大鼠视交叉上核内VIP,AVP及SOM样神经元的相互关系——免疫组化…

视交叉上核具有生物钟功能已为很多实验研究所证实，但其功能机制尚在探索之中，本实验采用双重免疫组织化学反应技术对大鼠视交叉上核内ＶＩＰ，ＡＶＰ及ＳＯＭ样三大神经元群之间的相互联系进行了观察。结果表明：（１）ＶＩＰ样扣结广泛分布于ＡＶＰ样神经元周围，数量最多，密度最大，而ＳＯＭ样扣结贴附于ＶＩＰ及ＡＶＰ样神经元的数量次之；（２）ＡＶＰ样扣结与ＶＩＰ样神经元之间，ＶＩＰ样扣结与ＳＯＭ样神经元之间也形成联     

大鼠视交叉上核内VIP、AVP及SOM样神经元的分布及相互联系—免疫组化多重标记法研究

大鼠视交叉上核内ＶＩＰ、ＡＶＰ及ＳＯＭ样神经元的分布及相互联系──免疫组化多重标记法研究王蕾，欧可群，操高原，陈文玉华西医科大学成都６１００４１视交叉上核（ＳＣＮ）具有生物钟功能已为众多实验所证实，但对其节律发生并保持与外界同步的机制却尚在探索之中。...     

双侧眼球摘除对大鼠视交叉上核的影响──免疫组化及光电镜体视学研究

采用双侧眼球摘除大鼠模型，术后存活不同时间，用免疫组化法探讨视交叉上核内ＶＩＰ和ＡＶＰ免疫反应强度和面积的变化；对变化明显的２１ｄ组进一步用光镜和电镜体现学方法进行形态学研究。＜１＞免疫组化研究：ＶＩＤ免疫染色，２１ｄ组免疫反应强度和面积均比对照组降低（Ｐ＜０．０５），２ｄ和７ｄ组免疫反应强度和面积与对照组相比无显著差异。ＡＶＰ免疫染色，三个时间实验组免疫反应强度和面积均与对照组无明显差异。＜２＞体视学研究：实验组ＶＩＰ样神经元胞体体积、胞核体积、核仁平均直径均明显缩小，粗面内质网和高尔基复合体表面积密度明显下降。以上所见提示摘除眼球２ｌｄ时，视交叉上核内直接接受光信息的ＶＩＰ样神经元的免疫活性下降是因阻断光传入所造成的。光传入的阻断和视神经纤维的溃变使视交叉上核中ＶＩＰ样神经元的结构呈现功能性改变，推测这些变化将引起该神经元肽类物质含量的下降。     

摘除双侧眼球对大鼠视交叉上核节律性的影响

成年Ｗｉｓｔａｒ雌鼠５７只，随机分为实验组３０只，行双眼摘除术。对照组２７只。术后４周将各组动物体重相近的每３只列为一个配伍组，分别在０９：００～１０：００、１７：００～１８：００、２３：００～２４：００三个时间处死。将含有视交叉上核的脑组织经固定、恒冷箱切片后，用免疫组化ＡＢＣ法染色显示视交叉上核内含ＶＩＰ或ＡＶＰ的神经元，微机图像分析仪上测量光镜下这两种神经元的相对切面面积及平均免疫反应强度。结果：（１）对照组不同时间处死的动物ＶＩＰ能神经元切面面积以２３：００～２４：００最大，０９：００～１０：００次之，１７：００～１８：００最小，呈昼夜节律变化，ＡＶＰ能神经元也以２３：００～２４：００最大，但在０９：００～１０：００和１７：００～１８：００间差异无显著性；（２）摘除双眼后各时间组间ＶＩＰ能神经元和ＡＶＰ能神经元切面面积均不再显示显著性差异。提示实验组动物视交叉上核的这两种神经元功能活动的昼夜节律已发生改变；（３）实验组和对照组动物的ＶＩＰ能神经元和ＡＶＰ能神经元平均免疫反应强度在所测的三个时间中，均未见明显差异。     

中国树Qu下丘脑视上核和室旁核内加压素能神经元的形态和神 …

用抗加压素（ＶＰ）血清和免疫组化技术，观察了中国树Ｑｕ下丘脑视上核（ＳＯＮ）和室旁核（ＰＶＮ）内ＶＰ能神经元的形态和神经纤维的分布，ＶＰ能胞体的形态，在ＳＯＮ主部多呈梭形，少数呈多角形，在ＳＯＮ交叉后部，多呈多角形，少数呈梭形，在ＰＶＮ，以多角形为主，少数为梭形，ＶＰ能纤维的分布；在ＰＶＮ与ＳＯＮ主部之间，特别是与视交叉上区和视束背内侧区之间，纤维细而直，多平行分布。在ＰＶＮ后半外侧，可见部分纤维     

大鼠视交叉上核与视上核的纤维联系—病毒跨神经元追踪,免疫组化双重标记法研究

大鼠视交叉上核与视上核的纤维联系—病毒跨神经元追踪，免疫组化双重标记法研究王蕾欧可群陈文玉操高原张军马玉琼（华西医科大学组织学研究室）有文献报道视交叉上核（ＳＣＮ）的传出纤维到达室旁核（ＰＶＮ），但是否有传出纤维投射至视上核（ＳＯＮ），目前尚未见报道...     

摘除松果腺对大鼠视交叉上核节律性的影响

成年Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠２０只，实验组１０只，行松果腺摘除术；对照组１０只。术后３０ｄ将实验组、对照组动物各半数在０９：００～１０：００和１６：００～１７：００分别处死。用免疫组化ＡＢＣ法显示视交叉上核内含ＶＩＰ的神经元；微机图像分析仪上测量其光镜下的切面面积及平均免疫反应强度。结果：（１）对照组不同时间处死的动物ＶＩＰ样神经元切面面积０９：００～１０：００大于１６：００～１７：００，呈节律性变化。（２）摘除松果腺后各时间组间ＶＩＰ样神经元切面面积的差异无显著性，提示实验组动物视交叉上核的ＶＩＰ样神经元功能活动的日周节律已发生改变。（３）对照组和实验组动物的ＶＩＰ样神经元平均免疫反应强度在所测的两个时间中均未见明显差异。     

视网膜节细胞的轴突与视交叉上核内含VP神经元间联系的研究

视网膜节细胞的轴突与视交叉上核内含ＶＰ神经元间联系的研究（华西医科大学组织学研究室，成都６１００４４欧可群，操高原，陈文玉，王蕾，张军，马玉琼）视交叉上核（ｓｕｐｒａｃｈｉａｓｍａｔｉｃｎｕｃｌｅｕｓ，ＳＣＮ）是哺乳动物昼夜节律起搏器，为证实视交叉上...     

大鼠三叉神经尾侧亚核内Fos及SP受体免疫反应神经元向丘脑腹后内侧核的投射

为了探讨三叉尾侧亚核（Ｖｃ）内向丘脑腹后内侧核（ＶＰＭ）直接投射的神经元与面口部伤害性刺激信息传递和ＳＰ能传入的关系，本研究用四甲基罗达明（ＴＭＲ）逆行追踪与Ｆｏｓ和ＳＰ受体免疫组织化学染色相结合的双标方法研究了Ｖｃ向ＶＰＭ投射的神经元。结果表明：（１）Ｆｏｓ阳性神经元主要分布在Ｖｃ浅层（Ⅰ、ⅠⅠ层）；（２）ＳＰ受体（ＳＰＲ）阳性神经元也主要分布在Ｖｃ浅层；（３）ＴＭＲ注射入一侧ＶＰＭ，逆标神经元仅见于对侧Ｖｃ和双侧延髓网状结构（ＭＲＦ）；（４）ＶｃⅠ层内ＴＭＲ逆标神经元总数的２２．３％为Ｆｏｓ阳性，１１．７％为ＳＰＲ阳性；（５）Ｖｃ深层内ＴＭＲ逆标神经元总数的１３．１％为Ｆｏｓ阳性，８．５％为ＳＰＲ阳性；（６）ＭＲＦ内ＴＭＲ逆标神经元总数的４３．３％为Ｆｏｓ阳性，５．１％为ＳＰＲ阳性。上述结果提示：（１）Ｖｃ及ＭＲＦ内直接向ＶＰＭ投射的部分神经元感受面口部伤害性刺激信息；（２）ＶｃⅠ层内直接向丘脑投射的部分神经元可能接受外周ＳＰ能的初级传入。     

双侧眼球摘除对大鼠视交叉上核的影响—免疫组化及光电镜体视…

采用双侧眼球摘除大鼠模型，术后存活不同时间，用免疫组化法探讨视交叉上核内ＶＩＰ和ＡＶＰ免疫反应强度和面积的变化；对变化时明显的２１ｄ组进一步同光镜和电镜体视学方法进行形态学研究。＜１＞免疫组化研究：ＶＩＰ免疫染色，２１ｄ组免疫反应强度和面积均比对照组降低（Ｐ＜０．０５），２ｄ和７ｄ组免疫反应强度和面积与对照组相比无显著差异。ＡＶＰ免疫染色，三个时间实验组免疫反应强度和面积均与对照组无显著差异。＜２     

大鼠视交叉上核至视上核的纤维联系—免疫组化双重标记法研究

为了观察视交叉上核（SCN）的传出纤维，本实验采用兔抗VIP及AVP血清作为一抗对大鼠下丘脑SCN与视上核（SON）进行免疫组化双重染色研究，结果观察到在SCN尾段，位于腹侧份的VIP样神经纤维走向SON，而在SON的腹侧份的VIP样神经纤维走向SON，而在SON的腹侧份及背侧份可见VIP样纤维分布，并明显可见该纤维包绕AVP样神经元周围,由此本推测在SCN至SON之间可能存在直接的纤维联系，它可能是体内血浆和神经垂体的加压素（VP），催化素（OT）水平呈现24小时节律的又一原因。     

大鼠蓝斑内P物质、神经降压肽和生长抑素样神经元的上行投射

本实验采用HRP逆行追踪与免疫细胞化学相结合的方法,对大鼠蓝斑内P物质(SP)、神经降压肽(NT)、生长抑素(SOM)三种肽能投射神经元的纤维联系及其局部关系进行了探讨。结果证实:1.HRP注射至丘脑或尾壳核后,大鼠蓝斑内均可见到双标记神经元。2.存在SP样和NT样蓝斑—丘脑纤维,前者终止于丘脑腹后核和板内核,后者终止于丘脑板内核。3.蓝斑至尾壳核的投射呈SOM样免疫反应。4.蓝斑内三种肽能投射的起始和终止部位有所不同,其中SP样和NT样神经元主要位于蓝斑后部背侧区,其纤维终于丘脑;而SOM样投射神经元则见于蓝斑前部背侧区,纤维终止于尾壳核。上述肽能通路均为双侧性,而以同侧占优势。5.蓝斑内三种肽能单标记神经元中以NT样免疫反应阳性胞体最为丰富。以上结果表明;蓝斑上行性投射中除含去甲肾上腺素纤维外,还含有SP样、NT样和SOM样纤维,并存在一定的局部定位投射关系。     

大鼠下丘脑生长抑素神经元性差别的观察

本实验用PAP免疫组织化学方法对比观察了雄性与雌性大鼠下丘脑生长抑素(SRIF)神经元胞体、纤维在正常和改变性激素代谢条件下数量或染色程度的差别。结果表明,在室周核(PV)、室旁核(PVN)和视交叉上核(SCN)内,雄性大鼠的阳性细胞和纤维较雌性多。此外,在视前内侧区(MPO)雄性有大量细丝样阳性纤维网络,而雌性只有较稀疏的阳性纤维。切除睾丸后大鼠PV、PVN、SCN阳性细胞和纤维减少,MPO和正中隆起阳性纤维密度降低。而切除卵巢的大鼠在上述区域的阳性胞体和纤维密度增强,当给去性腺的雌、雄性大鼠以同性激素替代后,染色结果接近正常。     

大鼠大脑内血管的氮能神经支配

目的：观察大鼠大脑内氮能神经元及血管的氮能神经支配。阐述一氧化氮在脑内血管中的作用。方法：大鼠经灌流固定后用恒冷切片机漂浮切片。还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）染色。结果：氮能神经元依形态分为双极和多极。见纤细的树突与血管紧密相连及串珠样血管周围神经丛。结论：大脑ＮＡＤＰＨ－ｄ阳性神经元纤细的树突与脑内血管密切相关。提示一氧化氮 控脑血管张力和血液循环方面有重要作用。     

大鼠视交叉上核与室旁核的联系──病毒跨神经元顺行追踪研究

本实验采用假狂犬病毒（猪疱疹病毒）作为跨神经元追踪示踪物，对下丘脑视交叉上核与下丘脑室旁核的联系进行了研究．实验大鼠于摘除双侧颈上交感神经节后，向单侧眼球内注入假狂犬病毒，术后动物分别存活48、56、72及96h．结果显示：56h组仅在视交叉上核内有极少数的细胞被病毒感染；72h组机交叉上核内被病毒标记的细胞增多，定劳核内也出现了被病毒感染的神经元，主要集中在背内侧帽区；96h组在室旁核内被病毒感染的神经元增加，除背内侧帽区外，其它亚孩也出现了被病毒感染的神经元；各实验组的亚室旁带未见有被病毒标记的神经元．以上表明视交叉上核的传出纤维直接投射到室旁核，两核团神经无间可能存在有直接的突触联系．     

Vasoactive intestinal peptide (VIP)-like immunoreactive neurons located in the rat suprachiasmatic nucleus receive a direct retinal projection

The existence of a direct projection from retinal ganglion cells to vasoactive intestinal peptide (VIP)-like immunoreactive neuronal elements in the rat suprachiasmatic nucleus (SCN) was revealed by combining analysis of degenerating axons following enucleation and electron microscopic immunocytochemistry. Degenerating axons appeared to make synaptic contact with VIP-like immunoreactive dendrite and neuronal perikarya in the ventral part of the SCN. The possibility of neuronal input from retinal ganglion cells to axons of VIP-like immunoreactive neurons was also suspected since axo-axonic synapses were detected between degenerating axons and axons with VIP-like immunoreactivity. Thus, VIP-like immunoreactive neurons in the SCN receive several neuronal inputs, including those from the retina, and may play a significant role in circadian entrainment.     

血管活性肠肽、加压素和生长抑素免疫阳性细胞和纤维在大鼠交叉上核的分布

用免疫组化技术观察了正常和秋水仙素预处理后的血管活性肠肽、加压素和生长抑素免疫反应阳性胞体和纤维在ＳＤ大鼠交叉上核的分布。（１）血管活性肠肽：在交叉上核嘴侧部的腹外侧部有少量阳性胞体和纤维分布；在交叉上核中部，大量阳性胞体集中在腹外侧亚核，相当多的阳性纤维分布于整个核区；在交叉上核尾侧部可见少量阳性胞体和中等密度的阳性纤维。（２）加压素：在交叉上核嘴侧部和尾侧部可见中等密度的阳性胞体和纤维，以核的背内侧为多，大量阳性胞体和纤维见于交叉上核中部的背内侧亚核。（３）生长抑素：阳世胞体较少，散布于交叉上核的背内侧亚核，以核的中部为多，中等密度的阳性纤维遍及交叉上核全长。（４）双标显示血管活性肠肽、加压素和生长抑素存在于交叉上核的不同神经元之中，没有共存。     

Morphological heterogeneity of the GABAergic network in the suprachiasmatic nucleus, the brain's circadian pacemaker

GABA (gamma-amino-butyric acid) is the predominant neurotransmitter in the mammalian suprachiasmatic nucleus (SCN), with a central role in circadian time-keeping. We therefore undertook an ultrastructural analysis of the GABA-containing innervation in the SCN of mice and rats using immunoperoxidase and immunogold procedures. GABA-immunoreactive (GABA-ir) neurons were identified by use of anti-GABA and anti-GAD (glutamic acid decarboxylase) antisera. The relationship between GABA-ir elements and the most prominent peptidergic neurons in the SCN, containing vasopressin-neurophysin (VP-NP) or vasoactive intestinal polypeptide (VIP), was also studied. Within any given field in the SCN, approximately 40–70% of the neuronal profiles were GABA-ir. In GABA-ir somata, immunogold particles were prominent over mitochondria, sparse over cytoplasm, and scattered as aggregates over nucleoplasm. In axonal boutons, gold particles were concentrated over electron-lucent synaptic vesicles (diameter 40–60 nm) and mitochondria, and in some instances over dense-cored vesicles (DCVs, diameter 90–110 nm). GABA-ir boutons formed either symmetric or asymmetric synaptic contacts with somata, dendritic shafts and spines, and occasionally with other terminals (axo-axonic). Homologous or autaptic connections (GABA on GABA, or GAD on GAD) were common. Although GABA appeared to predominate in most neuronal profiles, colocalisation of GABA within neurons that were predominantly neuropeptide-containing was also evident. About 66% of the VIP-containing boutons and 32% of the vasopressinergic boutons contained GABA. The dense and complex GABAergic network that pervades the SCN is therefore comprised of multiple neuronal phenotypes containing GABA, including a wide variety of axonal boutons that impinge on heterologous and homologous postsynaptic sites.     

Atrial natriuretic polypeptide: topographical distribution in the rat brain by radioimmunoassay and immunohistochemistry

The widespread distribution of neurons containing alpha-atrial natriuretic polypeptide-like immunoreactivity in the rat brain was demonstrated using radioimmunoassay and immunohistochemistry in conjunction with specific antisera. The highest concentrations of alpha-atrial natriuretic polypeptide-like immunoreactivity were in the hypothalamus and septum, with low but still appreciable concentrations in the mesencephalon, cerebral cortex, olfactory bulb and thalamus by radioimmunoassay. Immunohistochemical studies clearly showed that the perikarya of immunoreactive neurons are most prevalent in the ventral part of the lateral septal nucleus, periventricular preoptic nucleus, bed nucleus of the stria terminalis, periventricular and dorsal parts of the paraventricular hypothalamic nucleus, ventromedial nucleus, dorsomedial nucleus, arcuate nucleus, median mamillary nucleus, supramamillary nucleus, zona incerta, medial habenular nucleus and the periaqueductal grey matter. Scattered neurons were seen in the cingulate cortex, endopiriform nucleus, lateral hypothalamic area, and pretectal and dorsal thalamic areas. In addition to the areas mentioned above, high concentrations of immunoreactive varicose fibers were seen in the glomerular layer of the olfactory bulb, external layer of the median eminence, central to paramedian parts of the interpeduncular nucleus and the paraventricular hypothalamic nucleus. The globus pallidus, medial and central amygdaloid nuclei, dorsal raphe, dorsal parabrachial nucleus, locus coeruleus, vagal dorsal motor nucleus, solitary nucleus and some circumventricular organs, including the subfornical organ and organum vasculosum laminae terminalis, contained considerable numbers of immunoreactive varicose fibers. In dehydrated rats and homozygous Brattleboro rats, the pattern of alpha-atrial natriuretic polypeptide-immunoreactive neurons and varicose fibers was qualitatively similar to that seen in normal conditioned rats. This study gives an atlas of the distribution of the alpha-atrial natriuretic polypeptide-containing neuronal system in the rat brain and provides the groundwork for studying the influence of this new peptide on various brain functions.