黄花倒水莲口服液抗过氧化脂质的测定

本实验研究证明黄花倒水莲（ＰＡＤ）口服液高剂量（１００％ＰＡＤ）有显著增强小鼠抗过氧化脂质的能力，中等剂量（５０％ＰＡＤ）可能有增强抗过氧化脂质能力的作用。     

黑木耳抗脂质过氧化的初步探讨

本次动物实验，主要探讨黑木耳的抗脂质过氧化作用。４５只新西兰白兔随机分为正常组，胆固醇组和黑木耳加胆固醇组，实验期为三个月。实验期间除测定血清总胆固醇（ＴＣ），血清β脂旦白（β－Ｌｐ）和动脉硬化程度以外，还测定各组动物实验前后血清中脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化，用荧光法测定主动脉弓和腹主动脉组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性。实验结果表明：黑木耳除具有降血脂和抗动脉粥样硬化效果外，还具有抗脂质过氧化作用。脂质过氧化与衰老有密切关系。高脂血症和动脉粥样硬化均为老年人易患疾病。故老年人经常食用黑木耳将有利于防治高脂血症和冠心病及延缓衰老等作用。黑木耳可作为老年人的保健食品加以推广。     

银杏叶抗氧化和抗脂质过氧化损伤效应的探讨

目的探讨银杏叶抗氧化和抗脂质过氧化损伤的效应。方法检测７８例心绞痛患者经银杏叶制剂天保宁治疗前后的血浆维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）、过氧化脂质（Ｐ－ＬＰＯ）和红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｅ－ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ）、过氧化脂质（Ｅ－ＬＰＯ）值，在Ｃｏｍｐａｑ５８６微机上用ＳＰＳＳ／ＰＣ＋统计软件包分析处理。结果与治疗前比较，治疗后的Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ、Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ、Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ平均值皆显著升高（Ｐ＜０．０１），Ｐ－ＬＰＯ、Ｅ－ＬＰＯ平均值皆显著降低（Ｐ＜０．０１）；且均与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论心绞痛患者体内病理性氧化反应和脂质过氧化反应在治疗后明显减缓，银杏叶制剂具有较强的抗氧化损伤和抗脂质过氧化损伤的作用     

高血压病病人红细胞变形能力与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性的关系

目的：探讨高血压病病人红细胞变形能力（ＥＤ）变化与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性的关系。方法：采用ＥＤ测定仪、分光光度计和凝胶电泳法分别检测了１２６例高血压病病人和６７例健康人红细胞滤过指数、红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性、钙—三磷酸腺苷（Ｃａ２＋－ＡＴＰ）酶活性和红细胞膜收缩蛋白相对含量的变化。结果：高血压病病人红细胞滤过指数，红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性明显增高，Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和红细胞膜收缩蛋白相对含量明显降低，与对照组比较差异有极显著性（Ｐ＜０．００１）。且随着病程进展，各指标变化逐渐明显（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。高血压病病人红细胞滤过指数与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性呈正相关（ｒ＝０．６８０，Ｐ＜０．００１），与Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和红细胞膜收缩蛋白含量呈负相关（ｒ＝－０．５７２，－０．６２７，Ｐ＜０．００１）；Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和红细胞膜收缩蛋白含量与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性呈负相关（ｒ＝－０．５２８，－０．６６０，Ｐ＜０．００１）。结论：高血压病病人ＥＤ降低与红细胞膜钙依赖中性蛋白酶活性增高所致的膜蛋白水解和破坏有关。     

菟丝子抗衰老作用的实验研究

采用自然衰老小鼠，观察菟丝子水煎剂对老龄小鼠红细胞膜超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、血清过氧化脂质（ＬＰＯ）水平、脑组织脂褐素含量，肝单胺氧化Ｂ（ＭＡＯ－Ｂ）活性及血硒含量的影响。结果表明：菟丝子可使老龄小鼠红细胞膜ＳＯＤ活性增高，血清ＬＰＯ水平和脑脂褐素含量显著降低，肝ＭＡＯ－Ｂ活性降低，对血硒水平无影响。揭示菟丝子可增加老龄小鼠ＳＯＤ活性，抑制体内脂质过氧化物及终产物生成，抑制ＭＡＯ－Ｂ活性，进而延缓机体衰老过程。     

光合细菌抗脂质过氧化功能的研究

目的 评价Rhodobacter Sphaeroides No.1体内外抗脂质过氧化功能。方法 体外试验，测定在脂质易氧化系统中（脑匀浆－Fe^2 )超弱发光值（CP30s)，代表脂质过氧化强弱的程度。体内试验，用TBA荧光法测定小鼠血清中脂质过氧化最终产物之一丙二醛（MDA）含量，用羟胺法测定全血SOD的活性。结果 在体外系统中，当菌体浓度为5μg/L时，脂质过氧化抑制率达到74．1％。当灌喂菌体悬液剂量为5ml/kg体重.d，四周后，血清MDA含量下降了13．7％（P＜0．05）。小鼠全血超氧化物歧化酶（SOD）活性提高了69．4％（P＜0．01）。结论 光合细菌No.1具有较强的抗脂质过氧化功能，这种功能不仅是通过菌体内存在抗氧化剂的直接作用，而且可通过促进体内抗氧化物酶活性而实现的。     

HLAⅡ类抗原与病毒性心肌炎相关性的研究

目的：探讨人白细胞Ⅱ类抗原（ＨＬＡⅡ）与病毒性心肌炎（ＶＭＣ）的相关性。方法：用ＨＬＡ单克隆抗性体以微量淋巴细胞毒性试验调查３２例福建地区ＶＭＣ患者ＨＬＡ－ＤＲ和ＤＱ位点共２０个特异性抗原频率,并与４３例本地区政党人加以对照。结果：ＶＭＣ病人与ＨＬＡ－ＤＱ７（ＲＲ＝７．６００,ＰＣ＝０．００２）和ＤＱ２（ＲＲ＝０．１６１,ＰＣ＝０．００２）抗原分别为显著正、负相关结论：ＶＭＣ与ＨＬＡⅡ类抗原异常表     

人类白细胞抗原与风湿热和风湿性心瓣膜病易感性研究

为探讨人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＱＡ１基因与风湿热（ＲＦ）和风湿性心脏病（ＲＨＤ）患者发病中宿主的遗传关联，选择无亲缘关系的广东籍汉族健康人１０６例和５４例ＲＦ／ＲＨＤ患者，应用聚合酶链反应－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＣＲ－ＰＡＧＥ）法，结合高灵敏的银染色作ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因分型。发现本方法检测的６种ＤＱＡ１等位基因中，ＲＦ／ＲＨＤ组ＤＱＡ１＊０１０１（３１．４８％，相对危险率ＲＲ＝２．８９，Ｐ＜０．００５，病因系数ＥＦ＝０．２０６）明显增高，而ＤＱＡ１＊０１０２（１．８５％，ＲＲ＝０．１０６，Ｐ＜０．００５，预防分数ＰＦ＝０．１３４）显著下降；ＤＱＡ１的两种基因型（＊０１０１／０３０１和＊０１０１／０４０１）在病人组显著增高，而ＤＱＡ１的＊０１０２／０３０１基因型比健康人组明显下降（Ｐ＜０．００５）。上述结果显示：ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１０１对ＲＦ／ＲＨＤ有遗传易感作用，而ＤＱＡ１＊０１０２有遗传抵抗作用；ＤＱＡ１基因型检测可能为预测ＲＦ／ＲＨＤ易感者提供理论依据。     

汉族类风湿关节炎患者HLA—DR和—DQ基因分型研究

为探讨ＨＬＡ－ＤＲ和－ＤＱ等位基因与我国汉族类风湿关节炎（ＲＡ）的相关性，采用聚合酶链反应－限制性内切酶片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法对汉族人群中３５例ＲＡ患者和１００名健康人的ＤＲ和ＤＱ位点进行ＤＮＡ定型分析。结果发现，ＤＲ４频率在正常人为２４．０％，在ＲＡ患者为５１．４％（Ｐ＜０．０１，ＲＲ＝３．３０）；ＤＲ４亚型位点分析发现２组均以ＤＲＢ１＊０４０５占多数，但ＤＲＢ１＊０４０５频率在ＲＡ组为３１．４％，高于正常人的１０．０％（Ｐ＜０．０１）。ＤＱ４频率在全部ＲＡ患者为３７．１％，在ＤＲ＋４ＲＡ患者为７２．２％，均高于全部正常人的１０．０％（Ｐ＜０．０１）和ＤＲ＋４正常人的４１．６％（Ｐ＝０．０３７６）；ＤＲ＋４－ＤＱ＋４ＲＡ患者的病情重于ＤＲ－４患者。结果提示，ＤＲ４、主要是ＤＲＢ１＊０４０５与ＲＡ相关，ＤＱ４可增加ＤＲ４对ＲＡ的易感性，ＤＲ＋４－ＤＱ＋４单倍型是ＲＡ病情严重程度的标志。     

HLA—DR2,DRB1＊0301,DQA1＊0501基因频率与肌炎及其临床表现的 …

目的：观察人类白细胞相关抗原ＨＬＡ－ＤＲ２，ＤＲＢ１＊０３０１，ＤＱＡ１＊０５０１基因频率为多发性肌炎／皮肌炎（ＰＭ／ＤＭ）发病及其临床表现的关系，方法：特异性引物聚合酶链式反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法分别测定了３１例ＰＭ／ＤＭ患者及５０例正常人的ＨＬＡ－ＤＲ２，ＤＲＢ１＊０３０１及ＨＬＡ－ＤＡＱ１＊０５０１的基因频率，结果：三种基因型在３１例肌炎患得中基频率分别为：６．４５％，９．６８％和７７．４     

瑞香素抗红外期疟原虫作用的研究

目的　研究瑞香素 (DPNT)抗红外期疟原虫的作用。方法　于ICR小鼠腹腔注射约氏疟原虫子孢子后 0 5h灌胃给药 ,连续 4d。不同剂量的DPNT及DPNT伍用伯氨喹 (PQ)的抗疟作用 ,分别以d7ICR小鼠阴性率及d1 1 或d1 2 ICR小鼠每千个红细胞被原虫感染数作评价 ,并观察DPNT对ICR小鼠血红蛋白浓度的影响。结果　DPNT的剂量范围为每天 10～ 10 0mg/kg ,连服 4d ,d7原虫阴性小鼠数及d1 1 红细胞被感染程度与对照组相比其差异均无显著性 ;DPNT每天 5 0mg/kg和每天PQ5mg/kg配伍组的d7小鼠阴性率与PQ每天 10mg/kg组相当。ICR小鼠DPNT每天 5 0mg/kg组与对照组血红蛋白浓度在d8天有差异。结论　DPNT单独用药 ,无明显抗红外期疟原虫作用 ,但DPNT每天 5 0mg/kg与PQ每天 5mg/kg伍用的抗疟效果与PQ每天 10mg/kg相当。DPNT在短期内可致小鼠贫血。     

瑞香素对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶及核糖核酸还原酶活性的影响

目的 体外测定瑞香素对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶（COX）及核糖核酸还原酶（RNR）活性的影响。方法 Trager &; Jensen法体外培养恶性疟原虫FCC1/HN分离株，超声波破碎恶性疟原虫提取总蛋白，用紫外分光光度计检测瑞香素与瑞香素-Fe复合物在不同作用时间和不同作用浓度对恶性疟原虫COX活性的影响，以电子自旋共振法检测经瑞香素与瑞香素-Fe复合物作用1、2、3和4 h后，恶性疟原虫酪氨酸（Tyr）自由基的量以反映恶性疟原虫RNR的活性。 结果 体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素（100 μmol/L）作用2、4、8和12 h后，COX活性分别被抑制了0、6%、73%和80%；在瑞香素浓度为0.1、1、100和1 000 μmol/L，作用6 h后，COX活性分别被抑制3%、31%、53%和84%；而瑞香素-Fe复合物对COX的影响几乎消失。经瑞香素（100 μmol/L）作用1、2、3和4 h后RNR活性分别被抑制7%、51%、69%和75%；在瑞香素浓度为0.1、1、100和1 000 μmol/L，作用6 h后，RNR活性分别被抑制3%、31%、58%和93%；而瑞香素-Fe复合物作用6 h后RNR活性分别被抑制8%、6%、11%和9%。 结论 在体外瑞香素可显著降低恶性疟原虫的细胞色素C氧化酶（COX）及核糖核酸还原酶（RNR）活性。     

瑞香素杀疟原虫裂殖体的作用

[目的 ]研究中药瑞香素在体外和体内的杀裂殖体作用。 [方法 ]在恶性疟原虫FCCl株常规体外培养中测试瑞香素杀裂殖体活性 ,并按“四天抑制性试验”在感染伯氏疟原虫ANKA株的小鼠中测定不同剂量瑞香素的体内抗疟活性。 [结果 ]体外试验中瑞香素在 1～ 10 μmol L剂量范围内有明显杀灭裂殖体作用 ,而体内试验中按D4减虫率与感染鼠在 30d内的平均生存天数评价 ,5 0或 10 0mg kg .d- 1 × 4d瑞香素灌胃以及 10 ,5 0或 10 0mg kg.d- 1 × 4d瑞香素腹腔注射给药在伯氏鼠疟原虫ANKA株感染鼠中的抗疟作用与 10mg kg .d- 1 × 4d氯喹 (CQ)灌胃的疗效相似。 [结论 ]瑞香素在体外和体内均有一定的杀裂殖体作用。     

瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系

目的　研究瑞香素体外抗疟作用与其铁螯合能力的关系。　方法　在恶性疟原虫FCC1株常规方法体外培养中检测瑞香素和去铁胺杀裂殖体活性。利用荧光探针calcein测定瑞香素和去铁胺的铁螯合能力。　结果　与强铁螯合剂去铁胺相比 ,瑞香素具有中度的铁螯合能力。体外实验中瑞香素在 0～ 12 μmol/L剂量范围内有剂量依赖性的杀裂殖体活性。瑞香素与Fe2 + 按 2∶1混合后 ,抗疟作用明显下降。　结论　瑞香素的抗疟作用与它的铁螯合能力有关。     

瑞香素对体外培养恶性疟原虫超氧化物歧化酶活性及DNA合成的影响

目的研究瑞香素(DPNT)对体外培养恶性疟原虫超氧化物歧化酶(SOD)活性及DNA合成的影响。方法在恶性疟原虫FCC1株体外培养体系中,以SOD试剂盒检测瑞香素、瑞香素铁盐及去铁胺(DFO)对疟原虫SOD活性的影响。疟原虫培养同步化,利用荧光素Hoechest33258测定在瑞香素和去铁胺作用下疟原虫不同发育阶段(环状体和滋养体)的DNA合成水平。结果与未加药对照组比较,经瑞香素作用后疟原虫总SOD下降约60％(P<0.01),而相应的经去铁胺作用后,疟原虫的总SOD仅下降约22％(P>0.05)。瑞香素铁螯合能力被遮蔽后,几乎失去对疟原虫SOD的影响。同步培养的滋养体阶段疟原虫,在瑞香素作用下DNA合成率明显低于对照组。结论在体外瑞香素可显著降低疟原虫SOD活性,并影响滋养体阶段疟原虫的DNA合成。     

Daphnetin: a novel antimalarial agent with in vitro and in vivo activity.

Daphnetin is a dihydroxycoumarin that is being used in China for the treatment of coagulation disorders. It is also a chelator and an antioxidant. In vitro, daphnetin causes a 50% inhibition (IC50) of 3H-hypoxanthine incorporation by Plasmodium falciparum at concentrations between 25 and 40 microM. Several related compounds, such as scopoletin, 2, 3-dihydroxybenzoic acid and 3, 4-dihydroxybenzoic acid show no inhibitory activity. The antimalarial activity of daphnetin is inhibited by the addition of iron. Daphnetin does not appear to be an oxidant drug, since it does not spontaneously generate superoxide in vitro. However, it does alkylate bovine serum albumin when incubated in the presence of iron. In vivo, daphnetin significantly prolongs survival of P. yoelli-infected mice.     

Lipid peroxidation in patients with type-1 diabetes mellitus

A study was made of levels of malonic dialdehyde, peroxide hemolysis of erythrocytes, superoxide dismutase activity and a tocopherol content for the purpose of investigating the state of lipid peroxidation in 14 patients with type I diabetes mellitus. Correlation between the state of lipid peroxidation and a degree of diabetes mellitus compensation was established. Decompensated diabetes mellitus was characterized by more enhanced lipid peroxidation and tocopherol deficiency.     

日本血吸虫26 kDa基因重组蛋白免疫小鼠抗体内血吸虫生殖的作用

目的：探讨日本血吸虫２６ｋＤａ基因重组蛋白（ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ）抗日本血吸虫生殖作用及其免疫机制。方法：小鼠经ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫,攻击感染日本血吸虫尾蚴４０±１条,于６ｗｋ后解剖检虫体,计算虫数与肝组织和脾组织内的虫卵数,并对虫体主要生殖器官作透射电镜超微结构的观察。结果：证明ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ具有明确的抗生殖免疫作用。与对照组相比,免疫鼠减虫率为３０．０％,肝组织和脾组织内虫卵减少率分别为５７．１％与７９．９％,透射电镜观察显示免疫鼠体内雌虫的卵黄腺及雄虫的睾丸组织均产生不同程度的抑制作用,主要表现为卵黄细胞胞质中卵黄球、卵黄滴、脂滴和睾丸组织中精细胞、支持细胞胞质中的脂滴数量均有明显减少。结论：ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ有抗日本血吸虫生殖的作用,使虫体生殖器官受到损害     

瑞香素类抗疟化合物的筛选及其靶分子研究

目的 通过体外试验和鼠疟动物模型筛选瑞香素结构衍生物的抗疟作用,确定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫抗疟作用的靶分子.主要研究内容及方法 (1)在瑞香素基本结构的基础上设计并合成瑞香素的结构衍生物;(2)通过光学显微镜镜检和微量荧光法两种体外筛选系统筛检瑞香素类衍生物对恶性疟原虫的体外抗疟作用;(3)对体外筛检抗疟活性高的化合物,采用WHO推荐的四天抑制试验测定其对鼠伯氏疟原虫(ANKA株)的抗疟作用;(4)以电子自旋共振法测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫核糖核酸还原酶(ribonucleotide reductase,RNR)活性的影响;(5)采用紫外分光光度法测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫细胞色素C氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)活性的影响;(6)对体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素、DA78与DA79作用后,抽提总RNA,并合成相应的特异性引物,运用实时荧光PCR法测定瑞香素类抗疟化合物对恶性疟原虫的重要生物功能酶,如RNR、超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,L,DH)等基因表达的影响.结果 (1)在瑞香素结构的基础上,通过对7、8位羟基或相邻位点的修饰,共合成32种瑞香素结构衍生物.(2)通过体外筛选系统筛选出DA78与DA79两种新型的瑞香素类抗疟化合物,两者的IC50分别为7.6μmol/L、1.4μmoL/L,其体外抗疟活性与瑞香素的差别无统计学意义(P＞0.05);体内试验按D4减虫率评价,瑞香素、DA78与DA79灌胃给药在鼠伯氏疟原虫ANKA株感染小鼠中,DA79在1、10、50、75 ms/(kg·d)×4 d组与对照组1%西黄蓍胶相比较差异有统计学意义(P＜0.01),而DA78在50或75 mg/(kg·d)×4 d的抗疟作用与对照组相比较差异有统计学意义(P＜0.05);另外DA79在10或75 mg/(kg·d)×4 d的抗疟效果要优于同剂量的瑞香素(P＞0.05).(3)体外同步培养的恶性疟原虫经100μmol/L瑞香素2、4、8和12 h作用后,COX活性依次下降了0、6%、、73%和80%,在瑞香素浓度为100 nmoi/L、lμmoL/L、100 μmol/L与l mmol/L作用6 h后,COX活性依次下降了3%、31%、53%和84%(n=3),其活性随着瑞香素浓度的增高基本成线性降低,而当瑞香素的铁鳌合能力饱和后对COX活性的影响几乎消失;100 μmol/L DA78与DA79作用2、4、8和12 h后,COX的活性依次下降了0、2%、11%、9%与7%、13%、17%、32%,在DA78、DA79浓度为100 nmol/L、1 μmol/L、100 μmol/L与1 mmol/L作用6 h后,COX活性依次下降了0、0、4%、13%与1%、4%、15%、29%,其活性随着DA78或DA79浓度的增高基本成线性降低,其中DA79对COX的抑制作用高于DA78,但两者均低于瑞香素对COX的作用(n=3,P＜0.01).(4)体外同步培养的恶性疟原虫经瑞香素、DA78与DA79作用后.以电子自旋共振法测定不同时间恶性疟原虫酪氨酸的量以反映RNR的活性,经100 μmol/L瑞香素作用1、2、3和4 h后,相对于对照组的值RNR的活性依次为其值的93%、49%、31%和25%,在瑞香素浓度为100 nmol/L、1 μmol/L、100 Vanol/L与1 mmoL/L作用6 h后,相对于对照组的值RNR的活性依次为其值的97%、69%、42%和7%;RNR的活性随着瑞香素浓度的增高而降低,但并非呈线性相关.当瑞香索铁鳌合能力饱和后,恶性疟原虫RNR活性几乎未受影响(n=3,P＞0.05).经100μmot/L DA78与DA79作用1、2、3和4 h后,相对于对照组的值恶性疟原虫RNR的活性依次为其值的98%、96%、87%、71%与93%、44%、41%、23%,DA79对RNR活性的抑制作用高于同剂量相同作用时间DA78的作用(n=3,P＞0.01),DA79与瑞香素在体外对恶性疟原虫RNR抑制作用的差别无统计学意义(n=3,P＞0.05);在DA78与DA79浓度为100 nmol/L、1μmol/L、100μmol/L与1 mmol/L.,作用6 h后,相对于对照组的值RNR的活性依次为其值的100%、92%、64%、61%与97%、48%、25%、4%,DA79对RNR活性的抑制作用高于同剂量DA78的作用(n=3,P＜0.01),并且高于同剂量瑞香素对RNR活性的抑制作用(n=3,P＜0.05).(5)恶性疟原虫体外经瑞香素、DA78与DA79作用后,LDH、SOD与RNR 3种基因扩增的标准曲线,在105～109 copies/ml范围内标准曲线呈良好的线性关系,其基因扩增产物的标准曲线的r2依次为0.9907、0.9983、0.9975.根据标准曲线计算各组样品3种基因的原始拷贝数来比较各组3种基因表达量的差异,不同处理组对恶性疟原虫LDH基因的表达无显著性抑制作用(n=3,P＞0.05),而且各组间差异无统计学意义(n=3,P＞0.05);瑞香素、DA78与DA79对恶性疟原虫RNR基因的表达均有抑制作用;只有瑞香素对恶性疟原虫SOD基因表达产生抑制作用,其他各组无显著性抑制作用;但瑞香素的铁螯合能力饱和后,对上述3种基因的表达均未产生显著性抑制作用(n=3,P＞0.05).结论以DA78与DA79为代表的瑞香素类衍生物作为一类新型的抗疟化合物,在体外和体内试验中均显示出一定的抗疟活性;RNR很可能作为瑞香素类抗疟化合物抗疟作用的靶分子.本研究首次发现两种瑞香素结构衍生物DA78与DA79具有与瑞香素同一水平的抗疟活性,为寻求更有效的抗疟化合物提供了方向,并利用分子生物学方法对瑞香素抗疟化合物抗疟作用的靶分子进行了筛选与研究,初步确定了RNR作为瑞香素类抗疟化合物抗疟作用的靶标,为今后瑞香素类抗疟药物的进一步开发提供了理论依据.     

Cellular membrane fluidity measurement by fluorescence polarization in indomethacin-induced gastric cellular injury in vitro

Background Gastric complications of indomethacin involve generation of reactive oxygen species, which induce gastric mucosal injury via lipid peroxidation of cell membranes. Peroxidation by reactive oxygen species alters the amounts of unsaturated fatty acids in the cell membrane and thus affects membrane fluidity. Indomethacin-induced lipid peroxidation can thus be detected by measuring cellular membrane fluidity by the fluorescence polarization (FP) method. The aim of this study was to elucidate the usefulness of the FP method for detecting indomethacin-induced gastric cellular injury in RGM-1 cells. Methods Indomethacin-treated RGM-1 cells were investigated by conventional cytotoxicity assay, fluorometry of diphenyl-1-pyrenylphosphine (DPPP) to detect lipid peroxidation, and FP. The effects of both a radical scavenger and an initiator on membrane fluidity change (MFC) in RGM-1 cells were examined. The sensitivity of FP in detecting cellular injury was compared with those of DPPP fluorometry and conventional cytotoxicity measurements. Results Indomethacin caused an increase in MFC as determined by FP before cytotoxicity was detected by conventional methods. The increase in MFC was associated with increased membrane phospholipid peroxidation (MPP) but not with a prostaglandin deficiency, and the increases in both MFC and MPP were prevented by vitamin E. Conclusions The FP method is potentially useful for detecting cellular injury in vitro.