大蒜素联合顺铂对大鼠膀胱肿瘤生长抑制和诱导凋亡的实验研究

目的:评价大蒜素联合顺铂治疗SD大鼠膀胱肿瘤的效果,探讨其作用机制.方法:膀胱灌注N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导建立SD大鼠膀胱肿瘤模型,于第14周对5组荷瘤大鼠分别腹腔注射牛理盐水,顺铂,不同浓度大蒜素,顺铂 大蒜素.每次注射0.2ml,隔日1次.共7次,其间观察实验动物生存状态.全部注射完毕后处死大鼠,称取膀胱总重量,对肿瘤组织进行常规石蜡切片,HE染色,光镜观察,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况.结果:生理盐水组、不同浓度大蒜素组、顺铂 大蒜素组的大鼠体重均随鼠龄的增长而增加,而顺铂组大鼠在停药后随鼠龄的增长体重明显降低,与其他各组比较,差异显著.顺铂 大蒜素组大鼠膀胱的总重量显著小于其他各组.TUNEL法原位检测发现各组均出现不同程度的肿瘤细胞凋亡,大蒜素 顺铂组尤为明显.结论:大蒜素联合顺铂可共同诱导细胞凋亡发挥协同效应,抑制膀胱肿瘤的生长.并且能改善大鼠的生存状态.     

醋酸棉酚诱导膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的　研究棉酚对膀胱癌T2 4 细胞的抑制作用和诱导凋亡作用 ,探讨其作用机制。方法　将不同浓度的醋酸棉酚作用于人T2 4 膀胱癌细胞 ,利用MTT法检测其有效作用浓度、瑞氏染色、流式细胞仪 ,观察T2 4 细胞的凋亡情况。结果　MTT法测得其IC50 值为 12 6.3 μmol·L-1,浓度为 5 0～ 3 0 0 μmol·L-1的棉酚具有诱导T2 4 细胞凋亡的作用 ,随着药物作用时间的延长凋亡率增加。结论　棉酚抗癌作用机制之一是诱导人T2 4 膀胱癌细胞凋亡     

羟基喜树碱诱导人T24膀胱癌细胞凋亡的研究

目的研究羟基喜树碱对膀胱癌细胞的作用,探讨其抑制膀胱癌的机制。方法将不同浓度的羟基喜树碱作用于人Ｔ２４膀胱癌细胞,利用流式细胞仪、透射电子显微镜、荧光染色技术及ＤＮＡ分析,对所作用的Ｔ２４细胞进行动态分析以及细胞形态变化的观察。结果０．００５ｍｇ／Ｌ的羟基喜树碱,主要是通过阻止Ｔ２４细胞由Ｓ期进入Ｇ２／Ｍ期,并不诱导人Ｔ２４膀胱癌细胞的凋亡;０．０１～０．１０ｍｇ／Ｌ时,凋亡的细胞数随着其浓度增加及作用时间的延长而增加。羟基喜树碱能够诱导人Ｔ２４膀胱癌细胞的凋亡。结论羟基喜树碱作用机制之一是诱导人Ｔ２４膀胱癌细胞的凋亡。     

生长抑制因子诱导膀胱肿瘤细胞凋亡的研究

目的探讨生长抑制因子(PML)诱导膀胱肿瘤细胞凋亡的分子机制。方法应用脂质体Lipofectamine2000分别将重组可诱导表达的真核表达载体PMEP4／PML和对照PMEP4空载体转染到膀胱肿瘤细胞系UM-UC-2中,300μg／ml潮霉素B筛选稳定表达PML的抗性克隆。激光共聚焦检测PML蛋白表达。DNAladder法检测肿瘤细胞凋亡。Western印迹法检测凋亡相关蛋白表达情况。结果经5μmol／L的CdSO4诱导表达后,激光共聚焦显微镜观察发现转染PMEP4／PML组的细胞核内有散在的斑点样的黄绿色荧光亮点,而转染空载体PMEP4组细胞未见特异性的荧光斑点表达。DNA梯度法显示转染PML细胞在诱导PML表达后24h出现梯状凋亡条带。Western印迹法检测凋亡相关蛋白半胱氨蛋白水解酶3、活化PARP上调,而survivin的表达水平下调。结论PML诱导膀胱肿瘤细胞凋亡可能与上调半胱氨蛋白水解酶3、活化PARP蛋白,抑制survivin的表达有关。     

木黄酮诱导T24细胞凋亡和bcl-2基因表达的研究

目的　研究木黄酮诱导膀胱癌T2 4细胞凋亡及与bcl 2基因表达的关系。方法　采用末端标记(TUNEL)法及流式细胞术 (FCM)研究T2 4细胞凋亡 ;采用FCM和RT PCR法检测bcl 2蛋白表达及mRNA表达水平的变化。结果　TUNEL法显示凋亡的T2 4细胞呈明显的形态学改变 ,FCM显示随木黄酮作用时间延长 ,T2 4细胞凋亡率逐渐增加 ,bcl 2蛋白表达逐渐下降 ;RT PCR法则显示bcl 2mRNA水平逐渐下降。结论　木黄酮能诱导T2 4细胞凋亡、下调bcl 2蛋白表达及bcl 2mRNA水平 ,且作用呈时间依赖性。     

水飞蓟宾对人膀胱癌细胞系T24和5637的增殖抑制及凋亡诱导作用

目的：探讨水飞蓟宾(SB)对人膀胱癌细胞系T24和5637增殖及凋亡的影响,初步阐明其可能的机制。方法：培养人膀胱癌细胞系5637和T24,取处于对数生长期的5637和T24细胞分为对照组(0 μmol•L^-1 SB)及25、50、100、200和400  μmol•L^-1 SB 组,MTT法检测SB对人膀胱癌细胞系T24和5637的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察不同浓度SB作用不同时间对人膀胱癌细胞系T24和5637的侵袭抑制能力;DAPI染色法观察给药后细胞形态;流式细胞术检测并评估SB诱导肿瘤细胞凋亡的能力。结果：MTT法检测,随着SB浓度的增加和作用时间延长,不同浓度SB组T24和5637细胞存活率显著低于对照组;不同浓度SB处理后,各组细胞的迁移明显受到抑制;DAPI染色及流式细胞术检测,不同浓度SB组T24和5637细胞凋亡率显著高于对照组（P<0.05）。结论：SB通过诱导人膀胱癌细胞系T24和5637凋亡从而抑制细胞侵袭及增殖。     

氧化苦参碱体外诱导膀胱癌T24细胞凋亡

目的观察氧化苦参碱对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法不同浓度(0.625、1.25、2.5 mg/mL)氧化苦参碱作用于膀胱癌T24细胞,采用流式细胞术、光镜及电镜观察其诱导膀胱癌T24细胞的凋亡作用。用RT-PCR检测细胞凋亡相关基因survivin及caspase-3转录水平的改变。免疫印迹法检测survivin和caspase-3蛋白的表达情况。结果氧化苦参碱作用人膀胱癌细胞后,光镜及电镜下均见到典型的细胞凋亡形态,流式细胞术观察发现凋亡峰。同时观察到氧化苦参碱抑制survivin的转录和表达,对caspase-3有上调作用(P<0.05)。结论氧化苦参碱可能通过抑制survivin、上调caspase-3表达诱导膀胱癌T24细胞发生凋亡。     

胸腺肽α1诱导膀胱癌细胞株BIU87凋亡的实验研究

目的研究胸腺肽α1诱导膀胱癌细胞株BIU87凋亡的作用及其机制。方法用50~400μg/ml胸腺肽α1作用BIU87细胞24~72 h后,MTT比色法检测细胞生长活性,单细胞凝胶电泳法和流式细胞仪分别检测BIU87细胞DNA损伤和凋亡作用。结果胸腺肽α1能显著抑制膀胱癌细胞株BIU87细胞的体外生长(P<0.01),呈时间与剂量依赖性;流式细胞仪检测显示不同浓度凋亡率分别为(4.69±0.60)%、(21.15±3.10)%、(33.15±2.40)%、(40.87±1.50)%、(48.47±1.02)%;单细胞凝胶电泳检测显示不同浓度DNA损伤比率分别为5%、20%、41%、62%、85%。结论胸腺肽α1通过抑制BIU87细胞增殖、诱导细胞凋亡等机制,显著抑制膀胱癌细胞生长。     

冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞的诱导凋亡作用及机制

目的 研究冬凌草甲素(Oridonin,ORI)对膀胱癌T24细胞的作用及机制.方法 MTT法检测ORI对T24细胞的生长抑制作用;光学显微镜和Hoechst 33258染色法荧光显微镜观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测凋亡变化;分光光度法检测Caspase 3的活性变化;Western blot检测bcl-2和bax表达的变化.结果 ORI对T24细胞有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系.随着ORI作用时间延长,T24细胞凋亡增加,见凋亡小体出现.随着ORI作用时间的延长,T24细胞的Caspase 3活性逐渐增加,bcl-2的表达逐渐减弱,bax的表达逐渐增强.结论 ORI对膀胱癌T24细胞有明显的诱导凋亡作用;机制可能是活化Caspase 3和下调bcl-2/bax.     

香菇C91-3菌丝发酵液蛋白抑制小鼠宫颈癌细胞株U14生长及诱导凋亡的实验研究

目的研究香菇C91-3菌丝发酵液蛋白(LFP91-3)对小鼠腹水型宫颈癌细胞株(U14)的作用.方法应用不同剂量(50、100、150μg)的LFP91-3对U14所致小鼠腹水型宫颈癌模型进行治疗,观察荷瘤小鼠的生存期;并用MTT法(LFP91-3浓度5、10、15μg/ml)和流式细胞仪对经LFP91-3作用的U14进行观察和检测.结果LFP91-3能明显延长U14所致荷瘤小鼠的生存期.对体外培养的U14有直接杀伤作用,抑制率随LFP91-3浓度的增加和作用时间的延长而升高.流式细胞仪检测结果显示LFP91-3阻滞U14于细胞周期的分裂中期.结论LFP91-3能抑制小鼠宫颈癌细胞株的生长并诱导其凋亡.     

藏花素促膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的研究

目的研究藏花素诱导膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的作用及分子机制。方法通过MTT比色法分析藏花素对T24细胞增殖的影响;应用光镜观察细胞形态学的改变;Annexin V-FITC／PI荧光双标流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响,RT-PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达变化。结果藏花素能明显抑制T24细胞的增殖,并可导致其形态学的改变;随藏花素作用时间的延长,G0／G1期细胞比例逐渐增加,S期和G2／M期细胞比例逐渐减少,早期凋亡细胞逐渐增多,同时可以上调Bax和下调Bcl-2的基因表达水平。结论藏花素可明显抑制T24细胞的生长,诱导肿瘤细胞凋亡,可能与Bcl-2和Bax等凋亡调控基因有关。     

染料木黄酮诱导膀胱癌T24细胞凋亡的实验研究

目的　研究染料木黄酮对人T2 4膀胱癌细胞的抑制作用和诱导凋亡作用 ,并探讨其作用机制。方法　将不同浓度的染料木黄酮作用于人T2 4膀胱癌细胞 ,用MTT法检测其有效作用浓度 ,分别采用透射电子显微镜、瑞氏染色、Hoechest332 5 8荧光染色、流式细胞仪观察和检测T2 4细胞凋亡情况。结果　MTT法测得染料木黄酮对T2 4细胞的IC50 值为32 80mg·L-1,浓度为 2～ 80mg·L-1的染料木黄酮具有诱导人T2 4膀胱癌细胞凋亡的作用 ,且随药物作用时间延长凋亡率逐渐增加。结论　染料木黄酮具有抗膀胱癌作用 ,其重要作用机制之一是诱导人T2 4膀胱癌细胞凋亡     

维生素E琥珀酸酯对前列腺癌PC-3细胞株的生长抑制和诱导凋亡作用

目的:探讨维生素E琥珀酸酯(vitamin E succinate,VES)对于激素非依赖前列腺癌PC-3细胞株的生长抑制和诱导凋亡作用.方法:将VES溶解于无水乙醇,配制成VES溶液.取对数生长期的PC-3细胞,分别加入25、50、75、100、125 mg/L VES溶液,对照组加入1.25%浓度乙醇.培养24、48、72 h后,采用MTT法分析细胞的活力指数和抑制率,采用流式细胞术检测PC-3细胞的细胞凋亡率.结果:实验组的细胞活力明显低于对照组(P＜0.05),且与VES的作用浓度和作用时间呈负相关,而对照组的细胞活力与时间呈正相关.实验组的凋亡率较对照组有明显的升高,且与VES的浓度和作用时间呈正相关.并且,经VES作用48 h后,75 mg/L的VES浓度可以对PC-3细胞起到一个最佳的诱导凋亡作用,造成80%以上的PC-3细胞凋亡.结论:VES具有抑制PC-3细胞增殖及促进其凋亡的作用.提示其对于前列腺癌的化学预防和杀伤作用具有临床应用前景.     

维生素K3对人膀胱癌细胞株T24凋亡的诱导作用

目的 观察不同浓度的维生素K3(VK3)对人膀胱癌细胞株T24凋亡的诱导作用.方法 采用噻唑蓝(MTT)法观察不同浓度VK3(0,2,5,10,20 μmol/L)对T24细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测不同浓度的VK3对细胞凋亡率的影响.结果 0,2,5,10,20 μmol/L VK3作用T24细胞48 h后,生长抑制率分别为(5.80±0.038)%,(13.30±0.036)%,(26.55±0.032)%,(42.58±0.028)%和(65.35±0.034)%,细胞凋亡率分别为(2.86±0.4)%,(5.16±0.7)%,(10.85±1.1)%,(23.01±0.8)%和(75.80±1.2)%,其中10 μmol/L,20 μmol/L VK3对T24细胞生长有明显抑制作用(P<0.05). 结论 10-20 μmol/L VK3在体外作用48 h后可明显地诱导膀胱癌T24细胞株发生凋亡.     

塞来昔布对人恶性淋巴瘤Raji细胞株增殖、凋亡及Survivin表达的影响

【目的】探讨塞来昔布对人恶性淋巴瘤Raji细胞的作用及其可能机制。【方法】体外培养人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞，用不同浓度塞来昔布进行干预。采用MTT比色法检测Raji细胞生长情况；流式细胞术分析塞来昔布对Raji细胞周期分布的影响并检测细胞凋亡及Survivin蛋白在细胞中的表达情况；应用RT-PCR法检测Raji细胞中Survivin mRNA的表达水平。【结果】塞来昔布对Raji细胞生长具有抑制作用，且在12．5～150μmol／L范围内呈时间、剂量依赖性；流式细胞术检测出典型的“凋亡峰”，凋亡率（9．20±0．19）％～（44．63±1．34）％；塞来昔布使Raji细胞G0／G1期细胞数增多，S和G2／M期细胞数减少，凋亡率和细胞周期分布呈量效依赖关系；塞来昔布下调Raji细胞中Survivin蛋白和Survivin mRNA的表达。【结论】塞来昔布抑制Raji细胞增殖、诱导其凋亡可能与阻滞细胞周期和下调Survivin表达有关。     

维生素K3增强吉西他滨诱导人膀胱癌T24细胞凋亡的研究

目的 探讨维生素K3(VK3)是否能影响吉西他滨诱导人膀胱癌T24细胞凋亡.方法 用噻唑蓝(MTr)法筛选出吉西他滨作用T24细胞72 h后的适宜作用浓度,再用该浓度联合不同浓度的VK3(2,5,10,20 μnol/L)筛选出作用72 h后的适宜联合用药浓度.分为三组:空白对照组,吉西他滨组,药物联用组.用PI流式细胞术观察各组细胞凋亡情况,并通过流式软件分析细胞周期变化.结果 MTT法筛选出吉西他滨与VK3的适宜药物浓度分别是1.0 μg,/ml和10 μmol/L.药物联用组与吉西他滨组相比,可显著提高细胞抑制率和细胞凋亡率(均P<0.05).VK3可显著增强吉西他滨诱导细胞集中于S期的作用.结论 联用维生素K3可增强吉西他滨诱导人膀胱癌T24细胞凋亡的作用,可能与细胞周期s期阻滞增高有关.     

Re-expression of cell adhesion molecule inhibits growth and induces apoptosis of human pancreatic cancer cell line PANC-1

This study examined the expression of cell adhesion molecule 1 (CADM1) in pancreatic cancer and the possible mechanism.The expression of CADM1 was detected by immunohistochemistry in tissues of pancrea...