HMGB1在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)中的表达及临床意义。方法收集40例肾透明细胞癌、70例癌旁肾组织、20例正常肾组织标本,采用免疫组织化学二步法检测HMGB1的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果 HMGB1在正常肾组织、癌旁组织、RCCC中的阳性表达率逐渐升高(P<0.05);RCCC中,HMGB1阳性表达率在临床Ⅲ期、Ⅳ期高于Ⅰ期、Ⅱ期,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,肿瘤直径≥5cm组高于肿瘤直径<5cm组,肿瘤坏死组高于无坏死组(均P<0.05);其表达与年龄、性别、分化程度、肿瘤所在部位均无关(P>0.05)。结论 HMGB1蛋白的表达参与了RCCC的发生、发展,可以作为判断RCCC预后的分子指标。     

线粒体钙离子摄入蛋白1在肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨线粒体钙离子摄入蛋白1（mitochondrial calcium uptake 1,MICU1）在肾透明细胞癌（renal clear cell carcinoma,RCCC）组织中的表达及其临床意义。方法 以2016年1月—2018年12月于延安大学附属医院行根治性肾切除术的30例RCCC患者为研究对象。采用免疫组织化学法检测RCCC组织及癌旁正常组织中MICU1蛋白的表达。采用瞬时转染法分别将MICU1干涉片段和MICU1过表达质粒转染到CAKI-1细胞中（siMICU1组和MICU1组）,分别设置相应的阴性对照（siCtrl组和EV组）。采用Western blot检测蛋白表达,MTS实验和EdU实验检测细胞的增殖能力。收集TCGA数据库中517例RCCC组织转录组数据,分析MICU1 mRNA表达与RCCC患者临床病理特征及预后的关系。结果 MICU1蛋白在RCCC组织中表达水平低于癌旁正常组织（P<0.001）。成功构建过表达MICU1细胞和干涉MICU1细胞,MTS实验和EdU实验显示,MICU1组的细胞增殖能力低于EV组（P<0.05）,siMICU1组的细胞增殖能力高于siCtrl组（P<0.05）。TCGA数据库分析结果显示,MICU1表达与性别、TNM分期有关（P<0.05）;MICU1低表达患者生存率低于高表达患者（χ²=19.290,P＜0.001）;多因素Cox回归显示,MICU1低表达是影响RCCC患者总生存期的独立危险因素（HR=1.641, 95%CI：1.191~2.261,P=0.002）。结论　MICU1在RCCC组织中呈低表达,且可促进RCCC细胞增殖。     

ALDH1A1在肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨ALDH1A1(aldehyde dehydrogenase 1A1,ALDH1A1)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:应用免疫组化SP法检测95例ccRCC和23例正常肾组织石蜡中ALDH1A1蛋白的表达水平。Realtime PCR和Western Blot检测20例新鲜ccRCC及癌旁组织中ALDH1A1 mRNA和蛋白的表达量。结果:ccRCC石蜡组织中ALDH1A1表达高于正常肾组织,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。新鲜ccRCC组织中ALDH1A1 mRNA及蛋白的表达水平较癌旁正常肾组织显著升高。ALDH1A1表达与肿瘤大小、临床分期、血管侵袭及复发相关(P<0.05)。Log-rank分析进一步表明ALDH1A1高表达提示不良预后。结论:ALDH1A1的表达与ccRCC的生物学行为关系密切,可能为ccRCC的治疗提供新的靶点。     

AQP-1在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨水通道蛋白-1(AQP-1)在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测25例肾透明细胞癌组织和20例正常肾脏组织中AQP-1的表达情况。结果在肾透明细胞癌组织和正常肾脏组织中AQP-1阳性表达率分别为8.0%和100.0%,差异有统计学意义(P<0.05);在肾透明细胞癌组织中,毛细血管内皮细胞中AQP-1表达高于正常肾脏组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AQP-1的异常表达与肾透明细胞癌的发生及浸润转移有密切关系。     

TNFAIP3在透明细胞肾细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨TNFAIP3在透明细胞肾细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中的表达情况,并分析其表达与患者临床病理特征的相关性。方法:利用GEPIA2数据库分析TNFAIP3在ccRCC组织和正常肾脏组织中的差异表达,收集具备完整临床资料的97例ccRCC组织及对应的癌旁正常肾脏组织,采用免疫组织化学EnVision两步法检测TNFAIP3蛋白在ccRCC组织及对应癌旁正常肾脏组织中的表达,分析TNFAIP3蛋白的表达情况与患者年龄、性别、WHO/ISUP分级、肿瘤最大径及TNM分期等临床病理特征的关系。结果:GEPIA2数据库分析显示,与正常肾脏组织相比TNFAIP3在ccRCC组织中呈高表达（P＜0.05）,但TNFAIP3高表达ccRCC患者总生存时间和无瘤生存时间均显著高于TNFAIP3低表达ccRCC患者（P＜0.05）;TNFAIP3免疫组化检测证实,TNFAIP3在ccRCC组织中呈淡黄至棕褐色表达于细胞膜和细胞质,在ccRCC组织中高表达比例明显高于癌旁正常肾脏组织（P＜0.05）,TNFAIP3表达水平与ccRCC组织的WHO/ISUP肾细胞癌分级、肿瘤最大径、TNM分期、有无淋巴结转移临床参数有关（P＜0.05）,TNFAIP3高表达则提示较好的预后。结论:ccRCC组织中TNFAIP3的表达明显升高,而TNFAIP3高表达的ccRCC患者总生存期和无瘤生存期均好于TNFAIP3低表达的ccRCC患者,TNFAIP3参与ccRCC增殖、转移中的作用方式与分子调控机制则待进一步研究。     

Dishevelled2基因及其蛋白在透明细胞性肾细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨透明细胞性肾细胞癌（CCRCC）组织及其癌旁组织中Dishevelled2（DVL2）基因及其蛋白的表达情况及其临床意义。方法用半定量反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和荧光实时定量PCR方法检测22例CCRCC患者的原位肾癌组织及其配对癌旁组织DVL2基因表达情况,并检测了32例总样本中Ⅲ＋Ⅳ期与I＋Ⅱ期肾癌组织中DVL2基因的表达差异;应用免疫组织化学法回顾性研究22例CCRCC患者的原位肾癌组织及其配对癌旁组织中DVL2蛋白的表达情况,同时检测了10例无正常肾组织配对的CCRCC患者肿瘤组织。结果半定量RT—PCR结果表明,在22例CCRCC样本中,DVL2mRNA在17例（77．2％）CCRCC原发灶中的表达较其配对癌旁组织上调,其结果与实时荧光定量PCR结果基本一致（仁2．535,P=0．0197）,实时荧光定量PCR结果显示,13例Ⅲ＋Ⅳ期CCRCC中8例（61．5％）肾癌组织DVL2mRNA表达高于I＋Ⅱ期。肾癌组织;免疫组织化学分析表明,DVL2蛋白定位于CCRCC细胞的胞膜及胞质,22例CCRCC中有18例（81．8％）癌组织表达强度高于癌旁组织,但32例CCRCC的DVL2蛋白表达在不同年龄、性别、肿瘤分期间差异均无统计学意义（Fisher精确概率法,均P〉0．05）。结论在mRNA及蛋白水平上,CCRCC中DVL2表达水平显著高于癌旁组织,并且Ⅲ＋Ⅳ期肿瘤患者原位癌组织中DVL2的表达量高于I＋Ⅱ期,提示DVL2可能是一个潜在的与CCRCC发生及转移相关的分子标志物。     

β-cateni和MMP-7在肾透明细胞癌中的表达及其意义

目的 研究β-cateni和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在肾透明细胞癌中的表达,探讨其表达与肾透明细胞癌生物学行为的关系.方法 采用免疫组化二步法检测β-cateni和MMP-7在肾透明细胞癌中的表达.结果 β-cateni 和MMP-7在肾透明细胞癌组织异常表达率分别为92%、88%,两者的异常表达均与肿瘤直径、病理分化、肾盂肾包膜或静脉的侵犯及临床分期具有相关性.β-cateni异常表达与MMP-7表达有一定的相关性(P＜0.01) .结论 β-cateni和MMP-7表达在肾透明细胞癌进展中可能有一定作用.联合检测两者在肾透明细胞癌中的表达,有利于肾透明细胞癌治疗和预后的判断.     

β-catenin和MMP-7在肾透明细胞癌中的表达及其意义

目的研究β-catenin和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在肾透明细胞癌中的表达,探讨其表达与肾透明细胞癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化二步法检测β-catenin和MMP-7在肾透明细胞癌中的表达。结果β-cate-nin和MMP-7在肾透明细胞癌组织异常表达率分别为92%、88%,两者的异常表达均与肿瘤直径、病理分化、肾盂肾包膜或静脉的侵犯及临床分期具有相关性。β-catenin异常表达与MMP-7表达有一定的相关性（P〈0.01）。结论β-cate-nin和MMP-7表达在肾透明细胞癌进展中可能有一定作用。联合检测两者在肾透明细胞癌中的表达,有利于肾透明细胞癌治疗和预后的判断。     

Vimentin在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨波形蛋白(Vimentin)在人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)和癌旁组织样本中的表达情况,并分析其与 ccRCC 临床分期、病理分级和侵袭转移等恶性生物学特性的关系及临床意义。方法:Western blot方法检测29例新鲜肾透明细胞癌及相应癌旁组织中Vimentin的表达;免疫组织化学方法检测120例肾透明细胞癌及相应癌旁组织中Vimentin的表达情况,分析Vimentin在肾透明细胞癌组织中及癌旁正常肾脏组织中的表达水平差异及Vimentin的表达与肿瘤大小、临床分期、组织病理分级、远处转移的关系。结果:Vimentin在肾透明细胞癌及相应癌旁组织中均有表达,前者的表达水平较后者显著升高（P＜0.01）;免疫组织化学显示肾透明细胞癌组织中,Vimentin的阳性表达率高达90.0%,与癌旁组织存在明显差异（P＜0.01）;Vimentin在肾透明细胞癌组织中以胞膜表达为主,其表达随肾癌的临床分期、肾包膜受侵、癌栓形成或远处转移有升高趋势,但组间比较经统计学分析均无显著性差异。结论:Vimentin在肾透明细胞癌组织中的表达明显高于癌旁正常肾组织,提示Vimentin在肾透明细胞癌的发生发展过程中发挥重要的作用。Vimentin在肾透明细胞癌组织中过表达,与肾癌的发展密切相关,可以作为肾细胞癌早期诊断、预后和复发评估的参考指标之一。     

VHL基因在肾透明细胞癌中的表达及其预后价值

目的明确Von Hippel-1indau(VHL)基因表达与肾透明细胞癌(CCRCC)分级、分期和预后的关系.方法采用免疫组化技术检测58例CCRCC标本中VHL的表达,比较其与Fuhrman分级、病理分期和预后的关系.结果VHL表达阳性率为56.9%(33/58).与分级和患者生存率均显著相关(P＜0.001),而与病理分期无关(P＞0.05).结论VHL的表达情况为判断预后提供了有用的信息.     

基于生物信息学分析铁死亡相关lncRNA对肾透明细胞癌组织免疫浸润和患者预后评估的意义

目的：采用生物信息学方法探索与肾透明细胞癌(ccRCC)组织中铁死亡相关的lncRNA,并探讨其与免疫细胞浸润及患者预后的相关性,为ccRCC患者提供新的分子靶点。方法：从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载cc RCC的转录本数据和临床数据,利用单样本基因集富集分析(ssGSEA)及相关性分析获得与铁死亡相关的lncRNA;通过单因素和多因素回归分析构建与铁死亡相关的lncRNA特征图,分析其与预后的关系;利用R软件分析铁死亡相关lncRNA与肿瘤免疫细胞浸润和药物敏感性之间的关系。构建铁死亡相关RNA网络,并通过qPCR验证中国人ccRCC组织和癌旁组织（取自2019年12月至2021年03月间在西南医科大学附属医院手术切除8例标本）中关键lncRNA的表达。结果：Kaplan-Meier分析表明,铁死亡评分高的患者总OS率低于铁死亡评分低的患者。单因素和多因素回归分析确定11个ccRCC铁死亡相关lncRNA可评估患者预后,并构建ccRCC患者1、3、5年预后预测列线图。免疫细胞浸润分析表明,铁死亡相关lncRNA与ccRCC免疫细胞浸润密切相关,其中LINC01871、PRKA...     

基于Keap1基因多态性的肾透明细胞癌分子标志物的研究

目的:探讨KeapJ基因单核苷酸多态性与肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的相关性,为临床诊疗提供有效的分子靶点.方法:采集ccRCC组织108例与正常对照肾组织86例,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)和基因测序技术检测KeapJ基因单核苷酸多态性,判读两组样本基因型,实时荧光定量PCR法检测Keap1基因在两组中的表达情况.结果:Keap1基因rs1048289的不同基因型与等位基因频率在肿瘤组和对照组之间的分布不同,差异均有统计学意义(P＜0.05).AA基因型及A等位基因携带者患肾透明细胞癌的风险明显升高,AA基因型(OR=2.292,95％ CI:1.159～4.533,P＜0.05)及A等位基因(OR =2.067,95％ CI:1.280 ～3.342,P=0.001)为肾透明细胞癌患病的危险因素.肿瘤组Keap1基因表达量比对照组明显降低(P＜0.05),但不同基因型样本间Keap1基因表达量无明显差异(P＞0.05).结论:Keap1基因rs1048289与肾透明细胞癌患病显著相关,有望成为肾透明细胞癌早期诊断与基因治疗的有效分子靶点.     

基于TCGA 数据库分析DTX2 在肾透明细胞癌组织中表达的临床意义及其对肾癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的：基于TCGA数据库分析Deltex E3泛素连接酶2(DTX2)在肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的表达水平及临床意义,探讨DTX2对ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：利用TIMER数据库分析DTX2在泛癌组织中的表达水平,通过UALCAN数据库进一步验证ccRCC组织和癌旁组织中DTX2 mRNA和蛋白表达差异。使用UALCAN数据库中的TCGAccRCC队列数据集,分析ccRCC中DTX2表达与患者临床病理特征的相关性。通过K-M plot数据库分析DTX2表达与cc RCC患者预后的相关性。利用DAVID数据库对DTX2相关基因进行GO和KEGG通路富集分析。通过qPCR法检测DTX2基因在人胚肾293(HEK293)细胞和ccRCC细胞A498、Caki-1中的表达水平。利用siRNA技术分别将DTX2 siRNA及其阴性对照质粒转入A498、Caki-1细胞,采用CCK-8法、平板克隆实验、划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测敲低DTX2对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果：TCGA数据库分析结果表明,与癌旁组织相比,ccRCC组织中DTX2 mRNA和...     

Tenascin-C在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的:分析Tenascin-C（TN-C）在肾透明细胞癌中的表达及其与临床病理因素间的关系。方法:应用免疫组化方法检测肾透明细胞癌中TN-C蛋白表达情况。结果:免疫组化结果显示40.63%（39/96）的病例存在肿瘤间质TN-C蛋白的过表达,且过表达与肿瘤组织核分级负相关（P=0.022）;18.75%（18/96）的病例存在肿瘤细胞胞质TN-C蛋白的过表达,且过表达与肿瘤组织核分级、p-TNM分期正相关,分别为（P＜0.001;P=0.038）。肿瘤间质及肿瘤细胞胞质的过表达与RCCC患者的年龄、性别、肿瘤大小均无明显相关性。结论:肾透明细胞癌中存在TN-C蛋白肿瘤间质及肿瘤细胞的过表达,并与肿瘤分化和p-TNM分期相关。     

Hepcidin as a prognostic biomarker in clear cell renal cell carcinoma

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is a common malignancy of urologic neoplasms. Hepcidin is a pivotal modulator of iron metabolism involved in human cancers; however, the biological significance of hepcidin in ccRCC remains to be fully understood. Therefore, in this study, we evaluated the expression profiles of hepcidin in ccRCC from several public databases and found that hepcidin expression was upregulated in ccRCC, which was further validated in ccRCC cell lines, clinical samples, and tissue microarray (TMA) quantitative real-time PCR and immunohistochemistry. In addition, we found that the expression level of hepcidin was correlated with the age, T stage and pathologic stage of patients. Furthermore, hepcidin promoter methylation was significantly associated with the worse poor clinical parameters of ccRCC patients, and hepcidin was an independent prognostic factor. Mechanistically, enrichment analysis revealed that hepcidin participated in the immune-related and metabolism-related pathways. Hepcidin was positively correlated with not only immune infiltration and immune checkpoints but also tumor mutation burden and cytotoxic T lymphocyte. Finally, we validated the positive correlation of hepcidin with the marker of macrophage (CD68) in the TMA. Our findings provide insights into understanding the function and its underlying mechanism of hepcidin in ccRCC and suggest that hepcidin might serve as a potential predictive biomarker of response to immunotherapy and the prognosis of patients with ccRCC.     

Epigenomics of clear cell renal cell carcinoma: mechanisms and potential use in molecular pathology

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is one frequent form of urologic malignancy with numerous genetic and epigenetic alterations. This review summarizes the recent major findings of epigenetic alterations including DNA methylation, histone modifications, microRNAs and recently identified long noncoding RNAs in the development and progression of ccRCC. These epigenetic profilings can provide a promising means of prognostication and early diagnosis for patients with ccRCCs. With the developed high-throughput technologies nowadays, the epigenetic analyses will have possible clinical applications in the molecular pathology of ccRCC.     

Landscape of immune cell infiltration in clear cell renal cell carcinoma to aid immunotherapy

The tumor microenvironment, comprised of tumor cells and tumor-infiltrating immune cells, is closely associated with the clinical outcome of clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) patients. However, the landscape of immune infiltration in ccRCC has not been fully elucidated. Herein, we applied multiple computational methods and various datasets to reveal the immune infiltrative landscape of ccRCC patients. The tumor immune infiltration (TII) levels of 525 ccRCC patients using a single-sample gene were examined and further categorized into immune infiltration subgroups. The TII score was characterized by distinct clinical traits and showed a significant divergence based on gender, grade, and stage. A high TII score was associated with the ERBB signaling pathway, the TGF-β signaling pathway, and the MTOR signaling pathway, as well as a better prognosis. Furthermore, patients with high TII scores exhibited greater sensitivity to pazopanib. The low TII score was characterized by a high immune infiltration level of CD8⁺ T cells, T follicular helper cells, and regulatory T cells (Tregs). Moreover, the immune check point genes, including CTLA-4, LAG3, PD-1, and IDO1, presented a high expression level in the low TII score group. Patients in the high TII score group demonstrated significant therapeutic advantages and clinical benefits. The findings in this study have the potential to assist in the strategic design of immunotherapeutic treatments for ccRCC.     

RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨RhoB在肾透明细胞癌中的表达及临床意义.方法:采用实时定量PCR、Western blot和免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的表达情况.选取60例肾透明细胞癌组织标本,详细收集病人临床病理资料,通过免疫组化方法检测RhoB在肾透明细胞癌组织中的蛋白表达水平,并分析RhoB的蛋白水平与临床病理资料的关系.结果:与对应瘤旁肾组织相比,RhoB的mRNA及蛋白表达水平在肾透明细胞癌组织标本中明显降低;RhoB的蛋白表达水平在不同年龄、性别组间差异无统计学意义(P>0.05),而在肿瘤直径大小、T分期、临床分期和组织分级间差异有显著统计学差异(P<0.05).结论:RhoB的表达降低可能在肾透明细胞癌的肿瘤发生中发挥作用,且其表达下降可能与肾透明细胞癌的恶性进展有关.     

基于TCGA数据库分析E2F7在肾透明细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:通过数据挖掘分析E2F7在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）组织中的表达特征及临床意义。方法:基于GEPIA、LinkedOmics数据库分析E2F7在ccRCC中的差异性表达及其与患者预后的关系。应用WebGestalt工具分析与E2F7表达相关的基因。结果:E2F7 mRNA在ccRCC组织中表达水平高于正常肾组织。Linkedomics数据库分析显示E2F7 mRNA在ccRCC病理分期中存在表达差异（P＜0.05）,且随着病理分期的升高,表达水平有上调趋势。E2F7 mRNA在不同T、M、N分期（P＜0.05）中存在差异性表达。生存分析表明,E2F7的表达水平与ccRCC患者的总体生存率（Logrank P=0.023）与无复发生存率（Logrank P=0.041）显著相关,此外,E2F7表达水平与BUB1B、CDC6、CCNE2、CCNE1（r分别为0.827 7、0.720 4、0.677 8、0.612 5,P均<0.01）基因呈显著正相关,与PINK1、KAT5、HSD17B8（r分别为-0.511 0、-0.508 4、-0.502 9,P均<0.01）基因呈显著负相关。E2F7表达相关基因富集分析与DNA复制、细胞周期以及NF-kappa B信号通路（NF-kappa B signaling pathway）相关。结论:在ccRCC中E2F7的表达与患者的病理分期、T分期、N分期、M分期及预后有一定的相关性,因此E2F7可能成为ccRCC的预后标志物及潜在治疗靶点。