多糖激活树突状细胞的免疫调节作用

树突状细胞(DC)是迄今所知的功能最强的抗原提呈细胞,是固有免疫和适应性免疫的桥梁和纽带,主要参与细胞免疫和T细胞依赖的体液免疫反应,在免疫反应中处于中心位置.多糖作为一种生物免疫应答调节剂,对DC功能的影响近年来有所报道,主要包括多糖对DC表面分子的表达、细胞因子的分泌、吞噬功能、抗肿瘤免疫、多糖受体以及信号转导途径等方面的调节作用.     

异基因间充质干细胞对T淋巴细胞的免疫调节作用

间充质干细胞(MSC)不仅具有多系分化潜能,而且具有免疫调节功能,对树突状细胞,T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞等多种免疫活性细胞的增殖、分化和功能发挥调节作用。近年来,有关MSC的免疫调节尤其对T淋巴细胞的调节作用研究颇受关注,现就近年来异基因MSC对细胞毒性T淋巴细胞、辅助性T细胞、Th17细胞和调节性T细胞的免疫调节作用进行综述。     

黄芪多糖对浆细胞样树突状细胞功能及成熟的影响

目的:通过体外实验研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cell,pDC)功能及成熟的影响,为进一步阐明黄芪多糖的免疫学活性提供依据。方法:从健康志愿者外周血分离单个核细胞,流式细胞仪分选pDC,加入0、50、100、200mg/L的黄芪多糖共孵育,24小时后收集上清液,应用酶联免疫吸附试验检测pDC分泌的IFN-α、TNF-α、IL-6量,5天后收集细胞,应用流式细胞仪检测树突状细胞(Dendritic cell,DC)表型CD11c、CD80、CD86阳性率、光镜观察DC的形态、扫描电镜观察DC的超微结构。结果:黄芪多糖显著提高pDC分泌的IFN-α、TNF-α、IL-6量,并且呈黄芪多糖浓度依赖性(P0.05);黄芪多糖可促进pDC向DC的分化和成熟,并呈黄芪多糖浓度依赖性(P0.05)。结论:黄芪多糖能够增强pDC的功能,并促进其向DC的分化和成熟。     

霍乱毒素B亚单位对树突状细胞成熟的影响

背景:已有实验证明,霍乱毒素可诱导树突状细胞成熟。霍乱毒素B为霍乱毒素的无毒亚单位,是一种良好的免疫佐剂和输送抗原载体,其是否能促进树突状细胞成熟至今尚未得到证实。目的:观察树突状细胞2.4的表型和功能变化,初步探讨霍乱毒素B对树突状细胞成熟的影响。方法:通过细胞培养增殖树突状细胞2.4。将树突状细胞分成5组:空白对照组:不进行任何处理;霍乱毒素B0.1,1.0,10mg/L组:分别在培养液中加入相应霍乱毒素B;阳性对照组:培养液中加入脂多糖,终浓度1mg/L。每组设6复孔。采用流式细胞术检测培养不同时间树突状细胞2.4细胞表面CD80,CD86,MHC-Ⅱ类分子的表达,并行体外混合淋巴细胞反应,MTT法观察树突状细胞对同种T细胞的刺激能力。结果与结论:10mg/L霍乱毒素B显著增强树突状细胞表面分子(CD80,CD86和MHC-Ⅱ)的表达(P0.01),并显著提高树突状细胞对T细胞的激活能力(P0.01)。阳性对照组与空白组之间差异有显著性意义(P0.01)。结果显示霍乱毒素B能增强树突状细胞的活化与成熟,对其免疫学功能起正性调节作用。     

维甲酸对树突状细胞增殖及细胞骨架微丝的调节作用

目的观察药理剂量的全反式维甲酸对人单核细胞来源的树突状细胞增殖及细胞骨架微丝的调节作用。方法 rhGM-CSF1000U/mL、IL-4500U/mL诱导人外周血单核细胞向树突状细胞分化,在细胞分化过程中加入0.1μmol/L全反式维甲酸,相差显微镜下观察细胞的形态变化及集落形成,活细胞计数和MTT检测细胞的增殖。成熟树突状细胞经全反式维甲酸处理24h后,用FITC标记的鬼笔环肽检测细胞骨架微丝的形态和分布。结果细胞因子诱导的外周血单核细胞来源的树突状细胞具有典型的树枝状结构。在树突状细胞的分化过程中,全反式维甲酸作用组的树突状细胞的产量明显低于对照组(P0.05)。已经分化成熟的树突状细胞经维甲酸处理后细胞骨架微丝出现重排和分布不均。结论药理剂量的全反式维甲酸抑制树突状细胞的增殖和分化,并可能通过细胞骨架调节树突状细胞的功能。     

香菇多糖和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能调节的研究

目的:研究香菇和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:通过检测环磷酰胺免疫抑制模型小鼠的迟发型变态反应程度(DTH,足跖增厚法)、脏器指数、NK细胞活性(乳酸脱氢酶释放法)、淋巴细胞增殖能力(MTT试验)以及IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ水平变化(ELISA试剂盒)来评价香菇和黄芪多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果:实验表明,环磷酰胺能显著抑制正常小鼠DTH程度、NK细胞活性及细胞因子分泌水平(均为P<0.05);香菇和黄芪两种多糖能显著恢复DTH程度(P<0.05),极显著增高NK细胞包活性(P<0.01),同时能提高血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的含量。结论:香菇及黄芪多糖对免疫抑制小鼠具有显著的免疫功能恢复效果;香菇多糖的免疫调节效应明显优于黄芪多糖。     

乳凝集素对脐带血树突状细胞功能的调节作用

目的研究乳凝集素(lactadherin)对未成熟树突状细胞吞噬功能以及对成熟树突状细胞刺激初始T细胞增殖能力等方面的调节作用。方法 ficoll密度梯度离心法分离脐带血单个核细胞,加入细胞因子IL-4、GM-CSF、TNF-α(成熟组应用)诱导分化为树突状细胞(dendritic cell,DC),阳性对照组分别在第0天或第5天起加入lactadherin,各组均培养至第7天时收集细胞,流式细胞仪检测各组未成熟DC吞噬FITC-DEXTRAN的能力,MTT法检测各组成熟DC刺激初始T细胞增殖能力的变化。结果同时加入lactadherin诱导培养时,未成熟DC对抗原(FITC-DEXTRAN)的吞噬功能增强,在培养第0天时即加入lactadherin组培养完成后吞噬功能增强更为明显;成熟组DC刺激初始T细胞增殖的能力也较无lactadherin组明显增强(P<0.001),且以第5天加入组培养完成时刺激增殖作用更为显著。结论 lactadherin能够增强DC细胞的免疫功能,包括未成熟时的抗原吞噬摄取和成熟时刺激T细胞增殖,激活适应性免疫应答等。     

复方猪苓多糖对小鼠免疫功能的调节

目的 比较猪苓多糖单、方剂对机体的免疫调节作用,验证中药制剂增强机体免疫功能和拮抗肿瘤的正向调节作用。方法 本实验旨在观察猪苓多糖单、方剂对环磷酰胺免疫抑制效应的调节作用。通过检测小鼠淋巴细胞转化功能、ＮＫ细胞杀伤活性、Ｔ细胞亚群和ＩｇＧ水平等指标来比较。结果 复方猪苓多糖具有：（１）提高免疫功能低下小鼠Ｔ,Ｂ淋巴细胞转化能力;（２）增强免疫功能低下小鼠ＮＫ细胞杀伤肿瘤细胞的能力;（３）上调免疫功     

黄芪多糖诱导的树突状细胞增强CIK细胞的杀伤作用

目的:观察黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对树突状细胞(Dendritic cell,DC)抗原提呈功能的影响,并和同源CIK(Cytokine induced killer)细胞共培养,观察DC-CIK和黄芪多糖诱导DC-CIK细胞杀伤A549肺腺癌细胞的活性.方法:提取健康供血者的外周血单个核细胞(PBMC),常规诱导出DC与CIK细胞后,将其共培养,观察黄芪多糖对DC表型变化的影响,定量检测DC-CIK和黄芪多糖诱导DC-CIK细胞培养上清中的IFN-γ和IL-12;并用MTT法测定其体外细胞毒活性.结果:黄芪多糖能提高DC表面分子CD40、CD80、HLA-DR的表达,经黄芪多糖诱导的DC活化的CIK,对A549肺腺癌细胞的杀伤活性高于单纯DC-CIK细胞,差异显著(P＜0.05).结论:黄芪多糖能增强DC的抗原提呈功能,证实黄芪多糖诱导的DC能明显提高CIK对肿瘤细胞的杀伤活性,具有更广阔的应用前景.     

维生素D3及其类似物对人树突状细胞表达CSF-1及其受体的作用

目的 探讨维生素D3[1，25(OH)2D3]及其类似物抑制人树突状细胞分化，但保持细胞生存是否通过调节集落刺激因子(CSF-1)及其受体来实现。方法 在体外将人外周血单核细胞分化成树突状细胞。采用流式细胞术、RT-PCR和ELISA法分析1，25(OH)2D3及其类似物对树突状细胞表达和产生GSF-1及其受体的作用。结果 1，25(OH)2D3和他骨化醇(taealeitol)以剂量依赖的方式显著上调树突状细胞对CSF-1 mRNA的表达，并增高其蛋白分泌水平，而细胞表面CSF-1受体以及mRNA的表达均受到抑制。溶剂乙醇和24，25(OH)2D3对CSF-1及其受体均无调节作用。1，25(OH)2D3对树突状细胞表达GM-CSF受体mRNA无影响。结论 1，25(OH)2D3对树突状细胞分化的抑制与其特异性地调节CSF-l及其受体有关。     

雌二醇对人树突状细胞成熟和功能的影响

目的：研究雌二醇(17β-estradiol, E2)对人外周血来源树突状细胞(DCs)成熟和免疫学功能的影响。 方法： 在人外周血来源DC体外培养时加入两种浓度的E2 (10-7 mol/L和10-6 mol/L)处理，光镜和电镜下观察DCs的生成情况及形态变化，以流式细胞仪分析各组细胞的免疫表型，用ELISA方法测定其分泌的IL-12水平，［3H］-TdR掺入法检测体外混合淋巴细胞反应中DCs刺激同种反应性T细胞的增殖能力。 结果： 加入E2培养后, DCs树突状和膜面状伪足减少，表达低水平MHC-II分子和共刺激分子CD40、CD80和CD86，其分泌的IL-12水平明显下降，DCs刺激同种反应性T细胞的功能显著下降。 结论： E2抑制人外周血来源DC的成熟，对其免疫学功能具有负性调节作用。     

microRNA对免疫细胞的调节作用

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类可以直接作用于目的基因mRNA以调节相应功能蛋白的表达进而参与各种生理反应的小分子RNA,近年来受到广泛关注。本文主要综述了miRNA对免疫细胞的调节作用,包括造血干细胞、固有免疫细胞和适应性免疫细胞。miRNA不仅可以调节造血干细胞的发育,还可以调节巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞的发育和功能。此外,miRNA还能参与病毒感染、癌症、肿瘤和自身免疫性疾病的发生。     

抗原提呈细胞异质性的研究 建立对不同抗原提呈细胞有不同反应的T细胞杂交瘤

抗原提呈细胞是免疫反应中起始动和调节作用的细胞成分。已经发现能起抗原提呈作用的细胞包括巨噬细胞,树突状细胞,内皮细胞,B细胞以及星状细胞(Astrocye)等。本实验通过制备克     

肥大细胞与树突状细胞的相互作用

肥大细胞是速发型超敏反应的始动效应细胞 ,激活后释放多种炎症性介质和细胞因子 ,这些介质和细胞因子对于树突状细胞的分化成熟有促进作用。树突状细胞是诱发机体初级免疫应答 (包括超敏反应 )的主要细胞 ,在其分化成熟过程中产生大量细胞因子 ,对于肥大细胞增殖分化具有重要的调节作用。总之 ,肥大细胞和树突状细胞之间可能存在着某种相互作用机制。     

香菇茯苓银耳复合多糖对小鼠巨噬细胞功能的作用研究

目的：研究香菇茯苓银耳复合多糖对不同状态下巨噬细胞功能的调节作用。方法：将巨噬细胞株RAW264.7细胞分别与复合多糖（CP）、复合多糖联合LPS（CP+LPS）、复合多糖预孵育后联合LPS（Pre-CP+LPS）共孵育,采用荧光显微镜和流式细胞仪检测RAW264.7细胞吞噬荧光微球情况;采用Griess试剂检测RAW264.7细胞分泌NO水平;采用流式细胞术检测巨噬细胞表面活化标志物CD40、CD80和CD86的表达水平。结果：RAW264.7细胞与复合多糖共孵育条件下,复合多糖可以增强RAW264.7细胞对荧光微球的吞噬作用,且随着时间的延长愈加明显;复合多糖低浓度对RAW264.7细胞分泌NO无影响,当浓度达1 000 μg/ml时才能促进其显著分泌NO;复合多糖可以提高RAW264.7细胞CD40、CD80和CD86分子表达水平。在LPS刺激条件下,复合多糖联合LPS与复合多糖预孵育后联合LPS两种处理都可以减轻LPS导致的CD40、CD80和CD86活化标志过表达现象。结论：复合多糖对不同状态下巨噬细胞功能具有调节作用,即可以促进静息状态下巨噬细胞活化和吞噬作用,而对活化状态的巨噬细胞功能具有抑制作用。     

人外周血树突状细胞对LAK细胞杀伤活性的影响

从人外周血中分离出树突状细胞，体外观察了其对ＬＡＫ细胞活性的影响。发现：５×１０２～１×１０４／ｍｌ树突状细胞对ＬＡＫ细胞活性起增强作用，而５×１０４～１×１０５／ｍｌ树突状细胞却抑制ＬＡＫ杀伤活性。这说明人外周血树突状细胞对ＬＡＫ细胞活性起双相性调节作用。     

乳酸菌Z222产胞外多糖(EPSⅠ)对免疫细胞功能的影响

目的　检测乳酸菌Z2 2 2 产胞外多糖EPSⅠ对体外免疫细胞功能的调节作用。方法　不同浓度的EPSⅠ作用于小鼠的腹腔巨噬细胞和脾细胞 ,分别用中性红染色法检测巨噬细胞的吞噬能力 ,用MTT法检测淋巴细胞在体外的转化能力、NK细胞杀伤肿瘤细胞Yac 1的能力和产细胞因子IL 2的活性。结果　 (1)EPSⅠ单独作用小鼠脾细胞就能促进体外淋巴细胞增殖 ,且表现出剂量依赖关系。EPSⅠ亦可促进ConA诱导的体外小鼠淋巴细胞转化。 (2 )EPSⅠ体外作用于小鼠腹腔巨噬细胞均可提高MΦ的吞噬能力 ,与对照组比较差异都有显著性。 (3)与对照组相比EPSⅠ能增加体外NK细胞的活性 ,杀伤率最大值达 6 2 .4 1%± 2 .5 4 %。 (4 )EPSⅠ使小鼠脾细胞产IL 2的能力与对照组比较 ,差异有显著性。结论　乳酸菌多糖EPSⅠ对小鼠的免疫功能有一定的调节作用。     

体外培养小鼠骨髓树突状细胞的扩增、鉴定及形态学观察

目的建立体外培养和扩增树突状细胞(dendritic cell-DC)的方法,并进行形态学观察。方法在无菌条件下提取BALB/c小鼠骨髓细胞,分离单个核细胞,以小鼠重组粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL-4)协同诱导下培养,免疫组织化学染色、光镜和电镜下观察树突状细胞的形态。结果体外培养2周后小鼠树突状细胞可达70%~80%,光镜下可见典型的树突状细胞形态,S-100蛋白染色均呈阳性。电镜下,培养的细胞具有典型树突状细胞的形态特征,细胞功能活跃。结论体外大量培养和扩增小鼠骨髓树突状细胞,具有典型的树突状细胞的形态,为研究树突状细胞的功能和表型以及抗肿瘤作用提供体外实验材料。     

HTA-HSP70BCG对小鼠骨髓树突状细胞的冲击作用

目的 :用榄香烯复合瘤苗抗原 卡介苗热休克蛋白复合物 (HTA HSP70 BCG)冲击正常小鼠骨髓树突状细胞 ,检测其抗原递呈功能。方法 :用HTA HSP70 BCG刺激 ,并与GM CSM和IL 4联合培养的骨髓树突状细胞 ,用MTT法测增殖活性 ,用透射电镜检查形态学改变 ,用流式细胞仪检测FITC labeleddextran的摄取。结果 :与单用HTA或HSP70 BCG刺激的树突状细胞相比 ,HTA HSP70 BCG刺激的树突状细胞增殖指数明显增大 (2 10 7± 0 0 13) ,对脾不粘附细胞的激活作用明显增强 (增殖指数为 1 92 7±0 0 73) ,FITC labeleddextran摄取率明显增高 (达 5 8 6 1% ) ,形态上更趋于成熟。结论 :HTA HSP70 BCG 对树突状细胞具有较强的冲激作用 ,增强其抗原递呈功能。     

猪苓多糖刺激/诱导小鼠树突状细胞成熟

研究猪苓多糖对小鼠骨髓树突状细胞(DC)表型及功能成熟的影响。从小鼠骨髓中分离单个核细胞(MNC),用rmGM-CSF、IL-4培养5 d后,实验组加入猪苓多糖(50μg/ml),空白对照组加等量RPMI 1640,阳性对照组加LPS(1μg/ml),3组分别同时作用48 h。扫描电镜观察其体外培养过程中的形态特征,流式细胞仪(FACS)分析其表型特征,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其功能。用猪苓多糖刺激的小鼠骨髓MNC具典型的DC形态;细胞表达I-A/I-E、CD11c和分泌IL-12能力比空白对照组增加,具有极强的激发MLR的能力,显示成熟DC的特征。猪苓多糖可以促进体外培养的小鼠骨髓DC的成熟,促进DC诱导的免疫应答启动。