lncRNA DLEU2/miR-455-3p/OTUD7B轴通过PI3K/AKT信号通路促进宫颈癌恶性发展

目的:探讨长链非编码RNA DLEU2(lncRNA DLEU2,DLEU2)对宫颈癌恶性发展的影响。方法:利用TCGA数据库和qRT-PCR分析DLEU2在宫颈癌组织和细胞系中的表达。采用CCK-8、Western blotting、免疫荧光、细胞划痕、Transwell和TUNEL实验检测干扰DLEU2(sh-DLEU2)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析DLEU2和miR-455-3p的靶基因,评估miR-455-3p inhibitor/mimic对宫颈癌细胞生长和PI3K/AKT信号通路的影响。裸鼠荷瘤实验检测干扰DLEU2后对瘤体体内生长的影响。结果:宫颈癌组织和细胞系中DLEU2表达显著上调（P＜0.01）。sh-DLEU2可抑制Hela和SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭（P＜0.01）,促进细胞凋亡（P＜0.001）。DLEU2与miR-455-3p相结合,OTUD7B为miR-455-3p的靶基因。miR-455-3p inhibitor促进细胞恶性发展并激活PI3K/AKT信号通路,而sh-DLEU2可逆转其作用（P＜0.01）;miR-455-3p mimic也可部分逆转Oe-OTUD7B对细胞的作用（P＜0.01）。此外,sh-DLEU2抑制了裸鼠荷瘤组织的生长（P＜0.01）。结论:DLEU2通过miR-455-3p/OTUD7B轴激活PI3K/AKT信号通路促进宫颈癌的恶性发展。     

丹皮酚通过下调miR-21并抑制PI3K/AKT通路抑制Hela细胞侵袭、转移及增殖

目的:探讨丹皮酚对Hela细胞增殖、侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:使用不同浓度（50、100、200 和400 mg/L）丹皮酚处理Hela细胞株,分为正常对照组（NC组）、不同浓度丹皮酚组、miR-NC组、miR-21组、丹皮酚+miR-NC和丹皮酚+miR-21组。PI3K的激动剂740Y-P (25 μg/mL)加入丹皮酚组、 NC组,分别定义为丹皮酚+740Y-P组、740Y-P组。MTT检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力;实时荧光定量PCR检测细胞miR-21表达水平;Western blot检测细胞PI3K/AKT信号通路相关蛋白、基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2,MMP2）、MMP9水平。结果:丹皮酚可抑制Hela细胞增殖能力（P＜0.05）,抑制作用与浓度呈正相关。选择200 mg/L的丹皮酚进行后续研究。与NC组比较,丹皮酚组侵袭及迁移细胞数量、MMP2蛋白、MMP9蛋白、miR-21表达水平明显降低（P＜0.01）。与NC组比较,丹皮酚组细胞凋亡率增加,G1期延长,S期、G2期缩短（P＜0.01）。与NC组、miR-NC组相比,48、72 h 时miR-21组细胞活力明显升高（P＜0.05）,克隆、侵袭及迁移细胞数量明显升高(P＜0.05)。与丹皮酚组、丹皮酚+miR-NC组比较,丹皮酚+miR-21组克隆、侵袭及迁移细胞数升高（P＜0.05）。与NC组比较,丹皮酚组细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平明显下降（P＜0.01）;与丹皮酚+miR-NC组比较,丹皮酚+miR-21组细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）。与丹皮酚组比较,丹皮酚+740Y-P组克隆、侵袭及迁移细胞数升高（P＜0.01）,与740Y-P组比较,丹皮酚+740Y-P组克隆、侵袭及迁移细胞数降低（P＜0.01）。结论:丹皮酚可下调miR-21,抑制PI3K/AKT通路,进而抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭及迁移。     

沉默SDC1通过ERK信号通路促进胆囊癌细胞的侵袭和迁移

目的:观察沉默黏结蛋白聚糖1（syndecan-1,SDC1）对胆囊癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:采用RNA干扰技术敲低胆囊癌细胞系GBC-SD中SDC1的表达,Western blot和qRT-PCR验证转染效果;Transwell侵袭实验、划痕愈合实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot分析ERK1/2、p-ERK1/2、Snail、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。结果:成功构建SDC1低表达的胆囊癌细胞系;转染后各组细胞SDC1 蛋白和mRNA表达水平显著低于shNC组（P＜0.05）;与BC组和NC组相比,shSDC1组细胞侵袭和迁移能力明显提高（P＜0.01）;与BC组和NC组相比,shSDC1组细胞p-ERK1/2、Snail、N-cadherin蛋白表达水平显著上调,而E-cadherin蛋白表达水平显著降低。结论:沉默SDC1可能通过ERK信号通路促进胆囊癌细胞的侵袭和迁移。     

MUC16对胆囊癌细胞生物学行为的调控作用及机制分析

摘 要：［目的］ 探讨黏蛋白16（MUC16）对人胆囊癌细胞NOZ增殖、侵袭、转移的影响以及可能的分子机制。［方法］ 通过慢病毒转染体系,构建过表达MUC16的人胆囊癌细胞株NOZ,以及空病毒质粒转染细胞。MTT实验检测过表达MUC16对细胞体外增殖能力的影响;划痕实验和Transwell迁移小室实验检测过表达MUC16对细胞体外迁移和侵袭能力的影响;黏附实验检测过表达MUC16对细胞黏附能力的影响;Western blot检测MUC16调控NOZ细胞生物学行为可能的通路机制。［结果］ MUC16过表达细胞系生长速度明显高于对照组（P＜0.05）;并且MUC16转染NOZ细胞系体外迁移能力、划痕愈合能力以及黏附能力均较空质粒对照组细胞增强（P＜0.05）;MUC16可明显提高MMP2、MMP7、p-Akt蛋白的表达以及PI3K激酶的活性（P＜0.05）。［结论］ MUC16可以通过激活PI3K/Akt信号通路,增加胆囊癌细胞体外的增殖、侵袭以及转移能力。     

CSD多肽抑制卵巢癌SKOV3细胞的侵袭和迁移

目的:研究caveolin-1脚手架结构域（caveolin-1 scaffolding domain,CSD）多肽对卵巢癌SKOV3细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其分子机制。方法:用细胞免疫荧光法检测CSD多肽在SKOV3细胞中的渗透情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力,用细胞免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测E-cadherin和Vimentin蛋白的表达,蛋白免疫印迹法检测SKOV3细胞中EGFR、PI3K、Akt蛋白的相对磷酸化水平。结果:细胞免疫荧光显示CSD多肽能够顺利进入SKOV3细胞内,与空白对照组相比,CSD多肽能明显抑制SKOV3细胞的迁移能力（P＜0.01）和侵袭能力（P＜0.01）,并且CSD多肽能增加细胞中E-cadherin蛋白水平（P＜0.01）和下调Vimentin蛋白的表达（P＜0.01）;SKOV3细胞用CSD多肽处理后,EGFR、PI3K、Akt蛋白的相对磷酸化水平明显低于空白对照组（P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05）。结论:CSD多肽在体外能抑制SKOV3细胞的侵袭和迁移能力,逆转上皮-间质转化表型,EGFR/PI3K/Akt信号通路活性水平的下降可能是其重要的分子机制。     

AKT抑制剂DC885对鼻咽癌细胞迁移侵袭能力的抑制及其机制

目的：探讨2-嘧啶-5-酰胺基噻唑类AKT抑制剂DC885对鼻咽癌细胞迁移侵袭能力的抑制及其机制.方法：AKT激酶活性实验检测DC885在体外对AKT激酶活性的影响;MTT法检测DC885对细胞增殖的影响;细胞划痕实验测定细胞迁移能力;Transwell小室实验测定细胞迁移力和侵袭力;蛋白质印迹检测细胞AKT及其下游底物磷酸化水平、MMP2、MMP9、EMT相关指标的表达.结果：DC885在体外抑制AKT激酶活性,并下调AKT下游底物的磷酸化水平.当使用较低浓度（1.25、2.5、5μmol/L）的DC885作用细胞24h,对鼻咽癌细胞增殖的影响并不显著.与对照组相比,实验组细胞的迁移和侵袭能力受到抑制,差异具有统计学意义（划痕实验（H=15.025,P＜0.01）、Transwell细胞迁移实验（H=14.608,P＜0.01）、Transwell细胞侵袭实验（H=14.980,P＜0.01）.不同浓度DC885抑制MMP2、MMP9的蛋白表达水平并呈浓度依赖性.DC885上调E-cadherin、α-Catenin表达水平,下调Vimentin、Fibronectin表达水平,均呈浓度依赖性.结论：DC885对鼻咽癌细胞迁移和侵袭能力有显著抑制作用,其机制可能与抑制MMP2、MMP9的表达水平、逆转EMT现象有关.     

阿苯达唑对胃癌细胞MKN-45迁移及侵袭能力的影响

目的:阿苯达唑(Albendazole ,ABZ)是一种苯并咪唑类广谱抗寄生虫药物,已在多种癌细胞中证实具有抗肿瘤作用,但其对胃癌细胞的作用鲜有报道。本文探讨其对人胃癌细胞MKN-45的迁移、侵袭能力的影响以及可能的分子机制。方法:用不同浓度ABZ处理人胃癌MKN-45细胞,采用细胞划痕实验,Transwell 小室实验检测细胞的迁移侵袭能力, Western blot法检测MKN-45细胞中E-cadherin和MMP-9蛋白的表达水平,ELISA法检测细胞VEGF分泌水平。结果:阿苯达唑作用于人胃癌细胞MKN-45后,细胞划痕愈合的程度及Transwell穿膜细胞数随浓度增加有不同程度的改变,0.25、0.5μmol/L ABZ可显著抑制细胞迁移率（F=39.311,P＜0.01）,减少迁移细胞数（F=11.331,P＜0.01）及侵袭细胞数（F=7.671,P＜0.01）;经ABZ处理的MKN-45细胞E-cadherin蛋白表达水平上调而MMP-9蛋白表达水平明显下调,VEGF分泌水平明显下降。结论:阿苯达唑可能通过上调E-cadherin及下调MMP-9表达水平来抑制胃癌细胞的迁移及侵袭能力,并能抑制胃癌细胞VEGF的分泌。     

三氧化二砷诱导尤文肉瘤细胞凋亡及对EWS-FLi1融合蛋白的影响

目的:探讨三氧化二砷(Arsenic trioxide,As2O3)诱导尤文肉瘤细胞凋亡及对融合蛋白EWS-FLi1表达的影响.方法:应用噻唑蓝(MTT)法、形态学观察、原位末端标记法(TUNEL)、流式细胞术(FCM)观察As2O3对体外生长的尤文肉瘤RD-ES细胞系生物行为的影响;应用半定量RT-PCR测定应用As2O3前后c-myc基因mRNA水平的变化;应用免疫细胞化学及固定化蛋白印迹法(Western blot)观察用药前后EWS-FLi1融合蛋白表达水平的变化.结果:As2O3对体外生长的RD-ES细胞系具有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡.c-myc基因mRNA表达水平和EWS-FLi1融合蛋白表达量随As2O3作用时间延长逐渐降低.结论:常规治疗浓度的As2O3对体外生长的尤文肉瘤细胞具有明显的杀伤作用,其作用机制与改变线粒体膜通透性和抑制EWS-Fli1融合蛋白、降低c-myc基因表达有关.     

PTPRJ通过Src/PI3K/Akt信号通路促进前列腺癌细胞的黏附、迁移和侵袭

目的:探究PTPRJ基因表达对前列腺癌DU145细胞黏附、迁移和侵袭的影响以及可能的调控机制。方法:实时荧光定量PCR、Western blot检测PTPRJ在前列腺肿瘤组织和细胞系中的表达;用携带PTPRJ特异shRNA的重组慢病毒(LV-shPTPRJ)感染沉默PTPRJ表达;MTT检测细胞黏附力,Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光定量PCR、Western blot检测信号通路分子mRNA和蛋白表达。结果:与正常前列腺组织和细胞相比,PTPRJ在前列腺肿瘤组织和PC-3、DU145细胞系中表达升高（P＜0.05）;与对照组相比,沉默PTPRJ后前列腺癌DU145细胞黏附、迁移和侵袭能力显著下降（P＜0.01）、信号通路蛋白pY418Src、p-PI3K和p-Akt表达水平均显著降低（P＜0.05）;SC79激活PI3K/Akt可逆转PTPRJ下调对DU145细胞黏附和侵袭的影响;沉默PTPRJ下调裸鼠瘤体组织中pY418Src、p-PI3K和p-Akt表达（P＜0.05）。结论:PTPRJ可能通过激活Src/PI3K/Akt信号通路来促进DU145细胞的黏附、迁移和侵袭,预示PTPRJ可能成为前列腺癌治疗的潜在靶点。     

细胞周期蛋白激酶抑制剂诱导尤文肉瘤细胞凋亡作用的机制

目的探讨小分子细胞周期蛋白激酶抑制剂flavopiridol（FP）尤文肉瘤细胞株RD-ES凋亡诱导作用及其调控机制。方法FP作用RD-ES细胞后，光学显微镜观察其形态变化，MTT法测定FP对细胞增殖的抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot检测bcl-2，bax，mcl-l和caspase-8的蛋白表达变化。结果MTT实验显示FP对尤文肉瘤RD-ES细胞增殖有抑制作用，其抑制效应具有时间及浓度依赖的特点，流式细胞计数分析表明FP可诱导细胞凋亡，免疫印迹检测显示FP对bcl-2及bax的表达无影响，但细胞凋亡抑制基因mcl-1活性型caspase-8的表达被上调。结论FP可诱导尤文肉瘤细胞株凋亡，其作用不依赖于bcl-2基因的变化，mcl-1基因表达的抑制及caspase-8路径的激活可能为其机制之一。     

三氧化二砷对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对人肝癌SMMC-7721细胞黏附、侵袭、转移能力的影响以及其机制。方法：采用MTT法观察人肝癌SMMC-7721细胞经As2O3作用前后对基底膜黏附能力的影响;Transwell膜侵袭系统观察SMMC-7721细胞经As2O3作用前后游走与穿透基底膜能力的改变。免疫细胞化学方法检测人肝癌细胞经As2O3作用前后CD44V6表达的改变。结果：As2O3能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞与m arigel的黏附、抑制细胞游走与穿透基底膜的作用（P〈0.05）,能抑制人肝癌细胞CD44v6的表达（P〈0.05）。结论：As2O3具有抑制人肝癌细胞的侵袭、转移能力,其抑制作用可能与CD44v6的表达下调有关。     

HMGA1基因小分子RNAi对卵巢癌转移抑制的实验研究

目的：探讨高迁移率蛋白家族A1（high mobility group A1,HMGA1）基因小分子干扰RNA对卵巢癌转移抑制的机理。方法：RT—PCR一步法检测3种不同的卵巢癌细胞株中HMGA1、E钙黏蛋白mRNA的表达水平;设计并合成HMGA1 siRNA,转染H08910PM细胞：半定量RT—PCR分析法观察HMGA1 siRNA转染对E钙黏蛋白mRNA表达的逆转作用,及对卵巢癌细胞株体外侵袭、运动的抑制作用。结果：RT—PCR半定量分析结果显示：OVCAR-3细胞中HMGA1 mRNA表达量相对较低（0．64±0．13）,而E-钙黏蛋白mRNA仅在OVCAR-3细胞中有表达;H08910PM细胞稳定转染HMGA1 siRNA后,转染组、对照组HMGA1 mRNA表达水平分别为0．16±0．08、0．47±0．11（P〈0．01）,E钙黏蛋白mRNA表达水平分别为0．38±0．07、0．09±0.05（P〈0．01）;体外运动实验显示,跨膜细胞数转染组明显低于对照组（P〈0．05）;重组细胞基底膜侵袭实验显示,穿透基底膜细胞数转染组明显低于对照组（P〈0．01）。结论：HMGA1基因与卵巢癌转移密切相关,HMGA1基因siRNA可上调卵巢癌细胞中E钙黏蛋白的表达,抑制卵巢癌细胞的运动和侵袭,为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点。     

92例初治尤文氏肉瘤家族肿瘤综合治疗疗效和生存分析

背景和目的：尤文氏肉瘤家族肿瘤（Ewing’ssarcomafamilyoftumor,ESFF）恶性度高、进展快,其最佳治疗方法目前仍在探讨中。本研究旨在分析ESFF的临床特点和探讨其治疗方法。方法：回顾性分析1995年1月至2008年4月中山大学肿瘤防治中心收治的92例初治ESFF。结果：骨尤文氏肉瘤（Ewing’ssarcomaofbone,ETB）23例,骨外尤文氏肉瘤（extraosseousEwing’Ssarcoma,EOE）21例,外周性原始神经外胚叶瘤（peripheralprimitiveBeuroectodermaltumor,PNET）43例,Askin瘤5例。中位随访时间31．5个月（10～137个月）。局限期综合治疗38例,单一治疗19例,两组3年生存（overallsurvival,OS）率分别为63％、20％,3年无事件生存（events．freesurvival,EFS）率分别为46％、18％,两组问生存差异具有统计学意义（P均〈0．001）。局限期综合治疗患者在全身化疗的基础上加用手术加或不加放疗组远期生存均优于化疗＋放疗组（x2=7．591、9．212,P=0．006、0．002）。CAV／IE交替方案对局限期接受综合治疗患者延长了无事件生存期,但其总生存时间差异无统计学意义（X2=6．950、3．530,P=0．008、0．06）。多因素生存分析显示治疗模式以及疗效是独立的预后因素。结论：综合治疗能明显改善局限期ESFT患者疗效和生存．手术加化疗加或不加放疗的治疗模式在疗效和生存方面优于化疗加放疗治疗模式。治疗模式和近期疗效是独立的预后因素。     

小干扰RNA沉默基质金属蛋白酶-2基因对卵巢癌细胞恶性行为的影响

 目的　探讨靶向基质全属蛋白酶-2（MMP-2）基因的RNA干扰（RNAi）技术对卵巢癌OVCAR-3细胞MMP-2的沉默作用,以及沉默MMP-2基因对OVCAR-3细胞生长、黏附、侵袭和迁移能力的影响。方法　合成特异性靶向MMP-2基因的小干扰RNA（siRNA）并转染卵巢癌OVCAR-3细胞,以非特异性序列转染细胞作为阴性对照组,以培养液代替siRNA转染细胞作为空白对照组,采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测转染后24 、48 和72 h MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平,通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法绘制细胞生长曲线,利用Transwell、划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果　与阴性对照组相比,OVCAR-3细胞在转染siRNA-MMP-2后24 、48 和72 h MMP-2 mRNA表达量分别下降了73.8 %、78.8 %和78.4 %（均P＜0.05）,蛋白表达量分别下降了72.6 %、81.2 %和76.4 %（均P＜0.05）,以48 h作用最强;细胞生长曲线显示细胞生长无明显变化（P＞0.05）;60 min和90 min时的黏附抑制率分别为55.0 %和44.8 %（均P＜0.05）;细胞的侵袭和迁移能力分别下降29.7 %和35.8 %（均P＜0.05）。结论　siRNA介导的MMP-2基因沉默能明显抑制OVCAR-3细胞的黏附、侵袭和迁移能力,而对其生长无明显影响,MMP-2基因有可能成为卵巢癌基因治疗的重要靶点。     

肿瘤型丙酮酸激酶在结直肠癌血浆中的测定及其临床意义

目的：探讨肿瘤型丙酮酸激酶（tumorM2pyruvatekinase,TUM2-PK）在结直肠癌血浆中的浓度变化,及其作为肿瘤指标的临床应用价值。方法：使用Elisa方法测定16例健康对照组人群血浆TuM2-PK浓度,以及40例结直肠癌患者治疗前血浆TUM2-PK浓度（其中22例追踪测定术后血样浓度,7例追踪肿瘤复发转移后进行XELOX方案化疗1次后血样浓度）。同时期测定血清癌胚抗原（CEA）浓度。结果：结直肠癌患者的血浆TUM2-PK值明显高于正常人（P〈0．01）。血浆TUM2-PK值与Dukes分期较晚（P〈0．01）以及复发远处转移（P〈0．01）明显相关。在接受手术的患者中血浆TUM2-PK在原发肿瘤的病理分级不良（P=0．047）、淋巴转移阳性（P=0．030）、有远处转移（P：0．022）、DukesD期（P=0．048）情况下明显升高。在特异性相同的情况下,血浆TUM2-PK敏感性比血清CEA高（80％VS52．5％）,联合检测的敏感性明显上升。追踪术后及化疗后患者血浆TUM2-PK浓度变化,发现其浓度显著下降（P〈0．01）。结论：血浆TUM2-PK水平在罹患结直肠癌,尤其是发生浸润转移的患者中明显升高,并且在术后及化疗后下降明显,有望成为筛选和提示进展的诊断指标,并在检测疾病动态变化方面有良好的应用价值。     

RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响

[目的]研究RIN1过表达对人胃腺癌MKN28细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。[方法]①采用Western blot法和免疫荧光法检测RIN1在MKN28细胞中表达;②采用Burd-U标记检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞增殖能力变化;③采用Transwell法、细胞划痕法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞侵袭和迁移能力变化;④采用AV/PI染色法、Hoechst染色法检测MKN28细胞高表达RIN1后细胞凋亡情况。[结果]①RIN1在MKN28细胞中呈高表达,表达量是空载对照组的3.22倍,且主要分布在细胞质中;②Burd-U染色结果显示,RIN1高表达MKN28细胞的阳性率显著性升高,与空载对照组相比为75.6%±5.4%vs 25.6%±1.1%（P〈0.01）;③RIN1高表达MKN28细胞的侵袭和迁移能力明显增强,与空载对照组相比分别为122.0±7.0 vs 65.00±2.52（P〈0.01）和54.22%±3.45%vs 38.6%±2.45%（P〈0.01）;④RIN1高表达MKN28细胞株细胞凋亡数显著性减少,与空载对照组相比为21.63%±2.60%vs 8.07%±1.60%（P〈0.01）。[结论]RIN1过表达促进MKN28细胞增殖、侵袭和迁移,抑制MKN28细胞凋亡;RIN1可能是介导胃癌发生的癌基因之一。     

CXCR1/CXCR2受体拮抗剂——G31P抑制前列腺癌转移的体内外实验研究

目的研究CXCR1/CXCR2受体拮抗剂——G31P对人前列腺癌PC-3细胞的体内外转移的抑制作用。方法采用细胞划痕实验研究G31P对PC-3细胞体外转移的抑制作用。通过建立体内的绿色荧光蛋白(GFP)标志人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞的裸鼠原位移植瘤模型,观察G31P对裸鼠前列腺癌原位移植瘤体内转移的影响。结果细胞划痕实验结果显示,G31P 100μg/L处理组作用细胞72小时的迁移率为(50.17±22.43)%(P<0.05,与对照组比较)。与对照组(100μL N.S)比较,G31P处理组(0.5 mg/kg)淋巴结(腰淋巴结、肠系膜淋巴结、远处淋巴结)转移略有减少,但差异无统计学意义;胰腺和肝部转移则明显减少(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与对照组比较,G31P处理组MMP-9(P<0.05)的表达明显减少。结论在体内外实验中G31P均能抑制人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞系的转移。     

VEGF-C、COX-2在细支气管肺泡癌中的表达及其意义

目的探讨细支气管肺泡癌（BAC）中VEGF．C、COX-2蛋白表达及意义。方法BAC60例为实验组,肺腺癌伴BAC20例和肺腺癌22例为对照组,采用免疫组化法分别检测VEGF—C、COX-2蛋白在3种组织中的表达并分析其临床意义。结果VEGF．C在BAC、肺腺癌伴BAC和肺腺癌中阳性率分别为66．7％、90．0％和95．5％,各组间表达差异有统计学意义（P〈0．05）;VEGF—C在BAC非黏液型表达阳性率显著高于黏液型（P〈0．05）,伴淋巴结转移组阳性率明显高于无转移组（P〈0．05）,VEGF—C表达与性别、年龄、肿块部位、大小及TNM分期均无关联（P〉0．05）。COX-2在BAC、肺腺癌伴BAC和肺腺癌中阳性率分别为63．3％、75．0％和77．3％,各组间表达差异无统计学意义（P〉0．05）;COX-2在BAC伴淋巴结转移组表达阳性率明显高于无转移组（P〈0．05）,肿块直径≥3cm组阳性率明显高于肿块直径〈3cm组（P〈0．05）,COX-2表达与性别、年龄、肿块部位、病理类型及TNM分期均无关（P〉0．05）。VEGF-C与COX-2表达呈正相关（r=0．269,P〈0．05）。结论VEGF—C联合COX-2检测可用于BAC侵袭、转移特性的评估及预测。     

VEGF-C反义寡核苷酸对卵巢癌细胞株SKOV3侵袭转移能力的影响

[目的]探讨VEGF—C反义寡核苷酸（VEGF—CASODN）对人卵巢癌细胞SKOV3侵袭转移能力的影响。[方法]以VEGF—C基因编码区为靶点合成反义寡核苷酸，脂质体介导转染。MTT法检测卵巢癌细胞与细胞外基质Matrigel的黏附能力；体外侵袭实验检测卵巢癌细胞侵袭能力；Western blot检测细胞VEGF—C、MMP-2、E—cadherin蛋白表达。[结果]黏附实验结果显示VEGF—C ASODN转染后，在30min、60min、90min、120min各时间段与空白对照组、LIP组及SODN组相比，细胞黏附率都有明显下降（P〈0．01）：侵袭实验结果显示VEGF—CASODN转染48h后浸润细胞数目（62．5±8．71与空白对照组、LIF组和SODN组（分别为127.2±13．6、125．8±14．1、119．3±11．21相比明显减少（P〈0．01）；Western blot结果显示VEGF—C ASODN转染后细胞中VEGF—C、MMP-2蛋白表达与空白对照组、LIF组和SODN组相比明显下降，而E—cadherin蛋白表达明显增高（P〈0．01）。[结论]VEGF—C ASODN能明显抑制卵巢癌细胞体外实验中的侵袭转移能力，可望为卵巢癌提供一种有效的辅助治疗方法。     

直肠癌中HER-2、VEGF与CXCR4的表达及相关性

[目的]研究HER-2、VEGF与CXCR4在直肠癌中的表达及三者之间的相关性。[方法]采用免疫组化EnVision二步法检测HER-2、VEGF与CXCR4在15例癌旁正常组织及50例直肠癌中的表达水平，分析三者表达水平与临床病理因素的关系及三者之间的相关性。[结果]在正常直肠癌旁组织及直肠癌中HER-2蛋白的阳性表达率分别为0.6％，差异无显著性（P〉0．05）；而VEGF蛋白的阳性表达率分别为13．3％、62．0％，CXCR4蛋白的阳性表达率分别为20．0％、68．0％，均有显著性差异（P〈0．01）。直肠癌组织中HER-2蛋白表达与临床病理因素间无相关性．HER-2蛋白表达与VEGF蛋白、CXCR4蛋白表达之间亦未见相关性（r=-0．024，P〉0．05；r=-0．173，P〉0．05）；而VEGF、CXCR4蛋白阳性表达与淋巴结转移及Dukes’分期均显著相关，VEGF与CXCR4蛋白表达水平之间成正相关（r=-0．346，P〈0．05）。[结论]HER-2蛋白在直肠癌中的表达与VEGF和CXCR4蛋白不存在相关性，与侵袭、转移无关。VEGF与CXCR4蛋白的表达存在相关性，均与直肠癌侵袭、转移有关。