腺苷脱氨酶、C型凝集素及丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在白纹伊蚊唾液腺中的表达

目的了解腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)基因、C型凝集素(C-lectin)基因和丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor,serpin)基因在白纹伊蚊唾液腺中的表达情况。方法分别制备未吸血雌蚊唾液腺(SG组)和吸血雌蚊唾液腺(BSG组)、雌蚊躯体(无头无唾液腺,C组)和雄蚊组织(无头含唾液腺,M组)的总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR技术,以β肌动蛋白(β-actin)基因作为内参,根据GenBank公布的ADA、C-lectin和Serpin基因序列设计特异性引物进行RT-PCR,分析以上基因在不同组织中的表达情况。结果与雌蚊躯体和雄蚊组织中相对表达量相比,ADA基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了545倍和123倍(P0.01);C-lectin基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了3929倍和4973倍(P0.01);Serpin基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了1911倍和2978倍(P0.01)。吸血前后雌蚊唾液腺中ADA、C-lectin和Serpin等3个基因的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 ADA在蚊虫组织中均有表达,在雌蚊唾液腺中高表达;C-lectin和serpin基因在雌蚊唾液腺中特异高表达。     

猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因的克隆表达及免疫学分析

目的对猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因（malate dehydrogenase,MDH）进行克隆,表达及免疫学特性的初步研究。方法将猪带绦虫MDH基因克隆到原核表达质粒pET-28a（＋）中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用异丙基--βD-半乳糖苷（IPTG）诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹（Western Blot）进行免疫学分析。结果成功构建pET-28a（＋）-MDH重组质粒,并获得高纯度蛋白,该重组蛋白可被其免疫SD大鼠血清识别,同时也能被感染猪带绦虫的病人及猪、感染牛带绦虫病人及感染亚带绦虫病人血清所识别。结论猪带绦虫苹果酸脱氢酶基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。     

猪带绦虫磷酸丙糖异构酶基因的克隆、表达和分析

在多种绦虫中,研究者已用生化方法验证了几种糖原酵解酶,其中包括磷酸丙糖异构酶(TPI)。TPI是同二聚体,催化二羟基丙酮磷酸盐和3-P-甘油醛的转化,并在糖原     

猪带绦虫乳酸脱氢酶基因的序列分析、克隆表达和免疫学分析

目的利用生物信息学方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中识别乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDH-A),分析和预测其编码蛋白的结构和功能,并对其进行克隆表达和免疫学特性研究。方法利用NCBI和ExPASy中有关基因、蛋白的序列和结构信息分析工具,结合其它生物信息学分析软件包,从猪带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别乳酸脱氢酶A(TsLDH-A)的基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白的结构与功能;并将TsLDH-A克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中诱导表达,表达产物经纯化后用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析。结果该基因全长1 332bp,编码331个氨基酸。其氨基酸序列与其它物种LDH-A氨基酸序列一致性可达54%,具有乳酸脱氢酶保守结构域。其编码的蛋白理论分子量为3 5461.1Da,有3个跨膜区和多个磷酸化位点,蛋白的理化性质较稳定。预测有4个主要的B细胞抗原表位,L-乳酸脱氢酶活化位点之一的His192包含于表位190-199aa中。酶催化位点的3个关键氨基酸在空间结构上相互靠近。PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-TsLDH-A构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL-21/DE3中获得表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白能被TsLDH-A重组蛋白免疫的SD大鼠血清、感染了猪带绦虫的病人血清及猪血清识别,表明其具有较好的免疫原性和免疫反应性。结论应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了TsLDH-A的全长序列并预测得到其编码蛋白的结构与功能方面的信息,该基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达。     

猪带绦虫抗原基因TS76的克隆及原核表达

目的　测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法　采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同源性比较 ;将TS76片段亚克隆到原核表达载体pGEX - 1(T中 ,免疫印迹方法筛选得到能正确表达TS76片段的重组子 pGTS76 ;制备pGTS76原核表达产物 ,进行浓度梯度SDS -PAGE和Westernblotting分析。 结果　TS76克隆含 5 16对核苷酸 ,编码含 83个氨基酸残基的多肽 ,与EMBL数据库中的猪囊虫免疫原性蛋白质mRNA有 383bp的同源区域。重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为 34KD ,能与抗猪囊尾蚴兔血清产生很强的免疫反应。结论　分离到一个编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的基因。     

丝氨酸蛋白酶在细粒棘球绦虫中的表达及活性鉴定

目的比较细粒棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(Eg SP)在原头节、生发层(包囊)和成虫中的表达水平差异及活性鉴定。方法采用TRIzol试剂分别提取细粒棘球绦虫原头节(经胃蛋白酶消化和未经胃蛋白酶消化)、生发层(包囊)和成虫总RNA,并进行PCR分别扩增Eg SP基因片段,PCR扩增产物测序后通过Clustal×2.0软件进行序列比对,采用邻接法构建系统进化树。选择具有SP活性基团的38 000亚基基因序列进行原核表达,将正确的目的片段克隆至表达载体pET-30a中,再转化至大肠埃希菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用His标签亲和层析纯化柱纯化重组蛋白Eg SP (r Eg SP)。将r Eg SP (25μg)与等量的弗氏完全佐剂混合乳化,皮下多点注射免疫5只BALB/c小鼠,从第2次免疫开始,改为等量的弗氏不完全佐剂,第4次加强免疫采用腹腔注射,每次免疫间隔1周。免疫结束后,尾静脉采血,分离血清。ELISA检测血清中特异性抗体水平。实时荧光定量PCR (qRT-PCR)测定不同阶段中Eg SP mRNA的相对表达水平。蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测细粒棘球绦虫不同阶段中Eg SP的表达情况,采用Image Lab 6.0软件分析蛋白质的表达丰度。免疫组化检测Eg SP在细粒棘球绦虫原头节和生发层(包囊)中的表达情况。纯化的r Eg SP和囊液蛋白用胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸酶底物(Z-Arg-AMC)、组织蛋白酶L底物(Z-Phe-Arg-AMC)测定其蛋白酶活性。采用Graphpad Prism 7统计学软件对多组数据进行单因素ANOVA方差分析。结果细粒棘球绦虫原头节、生发层(包囊)和成虫的cDNA中均扩增出目的片段,与预期大小(1 455 bp)相符。PCR产物测序结果显示,Eg SP开放阅读框为1 455 bp,编码484个氨基酸,相对分子质量(Mr)为54 870,与多房棘球绦虫丝氨酸蛋白酶(Em SP)核苷酸序列一致性为97.73%,氨基酸序列一致性为96.69%。系统进化树分析结果显示,与其他绦虫属氨基酸序列一致性为33.10%～87.19%,其中与亚洲带绦虫(GenBank登录号:VDK43949.1),带状泡尾绦虫(GenBank登录号:VDM30859.1)的氨基酸序列一致性分别为87.19%、 52.89%。qRT-PCR结果显示,胃蛋白酶消化的原头节、生发层(包囊)、成虫中Eg SP mRNA的相对转录水平分别为2.1±1.2、 9.1±2.1、 5.8±2.3,均高于未经胃蛋白酶消化的原头节(1.0±0)(P 0.01)。Western blotting分析结果显示,原头节、生发层(包囊)、成虫中Eg SP蛋白相对表达水平分别为1.2±0.1, 3.6±0.2, 4.0±0.1,生发层(包囊)和成虫中的表达水平高于原头节(P 0.01)。免疫组化分析结果显示,Eg SP多克隆抗体能够特异性在生发层(包囊)中表达,而在原头节中不表达。在3种不同pH缓冲液中,r Eg SP和囊液蛋白均具有蛋白酶活性,且在pH7.2的缓冲液中,r Eg SP和囊液蛋白丝氨酸蛋白酶活性最强(P 0.01)。结论Eg SP在细粒棘球绦虫生发层(包囊)和成虫组织中高表达,原头节中表达较低。r Eg SP和囊液蛋白均具有较强的丝氨酸蛋白酶活性。     

猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810的鉴定及LBD区表达

目的 克隆鉴定猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810基因,并表达其LBD 区。方法 设计猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810特异性引物,并分段进行RT-PCR扩增。TsIR-4810的完整ORF序列经BLAST同源比对,SMART预测其结构域,SWISS-MODEL同源建模,并用PhyML构建系统发育树。将TsIR-4810的LBD区克隆至pET-30a中进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果 获得的目的基因完整的ORF为4 920 bp,其编码蛋白的氨基酸序列与其他生物的胰岛素受体一样,具有相对保守的分泌信号肽、受体L1和L2结构域、FnⅢ结构域、跨膜区和受体酪氨酸激酶域。构建的LBD重组菌株诱导表达了63 ku的目的蛋白,与预期大小相符,且主要以包涵体形式存在。结论 TsIR-4810为猪带绦虫胰岛素受体基因,其LBD区的成功表达,将为开展基于胰岛素受体LBD区的新型疫苗和药物奠定基础。     

脑胶质瘤中丝氨酸蛋白酶抑制剂、血管内皮生长因子表达及对血管生成的影响

目的检测胶质瘤中丝氨酸蛋白酶抑制剂(Mapsin)、血管内皮生长因子(VEGF)和CD31标记的微血管密度(MVD)的关系,分析其意义。方法以67例胶质瘤患者的临床资料和术后蜡块组织作为观察组,以非肿瘤性的脑组织(病理科存档)40例作为对照组。应用免疫组化方法检测两组中Mapsin、VEGF和CD31的表达。结果观察组中Mapsin表达的阳性率明显低于对照组,VEGF表达的阳性率明显高于对照组,观察组中MVD值明显高于对照组,观察组中Mapsin和VEGF的阳性率、MVD值与肿瘤的最大径、是否伴有坏死和Ki67增殖指数密切相关。相关分析显示Mapsin和VEGF、Mapsin和MVD的表达均呈负相关性,VEGF和MVD的表达呈正相关性。结论胶质瘤术后组织中Mapsin的阳性率低、VEGF的阳性率高、MVD值高,Mapsin对肿瘤血管生成可能具有抑制作用,Mapsin和VEGF共同调节着肿瘤的发生和进展。     

源于内脏脂肪组织的丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

Vaspin(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor,源于内脏脂肪组织的丝氨酸蛋白酶抑制剂)DNA于2005年日本冈山大学Hidak等首次分离自日本大冢黄褐鼠德岛肥胖大鼠(Otsuka Long-Evans Tokushina Fatty rat,OLETF)的内脏白色脂肪(WAT),这是一肥胖并患有2型糖尿病(T2DM)还具有     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血丝氨酸蛋白酶抑制剂A1基因多态性分析*

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血丝氨酸蛋白酶抑制剂A1(SERPINA1)基因多态性变化。方法 2018年3月～2020年3月我院收治的PBC患者62例和同期健康体检者60例,采用基因测序法检测外周血SERPINA1基因rs28929474位点基因型,采用x²检验和哈迪-温伯格平衡检验SERPINA1 基因rs28929474位点基因型和等位基因分布差异。结果 两组人群SERPINA1 基因rs28929474位点基因型分布符合哈迪-温伯格平衡(P>0.05),具有群体代表性;PBC患者AA基因型和A等位基因频率分别为37.1%和46.8%,显著高于对照组的11.7 %和27.5 %(P>0.05),而GG、GA基因型和G等位基因频率分别为43.5%、19.4%和53.2%,显著低于对照组的56.7%、 31.7%和72.5%(P>0.05),提示A等位基因是罹患PBC的保护性因素,而G等位基因可能是患者发生PBC的风险因素;携带GA/AA型PBC患者Child评分和MELD评分分别为(7.9±1.8)分和(19.2±2.4)分,显著高于GG型PBC患者(P>0.05),而两组血清抗核抗体和抗线粒体抗体阳性率比较无显著性差异(P>0.05)。结论 本地区居民发生PBC可能与SERPINA1 基因rs28929474位点多态性有关,其中A基因可能是保护基因,而G基因可能是罹患疾病的风险基因。监测外周血SERPINA1 基因rs28929474位点多态性对于预测PBC发生具有一定的临床意义,值得探讨。     

猪带绦虫TSOL18基因的表达、纯化和兔抗血清的制备

目的 构建猪带绦虫重组质粒pGEX-TSOL18,表达纯化TSOL18重组蛋白,制备兔抗重组蛋白血清。方法 全基因合成猪带绦虫TSOL18抗原编码基因,定向克隆到pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSOL18;转化大肠埃希菌ArcticExpress(DE3), IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况;亲和层析纯化获得重组蛋白,免疫兔制备抗血清;ELISA测定抗血清的效价,Western blot鉴定抗血清的特异性。结果 全基因扩增出393 bp的TSOL18抗原编码基因,酶切和测序鉴定证实TSOL18基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE分析显示表达重组蛋白相对分子质量(Mr)约为41 kDa,经亲和层析后可获得纯度为75%的重组蛋白;ELISA测定抗血清的效价为1∶256 000,Western blot证实该抗血清能与重组蛋白发生特异性反应。结论 猪带绦虫TSOL18基因能在大肠埃希菌中高效表达,成功制备了高纯度的TSOL18重组蛋白和高滴度的兔抗重组蛋白血清,为猪带绦虫的疫苗研制奠定了基础。     

毛首鞭形线虫丝氨酸蛋白酶抑制剂TtSerpin1对蛋白酶的抑制作用

目的原核表达、分离纯化毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)丝氨酸蛋白酶抑制剂1(TtSerpin1),并观察其对蛋白酶的抑制作用。方法从毛首鞭形线虫成虫cDNA中扩增TtSerpin1编码序列(Gen Bank登录号为MF401634),将其连接入原核表达载体,构建重组质粒pET32a-sumo/TtSerpin1。将重组质粒转化入大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导TtSerpin1融合蛋白表达。表达的包涵体蛋白经变性、复性、镍亲和层析纯化、SUMO蛋白酶酶切融合标签后获得rTtSerpin1。用发色底物法检测其对人组织蛋白酶G、中性粒细胞弹性蛋白酶、蛋白酶3、纤溶酶和胰蛋白酶,猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶及牛α-胰糜蛋白酶的抑制作用。结果成功构建了重组质粒pET32a-sumo/TtSerpin1,并在E.coli中成功表达。表达产物主要为包涵体,复性、纯化后的rTtSerpin1具有较好的蛋白酶抑制活性。1 000 nmol/L的rTtSerpin1对人组织蛋白酶G(100 nmol/L)、中性粒细胞弹性蛋白酶(10 nmol/L)、蛋白酶3(200 nmol/L),猪胰弹性蛋白酶(10 nmol/L),牛α-胰糜蛋白酶(1 nmol/L)的蛋白酶活性抑制率分别为60.89%、82.84%、21.21%、58.32%、96.98%,但对人纤溶酶、胰蛋白酶及猪胰蛋白酶抑制活性较弱。rTtSerpin1对人组织蛋白酶G及中性粒细胞弹性蛋白酶的抑制常数(K_i)分别为(949.80±91.51)、(242.70±53.41)nmol/L。结论 rTtSerpin1对多种丝氨酸蛋白酶具有较强抑制作用。     

亚洲带绦虫烯醇化酶基因的原核表达、鉴定与组织定位

目的 表达亚洲带绦虫（Taenia asiatica,Ta）成虫烯醇化酶（enolase,ENO）基因,并对其进行组织定位和免疫反应性分析。 方法 通过大规模测序从亚洲带绦虫cDNA文库中确定ENO基因,PCR扩增目的片段,将其克隆至表达质粒pET-30a（+）,在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）观察重组蛋白的表达情况,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱纯化重组蛋白,蛋白质印迹（Western blotting）分析该重组蛋白的免疫反应性。将重组蛋白免疫SD大鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体水平,间接免疫荧光检测确定ENO在亚洲带绦虫成虫组织中的定位。 结果 PCR、双酶切和DNA测序结果均表明,重组质粒pET-30a（+）-TaENO构建成功。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白TaENO的相对分子质量（Mr）为47 000。经亲和层析获高纯度的蛋白,蛋白浓度为0.37 mg/ml。重组蛋白TaENO能被SD大鼠抗血清、感染亚洲带绦虫的猪血清和患者血清识别。间接免疫荧光检测结果显示,TaENO主要定位于成虫的表膜。 结论 纯化后的亚洲带绦虫成虫烯醇化酶重组蛋白具有较强的免疫反应性,烯醇化酶主要定位于成虫表膜。     

HCV NS3区丝氨酸蛋白酶基因的克隆及序列分析

ＨＣＶＮＳ_３区丝氨酸蛋白酶基因的克隆及序列分析陈庄，徐静，宋宏彬，周育森，王海涛为进一步研究ＨＣＶ丝氮酸蛋白酶的特征及其与宿主细她的关系、我们对ＮＳ３氨基末端１８１个氨基酸的基因进行了克隆，序列分析和表达。从一名抗ＨＣＶ阳性献血员血清中以异硫氰酸胍?..     

幽门螺杆菌5种候选疫苗抗原基因的克隆、表达及抗原性的鉴定

目的:构建含人Hpylori5种候选疫苗抗原Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB的编码基因的重组质粒并研究其抗原性.方法:应用PCR技术从Hpylori染色体中扩增编码Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB的基因片段,将其T-A克隆和测序,并与GenBank公布的其他Hpylori菌株基因序列比较,再将目的基因克隆至融合表达载体pGEX-4T-1上中进行表达,用GST亲和层析对其进行纯化,纯化产物用于对29株小鼠抗Hpylori-全菌单克隆抗体(mAb)的鉴定及与Hpylori感染患者血清进行Westernblot分析.结果:扩增的Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB基因全长分别为528bp,351bp,675bp,855bp,1704bp(GenBank登录号分别为DQ106902,DQ141574,DQ141577,DQ141575,DQ141576),与GenBank公布的其他菌株的核酸序列的同源性在95%-99%,表达Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB融合蛋白的相对分子质量分别约为48000,41000,52000,60000,91000Da,29株小鼠抗Hpylori全菌mAb中针对Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB抗原的分别为4,5,5,1,6株,5种抗原的纯化产物均可被Hpylori感染患者血清特异性识别.结论:重组表达的Lpp20,HspA,UreaseA,CagA,UreaseB均具有较好的抗原性.     

血清腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂表达水平与冠心病发生及病变程度的相关性

目的探讨冠心病(CAD)患者血清腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平变化在CAD发生发展中的相关性。方法选择该院2013年9月至2015年6月116例CAD患者(CAD组)和47例健康者(对照组),其中根据病情严重程度,将CAD组分为急性冠脉综合征(ACS)组56例、稳定型心绞痛(SAY)组60例;根据血管狭窄数量分为3个亚组:1支病变组(1vd组)37例、2vd组38例、3vd组41例;根据Gensini分值分为低积分组35例、中积分组38例、高积分组43例。采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定血清Vaspin水平,分析血清Vaspin水平在各组间的差异及与CAD的相关性。结果 CAD组患者血清Vaspin水平较对照组明显降低,ACS组血清Vaspin水平明显低于SAY组,ACS组和SAY组血清Vaspin水平均低于对照组(P0.05)。3vd组血清Vaspin水平显著高于1vd组和2vd组(P0.05),1vd组和2vd组血清Vaspin水平无显著差异(P0.05)。高积分组和中积分组血清Vaspin水平明显低于低积分组,且高积分组Vaspin水平低于中积分组(P0.05),Spearman分析显示Vaspin与Gensini积分呈负相关(r=-0.429,P0.05)。Logistic分析显示,血清Vaspin低水平为CAD的独立危险因素(P0.05)。结论 CAD患者血清Vaspin水平较低,血清Vaspin水平与冠状动脉病变程度相关。     

结核分枝杆菌14000抗原基因的克隆、表达纯化及抗原性分析

目的对结核分枝杆菌14 000抗原基因进行克隆表达及纯化,并评价其抗原性。方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR方法获得目的基因构建大肠杆菌高效表达株;亲和层析柱纯化重组蛋白;进SDS-PAGE电泳鉴定;通用ELISA法进行重组蛋白的抗原性检测分析。结果获得了结核分枝杆菌抗原14 kD基因,在大肠杆菌BL21中高效表达,Western印迹结果证实该重组蛋白能与抗结核分枝杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应。ELISA分析中,该纯化的重组抗原敏感性、特异性和准确性分别为:52.5%、96.7%和67.2%,具有良好的抗原性和较高的特异性。结论14 kD重组蛋白抗原具备良好的抗原性与特异性,为结核病诊断、重组疫苗应用和免疫效应检测以及抗原、抗体的大规模制备打下基础。     

丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin与炎症反应关系的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin是近年发现的一种脂肪因子,主要由脂肪组织产生,能够调控机体的炎症反应、糖脂代谢和胰岛素抵抗等.vaspin通过调节多种信号通路参与炎症反应并调控炎症因子的表达,并与动脉粥样硬化、2型糖尿病、银屑病等疾病的发生发展密切相关.当机体患有动脉粥样硬化或糖尿病心肌病等疾病时,外源性vaspin减少...     

胆管癌组织紧密连结蛋白18、丝氨酸蛋白酶抑制剂和p53蛋白表达及其临床意义

目的 探讨胆管癌组织紧密连结蛋白18（claudin-18）、丝氨酸蛋白酶抑制剂（maspin）和p53蛋白表达的临床意义。方法 采用免疫组化和Western blot法检测46例胆管癌和32例正常胆管组织claudin-18、maspin和p53蛋白的表达,采用Spearman等级相关分析。结果 胆管癌组织claudin-18和p53蛋白阳性率分别为52.17%和56.52%,显著高于正常胆管组织（0.0%和0.0%,P<0.01）;胆管癌组织maspin阳性率为86.96%,显著低于正常胆管组织（100.0%,P<0.01）;胆管癌组织claudin-18、maspin和p53蛋白表达量分别为2.83±0.52、2.45±1.24和1.73±1.26,均显著高于正常胆管组织（0.48±0.75、0.46±0.32和0.0±0.0,P<0.05）;胆管癌组织maspin与p53表达呈负相关（r=-8.546,P=0.001）。结论 胆管癌组织maspin、claudin-18和p53蛋白表达的意义还有待于进一步研究。