RASSF2A基因甲基化在喉癌组织中的表达及意义

目的 探讨抑癌基因RASSF2A表达水平及其基因异常甲基化与喉癌的关系及意义。 方法 采用RT-PCR及甲基化特异性PCR(MSP)检测50例喉癌组织(实验组)和10例癌旁正常黏膜组织(对照组)中RASSF2A基因mRNA的表达水平及其启动子甲基化状态。 结果 喉癌组织中有54%(27/50)存在RASSF2A基因启动子,而对照组正常黏膜组织中未发现RASSF2A基因甲基化现象,差异有统计学意义(χ2=9.818, P=0.002)。RASSF2A甲基化水平程度与喉癌患者临床病理特征无明显相关性。喉癌组织中RASSF2A基因mRNA的表达水平明显低于正常黏膜组织(χ2=9.818, P=0.002)。RASSF2A基因甲基化的喉癌组织中其mRNA的表达减少,反之亦然。 结论 喉癌组织中RASSF2A基因CpG岛甲基化与其基因表达缺失有关,可能参与了喉癌的发生发展过程。     

中耳胆脂瘤上皮中CYLD、c-jun、Ki-67的表达及意义

目的研究抑癌基因CYLD(cylindromatosis)、原癌基因c-jun及细胞核增殖相关抗原Ki-67在中耳胆脂瘤上皮细胞中的表达情况,分析它们之间的相互关系,探讨CYLD、c-jun、Ki-67在中耳胆脂瘤发病机制中的可能作用。方法采用免疫组化技术检测CYLD、c-jun及Ki-67蛋白产物在30例中耳胆脂瘤上皮组织(实验组)及20例正常耳后皮肤上皮组织(对照组)中的表达情况。结果 CYLD蛋白产物阳性表达定位于细胞浆,其在中耳胆脂瘤上皮中主要见基底层弱阳性或阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮全层均见阳性表达或强阳性表达,CYLD蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显低于正常耳后皮肤(X2=16.333,p=0.000,p<0.05)。c-jun蛋白产物阳性表达定位于细胞浆和细胞核,其在中耳胆脂瘤上皮中上皮全层均见阳性表达或强阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮中均仅见基底层弱阳性或阳性表达,c-jun蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显高于正常耳后皮肤(X2=14.901,p=0.000,p<0.05)。Ki-67蛋白产物定位于细胞核,细胞质内未见Ki-67蛋白表达。其在中耳胆脂瘤上皮基底层、棘层,甚至颗粒层中均可见阳性或强阳性表达,而在对照组正常耳后皮肤上皮中均仅见基底层弱阳性或阳性表达,Ki-67蛋白在中耳胆脂瘤上皮中的表达明显高于正常耳后皮肤(X2=13.675,P=0.000,P<0.05)。Spearman相关性分析发现中耳胆脂瘤上皮细胞CYLD、c-jun蛋白表达存在负相关(rs=-0.381,P=0.038,P<0.05)。结论与正常耳后皮肤的上皮细胞相比,中耳胆脂瘤上皮细胞具有高度增殖的能力。CYLD、c-jun异常表达可能与中耳胆脂瘤发生、发展密切相关。在中耳胆脂瘤上皮中可能也存在CYLD对c-jun表达的负调节。     

Cyclin D1在中耳胆脂瘤中的表达及意义

目的 检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在中耳胆脂瘤中的表达,探讨其在胆脂瘤发病机制中的作用.方法 采用免疫组织化学技术PV-6000二步法检测CyclinD1在30例中耳胆脂瘤组织及15例正常耳后皮肤中的表达.结果 CyclinD1在中耳胆脂瘤组织及正常耳后皮肤中的阳性率分别为70.0％、26.7％,两者比较差异有统计学意义(x2 =5.951,P＜0.05).结论 CyclinD1在中耳胆脂瘤上皮中存在高表达,这反映了胆脂瘤上皮的过度增殖性,说明CyclinD1可能在中耳胆脂瘤的发生、发展中起重要作用.     

细胞周期蛋白E2在下咽癌中的表达及其意义

目的 观察细胞周期蛋白E2在下咽癌组织中的表达水平及其与临床病理特征及预后的相互关系。 方法 免疫组化法检测50例下咽癌肿瘤组织及相应的正常黏膜组织中细胞周期蛋白E2的表达水平,分析其与临床特征及生存率的相互关系,结果采用SPSS 18.0软件进行统计分析。 结果 细胞周期蛋白E2在下咽癌组织中的表达较正常黏膜组织明显增加(Z=-5.764,P=0.000),且其表达程度与肿瘤的临床分期(Z=-1.995, P=0.046)、淋巴结转移(Z=-2.176,P=0.030)相关。肿瘤组织中细胞周期蛋白E2表达阳性患者5年生存率为40.2%,阴性表达患者5年生存率为81.8%。细胞周期蛋白E2表达水平高的患者生存率明显降低(χ2=6.317,P=0.012)。 结论 细胞周期蛋白E2在下咽癌肿瘤组织中的异常表达提示其可能参与了肿瘤的发生发展,并有可能成为下咽癌的诊断、治疗与预后的分子标志物之一。     

MIF、GSK-3β在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性研究

目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及糖原合成激酶-3(GSK-3β)在喉鳞状细胞癌中表达的临床意义及相关性。 方法 采用免疫组化法检验30例喉癌患者癌组织及相应癌旁组织中MIF、GSK-3β的表达情况,并以10例非喉鳞状细胞癌患者喉部正常黏膜组织作对照;分析喉组织中MIF、GSK-3β表达与患者临床病理因素之间的关系,探讨喉鳞状细胞癌中MIF与GSK-3β表达的相关性。 结果 喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中MIF表达率分别为73.33%,40.00%,20.00%,喉癌组织中、癌旁组织及喉正常喉黏膜中GSK-3β阳性表达率分别为70.00%,13.33%,20.00%;MIF、GSK-3β在喉癌中表达与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移均相关(P<0.05);与患者年龄、性别、吸烟史和饮酒史均无相关性(P>0.05)。MIF、GSK-3β在喉癌中的表达具有相关性(r=0.592,P=0.003)。 结论 喉鳞状细胞癌中MIF、GSK-3β的高表达可促进喉癌的发生及发展,MIF、GSK-3β可作为喉癌的潜在的组织生物标志物和喉癌患者疾病进展监控及预后观测的指标。     

人乳头状瘤病毒及其相关基因在中耳胆脂瘤中的表达

目的　探讨人乳头状瘤病毒 (humanpapillomavirus ,HPV)感染在中耳胆脂瘤发生发展中的作用。方法　运用共同引物聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)和核酸分子斑点杂交法对44例 ( 44耳 )中耳胆脂瘤标本组织中的HPVDNA进行检测 ,并结合其中 35例 ( 35耳 )的病理学检查结果进行对比分析。结果　 12耳 ( 34.3 % )中耳胆脂瘤组织中观察到了HPV感染的损害特征 ;用共同引物PCR法及核酸分子斑点杂交法对 44耳中耳胆脂瘤组织标本进行HPVDNA扩增的阳性率分别为2 9 .5 % ( 13 44 )及 2 5 .0 % ( 11 44 ) ;表现有人乳头瘤病毒损害特征的 12耳中耳胆脂瘤组织HPVDNA检测阳性率为 5 8.3% ( 7 12 ) ,而无此损害特征的 2 3耳中耳胆脂瘤组织HPVDNA检测阳性率为 13.0 %( 3 2 3) ,统计学检验差异有显著性 ( χ2 =7.92 6 ,P <0 .0 0 5 )。结论　HPV感染可能激发中耳胆脂瘤上皮的分裂增殖 ,在中耳胆脂瘤发生发展中起一定的作用 ;侵蚀性乳头瘤样生长和空晕细胞改变可以作为中耳胆脂瘤组织中HPV感染的病理学证据     

肿瘤转移抑制蛋白在舌鳞状细胞癌中的表达与临床意义

目的 研究肿瘤转移抑制蛋白1(MTSS1)在舌鳞状细胞癌、癌旁正常组织中的表达及其意义。 方法 应用免疫组织化学方法检测舌鳞状细胞癌、癌旁正常组织中MTSS1蛋白的表达,并用单因素分析法研究其与临床病理因素的关系。 结果 20例舌鳞状细胞癌组织中MTSS1的蛋白表达水平与20例配对癌旁正常组织相比,差异有统计学意义(P=0.005);34例转移组中MTSS1的蛋白表达水平与46例非转移组相比,差异有统计学意义(P =0.033);37例临床Ⅲ~Ⅳ期组中MTSS1的蛋白表达水平与43例临床Ⅰ~Ⅱ期组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。 结论 MTSS1蛋白在舌鳞状细胞癌的早期进展中发挥了重要作用,MTSS1蛋白表达水平的降低可能与舌鳞状细胞癌的浸润转移有关,可能抑制了TSCC的发生和发展。     

中青年与老年慢性化脓性中耳炎及中耳胆脂瘤患者听力学特点及区别

目的 探讨中青年与老年慢性化脓性中耳炎及中耳胆脂瘤患者听力学特点及区别。方法 回顾性研究单侧慢性化脓性中耳炎或中耳胆脂瘤中青年(18～59岁)患者74例、老年(≥60岁)患者68例(语频段0.5、1.0、2.0、4.0 kHz)纯音测听结果, 分析其患耳与对侧耳、不同年龄组间患者听力学特征和区别。结果 中青年患者患耳各语频气、骨导阈值均高于对侧耳, 老年患者患耳气导、除4.0 kHz外的骨导高于对侧耳。老年患者各语频气、骨导耳间差均明显大于中青年患者。非胆脂瘤组、听骨链正常组老年患者耳间差在0.5、1.0、2.0 kHz气导、4.0 kHz骨导高于中青年患者。胆脂瘤组、听骨链中断组老年患者各语频气、骨导耳间差均明显大于中青年患者。结论 慢性化脓性中耳炎及中耳胆脂瘤对中青年、老年患者的气、骨导均可产生损害, 对老年患者的损害比中青年患者严重。中耳病变越严重, 老年患者比中青年患者听力受损的程度越高。     

磁共振弥散加权成像在先天性中耳胆脂瘤精准诊断与JOS分期中的应用探讨12例

目的 探讨磁共振弥散加权成像(DWI)在先天性中耳胆脂瘤精准诊断中的价值,及DWI联合颞骨高分辨CT(HRCT)对先天性中耳胆脂瘤术前分期的准确性。 方法 选取12例先天性中耳胆脂瘤患者,评估DWI在先天性中耳胆脂瘤的诊断效能;结合HRCT及DWI检查,按照日本耳科协会(JOS)分期标准进行术前分期,所有患者均行手术治疗并记录术中分期情况。将术前分期与术中分期相比较,评估两者之间的一致性。 结果 12例患者术前DWI诊断准确率为100%。HRCT联合DWI术前分期:Ⅰb期2例,Ⅰc期1例,Ⅱ期8例,Ⅲ期1例;术中分期:Ⅰb期1例,Ⅰc期2例,Ⅱ期8例,Ⅲ期1例,两者一致性高达92%。 结论 DWI对检测先天性中耳胆脂瘤具有较高敏感性及特异性,可实现对先天性中耳胆脂瘤的精确诊断。同时将HRCT与DWI联合应用,可于术前实现精准分期,对该疾病的手术治疗及预后具有一定的指导意义。     

NLR、LMR、PLR预测慢性鼻窦炎鼻内镜术后复发价值

目的 探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)预测慢性鼻窦炎鼻内镜术后复发价值。 方法 选取2016年3月至2018年3月收治的慢性鼻窦炎鼻内镜治疗患者60例。所有患者均术后随访6个月,并根据鼻窦炎是否复发分为术后复发组(n=21)和术后未复发组(n=39)。同期选取87例健康体检者作为对照组(n=87)。收集并分析所有患者NLR、LMR、PLR数值,并绘制上述指标受试者工作特征曲线(ROC)。 结果 CRS组NLR、PLR水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);CRS组LMR水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);术后未复发组NLR、LMR、PLR水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05);术后复发组NLR、PLR水平高于术后未复发组,差异具有统计学意义(P<0.05);术后复发组LMR水平低于术后未复发组,差异具有统计学意义(P<0.01);NLR的敏感度、特异度分别为63.33%(19/30)、93.33%(28/30);LMR的敏感度、特异度分别为72.00%(18/25)、91.43%(32/35);PLR的敏感度、特异度分别为67.86%(19/28)、93.75%(30/32);ROC曲线显示:NLR、LMR、PLR曲线下面积分别为0.719(0.587~0.851)、0.922(0.853~0.991)、0.830(0.587~0.851)。 结论 NLR、LMR、PLR能较好地预测慢性鼻窦炎鼻内镜术后复发情况。     

表皮生长因子受体和Ki67及p16在成人中耳胆脂瘤中的表达

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)、Ki67、p16在成人中耳继发性胆脂瘤上皮中的表达情况,分析它们之间的相互关系,探讨其表达对胆脂瘤上皮侵袭能力的影响。方法:应用免疫组织化学SP染色方法检测EGFR、Ki67和p16在30例成人中耳胆脂瘤上皮、21例成人胆脂瘤患者外耳道正常皮肤、17例正常人外耳道中的表达情况,应用计算机图像分析系统对其阳性表达进行定量分析。结果:EGFR、Ki67、p16在成人中耳继发性胆脂瘤上皮中阳性表达率分别为70.0%,60.0%,46.7%,与外耳道正常皮肤相比表达均差异有统计学意义。成人中耳胆脂瘤中EGFR、Ki67与p16之间表达均无相关性(均P>0.05)。胆脂瘤侵袭能力与EGFR、Ki67表达有显著相关性(均P<0.01)。EGFR、Ki67表达灰度值越低,表达密度越高,胆脂瘤侵袭能力越强。p16在成人中耳胆脂瘤中的表达与侵袭能力之间无相关性(P>0.05)。EGFR、Ki67、p16在成人中耳胆脂瘤中阳性细胞主要分布于上皮全层,以基底层和棘层为著,呈高度表达;而在对照组中阳性细胞仅在基底层表达,呈弱表达。结论:EGFR、Ki67、p16在成人中耳胆脂瘤中呈高表达,EGFR、Ki67的表达与成人中耳胆脂瘤的侵袭能力有高度相关性,提示成人中耳胆脂瘤具有高度增殖能力,其中细胞因子EGFR、Ki67、p16起到重要的作用。     

核转录因子κ-Bp65在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的检测核转录因子-κBp65（nuclear factor kappa Bp65,NF-κBp65）在中耳胆脂瘤上皮中的表达和活化,探讨其在中耳胆脂瘤发病机制中的可能作用。方法采用免疫组织化学SP法检测30例中耳胆脂瘤组织标本与15例正常外耳道皮肤标本中NF-κBp65蛋白的表达。结果NF-κBp65蛋白阳性表达定位于上皮细胞核。NF-κBp65蛋白在中耳胆脂瘤上皮组织中阳性表达率为63.3%,明显高于正常外耳道皮肤组的20.0%（P〈0.01）。结论NF-κBp65蛋白在中耳胆脂瘤上皮的异常表达可能在胆脂瘤的发生、发展过程中起重要作用。胆脂瘤上皮中NF-κBp65的活化可能参与了胆脂瘤上皮细胞过度增殖机制。     

转化生长因子β1和即刻早期基因及p27在中耳胆脂瘤上皮中的表达

OBJECTIVES: To analyze the expression of transforming growth factor-beta1 (TGF-beta1), cyclin dependent kinase inhibitor (p27) and c-fos in human middle ear cholesteatomas and to investigate the correlation between their expression and the ability of erosion of cholesteatoma. METHODS: Immunohistochemical staining (SP method) of 31 cholesteatomas and 11 external ear canal skin samples from patients and 10 external ear canal skin samples from healthful men which were taken intraoperatively, was performed for c-fos, TGF-beta1 and p27 positivity. The signals representing the expression of c-fos, TGF-beta1 and p27 were observed under microscope and scanned into a computer by an image scanner. The gray-scale of positive signals were quantitated by image processing computer. RESULTS: The percentage of positive expression of TGF-beta1 and c-fos in cholesteatoma were 87.1% and 83.9%, respectively. Their expression tended to be increased greatly compared with which in the skins of the control groups. Positive p27 signals were not observed in cholesteatomas and external ear skin tissues. It showed statistically significant correlation between expression of c-fos and the ability of erosion of cholesteatoma. There was correlation between the express ion of TGF-beta1 and the ability of erosion of cholesteatoma too. But there was no correlation between the expression of c-fos and TGF-beta1. CONCLUSION: The expression of c-fos in cholesteatoma was significally higher compared with which in the skin of external auditory of cholesteatoma patients and healthful men, which indicate that c-fos plays an important role in the hyperproliferative of cholesteatoma. The expression of TGF-beta1 was significant higher in cholesteatoma, which indicate that cytokines such as TGF-beta1 play a great role in the etiology of cholesteatoma.     

PTEN及P-ERK和P-AKT在中耳胆脂瘤上皮中的表达及意义

目的：检测蛋白酪氨酸磷酸酶基因（PTEN）、磷酸化蛋白激酶B（P-AKT）和磷酸化细胞外信号调节激酶（P-ERK）在人类中耳胆脂瘤上皮的表边情况及其相关性,探讨它们在中耳胆脂瘤形成机制中的重要作用。方法：应用免疫组织化学SABC法检测40例中耳胆脂瘤标本及15例正常皮肤标本中PTEN、P-AKT和P-ERK蛋白的表达量及定位。应用Western blot免疫印迹法检测其中20例中耳胆脂瘤标本和10例正常皮肤标本PTEN、P-AKT和P-ERK蛋白以及内参GAPDH的表达量。结果：①免疫组织化学显示,PTEN在胆脂瘤和正常皮肤中的细胞核及胞质均有着色。核PTEN在胆脂瘤的阳性表达率明显低于正常皮肤,两者差异具有统计学意义（P〈O．01）;质PTEN在胆脂瘤的阳性表达率明显低于正常皮肤,两者差异具有统计学意义（P〈0．01）;P-AKT主要在细胞质着色,胆脂瘤中的阳性表达率明显高于正常皮肤,两者差异具有统计学意义（P〈0．01）;p-ERK主要在细胞核着色,胆脂瘤中的阳性表达率明显高于正常皮肤,两者差异亦具有统计学意义（P〈O．01）。在中耳胆脂瘤标本中,PTEN分别与P-AKT、P-ERK蛋白的表达之间呈显著负相关（P〈O．01）。②Western blot免疫印迹法检测显示：胆脂瘤中PTEN的表达量明显少于正常皮肤中的表达量;而P-AKT和P-ERK在胆脂瘤中的表达量明显多于它们在正常皮肤中的表达量。结论：PTEN、P-AKT和P-ERK蛋白在中耳胆脂瘤中的异常表达可能与胆脂瘤上皮的高度增殖和抗凋亡密切相关。PTEN表达缺失导致其抑制作用减弱,一方面使P-AKT表达过度,继而引起胆脂瘤上皮细胞凋亡受抑制;同时也使P-ERK表达过度,导致胆脂瘤上皮细胞增殖加强。     

中耳胆脂瘤中P-Akt和Foxo3的表达及其和凋亡的关系

目的 检测人类叉头框O3(forkhead box O3,Foxo3)蛋白、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein ki-nase B,P-Akt)在中耳胆脂瘤的表达和DAPI核染色情况.方法 应用免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)检测中国医科大学附属盛京医院2019年8...     

Association between human beta defensin expression and cholesteatoma formation

OBJECTIVE: To investigate an association between human beta defensin (hBD) expression and cholesteatoma formation. METHODS: hBD-2 mRNA expressions were assessed in healthy external acoustic meatus skin organ cultures before and after stimulation with Pseudomonas aeruginosa. In addition, hBD-1 and hBD-2 protein production of stimulated and non-stimulated external acoustic meatus skin was visualized by immunohistochemistry. Furthermore, hBD-1 and hBD-2 mRNA expression was analyzed in 25 external acoustic meatus skin, 29 cholesteatoma, and 18 non-cholesteatoma control samples. Non-stimulated meatal tissue preparation did not express hBD-2, whereas incubation with P. aeruginosa demonstrated hBD-2 induction. RESULTS: The hBD-1 mRNA expression was detected in cholesteatoma (14/17), meatal skin, and middle ear mucosa (11/18). hBD-2 mRNA expression was shown in eight cholesteatoma (28.5%) and in three middle ear mucosa tissue samples (37.5%). CONCLUSION: Our data suggest constitutional hBD-1 and inducible hBD-2 expression in chronic middle ear infection and cholesteatoma. Failure of hBD-1 and hBD-2 expression might dispose to exacerbation of cholesteatoma disease. The organ culture model of the external acoustic meatus skin is effective in order to evaluate germ stimulation experiments.     

中耳胆脂瘤中热休克蛋白70和细胞周期素依赖蛋白p27的表达及病理意义

目的 探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)和细胞周期素依赖蛋白p~(27)在中耳胆脂瘤中的表达及病理意义。方法 应用免疫组织化学SP法和原位杂交技术,检测40例中耳胆脂瘤上皮中Hsp70、Hsp70mRNA和p~(27)的表达,选用20例正常外耳道皮肤作对照,应用全自动图像分析仪分析各张切片的平均吸光度值。结果Hsp70、Hsp70mRNA和p~(27)在中耳胆脂瘤上皮中表达均明显高于在正常外耳道皮肤中的表达(P<0.05)。而Hsp70和p~(27)二者间在中耳胆脂瘤上皮中表达无相关性(P>0.05)。结论 Hsp70和p~(27)二者可能独自参与了中耳胆脂瘤上皮的增殖、分化及胆脂瘤形成。     

Cycline-dependent kinase inhibitor, p27 (KIP1), is associated with cholesteatoma

OBJECTIVE: Cyclin-dependent kinases (CDKis) can arrest the cell cycle, which in turn inhibits the cell proliferation. P27 (KIP1) is a CDKi and acts as a tumor suppressor gene. In this study, we aimed to investigate the role of p27 CDKi in cholesteatoma, a disease characterized by the presence of hyperproliferative squamous epithelium. STUDY DESIGN: Immunohistochemical staining of 15 cholesteatoma and 18 control ear canal skin samples, which were taken intraoperatively, was performed for p27 positivity. METHODS: The monoclonal antibodies to p27 were used for immunohistochemical staining of the sections. The streptavidin-biotin horseradish method was used. The number of cells staining positive for p27 was calculated, and the intensity of p27 positivity was graded. RESULTS: P27 positivity was obtained in 9 (50%) of 18 skin tissues. In the cholesteatoma tissues, p27 positivity was found only in 2 (13.3%) tissue samples. The difference between the groups were statistically significant (P =.03). The mean numbers of p27 positivity were 11.8 +/- 15.5 and 1.4 +/- 3.8 (mean +/- standard deviation) in the skin and cholesteatoma samples, respectively. This difference was also statistically significant (P =.02). The p27 results of primary and secondary cholesteatoma samples were not significantly different (P =.3). The results of p27 were not related to the gender of the patients (P =.8). CONCLUSION: P27 is involved directly or indirectly in the occurrence of cholesteatoma. Alterations of p27 levels in keratinocytes can influence the proliferative state of the keratinocytes. Altered p27 levels in cholesteatoma may suggest a molecular pathology in cholesteatoma. The search for significance of CDKis seems promising to better understand the pathogenesis of cholesteatoma.