siRNA沉默RhoA治疗心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大的实验研究

目的观察应用小RNA干扰（siRNA）技术沉默RhoA对心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大的治疗效果。方法构建沉默RhoA mRNA表达的siRNA质粒,结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型。分梗死组（MI组）、空载质粒组和RhoA siRNA治疗组;术后21d,测定大鼠左室重量指数,心肌细胞横断面积,RT-PCR检测RhoA mRNA表达,Western-Blot检测RhoA蛋白表达水平,并行病理切片HE染色。结果术后21d,RhoAsiRNA治疗组大鼠心肌左室重量指数,心肌细胞表面积,RhoA mRNA表达水平以及RhoA蛋白表达水平较梗死组（MI组）、空载质粒组显著降低,且有统计学差异（P〈0.05）,与病理切片HE染色一致。结论靶向RhoA的siRNA技术通过对RhoA的有效沉默可明显减轻心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大发挥良好的治疗效果。     

辛伐他汀对心肌梗死大鼠心功能、心肌肌球蛋白重链与肌动蛋白的影响

目的:探讨3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂辛伐他汀对心肌梗死后心肌细胞内α-肌球蛋白重链(α-MHC),β-肌球蛋白重链(β-MHC)及骨骼肌α肌动蛋白(Sk α-actin)表达的影响.方法:结扎Wistar大鼠冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分为心肌梗死组(MI组)、辛伐他汀(Sim)20 mg组和40 mg组,另设假手术组(SH组).Sim组分别予20 mg/kg·d和40 mg/kg·d灌胃,MI组和Sham组以等量等浓度溶剂灌胃.8 wk后检测各组血流动力学指标,RT-PCR检测大鼠非梗死区心肌α-MHC和β-MHC mRNA表达,免疫组化法测定Sk α-actin表达.结果:MI组左室舒张末压高于SH组,左室收缩压低于SH组;两个Sim组左室舒张末压低于MI组,左室收缩压高于MI组.MI组α-MHC mRNA表达低于SH组,β-MHC mRNA表达高于SH组(均P＜0.01);两个Sim组α-MHC mRNA表达均高于MI组,β-MHC mRNA表达低于MI组(P＜0.01).Sk α-actin在SH组表达少,MI组表达明显增多,在两个Sim组中表达少于MI组.两个Sim组间无统计学差异.结论:辛伐他汀能减少心肌梗死后非梗死区心肌细胞内α-MHC基因mRNA表达,增加β-MHC基因mRNA表达,减少Sk α-actin表达,抑制心肌肥大,改进心脏功能.     

辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心肌白细胞介素-6表达的影响

目的:观察辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌组织白细胞介素- 6 (IL -6)基因及其蛋白表达的影响。方法:Wistar大鼠随机分 3组:辛伐他汀治疗组(MI- S组)、梗死对照组(MI C组)和假手术组 (Sham组 )。前2组大鼠结扎左冠状动脉前降支(LAD)制成AMI模型,MI S组给辛伐他汀 40mg/kg灌胃治疗,余 2组给予生理盐水灌胃。4周后,RT- PCR法和免疫组织化学法分别检测左心室梗死及非梗死区IL- 6mRNA和蛋白的表达,Westernblot法测定左心室非梗死区心肌IL- 6蛋白表达。结果:大鼠AMI后 4周,MI C和MI S组左心室梗死及非梗死区心肌IL- 6mRNA及蛋白表达均较Sham组明显升高(P<0. 05),MI S组IL- 6mRNA及蛋白表达均较MI C组低 (P<0. 05)。3组血脂差异无统计学意义。结论:辛伐他汀可减少AMI大鼠左心室心肌IL 6mRNA及蛋白表达,此改变不依赖其降脂作用。     

辛伐他汀对急性心肌梗死大鼠RhoA表达及心室重塑的影响

目的 在大鼠心肌梗死模型上,观察辛伐他汀是否下调小G蛋白RhoA mRNA及蛋白质表达,及其与改善大鼠心肌梗死后心室重塑和心脏功能的关系.方法 制备心肌梗死模型,予辛伐他汀干预.8周后,测定心脏质量指数、血流动力学指标、心肌RhoA mRNA及蛋白质表达,并与假手术组比较.结果 心肌梗死组较假手术组大鼠心脏质量指数升高、血流动力学恶化(P<0 01);心肌RhoA mRNA及蛋白质表达升高(P<0 01).辛伐他汀干预组较心肌梗死组心肌RhoA mRNA及蛋白质表达下降、心脏质量指数及血流动力学指标均改善(P<0 01).结论 辛伐他汀改善左室重塑和心功能,这可能与其在基因转录和蛋白质翻译水平抑制RhoA表达等综合作用有关.     

siRNA沉默NPY抑制心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大的实验研究

目的观察应用小RNA干扰（siRNA）技术沉默NPY对心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大的治疗效果。方法构建沉默NPYmRNA表达的siRNA质粒;结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型。分梗死组（MI组）、空载质粒组和NPYsiRNA治疗组;术后21d,测定大鼠左室重量指数,心肌细胞横断面积,RT-PCR检测NPYmRNA表达,Western-Blot检测NPY蛋白表达水平,并行病理切片HE染色。结果术后21d,NPYsiRNA治疗组大鼠心肌左室重量指数,心肌细胞表面积,NPYmRNA表达水平以及NPY蛋白表达水平较梗死组（MI组）、空载质粒组显著降低,且有统计学差异（P〈0.05）,与病理切片HE染色一致。结论 靶向NPY的siRNA技术通过对NPY的有效沉默可明显减轻心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大发挥良好的治疗效果。     

厄贝沙坦对大鼠梗死心肌PPAR-γ表达及心室重塑的影响

目的:检测过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ)在大鼠心肌梗死时心肌细胞中的表达水平,探讨厄贝沙坦逆转心室重塑的机制是否与PPAR-γ有关.方法:结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分成心肌梗死(Myocardial infarction,MI)组、厄贝沙坦(Irbesartan,Ire)组75 mg/(kg·d),另设假手术(Sham)组.6周后测定PPAR-γ mRNA及蛋白的表达情况,左室重量指数,心肌细胞横切面积,测定心肌胶原容积分数.结果:与假手术组比较,MI组大鼠心肌中PPAR一γmRNA及蛋白表达水平显著降低,左室重量指数增加,心肌细胞横截面积增加,非梗死区胶原沉积明显,胶原比例增加.Ire组心肌中PPAR-γmRNA及蛋白表达水平增高,左室重量指数降低,心肌细胞横截面积减少,非梗死区胶原沉积减少.结论:PPAR-γ在大鼠心肌梗死时心肌细胞中的表达下调;厄贝沙坦可能通过上调并激活PPAR-γ逆转心肌梗死后左室重塑.     

伊伐布雷定对心肌梗死大鼠心肌细胞Notch和 NF-κB信号通路的影响

目的:探讨伊伐布雷定(IVA)对心肌梗死大鼠心肌细胞Notch和NF-κB信号通路的影响。方法:采用结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型,将存活大鼠随机分为模型组(MI组,n=8)和治疗组(IVA组,n=8)。以相同部位穿线但不结扎冠状动脉左前降支的大鼠作为对照组(CON组,n=8)。IVA给药28 d。检测所有大鼠血流动力学和心功能指标:心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室内压最大上升和下降速率(±dp/dt);左室重量指数、左室截面直径和心肌梗死面积;RT-PCR检测大鼠心肌细胞Notch信号通路成分mRNA的表达水平(Notch-1、Dll-4、Hes-1);Western-blot检测DICD-1蛋白和P65蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK法。结果:MI组SBP、 DBP、MAP、LASP、LVEDP和±dp/dt均低于对照组(P<0.05);而IVA上述指标均高于MI组(P<0.05)。MI组左室重量指数和左室截面直径明显大于对照组(P<0.05),但小于IVA组(P<0.05)。MI组Notch-1 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),但低于IVA组(P<0.05)。3组Dll-4和Hes-1 mRNA表达水平的比较差异无统计学意义(P>0.05)。MI组心肌细胞NICD-1蛋白和P65蛋白表达水平明显高于CON组(P<0.05),但是低于IVA组(P<0.05)。结论:IVA可能通过Notch和NF-κB信号通路发挥改善心肌梗死大鼠心功能和抑制心室重构的作用。     

辛伐他汀对心肌梗死后心肌骨桥蛋白表达的影响及其与心室功能的相关性

目的 在大鼠心肌梗死模型上,观察辛伐他汀是否下调OPN mRNA及蛋白表达,及其与改善大鼠心肌梗死后心室重塑和心脏功能的关系.方法 制备MI模型,予辛伐他汀干预.分为3组:Sim组、MI组及假手术组.4周后分别测定左、右心室质量指数,血流动力学指标,HE染色观察心肌组织病理学改变,运用免疫组化、RT-PCR方法检测OP...     

培哚普利对心肌梗死大鼠左室重构和心肌组织osteopontin蛋白表达的影响

目的观察血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利对心肌梗死大鼠左室重构和心功能的影响,并探讨osteopontin蛋白在其中的作用。方法将成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组,心肌梗死盐水组和心肌梗死培哚普利组。后两组动物在冠状动脉左前降支结扎第2天起给予生理盐水或者培哚普利灌胃,1次/d。4周后测定有创左室血流动力学,超声心动图测量左室内径和射血分数,组织学方法检测非梗死区心肌细胞直径和胶原纤维沉积,Westernblot检测心肌组织osteopontin蛋白表达水平。结果与假手术组相比,所有心肌梗死大鼠(盐水组和培哚普利组)均出现显著的左室收缩和舒张功能障碍,表现为LVEF、LVSP和±dp/dtmax下降,LVEDP显著升高。同时左室重量与体质量比值升高,LVEEDD和LVESD增大,非梗死区心肌细胞横径增加,心肌间质胶原纤维沉积增加,提示显著的左室重构。与盐水组相比,培哚普利治疗显著改善心肌梗死大鼠心功能,预防左室扩大,减轻非梗死区心肌细胞肥大和心肌间质胶原纤维沉积。Westernblot未检测到osteopontin蛋白在假手术大鼠心肌组织表达,在心肌梗死大鼠心肌组织有大量osteopontin蛋白表达,该上调的蛋白能被培哚普利治疗显著抑制。结论培哚普利抑制心肌梗死大鼠左室重构,改善心功能,可能与其抑制osteopontin蛋白表达有关。     

辛伐他汀对大鼠心肌梗死后MMP-2,9 mRNA表达的影响

目的 :观察辛伐他汀对大鼠心肌梗死 (MI)后心肌基质金属蛋白酶 2 ,9(MMP 2 ,9)mRNA表达的影响。方法 :结扎大鼠左冠状动脉前降支 (LAD)制成急性心肌梗死模型 ,随机分为 3组 :分别为辛伐他汀干预组(MI S)、心肌梗死对照组 (MI C)和假手术组 (sham)。 4周后 ,RT PCR法检测左心室梗死区及非梗死区心肌MMP 2和MMP 9mRNA表达的情况。结果 :大鼠MI4周后左心室心肌MMP 2和MMP 9mRNA表达较假手术组明显升高 (P <0 .0 5 ) ,辛伐他汀组上述指标较梗死对照组显著降低 (P <0 .0 5 ) ,但仍高于假手术组 (P <0 0 5 ) ,三组血脂无显著性差异。结论 :辛伐他汀减少大鼠心肌梗死 4周后左心室心肌MMP 2和MMP 9mR NA表达 ,此改变不依赖其降脂作用。