多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的 了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据.方法 用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶.结果 50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性.结论 本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染.     

重症监护病房铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与耐药特征分析

目的了解上海市长宁区中心医院重症监护病房铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出78株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果 78株铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)5株(6.4%)、产碳青酶烯酶(AmpC)31株(39.7%),17株同时产ESBLs和AmpC(21.8%),金属酶筛选出12株(15.4%)阳性。结论该院铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmPC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

三维试验检测耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶

目的了解耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶的现状。方法采用K-B法进行药敏试验,筛选耐头孢他啶的铜绿假单胞菌,采用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶。结果 65株临床分离耐头孢他啶铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)30株(46.2%),AmpC酶4株(6.2%),同时产ESBLs和AmpC酶10株(15.4%),同时产金属酶和产ESBLs 15株(23.1%),同时产AmpC酶和金属酶2株(3.1%)。结论益阳市第三人民医院铜绿假单胞以产ESBLs为主,其次为AmpC酶和金属酶。     

铜绿假单胞菌的临床分布及β-内酰胺酶耐药表型研究

目的了解医院分离铜绿假单胞菌院内感染临床分布、产酶情况及其耐药性。方法采用手工法及法国生物梅里埃鉴定系统对菌种进行鉴定,用琼脂扩散法进行药敏试验,采用双纸片扩散法、三维试验、协同法分别对细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、β-内酰胺酶(AmpC酶)、金属酶进行检测。结果铜绿假单胞菌分布于呼吸科、ICU、外科,其中呼吸科和ICU检出率最高,分别占总分离菌株的50.7%和18.7%;临床标本以痰标本为主,分离率为80.6%,其次是脓汁和伤口分泌物;产AmpC酶71株,单产ESBLs酶27株,产金属酶16株,其中同时产ESBLs和AmpC酶菌株17株,产AmpC酶菌株检出率最高。结论多重耐药铜绿假单胞菌以产AmpC酶为主,临床治疗应合理用药,减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及分析

目的对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行检测分析。方法采用K—B法或MIC法进行药物敏感试验筛选多重耐药铜绿假单胞菌：再进行改良三维试验．对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行分析。结果在93株多重耐药铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）有16株（17．20％），8株高产AmpCβ-内酰胺酶（8．60％），6株为金属β-内酰胺酶（MBL）（6．45％），有2株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶（2．15％），2株菌（2．15％）可能产丝氨酸碳青霉烯酶或有胞壁屏障。总产酶率为36．56％。结论产β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一．研究铜绿假单胞菌β-内酰胺酶，正确认识它的耐药机制，有助于了解和控制医院内感染以及医院内耐药基因的播散和流行。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶的检测及分析

目的对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行检测分析。方法采用K—B法或MIC法进行药物敏感试验筛选多重耐药铜绿假单胞菌：再进行改良三维试验．对多重耐药铜绿假单胞菌所产β-内酰胺酶进行分析。结果在93株多重耐药铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）有16株（17．20％），8株高产AmpCβ-内酰胺酶（8．60％），6株为金属β-内酰胺酶（MBL）（6．45％），有2株同时产ESBLs和AmpCβ-内酰胺酶（2．15％），2株菌（2．15％）可能产丝氨酸碳青霉烯酶或有胞壁屏障。总产酶率为36．56％。结论产β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一．研究铜绿假单胞菌β-内酰胺酶，正确认识它的耐药机制，有助于了解和控制医院内感染以及医院内耐药基因的播散和流行。     

多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

[目的]探讨医院感染多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性及耐药表型.[方法]对本院2009年10月至2010年10月临床检出菌,用天地人200B系统鉴定及药敏分析,并用三维法对分离的铜绿假单胞菌进行AmpC酶检测,同时用双纸片法进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测.[结果]共检出铜绿假单胞菌64株,其中检出AmpC阳性菌株18株,产酶率为28.13%;产ESBLs菌株16株,产酶率为25.00%;产AmpC＋ESBLs菌株8株,产酶率为12.50%.在14种抗生素中,耐药率最低的是亚胺培南.[结论]住院病人免疫力低下的患者是铜绿假单胞菌的易感人群.亚胺培南是治疗感染多重耐药铜绿假单胞菌的有效药物.     

某医院下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌耐药性分析

目的了解临床下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌对13种抗菌药物的耐药性、以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头胞菌素酶（AmpC酶）及金属β-内酰胺酶情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法选择该院2007-2012年480株下呼吸道标本中分离出的铜绿假单胞菌,菌株鉴定采用法国梅里埃API鉴定系统进行。药敏试验按K-B纸片琼脂扩散法操作并判断结果。采用三维试验法检测铜绿假单胞菌中的ESBLs和AmpC酶,双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶。结果从480株铜绿假单胞菌中检出产ESBLs、AmpC及金属β-内酰胺酶189株,总检出率39.4%。铜绿假单胞菌对妥布霉素、哌拉西林-三唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星显示较好的敏感度,对头孢曲松、头孢替坦、头孢唑林高度耐药。结论应重视铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC和金属β-内酰胺酶检测;对于该菌引起的呼吸道感染宜采用哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶联合氨基甙类或喹诺酮类抗菌药物治疗。     

三维试验检测革兰阴性杆菌ESBLs及AmpC酶

目的了解革兰阴性杆菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、染色体头孢菌素酶(AmpC)的分布及分离率。方法准确鉴定菌株,采用底物为头孢噻肟的三维试验,测定菌株中ESBLs及AmpC酶。结果临床分离175株革兰阴性杆菌中产ESBLs 49株,阳性率28.0%,包括阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、克雷伯菌属、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和弗劳地枸橼酸菌。产AmpC酶22株,阳性率12.6%,包括阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、产酸克雷伯菌。其中阴沟肠杆菌产ESBLs及AmpC酶分离率均居首位(分别为55.6%、33.3%)。3株铜绿假单胞菌同时产AmpC酶和ESBLs。结论我院产ESBLs菌以阴沟肠杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主。产AmpC酶以阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主。超超广谱β-内酰胺酶(SSBLs)菌株在医院有流行。     

医院感染铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的研究医院感染铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型分布。方法用聚合酶链反应(PCR)对68株医院感染铜绿假单胞菌的SHV、TEM、CTX-M、OXA-10、VEB和PER等基因进行扩增和序列测定。结果68株医院感染铜绿假单胞菌中,检出26株产OXA-10群ESBLs,检出率为38.23%(26/68);其中1株既产OXA-10群ESBLs又产TEM型广谱β-内酰胺酶;其余基因型未检出。经序列测定为OXA-10-like基因和TEM-1基因。结论医院感染铜绿假单胞菌所产的ESBLs主要为OXA-10群,且为多重耐药菌株。     

医院感染铜绿假单胞菌多重耐药机制的研究

目的了解近3年医院感染铜绿假单胞菌的耐药表型、产酶情况及Ⅰ类整合子在耐药基因播散中所起的作用。方法采用平皿二倍稀释法检测MIC；改良三维法对β内酰胺酶进行分析；应用PCR技术检测Ⅰ类整合子，并通过测序分析其所携带耐药基因。结果铜绿假单胞菌对多种抗菌药物耐药率不断上升，细菌可产生多种β内酰胺酶，Ⅰ类整合子阳性率为42．4％，所携带耐药基因包括aadB，aadA2，aac6-Ⅱ和PSE-1。结论多重耐药铜绿假单胞菌比例不断上升．这与细菌可产生多种β内酰胺酶及整合子可介导耐药基因横向播散相关，临床医师务必根据药物敏感试验和本单位耐药监测情况合理选择抗菌药物，以减少多重耐药菌的发生和发展。     

铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶、质粒介导AmpC酶基因分布及流行特征分析

目的研究临床分离铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒介导AmpC酶的基因分布及流行特性,为细菌耐药性的监控提供依据。方法回顾性调查5年间临床分离的铜绿假单胞菌的分布和耐药情况。选取每年同一时间段的临床连续分离株共169株,用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、VEB、PER、GES、TLA、IBC、CTX-M、OXA等β-内酰胺酶基因和AmpC酶基因。使用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析菌株间的同源性。结果铜绿假单胞菌主要分离自呼吸道(痰标本),占75.7%;对复方磺胺甲噁唑和头孢曲松耐药情况严重,耐药率分别为91.9%和91.7%;对其他主要抗菌药物的耐药率分别为头孢他啶46.7%、亚胺培南38.2%、左旋氧氟沙星30.2%、环丙沙星28.3%、阿米卡星5.0%。169株铜绿假单胞菌中产TEM、CTX-M、OXA和GES型β-内酰胺酶菌株84株(49.7%);质粒介导AmpC酶23株(13.6%)。PFGE结果显示铜绿假单胞菌仅3株具有同源性,呈散发流行。结论铜绿假单胞菌临床感染率高,呈多重耐药且散发流行趋势。     

多重耐药绿脓假单胞菌中I类整合子的研究

目的 探讨整合子介导耐药在多重耐药绿脓假单胞菌中所起的作用。方法 采用纸片扩散法进行药物敏感试验，筛选多重耐药绿脓假单胞菌；应用三维试验法区别β内酰胺酶型别；采用聚合酶链反应（PCR）技术检测耐药菌中的整合子基因，并应用DNA测序研究整合子内携带的耐药基因。结果 多重耐药绿脓假单胞菌中整合子检出率为42．4％，所检出整合子共有3种长度即750、1000、2500bp，它们分别携带了aadB、aadA2、aadB、aac6-Ⅱ和PSE-1基因。结论 整合子参与是形成绿脓假单胞菌多重耐药的重要因素。     

314株铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的分布及多药耐药性分析

目的了解我院2012年铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）在感染中的流行情况及耐药特征,为临床合理使用抗生素提供实验室依据。方法细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK2-compact的GN鉴定卡;药敏试验采用K-B扩散法;双纸片增效法检测ESBLs;头孢西丁三维实验法检测AmpC酶;应用Whonet5.4、SPSS13.0软件进行统计分析。结果在2113份阳性标本中分离出铜绿假单胞菌314株为14.9%,其中呼吸道标本的阳性率最高为78.0%,以呼吸内科、老年病科及ICU病房检出率为主,分别为22.6%、19.4%、18.5%。单产AmpC酶、单产ESBLs及同时产AmpC酶＋ESBLs的铜绿假单胞菌分别为81株、56株、56株,其中ICU产酶率最高,其次为呼吸内科及老年病科,产酶率分别占79.3%、71.8%、70.5%。铜绿假单胞菌对美罗培南,阿米卡星及亚胺培南耐药性最低,分别为15.3%、19.7%、25.8%。结论产酶的铜绿假单胞菌多药耐药严重,合理使用抗生素以减少耐药率。     

对肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的对临床分离肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶情况以及不同产酶模式进行耐药性分析。方法采用法国BioMerieux VITEK2 Compact全自动细菌鉴定仪对临床分离菌株进行鉴定及药敏检测。超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测，采用美国临床实验室标准化协会推荐的纸片表型确证试验。头孢菌素酶（AmpC）的检测，采用头孢西丁纸片琼脂法筛选，筛选阳性菌株再经改良三维试验确证为AmpC阳性菌株。结果137株肺炎克雷伯菌中ESBLs和AmpC的阳性率为37．2％和8．8％，其中ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌产AmpC的阳性率为58．3％。产ESBLs的菌株对头孢唑啉、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟及安曲南的耐药率均为100％，此外，AmpC阳性菌株对头孢替坦的耐药率为41．7％。二者对亚胺培南及厄它培南耐药率最低，均为0％。结论β-内酰胺酶的产生是肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因，碳青霉烯类抗生素仍然是产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的有效抗生素。     

佳木斯地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌质粒介导头孢菌素酶、超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 了解佳木斯地区临床分离的大肠埃希菌和阴沟肠杆菌中质粒介导头孢菌素酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)流行情况及主要的基因型别.方法 127株临床分离无重复大肠埃希菌81株与阴沟肠杆菌46株,采用酶提取物三维实验检测产AmpC酶和ESBLs菌株,聚合酶链反应(PCR)扩增质粒型AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型.结果 46株阴沟肠杆菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占21.7％、28.3％、6.5％;81株大肠埃希菌中,单产AmpC酶者、单产ESBLs者、高产AmpC酶并产ESBLs者分别占19.8％、38.3％、9.9％.大肠埃希菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.阴沟肠杆菌ESBLs基因型为TEM、SHV、CTX-M,质粒AmpC酶基因型为DHA.结论 CTX-M型和DHA-1型分别是本地区大肠埃希菌和阴沟肠杆菌ESBLs和质粒介导AmpC酶的主要流行基因型.     

Extended-spectrum and metallo-beta-lactamases among ceftazidime-resistant Pseudomonas aeruginosa in Riyadh, Saudi Arabia

We investigated the extended-spectrum (ESBLs) and metallo-beta-lactamases (MBLs) among Pseudomonas aeruginosa isolates in Saudi Arabia. Disc susceptibility testing was performed on 200 P. aeruginosa isolates collected during 2010 at the Armed Forces Hospital in Riyadh, with MIC testing and phenotypic screening for ESBLs and MBLs carried out on those found to be ceftazidime resistant. Genes for ESBLs and MBLs were sought by PCR. Thirty-nine (19.5%) P. aeruginosa isolates were ceftazidime resistant, mostly with considerable resistance to other antibiotics except colistin. Twenty-three of these 39 (59%) appeared ESBL positive and 16 (41%) had MBLs. bla(VEB), and bla(GES) genes were found in 20 (86.95%), and 5 (21.74%) of 23 ESBL-positive isolates, respectively whilst bla(VIM) was detected in all 16 MBL-producers. bla(OXA-10-like) often accompanied bla(VEB), bla(VIM) or bla(GES). Several isolates had similar antibiogram and β-lactamase profiles, and may represent outbreaks; nevertheless, the collection was not dominated by any single clone. This dominance of acquired ceftazidime-inactivating beta-lactamases, often in combination is in contrast to the situation in Europe and the USA, where most ceftazidime resistance in P. aeruginosa is attributable to AmpC and efflux.