早孕绒毛及蜕膜组织中酪氨酸磷酸酶-1 / 2( SHP-1,SHP-2) 与吲哚胺2,3-双加氧酶( IDO) 的表达及其相关性

目的:研究母胎界面中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)及酪氨酸磷酸酶-1/2(SHP-1,SHP-2)的表达及其相关性,以探索母胎免疫耐受的新机制。方法:30 例正常早孕6 ~8 周妇女行人工流产获取绒毛及蜕膜组织,用Western blot 方法检测绒毛、蜕膜组织中的酪氨酸磷酸酶-1/2(SHP-1、SHP-2)与IDO 的蛋白表达,分析IDO 与SHP-1、SHP-2 的相关性。结果:人早孕绒毛及蜕膜组织中均有SHP-1、SHP-2 的表达,与IDO 的表达呈正相关;SHP-1、SHP-2 和IDO 在蜕膜组织中的表达均高于绒毛;结论:在正常生理妊娠状态下,母胎界面中SHP-1、SHP-2可能参与调节IDO 的表达,在维持母胎界面的免疫耐受状态起着重要作用。     

人早孕母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达

目的：研究正常早孕绒毛及蜕膜组织细胞因子信号转导负调控因子（Suppressors of cytoldne signaling，SOCS）基因和蛋白水平表达，以揭示SOCS在母胎界面生理性调节作用。方法：半定量RT-PCR检测早孕绒毛组织、蜕膜组织及原代培养早孕滋养细胞、蜕膜基质细胞SOCS1、SOCS2、SOCS3 mRNA水平；Western blot检测早孕绒毛组织及蜕膜组织SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达；免疫组化定位SOCS1、SOCS2、SOCS3在早孕绒毛组织、蜕膜组织表达；ELISA检测滋养细胞、蜕膜基质细胞分泌IL-10、IFN-γ。结果：正常母胎界面见SOCS1、SOCS2、SOCS3基因表达，其中SOCS3绒毛／蜕膜阳性率73．7％／71．1％；SOCS2绒毛／蜕膜阳性率50．0％／39．5％，SOCS1最少，绒毛／蜕膜阳性率34．2％／31．6％；SOCS1、SOCS2、SOCS3蛋白表达与转录水平基本一致；正常母胎界面SOCS1、SOCS2、SOCS3表达主要定位于绒毛滋养细胞和蜕膜间质；体外无血清培养滋养细胞和蜕膜基质细胞SOCS2、SOCS3低表达，SOCS1未见表达，其分泌的IL-10随时间而增高（P〈0．05）。结论：正常早孕母胎界面表达SOCS1、SOCS2、SOCS3，无刺激条件下滋养细胞和蜕膜基质细胞低表达SOCS2、SOCS3，SOCS在正常妊娠Th平衡中具有重要意义。     

IFN-γ在早孕母胎界面对吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达的正性调节研究

目的:探讨早孕绒毛和蜕膜组织中的干扰素(IFN-γ)是否上调母胎界面中吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)的表达。方法:收集早孕6～9周的妇女行人工流产获取绒毛组织与蜕膜组织,用Western blot方法检测绒毛、蜕膜组织中IFN-γ与IDO蛋白的表达情况;在绒毛和脱膜组织中加入不同浓度的IFN-γ(1、10和100 ng/ml)分别培养48 h和72 h后,观察IDO蛋白在两种组织中的变化。结果:人早孕绒毛和蜕膜组织均有IFN-γ与IDO蛋白的表达且成正相关性(r=0.987 1,0.979 1,P均0.01);不同浓度的IFN-γ(1、10和100 ng/ml)分别培养48、72 h后,IDO蛋白表达显著升高(P均0.05),且随着IFN-γ浓度的增高而升高。结论:在正常生理妊娠状态下,母胎界面中IFN-γ与IDO蛋白质表达成正相关,IFN-γ可上调IDO的表达。     

正常妊娠反复自然流产绒毛及蜕膜组织中细胞因子信号转导负调控因子的表达：改变Th1/Th2平衡调节可影响妊娠结局

背景：细胞因子信号转导负调控因子(suppressors of cytokine signaling, SOCS)参与多种细胞因子信号通路的调节,SOCS1-3对妊娠的调节作用较为突出。 目的：通过检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛及蜕膜组织中SOCS3蛋白表达,了解反复自然流产患者SOCS3蛋白的表达。 方法：Westen blotting 方法检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛组织及蜕膜组织SOCS3的表达。 结果与结论：与正常妊娠组相比,反复自然流产组SOCS3在绒毛组织中表达减少(P < 0.05),在蜕膜组织中表达减少(P < 0.01)。推测SOCS3蛋白可能影响妊娠结局,反复自然流产组SOCS3表达降低,可能导致Th2反应降低,从而导致流产发生。      

吲哚胺2,3-双加氧酶与细胞因子信号传导抑制蛋白-3在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及相关性分析北大核心CSCD

目的:探究吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)与细胞因子信号传导抑制蛋白-3(SOCS3)在妊娠期高血压疾病(HDP)患者胎盘组织中的表达及其与疾病进展的相关性。方法:通过Western blot法检测HDP患者胎盘组织中IDO和SOCS3的表达,分析胎盘组织中两者的表达量及相关性。结果:HDP患者及正常妊娠者胎盘组织中均有IDO与SOCS3表达,IDO、SOCS3表达与HDP进展呈负相关。三组胎盘组织中IDO与SOCS3的表达均呈正相关,子痫前期组IDO与SOCS3相关性明显高于HDP组、正常妊娠组,HDP组IDO与SOCS3的相关性明显高于正常妊娠组。结论:IDO及SOCS3在妊娠晚期免疫耐受中起重要作用,且可能参与了HDP的发病过程,IDO与SOCS3表达及其相关程度可预示HDP的进展。     

反复自然流产患者母胎界面SOCS3蛋白、TNF-α及IL-10的表达

目的:研究反复自然流产患者蜕膜组织中细胞因子信号转导抑制因子SOCS3,细胞因子TNF-α及IL-10的表达,并与正常妊娠作对照。方法:Western blot检测SOCS3的表达,免疫组织化学法检测细胞因子TNF-α及IL-10的表达。结果:反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3的表达明显降低(P<0.01),差异有统计学意义,IL-10表达降低(P<0.01),TNF-α表达增高(P<0.05),差异有统计学意义。结论:与正常妊娠相比,反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3蛋白及IL-10表达降低,TNF-α表达增高,差异有统计学意义,说明反复自然流产患者母胎界面Th1/Th2失衡,SOCS3蛋白可能通过与细胞因子的相互调控作用影响Th1/Th2平衡导致流产发生。     

早期自然流产患者TNF-α异常表达

目的探讨自然流产患者母胎界面肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的异常表达.方法采用半定量免疫组化技术,检测30例早期自然流产患者(自然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)绒毛和蜕膜组织内TNF-α表达强度.结果自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组(P＜0.01).结论早期自然流产患者细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

补肾益气方通过上调滋养细胞IDO 的表达促进母胎界面NK 细胞的表型转化

目的:研究补肾益气方诱导母胎界面耐受状态的机制及吲哚胺2,3鄄双加氧酶(IDO)对蜕膜NK 细胞表型转 化的影响。方法:用免疫组织化学方法测定正常绒毛组织和复发性流产患者绒毛组织内IDO 的表达。体外培养人滋养细胞 HTR-8/ SVneo,用流式细胞术检测含药血清对HTR鄄8/ SVneo IDO 表达的影响。用含对照大鼠血清、含药大鼠血清及含药血清 联合IDO 阻断剂1鄄甲基色氨酸(1-MT)的培养液分别处理HTR鄄8/ SVneo 后与人外周NK 细胞共培养,测定其对NK 细胞的调 节作用。结果:正常绒毛组织中IDO 的表达较流产绒毛组织明显增加。含药血清可增强HTR鄄8/ SVneo IDO 的表达。外周NK 细胞与含药血清处理过的HTR鄄8/ SVneo 共培养后,NK 细胞表面CD16 表达减低,CD56 表达增加,且CD16 的改变可被1-MT 抑制。结论:补肾益气方可以通过上调滋养细胞IDO 的表达诱导外周NK 细胞向耐受型转变。     

左旋甲基色氨酸在小鼠母胎界面诱发免疫耐受失衡

目的探讨是左旋-1-甲基色氨酸(1-L-MT)还是右旋-1-甲基色氨酸(1-D-MT)在小鼠母胎界面诱发母胎免疫耐受失衡。方法雌性BALB/c小鼠与雄性C57BL/6J小鼠交配后,自妊娠第6.5天起分别给予1-L-MT、1-D-MT、有机溶剂,共10 d,于妊娠第16.5天处死孕鼠,应用高效液相色谱法检测胎盘组织中哚胺2,3-二氧化酶(IDO)活性,流式细胞技术检测蜕膜组织中IFN-γ/IL-4比率,并对比妊娠结局。结果 1-L-MT给药组胎盘组织中IDO活性明显低于1-D-MT组及对照组,而1-D-MT组与对照组间无统计学差异;蜕膜组织中IFN-γ/IL-4比率高于1-D-MT组及对照组,而1-D-MT组与对照组间无统计学差异;胎鼠数量及体质量明显低于1-D-MT组及对照组,而1-D-MT组与对照组间无统计学差异。结论 1-L-MT而非1-D-MT通过抑制IDO活性在小鼠母胎界面诱发母胎免疫耐受失衡。     

CXCL12 在母胎界面的表达及其促进BeWo滋养细胞系的体外迁移作用

目的研究CXCL12在早孕期母胎界面的表达情况及其对BeWo细胞的体外迁移作用.方法免疫组织化学法检测早孕期绒毛及蜕膜组织中CXCL12的表达情况;用Transwell细胞侵入系统检测CXCL12对BeWo细胞迁移的影响.结果早孕期绒毛及蜕膜组织均有CXCL12的表达,分布于绒毛柱、滋养细胞及间质血管内;CXCL12对BeWo细胞具有趋化作用,浓度达10ng/ml时趋化效应最强.结论 CXCL12可促进BeWo细胞的迁移,因此早孕期母胎界面产生的CXCL12可能参与滋养细胞的迁移,对于维系正常妊娠发挥了一定作用.     

非经典HLA-Ⅰ类分子对母胎免疫耐受的调节

<正>携带父系抗原的胚胎作为植入母体子宫腔内的半同种异体移植物,却不被母体排斥,有赖于母胎间复杂的免疫耐受。一旦母胎免疫耐受不足或缺失就可能导致反复妊娠丢失等病理性妊娠的发生。在正常妊娠过程中,胎儿绒毛外滋养细胞可特异性高表达非经典HLA-I类分子HLA-E、HLA-F、HLA-G,对母胎界面免疫耐受的维持及调节发挥着关键作用。1 HLA-G对母胎免疫耐受的调节整个妊娠过程中的胚胎、母胎界面绒毛外滋养     

补肾中药对蜕膜巨噬细胞吲哚胺2,3-二氧化酶的影响

目的：探讨补肾中药对人早孕蜕膜巨噬细胞吲哚胺2，3-二氧化酶(Indoleanline 2，3-dioxygenase，IDO)的影响。方法：半定量RT-PCR测蜕膜IDO mRNA表达；Western blot检测蜕膜巨噬细胞IDO蛋白质表达；ELISA测蜕膜巨噬细胞和淋巴细胞共培养上清液中IL-10、IFN-γ含量，高效液相色谱法测上清色氨酸、犬尿氨酸含量，以二者比值表示IDO活性。结果：正常组蜕膜IDOmRNA表达高于难免流产组；IDO抑制剂使Th细胞因子平衡偏离TL2型；中药血清可提高IDO蛋白质表达及活性，恢复Th细胞因子平衡。结论：蜕膜巨噬细胞IDO正常表达和活性是维持妊娠所必需，补肾中药可提高IDO活性至正常水平。     

IL-6上调绒毛及蜕膜组织吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达

目的 探讨早孕绒毛和蜕膜组织中的白细胞介素6(IL-6)对吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达的调节作用.方法 收集早孕6～9周行人工流产妇女的绒毛及蜕膜组织,采用Western blot法检测绒毛、蜕膜组织IL-6与IDO蛋白的表达情况;在绒毛、蜕膜组织中,加入(10、50、100) ng/mL IL-6分别培养48...     

Toll样受体4/髓样分化蛋白88在早期自然流产母-胎界面的表达

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)与早期自然流产的相关性。方法:选择30例正常妊娠妇女作为对照组,采用免疫组织化学显色对30例早期自然流产患者(流产组)母-胎界面的蜕膜和绒毛组织中TLR4、MyD88蛋白表达进行定位观察,采用RT-PCR技术对其TLR4和MyD88mRNA表达进行半定量分析。结果:TLR4和MyD88蛋白在流产组和对照组的绒毛及蜕膜组织中均有表达,定位表达于绒毛滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质内,阳性反应强弱不等。RT-PCR半定量分析结果显示,在绒毛组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组;在蜕膜组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组。流产组绒毛和蜕膜组织中TLR4与MyD88的表达均呈正相关。结论:TLR4和MyD88可能参与早期自然流产的病理过程,且TLR4可能通过MyD88信号途径参与早期自然流产的发生。     

胚胎停育者绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3的表达及意义

目的 了解MMP-9、TIMP-3在正常早孕和胚胎停育者绒毛和蜕膜组织中的定位及表达水平,探讨其水平及平衡在维持正常妊娠中的作用。方法 选取60例正常早孕自愿终止妊娠的妇女作为照组,60例为胚胎停育组,均给与负压吸宫术;均留取绒毛和蜕膜组织,应用免疫组化法测定绒毛和蜕膜组织中MMP-9、TIMP-3表达情况。结果 胚胎停育患者绒毛和蜕膜组织中MMP-9表达水平高于对照组(P0.05),两组绒毛和蜕膜TIMP-3的表达差异无统计学意义(P0.05),胚胎停育组绒毛和蜕膜组织中MMP-9/TIMP-3的比值高于对照组(P0.05)。结论 金属基质酶MMP-9在胚胎停育发生过程中起关键的作用,MMP-9/TIMP-3的平衡失调可能是导致胚胎停育的主要原因之一。     

环孢素A对人母-胎界面IL-10和IFN-γ细胞因子格局的调节作用

本研究目的为了探讨环孢霉素A(CsA)对人早孕期母-胎界面主要组成细胞产生的IL-10与IFN-γ比率的调节作用,为治疗复发性自然流产等妊娠相关性疾病提供新线索.收集6～10周行人工流产术的正常妊娠妇女的绒毛和蜕膜组织;体外分离、培养获得蜕膜免疫细胞、蜕膜基质细胞与滋养细胞,建立三种细胞之间的两两共培养和三者共培养模型...     

吲哚胺2,3-双加氧酶在母胎免疫耐受中的作用研究进展

<正>作为半同种移植物的胎儿,在母体内存活直至分娩得益于母胎之间的免疫耐受。母-胎界面是胚胎和母体直接接触的部位,细胞、细胞因子及细胞外基质之间构成相互作用的复杂网路,形成了母-胎界面上特有的免疫耐受状态,以维持正常妊娠。吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是分解色氨酸沿犬尿氨酸通路代谢的限速酶,通过耗竭色氨酸及产生犬尿氨酸等生物活性物质,调节T细胞、NK细胞等介导的免疫反应,发挥免疫调节作用。母-胎界面的IDO对     

复发性流产患者蜕膜自然杀伤细胞亚群Fas表达的研究

近年来研究发现，Fas-FasL在母胎免疫耐受中起重要作用，即表达FasL的滋养细胞能够杀伤入侵到胎盘绒毛的表达Fas的淋巴细胞，从而使滋养细胞免受母体免疫细胞的破坏。以往大多数研究重点放在母胎界面T细胞的凋亡上，而对妊娠早期蜕膜组织的主要淋巴细胞、NK细胞的凋亡报道较少，我们通过用流式细胞术检测复发性流产（RSA）患者外周血和蜕膜组织淋巴细胞、     

孕酮对自然流产小鼠白细胞介素6表达的影响

目的:探讨孕酮对自然流产小鼠母胎界面白细胞介素6(IL-6)的调节作用.方法:建立经典的自然流产动物模型(CBA/J×DBA/2),用免疫组织化学显色和RT-PCR检测自然流产小鼠蜕膜及绒毛组织中IL-6蛋白和mRNA的表达情况.结果:孕酮组血清孕酮水平明显高于模型组,IL-6水平高于模型组.孕酮组血清孕酮、IL-6水平与正常组比较均无差异.免疫组织化学显色和RT-PCR结果显示,在绒毛组织中,孕酮组IL-6蛋白相对含量显著高于模型组,IL-6 mRNA相对含量高于模型组,两者与正常组比较均无差异;在蜕膜组织中,孕酮组IL-6蛋白的相对含量低于模型组,IL-6 mRNA相对含量高于模型组,与正常组比较均无差异.结论:孕酮通过上调IL-6的表达来减少自然流产的发生和发展,而且孕酮调节Th1/Th2细胞因子平衡的作用发生在母胎界面.     

巨噬细胞亚群在母胎免疫耐受中的作用

正母胎界面主要由胎盘、子宫内膜(或蜕膜)和肌层3部分组成,其中胎盘起源于胚胎,子宫蜕膜和肌层属于母体。子宫蜕膜组织免疫细胞与同种半异体胚胎来源的抗原和滋养层细胞直接接触,却不对其产生免疫排斥,这种特殊的免疫耐受是胚胎正常发育的前提~([1])。研究表明,正常情况下,巨噬细胞普遍存在于母胎界面,在妊娠的各个阶段,巨噬细胞根