肉桂提取物对粉尘螨杀灭的实验研究

目的研究肉桂(Cinnamomum cassia Presl)不同溶剂提取组分对室内粉尘螨(Dermatophagoides farinae)的杀灭活性。方法肉桂粉碎后以石油醚、乙酸乙酯、甲醇为提取剂,分别用索氏提取法、浸渍法提取肉桂的不同有效组分;以作用浓度和作用时间为变量,分别用直接接触法测试肉桂石油醚、乙酸乙酯、甲醇提取组分对粉尘螨的杀灭活性,用熏蒸法测试肉桂石油醚、乙酸乙酯提取组份对粉尘螨的杀灭活性。结果直接接触法测试肉桂不同组分对粉尘螨杀灭活性的结果显示作用24h时肉桂石油醚提取组分和乙酸乙酯提取组分的LD50分别为4.64μg/cm2和1.44μg/cm2,甲醇提取组分对粉尘螨则不具有显著杀灭活性;从作用时间上看,石油醚组分作用时间最短,乙酸乙酯组分次之;熏蒸法测试结果显示肉桂石油醚、乙酸乙酯提取组分使用剂量为6.09μg/cm2和9.75μg/cm2时作用24h后对粉尘螨的致死率即达到100%。结论本文研究结果表明肉桂的石油醚和乙酸乙酯提取组分对粉尘螨具有良好的杀灭活性,呈剂量、时间依赖性,且与作用方式直接相关。     

南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导HepG2细胞凋亡的实验研究

目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物对HepG2细胞增殖和诱导凋亡的机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖;使用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;采用分光光度计检测凋亡细胞胞浆caspase-3的活性变化。结果不同浓度的南蛇藤提取物能抑制HepG2细胞增殖,呈剂量效应和时间效应关系;药物作用24h时,其IC50为111.8μg/ml,作用48h时,其IC50为99.7μg/ml,作用72h时,其IC50为43.0μg/ml;药物干预24h时,HepG2细胞停滞在G0-G1期,并产生细胞凋亡亚二倍峰。在药物为15μg/ml、30μg/ml和60μg/ml时,细胞凋亡率分别为44.91%、31.95%和21.94%,与对照组比较,均有显著性差异（F=5.449,P〈0.05）;在药物浓度为30μg/ml、60μg/ml和120μg/ml并分别作用24h和48h时,Caspase-3活性逐渐增强。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物抑制HepG2细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用可能与其增强Caspase-3活性有关。     

南蛇藤乙酸乙酯提取物通过活化caspase依赖的线粒体通路诱导HepG2细胞凋亡

目的通过检测南蛇藤乙酸乙酯提取物在诱导肝癌细胞HepG2凋亡过程中产生的凋亡蛋白表达量探讨其凋亡途径。方法应用Annexin V-FITC与碘化丙啶(promide iodine,PI)双染色法,通过流式细胞技术检测不同浓度(15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml和240μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物)干预HepG2细胞24小时后的细胞凋亡情况;应用蛋白质印迹法检测不同浓度(30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml)南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞24小时及60μg/ml和120μg/ml南蛇藤乙酸乙酯提取物作用HepG2细胞48小时后细胞中细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9(cleaved caspase-9)和胱冬蛋白酶3(caspase-3)的表达。结果当南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度为15μg/ml、30μg/ml和60μg/ml时,可诱导HepG2细胞出现细胞凋亡,且细胞色素c、裂解的胱冬蛋白原9和caspase-3的表达量增加;随南蛇藤提取物浓度的增加(30μg/ml、60μg/ml及120μg/ml),蛋白表达亦增强。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可能是通过促使膜间蛋白细胞色素c表达和释放活化caspase-9与caspase-3而诱导HepG2细胞的凋亡。     

藏荆芥不同溶剂提取物清除DPPH活性的研究

目的通过DPPH自由基清除实验研究藏荆芥提取物的体外抗氧化活性。方法将藏荆芥提取物依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇进行萃取,各组分都配制成适当稀释倍数的溶液,采用DPPH法测定各组分的抗氧化活性,并计算各组分的IC50。结果藏荆芥二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、正丁醇、石油醚提取部分都具有明显清除DPPH自由基的作用。结论藏荆芥提取物对DPPH自由基的清除率与样品浓度存在较明显的量效关系,藏荆芥具有较强的抗氧化能力。     

光枝勾儿茶提取物的抗氧化活性

目的 探讨光枝勾儿茶提取物的抗氧化活性.方法 采用80%乙醇进行回流提取,其中醇提浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取.分别考察光枝勾儿茶各提取物对羟基自由基 (·OH)、二苯代苦味基肼自由基(DPPH·)的清除率以及对Fe3+的还原力.结果 与抗坏血酸(Vc)比较,光枝勾儿茶提取物对自由基均有较强清除作用,对·OH的清除率Vc>乙酸乙酯萃取物>石油醚萃取物>正丁醇萃取物>水层部分,半清除率浓度(IC50,mg/ml)分别为0.061、0.099、0.344、0.770、1.709;对DPPH·的清除率Vc>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物>水层部分>石油醚萃取物,其半清除率浓度(IC50,mg/ml)分别为0.004 6、0.011 1、0.019 2、0.028 3、0.058 6.不同提取物对Fe3+有较强还原能力,还原力大小为:Vc>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>石油醚萃取物>水层部分.结论 光枝勾儿茶具有明显的抗氧化活性,在抗衰老方面有广泛应用前景.     

吡喹酮和阿苯达唑对细粒棘球蚴原头节超微结构的影响

体外培养试验证明,吡喹酮对细粒棘球蚴原头节(以下简称原头节)具有较强的杀灭作用,而阿苯达唑的则较差和缓慢。本文系报道用透射电镜观察此2种药物对原头节超微结构的影响。结果表明,体外培养的原头节经吡喹酮1μg/ml作用1h即见少数原头节的皮层细胞核染色质有集聚,胞浆内有空泡变化;集合管扩     

桦褐孔菌的不同提取物对胃癌BGC-823细胞株生长抑制作用的体外观察

目的 研究桦褐孔菌不同提取物对人胃癌BGC-823细胞株生长的抑制作用.方法 制备桦褐孔菌水提取物、石油醚提取物(醚提物)、乙酸乙酯提取物(酯提物)后,采用MTT法,测定3种提取物作用下的胃癌BGC-823细胞株生长的抑制作用.结果 桦褐孔菌水提取物、醚提取物、酯提取物对胃癌BGC-823细胞株的生长均有抑制作用,终浓度在80 g/ml、48 h,体外最大抑制率分别达到51％、60％、62％.结论 桦褐孔菌的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物对人胃癌BGC-823细胞株生长抑制作用高于水提取物.     

楮实提取物体外抗氧化活性的研究

目的 探讨楮实提取物的体外抗氧化活性.方法 先用80%乙醇,然后用蒸馏水对楮实进行提取.其中醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,水提部分经醇沉、干燥后得到楮实粗多糖.运用羟基(·OH)自由基体系、二苯代苦味基肼(DPPH·)自由基体系和对Fe~(3+)的还原能力实验,比较楮实各提取物的抗氧化活性.结果 楮实提取物对·OH自由基和DPPH·自由基均有较好的清除作用,其中总醇提取物对·OH自由基的清除能力最强,其IC_(50)值为0.28 mg/ml;乙酸乙酯提取物对DPPH·自由基的清除效果最好,其IC_(50)值达到0.08 mg/ml;各提取物对Fe~(3+)均有较强的还原能力,乙酸乙酯提取物还原效果最为明显.结论 楮实提取物具有一定的抗氧化活性,在抗衰老方面有广泛的应用前景.     

仙茅提取物体外抗氧化活性研究

目的 探讨仙茅提取物的抗氧化活性.方法 先用80%乙醇,然后用蒸馏水对仙茅进行提取,其中醇提浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取;水提部分经醇沉,制备仙茅粗多糖.分别观察仙茅各提取物对羟基自由基 (·OH)、1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH·)的清除率以及对Fe~(3+)还原力.结果 与抗坏血酸比较,仙茅提取物对自由基均有较强清除作用,对·OH的清除率乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>粗多糖>总醇提物,IC_(50)值分别为0.247、0.358、0.796和0.871 mg/ml;对DPPH·的清除率乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总醇萃取物>氯仿萃取物>石油醚萃取物>粗多糖,其IC_(50)值分别为0.026、0.055、0.620、0.071、0.122和0.275 mg/ml.不同提取物对Fe~(3+)有较强还原能力,还原力大小为:乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>总醇提物>氯仿萃取物>石油醚萃取物>粗多糖.结论 仙茅具有明显的抗氧化活性,在抗衰老方面有广泛的应用前景.     

去氢骆驼蓬碱体外诱导细粒棘球蚴原头节凋亡过程中caspase-3及抗氧化酶活性检测分析

目的观察不同浓度去氢骆驼蓬碱体外诱导细粒棘球蚴原头节生长凋亡过程中虫体活力、Caspase-3及相关抗氧化酶活性变化。方法将体外培养的细粒棘球蚴原头节分为空白对照组、溶剂组、阿苯达唑(ABZ)阳性对照组及不同浓度去氢骆驼蓬碱(25、50μmol/L)处理组进行体外干预试验,于48、96、144、192、240、288h后取样,经0.1%伊红染色后置于倒置显微镜下观察原头节活力。试验重复验证3次,绘制活力曲线图。用ELISA试剂盒检测作用48h、96h后各浓度组原头节caspase-3及抗氧化酶HO-1和NQO-1的活性变化。结果去氢骆驼蓬碱处理组从作用第48h开始原头节活力开始下降,培养至第240h时25μmol/L组原头节死亡率为97.9%,50μmol/L组原头节均死亡。ELISA法测定25、50μmol/L去氢骆驼蓬碱作用原头节48h后caspase-3活性分别为(32.776±8.437)ng/ml和(52.129±5.949)ng/ml,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05);ELISA法测定25、50μmol/L去氢骆驼蓬碱作用48、96h后原头节抗氧化酶HO-1和NQO-1活性分别为(0.563±0.031)ng/ml、(1.832±0.10)ng/ml和(0.425±0.011)ng/ml、(1.288±0.05)ng/ml,差异均有统计学意义(P0.05),且呈时间及剂量依赖性。结论去氢骆驼蓬碱能抑制体外培养的细粒棘球蚴原头节的生长,并能降低caspase-3及抗氧化酶活性,具体机制有待进一步研究。     

氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴效果的评价

目的观察氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴的效果。方法体外培养羊源细粒棘球蚴原头节和继发感染小鼠来源的生发层细胞,用浓度为1、2、4、8、10和20μg/ml的BTB3作用3 d后,分别采用美兰染色法和CCK-8法检测原头节和生发层细胞的活性。用扫描电镜观察10μg/ml BTB3对生发层细胞造成的损伤。体外培养细粒棘球蚴囊,用浓度为1、5和10μg/ml的BTB3作用2周后,观察其对囊的影响,并用扫描电镜观察囊内部结构的变化。结果 10μg/ml和20μg/ml BTB3组原头节的死亡率分别为(100.0±0.0)%和(85.2±7.2)%。但当浓度降低后,原头节死亡率均低于10%。生发层细胞经8、10和20μg/ml BTB3作用后,其细胞活性抑制率均达100%,其余低浓度BTB3组的抑制率随浓度的降低而降低。扫描电镜观察发现,BTB3可使生发层细胞发生脱落、皱缩以及空腔化。10μg/ml BTB3作用于棘球蚴囊14 d后,全部囊均出现塌陷。其超微结构显示,BTB3作用后棘球蚴内囊中出现了细胞脱落和不均匀的现象。结论 BTB3对体外培养的细粒棘球蚴原头节、生发层细胞和棘球蚴囊均有较强的作用,是一种潜在的抗棘球蚴药物。     

基于GC/MS技术的赤桉叶提取物灭螺谱-效关系动态分析

目的 目的 确定赤桉叶中主要GC/MS峰所代表的化学成分以及其对杀螺作用的贡献, 探索一条从天然产物中寻找有 效成分的快捷途径。方法 方法 在同一地点连续采集12个月的赤桉树叶, 并采用二氯甲烷提取; 利用GC/MS技术分析其化学 成分; 采用室内浸杀法进行杀螺药效实验并计算LC50; 利用灰色系统理论建模软件对12个月赤桉叶提取物的主要成分及 其相应提取物的杀螺活性作灰色关联分析。结果 结果 赤桉树叶的二氯甲烷提取物均表现出较好的杀螺活性, 尤以6月和7 月采集的样品杀螺作用最强, 其LC50分别为0.257 mg/L和0.242 mg/L, 而1月和12月的样品杀螺作用最弱, LC50分别为 6.802 mg/L和5.406 mg/L。GC/MS分析鉴定了16个主要化学成分, 多为单萜及倍半萜类化合物; 与杀螺活性的灰色相对关 联度均 > 0.5,其中5个成分的灰色关联度 > 0.9, 分别为4, 4, 8?三甲基 ［6.3.1.0 （1, 5）］ 三环十二烷?2, 9?二醇、 （?） ?桉油烯醇、 （?） ?桉油烯醇的同分异构体或类似物、 1, 8?桉叶油素、 喇叭茶醇。结论 结论 赤桉叶二氯甲烷提取物中多个成分与杀螺活性均 表现出了较好的关联度, 提示其杀灭钉螺作用可能是多种化学成分共同作用的结果。     

蒿甲醚体外抗多房棘球绦虫原头蚴作用研究

目的观察蒿甲醚体外抗多房棘球绦虫原头蚴作用,探讨治疗泡球蚴病新药物。方法将多房棘球绦虫原头蚴随机分为4组：蒿甲醚低剂量组（50μg/ml）,蒿甲醚高剂量组（100μg/ml）,阿苯达唑组（50μg/ml）,空白对照组。每组设2个平行组,每组约含3 000个原头节,分别置含10 ml DMEM培养液的培养瓶中,每天观察1次,取样滴于玻片,用0.03%美蓝染色,显微镜下计数原头蚴约200个,计算死亡率。直至该组原头蚴全部死亡时培养结束,并对原头蚴进行超微结构观察。结果蒿甲醚50μg/ml和100μg/ml组不同作用时间原头蚴死亡率与空白对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）;高、低剂量组原头蚴死亡率差异无统计学意义（P〉0.05）。培养至第9 d时,蒿甲醚高剂量组原头蚴死亡率达100%,蒿甲醚低剂量组原头蚴死亡率93.28%,阿苯达唑组原头蚴死亡率99.03%,空白对照组原头蚴死亡率78.83%。结论蒿甲醚具有体外抗多房棘球绦虫原头蚴作用,且呈剂量、时间依赖。     

白头翁提取物体外抗猪三毛滴虫作用研究

目的探讨白头翁4种提取物对猪三毛滴虫的杀灭效果,为临床用药提供依据。方法利用不同浓度白头翁4种提取物进行体外抗猪三毛滴虫试验,绘制虫体生长曲线,分析猪三毛滴虫对白头翁4种提取物的敏感性。结果白头翁4种提取物在0.312 5～5.0mg/ml浓度时均具有抑制或杀灭猪三毛滴虫的作用,且作用效果随着药物浓度的增加而增强。白头翁4种提取物抑杀猪三毛滴虫效果水浸膏>乙酸乙酯>正丁醇>皂苷。结论白头翁水浸膏和乙酸乙酯成分具有较强的抗猪三毛滴虫作用。     

南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导HepG2细胞凋亡的实验研究

目的探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导肝癌细胞Hep G2凋亡的作用。方法 Hoechst33342/PI染色后,在荧光显微镜下观察经南蛇藤乙酸乙酯提取物诱导的Hep G2细胞凋亡后细胞及细胞核的形态变化;应用琼脂糖凝胶电泳观察细胞晚期凋亡形成的"DNA梯带"。结果随着南蛇藤乙酸乙酯提取物浓度的增加,Hep G2细胞生长被抑制,凋亡细胞增多。同时,随着作用时间的延长,细胞凋亡的数量增多;30μg/ml的南蛇藤乙酸乙酯提取物作用细胞24 h后,可观察到明显的"DNA梯带"。随着南蛇藤乙酸乙酯提取物作用剂量的提高,DNA梯带更加明显。结论南蛇藤乙酸乙酯提取物可诱导Hep G2细胞凋亡,具有量效关系和时间依存性。     

雷公藤配伍金钱草抗肺癌增效作用的组成配比及其量效关系

目的考察雷公藤(LGT)配伍金钱草(JQC)体外抗人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增效作用的组成配比及其量效关系。方法将LGT与JQC按照不同质量配比(1/4、1/2、1/1、2/1、4/1)混合后,分别用水和75%乙醇回流提取,制备LGT/JQC饮片不同质量配比的提取物;采用体外MTT法检测LGT-JQC不同配比配伍提取物(200μg/ml)对人A549细胞增殖抑制的影响,确定LGT-JQC配伍增效作用的最佳组成配比;进一步采用体外MTT法检测最佳组成配比的提取物对人A549细胞增殖抑制作用的量效关系,计算其半数抑制浓度(IC50)。结果 LGT-JQC在质量配比2/1~4/1配伍的醇提物(200μg/ml)具有抑制NSCLC A549细胞增殖的增效作用(P0.05),且配比在2/1时增效作用最强(与配比4/1组比较,P0.01),而LGT-JQC配伍的水提物(200μg/ml)在既定配比下均无增效作用(P0.05);LGT-JQC配比在2/1(最佳配比)的醇提物,在浓度为50~400μg/ml范围内对A549细胞的增殖抑制呈现出良好的剂量依赖性关系,其IC50值为249.40μg/ml。结论 LGT-JQC配伍的醇提物对体外人小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制具有协同增效作用,二者组成配比应在2/1~4/1,尤以在2/1作用为佳;LGT-JQC配比为2/1的醇提物,在浓度为50~400μg/m L对A549细胞的增殖抑制具有良好的量效关系。     

中药牛至油、鸦胆子对人芽囊原虫的体外杀灭作用

目的通过观察牛至油、鸦胆子对人芽囊原虫的体外杀灭作用,筛选治疗人芽囊原虫感染有效药物及浓度。方法从腹泻患者新鲜粪便中分离人芽囊原虫,分别用含牛至油和鸦胆子1640培养基培养,药物设200、400、800、1600、3200和6400μg/ml组。于加药24h和72h作虫体计数,评价药物效果,试验设甲硝唑药物对照组和不加药空白对照组。结果牛至油1600、3200μg/ml作用72h、6400μg/ml作用24h,虫体全部死亡,最适杀虫体浓度为800μg/ml;鸦胆子6400μg/ml24h虫体全部死亡,最适杀虫浓度为1600～3200μg/ml;甲硝唑40μg/ml72h、≥80μg/ml24h虫体全部死亡。结论牛至油和鸦胆子具有体外杀灭人芽囊原虫作用。且牛至油的杀虫效果强于鸦胆子。     

高效液相法检测短果茴芹提取物降血压机制

目的探讨短果茴芹有效提取成分及降压的机制。方法采用高效液相色谱法,体外测定短果茴芹提取物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制作用。结果石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组的对血管紧张素转化酶抑制效果不明显;在药物浓度0.01-5 mg/ml的正丁醇提取物组和水提取物组对血管紧张素酶的抑制率均随药物浓度的增大而升高,但相同浓度的条件下,水提取物组的抑制率均略低于正丁醇提取物组,正丁醇和水提取物组的抑制率在3-5 mg/ml达到稳定,正丁醇提取物组和水提取物组的最高抑制率时的浓度为4 mg/ml时,最高抑制率分别为35%和30%。结论短果茴芹可能是通过抑制血管紧张素转化酶实现降压作用。     

护龈灵体外抑杀口腔毛滴虫的研究

以40%～80%5个浓度的乙醇作为溶剂提取护龈灵有效成份,获取40%、50%、60%、70%和80%护龈灵醇提浸膏。实验设40%～80%护龈灵醇提浸膏组、甲硝唑对照组和空白对照组。护龈灵醇提浸膏各组分别再设5个亚浓度组,分别于125μl对数生长期口腔毛滴虫悬液(2×105个/ml)中加入终浓度为6.25、12.5、25、50和100mg/ml的各浓度护龈灵醇提浸膏;甲硝唑组的终浓度为10μg/ml,每组4孔。作用12、24和48h后,采用显微镜计数法检测护龈灵体外杀灭口腔毛滴虫的效果。并采用噻唑蓝(MTT)法检测药物作用24h后各浓度护龈灵醇提浸膏组对口腔毛滴虫的杀灭效果。结果显示,各浓度护龈灵醇提浸膏随着药物浓度的增大或药物作用时间的延长,对口腔毛滴虫的杀灭作用增强。药物浓度为6.25和12.5mg/ml的60%护龈灵醇提浸膏的相对杀虫率,与相同浓度的40%、50%、70%和80%护龈灵醇提浸膏之间的差异有统计学意义(P0.01),提示护龈灵醇提浸膏在体外具有较强的杀灭口腔毛滴虫作用,其中以60%护龈灵醇提浸膏的作用最强。     

贯众中活性组分对金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

目的 分离贯众中活性组分,并研究其对老年肺部感染金黄色葡萄球菌的抑制作用.方法 采用pH3的95%乙醇进行回流提取,制成粗提液,并以石油醚、乙酸乙酯萃取,纸片法筛选活性部分,低压液相色谱做精分离,根据分离图谱的不同吸收峰位置来收集不同组分.采用三氯化铁+铁氰化钾多酚定性实验和Folin-酚法进行组分的总多酚定量,以液体试管稀释法测定不同组分对老年肺部感染患者痰中分离的金黄色葡萄球菌的抑制作用.结果 贯众95%乙醇粗提液和乙酸乙酯萃取部分都具有较强的抑制作用,将后者经低压液相色谱分离后共获得13个组分,组分2、3、4、8、9、11、12和13均具有较强的抑菌及杀菌作用,其组分13的抑菌作用最强,其MIC为4.29 μg/ml,MBC为8.58 μg/ml.结论 贯众经乙醇粗提并且乙酸乙酯萃取部分中含有多种活性组分,具有较强的抑制及杀灭金黄色葡球菌作用.