核内不均一核糖核蛋白A2/B1在舌鳞状细胞癌中的表达及作用

目的：舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是口腔颌面部的常见癌症,严重危害人们的生命健康。核内不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)是一种RNA结合蛋白,可调控多种基因的表达,参与多种癌症的发生和发展。本研究旨在探究hnRNP A2/B1对TSCC进展的表达及作用。方法：基于基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)相关芯片GSE146483、GSE85195分析hnRNP A2/B1在OSCC及正常口腔黏膜细胞、组织中的差异表达情况,基于TSCC相关芯片GSE4676分析hnRNP A2/B1表达与TSCC患者无病生存期的相关性。收集2021年7月至12月于湖南省肿瘤医院就诊的30例TSCC患者的癌及癌旁组织样本,采用real-time RT-PCR和蛋白质印迹法验证TSCC患者样本中hnRNP A2/B1的mR...     

核内不均一核糖核蛋白D和上皮细胞黏附分子在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

目的：探讨核内不均一核糖核蛋白D （hnRNPD）和上皮细胞黏附分子（EpCAM）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织和正常口腔黏膜组织中的表达及其与OSCC患者临床病理特征的关系,阐明其在OSCC发生发展中的作用。方法：选取术前均未经放、化疗的38例OSCC患者的肿瘤组织（OSCC组）和11例正常拔牙患者的口腔黏膜组织（对照组）,采用免疫组织化学染色法检测OSCC组织和正常口腔黏膜组织中hnRNPD和EpCAM表达水平,并分析不同临床病理特征OSCC患者肿瘤组织中hnRNPD和EpCAM表达水平,采用Spearman相关性检验分析OSCC组织中hnRNPD和EpCAM表达的相关性。结果：与对照比较,OSCC组肿瘤组织中hnRNPD和EpCAM表达水平升高（Z=-4.936,P=0.000;Z=-2.780,P=0.005）;不同性别和年龄OSCC患者肿瘤组织中EpCAM蛋白表达水平差异有统计学意义（Z=-2.471,P=0.013;Z=-1.967;P=0.049）;不同临床病理特征OSCC患者肿瘤组织中hnRNPD表达水平比较差异均无统计学意义（P>0.05）。hnRNPD和EpCAM表达水平相关性较弱（ρ=0.227,P=0.17）。结论：OSCC患者肿瘤组织中hnRNPD和EpCAM表达水平上调,两者促进了OSCC的发生发展。     

纤维支气管镜刷检细胞核内不均一核糖核蛋白B1染色诊断肺癌价值的研究

目的　探讨纤维支气管镜刷检细胞核内不均一核糖核蛋白B1(HnRNPB1)染色在肺癌诊断中的价值。方法　对 381例病理检查证实的肺癌患者及 10 0例非肺癌患者 ,经纤维支气管镜刷检脱落细胞涂片 ,采用抗HnRNPB1单克隆抗体免疫细胞化学染色 ,研究HnRNPB1诊断肺癌的敏感性与特异性 ,并与传统的CT及痰脱落细胞学检查进行比较。结果　 381例肺癌患者均经纤维支气管镜检查于病变所在叶支气管进行刷检涂片 ,HE染色脱落细胞学检查发现癌细胞 2 18例 ,采用抗HnRNPB1单克隆抗体免疫细胞学检查 ,2 0 8例样本可见HnRNPB1染色。在癌细胞阴性的 16 3例样本中HnRNPB1染色阳性 12 1例 ,癌细胞阳性与阴性组间HnRNPB1表达有明显差异 (P <0 .0 5 )。不同病理类型肺癌的HnRNPB1表达为 :鳞癌 2 19例 ,HnRNPB1染色阳性 197例 (90 .0 % ) ;腺癌 10 8例 ,HnRNPB1染色阳性 85例 (78.7% ) ;小细胞癌 5 4例 ,HnRNPB1染色阳性 4 7例 (87.0 % )。鳞癌及小细胞肺癌HnRNPB1表达阳性率高于腺癌 (P <0 .0 5 )。HnRNPB1免疫细胞化学染色诊断肺癌的敏感性为 86 .4 % ,特异性为 91% ,假阴性率为 13.6 % ,假阳性率为 9% ,阴性提示率为 6 3.6 % ,阳性提示率为 97.3%。结论　HnRNPB1免疫细胞学检查诊断肺癌的敏感性明显优于痰脱落细胞学检查 ,提示HnR     

生存素在子宫内膜异位症中的表达

目的　了解凋亡抑制蛋白生存素在子宫内膜异位症患者病灶中的表达情况。方法　采用免疫组化抗生物素蛋白 -过氧化物酶染色法 (SP法 )检测 38例子宫内膜异位症患者的 4 0个异位内膜标本中生存素的表达。结果　生存素在子宫内膜异位症中的病灶广泛表达 ,表达的强度与病灶部位无关 ,与分期相关 (P =0 0 0 1) ,并与间质表达的强度呈正相关 (P =0 0 14 )。结论　未经治疗的子宫内膜异位症患者的病灶中有生存素的再表达 ,且间质的表达与腺体的表达有一致性 ,可能与发病机制相关。     

核不均一核糖核蛋白L在肿瘤中作用机制的研究进展

核不均一核糖核蛋白（hnRNP）家族的重要成员hnRNP L,是一类主要位于细胞核的RNA结合蛋白。近年来发现,hnRNP L除了在免疫系统形成中发挥重要作用外,还在多种肿瘤中异常表达。进一步研究发现,hnRNP L促进肿瘤细胞的各种生物学过程,包括增殖、迁移和侵袭,并与预后相关,提示其在肿瘤发生、发展中发挥重要作用。本文通过总结hnRNP L在各种癌症中的作用机制,探讨hnRNP L的临床意义。     

整合素β3在子宫内膜异位症中的表达研究

目的研究整合素β3在子宫内膜异位症中表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法（SP方法），检测10例正常内膜组织及20例内异症患者内膜样组织中整合素β3的表达情况。结果整合素β3在二种组织中均为阳性表达，但二种组织中的表达率有显著差异。结论整合素β3在内异症的发生、发展过程中起着重要的作用。     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在子宫内膜异位症 (EM)中的表达及其与 EM发病机制的关系。方法 :收集 2 9例EM患者的卵巢子宫内膜异位病灶组织 ,2 9例在位内膜组织及 30例非子宫内膜异位症患者的子宫内膜组织 (对照组 ) ,分别测定 VEGF的表达情况。结果 :1VEGF的表达在位内膜组高于对照组和异位内膜组 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,异位内膜组高于对照组 ,差异亦有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;2在位内膜组和对照组的不同月经周期 VEGF的表达差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论 :VEGF为促进血管生成的重要细胞因子 ,在 EM的异位内膜及在位内膜中均有表达 ,VEGF的促血管生成是 EM发生发展中的一个重要环节。     

hnRNP B1 siRNA对肺癌组织hnRNP B1表达干扰效果的体内研究

目的 在体内实验中观察所构建的核内不均一核糖核蛋白B1(hnRNP B1)特异性的siRNA真核细胞表达载体对肺癌组织hnRNP B1表达的干扰作用.方法 选取转染本课题组已构建并经体外实验证实有较好干扰效果的两对hnRNP B1特异性的siRNA真核细胞表达载体(重组质粒A和B)的人肺腺癌细胞株A549,将其接种于BALB/C nu/nu裸鼠右前腋下,构建肺癌动物模型.分别应用RT-PCR和免疫组织化学的方法检测接种40、60 d时肿瘤组织中的hnRNP B1 mRNA和蛋白质表达水平.结果 hnRNP B1特异性的siRNA真核细胞表达载体在体内表达40 d时均能较稳定而明显地抑制肿瘤组织中hnRNP B1 mRNA的表达,免疫组织化学从蛋白表达方面也予以证实,而且重组质粒A和B两组间的表达的差异无统计学意义.但是随着时间的延长(接种60 d时),siRNA的干扰效果会逐渐减弱,与未转染A549细胞比较无明显差异.结论 hnRNP B1特异性的siRNA在体内可以稳定的表达,并且能特异、高效地抑制肺腺癌细胞A549 hnRNP B1基因的表达,有望成为肺癌基因治疗的合理策略之一.     

细胞周期蛋白B1及Cdc2在正常子宫内膜及子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达

目的探讨细胞周期蛋白（CyclinB1）及Cyclin-Dependent kinasel（Cdc2）在子宫内膜异位症发生发展中的作用及其与卵巢激素之间的相关关系。方法采用RT-PCR,Western印迹以及免疫组织化学的方法检测了子宫内膜异位症患者（异位症组）的异位内膜（29例）和在位子宫内膜（20例）以及正常生育期的其他良性疾病妇女的子宫内膜（对照组,30例）中CyclinB1及Cdc2的表达。结果CyclinB1在异位症组异位内膜上的表达量明显高于在位内膜及对照组（P〈0．05）。异位症组在位内膜上CyclinB1的表达量与对照组相比没有显著性差异（P〉0．05）。Cdc2在各组患者中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CyclinB1高表达可能与子宫内膜异位症异位内膜的增生相关。     

MMP-9、p53在子宫内膜异位症组织中的表达及相关性研究

目的:探讨肿瘤相关蛋白基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、p53在子宫内膜异位症(EMc)发生、发展中的作用。方法:应用免疫组化SP法检测30例异位子宫内膜、25例在位子宫内膜和30例正常子宫内膜及20例卵巢癌组织标本中MMP-9、p53蛋白的表达情况。结果:(1)MMP-9在子宫内膜异位症患者异位内膜中阳性表达率为86.7%,分别高于其在内异症在位内膜中的表达44%及正常子宫内膜中的表达16.7%(P<0.01),而与其在卵巢癌组织中的表达90%差异无统计学意义(P>0.05);MMP-9在内异症在位内膜中的表达高于正常子宫内膜(P<0.05);(2)p53在子宫内膜异位症患者异位内膜中的阳性表达率为20%(6/30),高于其在正常子宫内膜及内异症在位内膜中的阴性表达(P<0.05);p53在卵巢癌组织中的阳性表达率为50%(10/20),显著高于异位内膜组织的表达(P<0.05);(3)Spearman等级相关分析显示,MMP-9与p53在内异症异位子宫内膜中的表达无相关性(rs=-0.294,P>0.05)。结论:MMP-9与p53可能通过各自不同的生物...     

hnRNP A2/B1在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的观察hnRNP A2/B1在肺癌中的表达,探讨hnRNP A2/B1对肺癌的诊断价值及其与组织类型、临床分期、吸烟的关系.方法采用免疫组织化学染色方法检测41例肺癌、13例非肺癌组织中hnRNP A2/B1的表达情况.结果hnRNP A2/B1免疫组化肺癌组染色阳性率为85.4%(35/41),明显高于非肺癌组30.8%(4/13),两组间有非常显著性差异(P＜0.01).其在胞浆、胞核均有表达,主要在胞浆表达.4种类型肺癌组织均显示hnRNP A2/B1阳性染色,其中鳞癌细胞染色阳性率为86.9%(20/23),较腺癌细胞78.6%(11/14)高,两组间无显著性差异(P＞0.05).Ⅲ-Ⅳ期肺癌hnRNPA2/B1染色阳性率为88.9%(24/27),高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌76.9%(10/13),两组间差异不显著(P＞0.05).有吸烟史组hnRNP A2/B1染色阳性率为80.0%(32/40)明显高于无吸烟史组50.0%(7/14),两组间差异显著(P＜0.05).结论hnRNP A2/B1与肺癌组织类型、临床病理分期无关,但与吸烟密切相关.hnRNP A2/B1检查敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断.     

非小细胞肺癌hnRNP A2/B1免疫组化及定量测定的临床意义

目的:探讨hnRNP A2/B1对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值及与NSCLC临床病期、淋巴结转移的关系.方法:标本系胸外科手术切除的石蜡包埋组织或新近手术切除标本,其中原发性NSCLC 39例、肺良性肿瘤22例、正常肺50例,各组年龄、性别均具可比性.采用免疫组化S-P法和流式细胞术(FCM)分别检测肺组织hnRNP A2/B1的表达及细胞内hnRNP A2/B1的含量.结果:(1)NSCLC组hnRNP A2/B1免疫组化表达阳性率(74.4%)显著高于肺良性肿瘤组(40.1%,P<0.01)及正常肺组(38.0%,P<0.01),NSCLC组中有淋巴结转移者阳性率(94.7%)明显高于无淋巴结转移者(55.0%,P<0.05);(2)NSCLC细胞内hnRNP A2/B1定量测定含量(67.25±14.02,阳性率82.1%)显著高于肺良性肿瘤细胞(31.79±6.79,阳性率4.5%,P<0.01)及正常肺细胞(30.15±5.85,阳性率0,P<0.01),NSCLC组中有淋巴结转移者阳性率(100%)明显高于无淋巴结转移者(65.0%,P<0.05).结论:hnRNP A2/B1对NSCLC的诊断、病情预测、判断淋巴结转移的程度均具有重要的临床价值.FCM与免疫组化方法相比,具有阳性率高、简便、快速等优点.     

COX-2 在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 观察环氧合酶-2（COX-2）在子宫内膜异位症中的表达,并比较其在正常对照子宫内 膜中的表达差异。方法 选取2017 年1 月1 日—2017 年12 月31 日于湖南省妇幼保健院妇科手术切除且经 病理确诊为卵巢子宫内膜异位囊肿患者36 例,根据选取的不同组织分为异位内膜组和在位内膜组。选取同 期于该院就诊的子宫内膜标本正常患者25 例作为对照组。用免疫组织化学法检测各组COX-2 的表达差异。 结果 异位内膜组和在位内膜组COX-2 表达强度高于对照组（P <0.05）。在位内膜组增生期和分泌期的 COX-2 表达强度高于对照组（P <0.05）,异位内膜组美国生育协会分期Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ、Ⅳ期COX-2 表达强 度高于对照组（P <0.05）。结论 COX-2 可能在子宫内膜异位症的发生中发挥作用。     

异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)基因克隆及其在滑膜组织中的表达

目的获得hnRNP A2/B1 cDNA序列,研究其在滑膜组织中的表达水平,探讨它在类风湿滑膜炎中可能的致病作用.方法从人外周血单个核细胞中提取总RNA进行逆转录反应,经PCR扩增目的片段,将其克隆于PUC-T1质粒上,并经酶切电泳、DNA测序鉴定分析.采用免疫组化和原位杂交方法,分别利用单克隆抗体和特异的cDNA探针,检测滑膜组织中hnRNP A2/B1的含量及表达水平.结果从人外周血单个核细胞总RNA中扩增得到目的片段,并经测序证实该片段为hnRNP A2/B1的编码序列.免疫组化和原位杂交显示hnRNP A2/B1在类风湿关节炎(RA)滑膜中的表达水平整体上较骨关节炎(OA)和正常对照滑膜组高(P＜0.05).结论成功克隆hnRNPA2/B1 cDNA;初步证明hnRNP A2/B1水平在RA关节局部增高,推测它可能参与了类风湿滑膜炎的发病.     

异质性胞核核糖核蛋白A2在类风湿关节炎诊断中的临床意义

目的 探讨异质性胞核核糖核蛋白A2（hnRNP A2）在类风湿关节炎（Rheumatoid Anhritis,RA）诊断中的临床意义,建立简便、快捷的ELISA检测方法,并与国外Anti—RA33Ab试剂盒的结果对比,以作为验证国内试剂盒可用性的依据。方法以高纯度的具有抗原反应性的重组hnRNPA2蛋白作为抗原．对临床上包括137例RA在内的多种结缔组织病患者的血清中的相应抗体进行ELISA检测。应用国外Anti—RA33Ab试剂盒ELISA法检测并对比检测结果。结果hnRNPA2在RA患者中的敏感性为37．23％。特异性为85．44％,抗hnRNPA2／RA33抗体在RA患者中阳性率均明显高于其他疾病组（P〈0．05）。抗hnRNPA2／RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为43．75％。与国外Anti—RA33Ab试剂盒检测结果比较,在各组患者中检测抗RA33抗体的阳性率无明显差别（P〉0．05）,且总体符合率高达86．88％。另外,该抗体与年龄、病程、晨僵时间、血沉、C反应蛋白、关节功能、X线分期、类风湿因子（RF）、抗角蛋白抗体（AKA）、抗核周因子抗体（APF）及抗CCP抗体之间均无相关性（P〉0．05）。结论我们初步纯化了RA33抗原．对hnRNPA2进行了基因的克隆、重组蛋白的表达和纯化,并以其为抗原,用ELISA方法检测抗hnRNPA2／RA33抗体是早期诊断RA的可靠方法。与国外Anti—RA33Ab试剂盒的检测结果对比无明显差异,自制的抗RA33抗体试剂盒可以可靠地应用于临床检验。     

环氧合酶-2在子宫内膜异位症子宫内膜组织中的表达

目的：研究环氧合酶-2（COX-2）在子宫内膜异位症（内异症）在位子宫内膜组织和异位子宫内膜组织中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法检测30例卵巢内异症在位内膜、10例卵巢巧克力囊肿壁异位内膜及27例正常子宫内膜中COX-2的分布和表达。结果：COX-2在3组子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞中均可见表达。COX-2在正常对照组内膜和卵巢内异症组在位内膜腺上皮细胞中的表达均是分泌期高于增生期（P<0.05)，而在间质细胞中的表达分泌期与增生期比较无统计学差异（P>0.05)。COX-2在卵巢内异症组在位和异位内膜中的表达均高于对照组（P<0.05），而内异症患者在位和异位内膜中COX-2的表达则无统计学意义（P>0.05）。结论：COX-2在卵巢内异症在位和异位内膜中表达增高，可能与卵巢内异症的病理异常有关。     

逍遥散对大鼠慢性束缚应激脑区NMDAR2A和NMDAR2B蛋白的调节作用

目的观察海马及杏仁核NMDAR2A和2B蛋白在束缚应激状态下蛋白表达变化及逍遥散的调节作用。方法采用每天捆绑3 h的方法制作慢性束缚应激动物模型,并用逍遥散进行干预,分别于7 d后和21 d后用Western blot方法检测各组大鼠海马CA1区、CA3区、齿状回（DG）和杏仁核的NMDAR2A和2B蛋白表达的情况。结果在分离的4个部位（CA1,CA3,DG和杏仁核）,发现NR2A和NR2B分子在其中都有表达。NR2A的表达：在CA3和DG区,7 d和21 d模型组的表达降低,差异具有统计学意义（P〈0.05和P〈0.01）,逍遥散组的表达升高,差异具有统计学意义（P〈0.05和P〈0.01）。NR2B的表达情况和NR2A基本一致。结论逍遥散对NR2A和NR2B有明显的调节作用,在海马的CA3和DG区最明显,对7 d和21 d的应激模型都有不同程度的改变作用,以维持机体原来的平衡状态。提示逍遥散对神经突触性的改变有生理性保护作用。     

同种异体移植物炎症因子在子宫内膜异位症的表达

目的检测同种异体移植物炎症因子（AIF-1）在子宫内膜异位症在位子宫内膜和异位子宫内膜组织中的表达情况,探讨其与子宫内膜异位症的关系。方法收集子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织48例和异位子宫内膜组织58例（研究组）,取同期手术的子宫肌瘤患者子宫内膜组织43例（对照组）,采用免疫组织化学法检测子宫内膜组织中AIF-1的表达情况。结果研究组在位子宫内膜组织中AIF-1表达与对照组相比,差异无显著性（P〉0．05）;研究组异位子宫内膜组织中AIF-1呈明显的高表达,与对照组相比,差异有显著性（P〈0．05）;研究组在位子宫内膜AIF-1表达与异位子宫内膜AIF-1表达之间,差异有显著性（P〈0．05）。结论AIF-1在子宫内膜异位症在位子宫内膜和异位子宫内膜组织中表达增强,可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起重要作用。     

RAP1A和EPAC1在卵巢子宫内膜异位症组织中的表达及意义*

目的 检测RAS相关蛋白1（RAP1）的异构体RAP1A和环磷酸腺苷交换蛋白1（EPAC1）在卵巢子宫内膜异位症的表达和分布,探讨两者在疾病发生、发展中的作用及意义。方法 收集2019年6月—2020年 1月在中南大学湘雅医院妇科行腹腔镜下卵巢子宫内膜异位症手术患者的临床资料及组织,采用免疫组织化学法检测RAP1A和EPAC1在异位内膜、在位内膜、正常内膜的表达和分布情况,采用Western blotting法检测蛋白的表达,分析RAP1A和EPAC1表达的相关性。结果 RAP1A表达于腺上皮细胞及间质细胞的细胞质,在在位内膜腺上皮细胞呈强阳性表达;EPAC1表达于腺上皮细胞的细胞质,在间质细胞的细胞质和细胞核都有表达,在腺上皮细胞的细胞质呈强阳性表达。2种蛋白在异位内膜、在位内膜及正常内膜的表达比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,其中异位内膜、在位内膜的表达均高于正常内膜（P?<0.05）,异位内膜与在位内膜的表达差异无统计学意义（P?>0.05）。Pearson相关性分析显示,RAP1A和EPAC1的表达水平在异位内膜（r?= 0.635,P?<0.05）、在位内膜（r?=0.697,P?<0.05）和正常子宫内膜（r?=0.436,P?<0.05）均呈正相关。结论 RAP1A和EPAC1在卵巢子宫内膜异位症中呈高表达,两者可能相互协同,促进异位病灶的发生、发展。     

IL-8在子宫内膜异位症在位内膜的表达

目的:探讨白介素-8(interleukin-8,IL-8)在子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)患者的在位子宫内膜中的表达水平及其在EMT发病中的作用。方法:采用免疫荧光方法与Western Blot检测并比较IL-8在EMT患者在位内膜和正常子宫内膜中的表达水平。结果:(1)免疫荧光检测结果显示IL-8在内膜腺体和间质细胞中均有表达,主要定位于内膜腺体的腺泡浆。正常子宫内膜分泌期IL-8的表达(26.577±3.202)高于增生期(17.204±1.905)(P<0.05);EMT在位内膜分泌期IL-8的表达(49.122±5.390)高于其增生期(38.506±2.744)(P<0.01);EMT在位内膜IL-8的表达高于正常子宫内膜(P<0.01);(2)Western Blot结果显示:正常子宫内膜分泌期IL-8的表达(0.346±0.035)与其增生期(0.076±0.015)相比,差异有统计学意义(P<0.01);EMT在位内膜分泌期IL-8的表达(0.659±0.043)高于其增生期(0.437±0.0428)(P<0.01);EMT在位内膜IL-8的表达高于正常子宫内膜(P<0.01)。结论:IL-8可能在病变中起重要作用。