AP921抗炎机制的研究

目的观察特异性的血小板激活因子(platelet-activatmg factor,PAF)受体拮抗剂AP924的抗炎机制.方法观察经PAF受体拮抗剂(AP921,10-6M)预处理的人体多形核白细胞(PMN).在PAF刺激下,产生炎症性介质IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、LTB4及超氧自由基的改变,探讨AP21的抗炎机制结果PAF可刺激PMN产生炎症介质IL-8、TNF-α、LTB4及超氧自由基;HG能完全抑制PAF所致的PMN的IL-8产生,HG能部分抑制PAF所致的PMN的TNF-α、LTB4及超氧自由基产生;PAF和H(G均对PMN产生IL-Iβ、IL-6无影响.结论AP921是通过PAF受体抑制炎症细胞产生炎症介质而发挥抗炎作用.     

高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响

目的：探讨高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响。方法：利用HG预处理人体主要的炎症细胞多形核白细胞(PMN),测定PAF刺激下PMN产生的炎症介质IL-1B、IL-6、IL-8、TNF-α和白三烯B4(LTB4)。结果：PAF可刺激PMN产生炎症介质TNF-α、LTB4;HG能完全抑制PAF所致的PMN产生TNF-α,HG能部分抑制PAF所致的PMN产生LTB4;PAF和HG均对PMN产生IL-1β、IL-6及IL-8无影响。结论：HG作为PAF拮抗剂,可抑制炎症介质产生而发挥抗炎作用。     

芦荟大黄素对大鼠实验性急性胰腺炎的作用

目的：研究芦荟大黄素对大鼠急性胰腺炎（AP）炎性介质的作用。方法：应用牛黄胆酸钠制备大鼠AP模型,将54只大鼠随机分为假手术组、AP模型组、芦荟大黄素治疗组。术后3、6、12h各处死6只,测定AP大鼠血小板活化因子（PAF）、白介素-6（IL-6）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平。结果：芦荟大黄素治疗组与AP模型组比较,血清中PAF及IL-6、TNF-α水平明显低于重症急性胰腺炎模型组。结论：PAF、IL-6及TNF-α水平的降低可能与芦荟大黄素对它们的抑制作用有关。     

川芎嗪对大鼠实验性急性胰腺炎的作用

目的:研究川芎嗪(TMP)对急性胰腺炎(AP)炎症介质的影响及其治疗作用.方法:雄性SD大鼠96只,体质量280～320 g,随机分为对照组(n=24),AP组(n=36)和TMP治疗组(n=36).其中,AP组和TMP治疗组均利用大鼠AP模型,该模型采用ip 35 g/L牛磺胆酸钠方法建立,每组造模后又按3,6,12和24 h分为4个时间点.分别在3个组的不同时间点抽血,检测血清中血小板活化因子(PAF),TNF-α,IL-6等水平的变化并进行分析.结果:AP组各时段血清PAF,TNF-α,IL-6升高,其中PAF在各时段持续升高,TNF-α在6 h时达高峰,而IL-6在12 h达高峰,与对照组各个时段比较差异有统计学意义 (P＜0.01);用药后TMP治疗组在3,6,12和24 h 4个时间点血清PAF,TNF-α,IL-6的水平都可降低 ( P＜0.05).结论:TMP可抑制炎症介质,明显减轻胰腺/肺组织病理损害.     

急性结膜炎血浆炎性细胞因子水平变化的研究

目的：观察急性结膜炎炎症急性期和炎症缓解后的血浆炎性细胞因子水平变化。方法：应用放射免疫分析法和超敏免疫分析测定了127例急性结膜炎患者治疗前后血浆白介素（IL）-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和超敏-C反应蛋白（hs-CRP）水平,并与正常对照组进行比较,行相关性分析。结果：127例急性结膜炎患者治疗前后血浆IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和hs-CRP水平与54例正常对照组相比明显增高,两组间差异有统计学意义（P均〈0.01）。治疗后半个月,在急性炎症缓解后血浆炎性因子基本恢复至正常水平。血浆hs-CRP与IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平相关系数分别为0.613 8、0.604 4、0.615 6和0.627 8。结论：急性结膜炎血浆炎性细胞因子在炎症急性期有明显增高。血浆hs-CRP与IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平呈正相关。     

TLR4对人牙周膜细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响

目的 观察在内毒素脂多糖(LPS)刺激下,Toll样受体4 (TLR4)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLC)分泌白细胞介素(IL)中的IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 选用100 ng/mL、1 μg/mL和10 μg/mL大肠杆菌LPS分别刺激HPDLC,双抗体夹心法检测刺激后 6、12、24、48 h时,HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平.运用不同滴度anti-TLR4单克隆抗体预先处理HPDLC,观察1 μg/mL LPS刺激下其分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平变化.结果 LPS刺激HPDLC 6 h后,即可检测到IL-1β、IL-6和TNF-α,24 h达到顶峰,然后逐渐下降,各LPS浓度组规律基本一致;anti-TLR4单克隆抗体预先处理的HPDLC,在1 μg/mL LPS刺激下,其产生IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显下降(P＜0.05),且与anti-TLR4单克隆抗体滴度呈量效关系.结论 TLR4参与了HPDLC的炎症反应过程;anti-TLR4单克隆抗体能有效抑制LPS刺激后HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的能力.     

TLR4对人牙周膜细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响

目的观察在内毒素脂多糖(LPS)刺激下,Toll样受体4(TLR4)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLC)分泌白细胞介素(IL)中的IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法选用100ng/mL、1μg/mL和10μg/mL大肠杆菌LPS分别刺激HPDLC,双抗体夹心法检测刺激后6、12、24、48h时,HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。运用不同滴度anti-TLR4单克隆抗体预先处理HPDLC,观察1μg/mLLPS刺激下其分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平变化。结果LPS刺激HPDLC6h后,即可检测到IL-1β、IL-6和TNF-α,24h达到顶峰,然后逐渐下降,各LPS浓度组规律基本一致;anti-TLR4单克隆抗体预先处理的HPDLC,在1μg/mLLPS刺激下,其产生IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显下降(P<0.05),且与anti-TLR4单克隆抗体滴度呈量效关系。结论TLR4参与了HPDLC的炎症反应过程;anti-TLR4单克隆抗体能有效抑制LPS刺激后HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的能力。     

膜表面核仁素对脂多糖所致TNF-α和IL-1β表达的影响

目的：观察人THP-1细胞膜表面核仁素对脂多糖（LPS）所致TNF-α和IL-1β表达的影响。方法：采用免疫荧光、免疫印迹等方法观察核仁素在THP-1细胞膜表面表达。利用抗体封闭策略使膜表面核仁素失活,以LPS刺激THP-1细胞的炎症细胞模型,采用逆转录PCR和酶联免疫吸附实验观察炎症因子TNF-α和IL-1β的表达与分泌。结果：免疫荧光结果显示核仁素呈斑点状位于细胞膜表面;免疫印迹检测显示核仁素和Fas存在于THP-1细胞膜蛋白中。逆转录PCR结果显示LPS（1000μg/L）处理1,2,3,4h后,IL-1β和TNF-α mRNA均表达上调,而核仁素抗体封闭明显抑制二者的表达。酶联免疫吸附检测发现,LPS（1mg/L）刺激4,12,24h后,促进THP-1细胞分泌TNF-α和IL-1β,而核仁素抗体封闭显著抑制LPS所致的炎症因子释放（P〈0.05）。结论：THP-1细胞膜表面核仁素参与介导LPS所致早期炎症介质IL-1β和TNF-α的表达与分泌。     

孟鲁司特治疗慢性阻塞性肺疾病的疗效分析

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是以逐渐发展的不完全可逆性气流阻塞为特征,其发病机制包括气道、肺实质和肺血管的慢性炎症,多种炎性因子如白介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子仅（TNF-α）、白三烯B4（LTB4）参与其中。本文就白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病的作用及部分机制进行探讨。     

白藜芦醇对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的：：研究白藜芦醇在肝脏缺血再灌注损伤(CHIRI)中的保护作用及其相关机制。方法：24只雄性大鼠随机分为假手术对照(SC)组、缺血再灌注损伤(I/R)组、白藜芦醇后处理(Res)组,每组8只。建立大鼠在体肝脏缺血再灌注模型,于再灌注6 h 采集血液和肝组织标本。观察肝脏病理学变化,检测血清中肝脏酶学指标 ALT、AST、AKP 和炎症介质指标 TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-β的变化。结果：白藜芦醇后处理可以减轻肝脏病理损伤,显著降低肝脏酶学指标,同时促炎介质 TNF-α和 IL-6明显下降,抑炎介质 IL-10和 TGF-β含量明显升高,与 I/R 组比较,各指标变化均有显著性差异(P <0.01)。结论：白藜芦醇对大鼠 HIRI 有明显的保护作用,其机制可能是通过抑制 TNF-α和 IL-6的释放,促进 IL-10和 TGF-β的分泌,从而抑制炎症反应实现。     

姜黄素对LPS诱导的星形胶质细胞炎性反应的抑制作用

目的：探讨脂多糖(LPS)诱导星形胶质细胞产生炎性反应及姜黄素对它的抑制作用。方法在2015年3月—2015年7月期间,分离培养了10只新生1~2 d的昆明小鼠大脑皮质星形胶质细胞,培养10 d后传代分组,实验分PBS对照组(n=6)、LPS刺激组(n=6)、LPS联合姜黄素干预组(n=6)。 ELISA检测炎性因子IL-6、IL-1β和TNF-α的释放。结果与PBS组的IL-6(873.82±20.28)、IL-1β(680.62±10.35)和TNF-α(492.73±8.56)比较,LPS刺激组IL-6(1132.42±78.09)、IL-1β(821.87±14.33)和TNF-α(559.32±9.6)的分泌增加(P<0.05);姜黄素能显著抑制 LPS 诱导的IL-6(1014.79±52.08)、IL-1β(738.84±7.33)和 TNF-α(476.7±10.38)的分泌,与 LPS 组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素能抑制LPS激活星形胶质细胞所致的炎性反应。     

脂多糖注射大鼠肺组织TNF—α、c—Jun和IL—10 mRNA的表达及地塞米松的影响

目的 探讨TNF-α、c-Jun、IL-10在急性肺损伤中的作用及糖皮质激素的抗炎作用机制。方法 采用脂多糖注射大鼠模型，观察了血浆中TNF-α含量和肺组织中TNF-α、c-Jun IL-10mRNA的表达变化和地塞米松的影响。结果 LPS注射后1h血浆TNF-α水平显著增高，TNF-α、c-Jun表达显著增强；地塞米松治疗1h组，TNF-α的水平显著降低，TNF-α、c-Jun表达被显著抑制。LPS刺激12h后，TNF-α、c-Jun表达减弱，而IL-10表达显著增强。地塞米松对IL-10表达没有显著影响。结论 c-Jun与TNF-α在肺组织中的表达时相有相似之处，提示c-Jun的表达可能与促炎症介质TNF-α等的转录调控有关。TNF-α的表达与IL-10的表达呈反相改变，提示TNF-α表达的变化可能与IL-10等抗炎介质的表达增加有关。糖皮质激素的抗炎作用机制之一是在mRNA水平调控促炎和抗炎介质的表达。     

鞣料云实素的体外抗炎作用

目的:初步探讨鞣料云实素在细胞模型上的抗炎机制。方法:采用脂多糖(LPS)刺激的小鼠巨噬细胞瘤细胞RAW 264.7建立炎症模型,同时用鞣料云实素进行干预,ELISA法检测细胞上清中TNF-α,IL-1β,IL-6的含量,Real-time PCR法检测细胞中TNF-α,COX-2mRNA的表达情况。结果:鞣料云实素可以通过在基因和蛋白水平上下调促炎因子TNF-α,IL-1β,IL-6的表达。结论:鞣料云实素对促炎细胞因子和炎性介质TNF-α,IL-1β,IL-6,COX-2均有不同程度的抑制作用,说明鞣料云实素对炎症的起始阶段有明显的抑制作用。     

类风湿关节炎滑膜细胞中白三烯B4诱导肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1βmRNA表达的测定

目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜细胞中白三烯B4(LTB4)诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达的定量测定方法.方法:RA患者的滑膜细胞进行原代培养,加入外源性LTB4或者在LIT存在的情况下,分别加入MK-886(5-脂氧合酶激动蛋白抑制剂)和苯丁抑制素(Bestatin,LTA4水解酶抑制剂),采用TaqMan PCR来定量检测滑膜细胞中TNF-α和IL-1β mRNA水平的表达.结果:原代培养的RA滑膜细胞的基本TNF-α和IL-1β mRNA表达水平(TNF-α/GAPDH和IL-1β/GAPDH),分别为0.02±0.00和0.16±0.01.当加入外源性的LTB4 10^-9和10^-8 mol/L后,LTB4 10^-9 mol/L使TNF-α RNA水平的表达增高了7倍,LTB4 10^-8 mol/L使TNF-α mRNA水平的表达增高了15倍,LTB4 10^-8 mol/L使IL-1β mRNA水平增高了1倍.而加入LIT刺激内源性的LTB4增高后,使TNF-α和IL-1β mRNA水平分别增高了145倍和12倍.在LIT存在的情况下,加入LTB4合成抑制剂MK-886(1 μmol/L,10 μmol/L)后,使TNF-α mRNA水平的表达分别下降15%和66%,IL-1βm RNA水平的表达分别下降了41%和71% . 1100 mg/L 苯丁抑制剂使TNF-α和IL-1β mRNA水平表达分别降低了86%和79%.结论:RA滑膜细胞中LTB4可诱导TNF-α和IL-1β mRNA水平的表达,并有助于定量测定mRNA表达水平.     

雷公藤红素对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中RANKL､OPG及炎性因子表达的影响

目的:观察雷公藤红素(Celastrol,Cel)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞系MH7A细胞中核因子κB受体活化因子配体(RANKL)?骨保护素(OPG)?白细胞介素-6(IL-6)?肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素-8(IL-8)表达的影响?方法:以白细胞介素-1β(IL-1β)刺激MH7A,不同浓度的Cel(0.1?0.5?1.0?2.0 μmol/L)干预细胞24 h后,采用real-time PCR和免疫荧光的方法检测RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8的表达?结果:IL-1β刺激MH7A细胞系24 h后,RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8 mRNA及RANKL免疫荧光明显增强,Cel呈剂量依赖性抑制MH7A中IL-1β诱导的RANKL?OPG?IL-6?TNF-α及IL-8 mRNA水平(P < 0.05)和MH7A中RANKL免疫荧光表达,显著上调OPG/RANKL轴比值?结论:Cel能调节滑膜成纤维细胞中OPG/RANKL轴和抑制促炎因子?趋化因子的表达,可能在阻止类风湿关节炎“炎症”和“骨侵蚀”中发挥重要作用?     

布地奈德联合辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子与肺组织病理的影响

目的探讨布地奈德联合辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型炎症因子与肺组织病理的影响，为药物干预方案提供实验依据。方法根据不同的药物干预方案将COPD 大鼠分为模型组（M 组）、布地奈德组（BD 组）、辛伐他汀组（SV 组）及布地奈德联合辛伐他汀组（BD+SV 组），比较不同组别COPD 大鼠血清和支气管肺泡灌洗液（BLAF）中的白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、白三烯B4（LTB4）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平及肺组织病理的改变。结果血清炎症因子水平：BD 组IL-6、TNF-α，SV组IL-6，（BD+SV）组IL-6、IL-8 及TNF-α分别较M 组降低（均 p<0.05）；（BD+SV）组IL-8 水平较SV 组下降（p <0.05）。BALF 炎症因子水平：BD 组IL-6、IL-8，SV 组IL-6、TNF-α，（BD+SV）组IL-6、IL-8、LTB4 及TNF-α水平分别较M 组降低（均p<0.05）。（BD+SV）组BALF 中IL-8、LTB4 及TNF-α水平较BD 组降低，IL-8、LTB4水平较SV组下降（均p<0.05）。BD组、SV组、（BD+SV）组肺组织病理半定量评分较M组降低（均p<0.05），病理均显示肺气肿囊腔变小、支气管炎症减轻。结论使用布地奈德联合辛伐他汀可以有效降低COPD 大鼠全身和气道炎症反应，改善肺组织病理。     

高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙抗血小板活化因子的竞争抑制实验

探讨槲寄生抗血小板活化因子(PAF)的有效活性成分高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)的作用机制。方法：利用不同浓度HG对^[3H]PAF结合的竞争抑制实验。结果：HG能够将^[3H]PAF置换下来,且置换呈剂量依赖性和饱和性的特点。结论：HG是通过PAF受体而发挥特异性的PAF拮抗剂作用。     

体外循环患者血浆致炎因子、抗炎因子、内毒素的变化及其临床意义

目的 观察体外循环心脏手术患者血浆致炎因子(肿瘤坏死因子，白介素6)、抗炎因子(白介素4，白介素10)及内毒素的变化。探讨致炎因子与抗炎因子在体外循环炎症反应中的作用。方法采用鲎试剂，ELISA等技术分别观察体外循环和未进行体外循环的患者血浆内毒素、TNF-α、IL-6、IL-4、IL-10的水平。结果体外循环时发生内毒素血症；体外循环时血浆TNF-α、IL-6、IL-4、IL-10水平显著升高，但抗炎因子IL-4，IL-10释放迟于致炎因子TNF-α，IL-6。结论体外循环时，血浆抗炎症介质的释放要迟于致炎症介质，抗炎症介质释放的延迟可能是导致炎症反应抗炎症反应失衡的原因，这可能与体外循环时全身炎症反应的发生有一定关系。     

体外循环对小儿血浆细胞因子水平及中性粒细胞凋亡的影响

目的通过检测小儿体外循环(CPB)引起的致炎细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)和抗炎细胞因子白介素-10(IL-10)的水平及中性粒细胞(PMN)凋亡率的动态变化,探讨CPB前后PMN凋亡及致炎和抗炎细胞因子水平的变化与规律。方法选择于CPB时行室间隔缺损修补术的患儿30例,分别于麻醉诱导前(T0)、麻醉诱导后(T1)、复温前(T2)、停CPB即刻(T3)、术后24h(T4)及48h(T5)6个时间点取外周血,ELISA法检测血浆TNF-α、IL-8和IL-10水平,流式细胞仪测定PMN凋亡率,进行比较分析。结果血浆TNF-α水平、IL-8水平及PMN凋亡率在T2与T0间差异有统计学意义(P<0.05);T3与T0间差异亦有统计学意义(P<0.01);T4、T5与T0间差异均无统计学意义(P>0.05)。血浆IL-10水平在T2、T3、T4与T0间差异均有统计学意义(P<0.01);T5与T0间差异无统计学意义(P>0.05)。CPB结束时,血浆TNF-α水平与PMN凋亡率呈负相关(r=-0.578,P<0.05);血浆IL-8水平与PMN凋亡率呈负相关(r=-0.455,P<0.05);血浆IL-10水平与PMN凋亡率呈正相关(r=0.374,P<0.05)。结论CPB引起致炎细胞因子TNF-α、IL-8水平升高,抗炎细胞因子IL-10水平升高,PMN凋亡率下降;致炎细胞因子TNF-α、IL-8可能抑制PMN的凋亡;抗炎细胞因子IL-10可能促进PMN的凋亡。     

巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素-10对人外周血单核巨噬细胞产生肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-8的相互作用

目的:研究巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和白细胞介素(IL)-10对人外周血单核细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-8的诱生作用及相互影响。方法:自健康献血员血液中分离单核细胞进行体外培养,并以M-CSF、IL-10单独及共同作用,然后收集上清,以双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法和生物活性法测TNF-α,以ELISA法检测IL-8。结果:①M-CSF能诱导单核细胞分泌TNF-α(P<0.05),与脂多糖(LPS)具有诱生TNF-α的协同效应(P<0.05);IL-10则能抑制TNF-α的产生(P<0.05),并拮抗M-CSF增强LPS诱生TNF-α的作用(P<0.05);②M-CSF能诱导单核细胞分泌IL-8(P<0.05),IL-10则能抑制IL-8的分泌(P<0.01),并拮抗M-CSF对IL-8的诱生效应(P<0.05)。结论:M-CSF可以促进单核细胞释放炎性细胞因子,是体内重要的炎症性因子之一,而IL-10则是体内重要的炎症抑制因子,能拮抗M-CSF的致炎作用。