ALB、 CHE、 PTA 与治疗前及对照组比较差异均无统计学意义。（3） 所有患者均未发生严重不良反应及并发症。结论 经外周静脉移植脐血干细胞治疗失代偿期肝硬化患者安全有效, Child-Pugh A、 B 级患者的疗效优于 Child-Pugh C 级患者。     

人胃癌细胞系HGC-27细胞中SP亚群的初步研究

目的分析人胃癌细胞系HGC-27细胞中肿瘤干细胞相关的SP（sidepopulation）亚群比例,分选出相关的sP和NSP细胞,并鉴别相关的sP是否具有干细胞某些生物学特性。方法制备人胃癌细胞系HGC-27细胞中细胞悬液,经Hoechst33342和PI染色（其中对照组同时加入拮抗剂维拉帕米）,流式细胞仪分析相关SP亚群。通过流式细胞仪分选出人胃癌细胞系HGC-27细胞中相关的sP细胞。克隆形成实验和MTY实验检测相关的sP和NSP细胞增殖能力差异。结果SP亚群占HGC-27细胞中的6．00％左右,维拉帕米阻断后减少为0．01％左右。流式细胞仪分选出sP细胞8．5×105个,大部分为NSP细胞。克隆形成实验和MTY实验证实相关的SP细胞和NSP细胞增殖能力有差异。结论人胃癌细胞系HGC-27细胞中存在相关的sP亚群细胞,维拉帕米可抑制染料外排而明显减少sP细胞的比例。可以通过流式细胞仪分选出相关的sP细胞,通过克隆形成实验和MTr实验检测相关的sP和NSP细胞增殖能力有差异。但尚需从分子水平证实胃癌细胞SP细胞相关干细胞特异性。     

干细胞临床研究及管理的现状与未来

干细胞研究和临床试验发展迅速,目前全球干细胞临床研究排名前三的国家或地区分别是美国、欧洲和中国,干细胞治疗种类以造血干细胞为主,间充质干细胞日益增长,神经干细胞和多能干细胞的临床试验也相对较多。目前全球已有14款干细胞药物上市,超过一半以上是间充质干细胞治疗产品。中国共有87个干细胞临床项目完成备案,其中间充质干细胞备案项目最多。细胞治疗是按照医疗技术还是药品来监管,世界各国有所不同。在美国按细胞组织类产品风险高低进行归类监管,欧盟以先进技术治疗医学产品归类监管,日本按照再生医学产品管理,中国目前进行机构和项目双备案制度。在严格分类管理的基础上,无论欧盟的医院豁免制度、日本的条件限制性准入政策,还是中国从药品-第三类医疗技术-备案制管理政策的变迁,都为干细胞及其他细胞治疗产品的研究和应用提供了科学而快速发展的政策保障。对国内外干细胞临床研究及应用的发展现状进行综述,同时分析各国干细胞临床研究相关的法律法规与质量控制监管政策。     

人宫颈癌侧群细胞差异微小RNA表达分析

目的筛选入宫领癌侧群细胞差异表达的微小RNA（microRNA）,方法选取16例行宫颈鳞癌切除的手术标本,进行宫颈癌细胞原代培养,流式细胞仪分选侧群细胞,对比侧群细胞和非侧群细胞的体外自我更新能力和肿瘤形成能力。分别提取侧群细胞和非侧群细胞的总RNA,用microRNA芯片分刖检测侧群细胞和非侧群细胞的micl’oRNA表达谱并进行分析,筛选出差异表达的microRNAi．结果在原代培养的16株宫颈癌细胞中均分选出侧群细胞,比例占（1．67±0．94）％。培养14d后,侧群细胞的克隆形成牢为0．51±0．07,而非侧群细胞的克隆形成率仪为0．05±0．02,侧群细胞和非侧群细胞的克隆形成率比较差异有统计学意义（t=2．828,P〈0．01）．仅1×10^4个侧群细胞即可形成肿瘤,而至少1×10^6个非侧群细胞才能形成肿瘤。microRNA芯片筛选出表达差异在10倍以上的有16条microRNA,其中3条microRNA上测,13条microRNA下调;差异表达超过共同2倍的microRNA有7条,其中3条microRNA上调,4条microRNA下调,结论人宫颈癌侧群细胞具有肿瘤干细胞特性,人宫颈癌侧群细胞表达一些特异的microRNA,     

肿瘤微环境对乳腺癌发生发展的影响

摘要： 肿瘤微环境 （TME） 在局部耐药性、 免疫逃脱和远端转移等多个肿瘤发生、 发展的步骤中起关键作用。依据 不同个体的 TME, 准确评估和选择临床用药, 可有效控制原位癌和转移癌的恶性转化。目前, 治疗癌症的主要方法 是化疗, 由于 TME 中良性细胞可调节癌细胞对标准化疗和靶向药物治疗的反应, 因此, 结合靶向 TME 治疗会取得更 理想的临床疗效。本文就乳腺癌 TME 中细胞外基质 （ECM）、 肿瘤相关成纤维细胞、 肿瘤相关巨噬细胞、 调节性 T 细 胞和骨髓间质干细胞对肿瘤发生、 发展的作用机制进行综述。     

脑缺血再灌注损伤后BMSCs 不同示踪方式的比较

目的比较脑缺血再灌注损伤后,不同示踪方式观察骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植后的效果。方法 BMSCs 复苏培养后,分别采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）、PKH26 进行标记,并且与绿色荧光蛋白（GFP）转染细胞,分别对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织进行移植。将75 只SPF 级雄性SD 大鼠随机均分为假手术组,模型组,BrdU、 PKH26、GFP 示踪组。采用线栓改良法制备大鼠左侧大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注损伤模型。脑缺血再灌注24 h 后,假手术组、模型组分别采用脑立体定位仪经脑实质植入10 μL 生理盐水;BrdU、PKH26、GFP 示踪组分别植入 10 μL 的BMSCs/BrdU、BMSCs/PKH26、BMSCs/GFP。采用神经行为学评分、TTC 染色、脑组织含水量法进行模型鉴定及疗效判定,采用焦油紫染色进行神经元计数,并在荧光显微镜下计数标记细胞阳性率。结果移植前细胞BrdU、 PKH26、GFP 标记率无明显差异。移植4 周后3 示踪组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量均显著低于模型组,神经元计数显著高于模型组;神经行为学评分、脑梗死体积高于假手术组,脑组织含水量、神经元计数与假手术组差异无统计学意义;3 示踪组间上述指标差异均无统计学意义。GFP 示踪组的荧光标记细胞阳性率高于 BrdU、PKH26 示踪组。结论脑缺血再灌注损伤中,GFP 示踪方式效果更为持久,优于BrdU 和PKH26。