大鼠压力超负荷心肌糖蛋白130表达及贝那普利干预研究

目的 研究糖蛋白130(GP130)在腹主动脉缩窄所致大鼠压力超负荷性心肌肥大模型中的表达变化与心肌肥大的关系,以及贝那普利(Benazepril,Ben)对GP130蛋白表达及心肌肥大的影响.方法 用腹主动脉缩窄术建立大鼠压力超负荷性心肌肥厚模型,随机分为左室肥厚组(LVH,n=7)、贝那普利干预组(n=7,贝那普利1 mg·kg-1·d-1,灌胃3周),另设一假手术组(n=7)为对照.干预3周后测定血流动力学指标、左心室质量指数,应用放射免疫分析法测定心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,免疫组化法检测心肌中GP130 蛋白水平表达.结果与假手术组比较,左室肥厚组动物的血压与左心室质量指数显著升高(P＜0.05);心肌组织AngⅡ含量(P＜0.01)和GP130蛋白表达水平明显增加(P＜0.05).贝那普利干预可显著降低血压和左心室质量指数(P＜0.05),同时降低肥厚心肌组织AngⅡ浓度(P＜0.01)与GP130蛋白表达水平(P＜0.05).结论 GP130蛋白的过度表达参与了压力超负荷性大鼠心肌肥大的发病过程;贝那普利对GP130蛋白表达及心肌肥大有抑制作用.     

心肌营养素-1在压力超负荷性大鼠心室重构中的表达及替米沙坦的干预影响

本文旨在研究心肌营养素-1（Cardiotrophin-1,CT-1）在压力超负荷大鼠心室重构中的表达变化与心室重构的关系，以及替米沙坦（Telmisartan）对CT-1表达的影响。     

黄芪多糖对压力超负荷诱导的大鼠心肌营养素-1、血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的:探讨黄芪多糖对压力超负荷诱导的大鼠心肌营养素-1(CT-1),血管紧张素Ⅱ(AngII)表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组,腹主动脉缩窄组,APS低剂量组,APS高剂量组和Captopril组,6周后测定大鼠心脏指数的变化,免疫共沉淀法测定血浆及左心室肌组织中血管紧张素II含量的变化,酶联免疫吸附法检测左心室肌组织中CT-1表达的改变。结果:心脏指数(心脏重量/体重)模型组高于正常组(P<0.01),APS低剂量组较模型组降低(P<0.05),APS高剂量组降低更明显(P<0.01);左心室肌组织中AngII的表达模型组高于正常组(P<0.01),APS低(高)剂量组AngII的表达较模型组降低(P<0.01);CT-1蛋白的表达模型组高于正常组(P<0.01),APS高剂量组较模型组显著减少(P<0.05)。结论:黄芪多糖可抑制压力超负荷诱导的大鼠CT-1及AngII的表达,进而抑制心肌肥大的发生。     

心肌营养素-1在扩张型心肌病大鼠心肌的表达

目的探讨心肌营养素-1（CT-1）在DCM大鼠心肌的表达及作用。方法30只成年雄性Wistar大鼠随机分为两组：DCM组20只,腹腔内注射阿霉素（ADM）2．5mg／kg,2次／周,共6周,诱导大鼠DCM模型;对照组10只,同法注射等量生理盐水。第8周时行心脏超声检测,用VG染色观察心肌组织病理改变,用半定量RT—PCR检测CT-1在对照组大鼠与DCM大鼠心肌的表达。结果DCM组的心脏较对照组明显扩大,且心肌纤维化明显,心肌CT-1表达明显升高（P〈0．01）。结论在阿霉素诱导的DCM大鼠心肌中CT-1过度表达,可能与其保护心肌细胞、促进心肌细胞肥大有关。     

心肌营养素-1在心血管系统作用的研究进展

心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)是Pennica等[1]在1995年利用小鼠心脏发育的胚胎干细胞模型克隆出的一种促进心肌肥大的细胞因子,此外,在心血管系统中还有多种生物学作用.现就其研究进展综述如下.     

心肌营养素-1上调大鼠心肌转录因子GATA4 mRNA的表达

[目的]研究心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)对心肌转录因子GATA4 mRNA表达的影响。[方法]应用RT-PCR半定量技术,分别测定不同刺激剂量CT-1作用24 h及0.1nmol/L的CT-1作用不同时间后,大鼠心肌细胞GATA4 mRNA表达情况。[结果]心肌细胞GATA4 mRNA表达值在0.001 nmol/L、0.01 nmol/L、0.1 nmol/L1、nmol/L及10 nmol/L的CT-1作用24 h后分别为0.504±0.044、0.73±0.029、1.217±0.023、2.109±0.11、2.613±0.089;与对照组0.445±0.024相比,0.01nmol/L以上组均差异显著(P<0.05);在0.1 nmol/L的CT-1作用10 min、30 min1、h、2 h3、h、6 h1、2 h及24 h后分别为0.591±0.2、0.613±0.096、0.618±0.088、0.608±0.132、0.657±0.055、1.109±0.089、1.309±0.111、1.323±0.074;与对照组0.55±0.1067相比,6 h以后均表现为极显著性差异(P<0.01)。[结论]CT-1刺激与大鼠心肌转录因子GATA4 mRNA表达有明显的相关性。     

信号转导通路在心肌营养素-1调解心肌转录因子GATA4表达中的作用

目的探讨（CT-1）3条主要作用通路（STAT3、ERK和PI3-K）在其致心肌肥大过程中的作用及相互关系。方法应用Parthenolide（STAT3通路阻断剂）和（或）U0126（ERK通路阻断剂）及（或）LY-294002（PI3-K通路阻断剂）预处理，再加入CT-1（0．1nmol／L）作用6h后测定各组GATA4 mRNA，作用60min后测定GATA4结合活性。结果Parthenohde可抑制CT-1引起的GATA4 mRNA的表达（P〈0.01）及结合活性的增强，U0126可以增加GATA4转录表达（P〈0．01）及GATA4结合活性，LY294002对上述过程均无影响。U0126引起的GATA4的表达增加可被Parthenohde抑制。结论CT-1主要主要通过STAT3通路发挥致肥大作用，ERK通路通过负调节STAT3通路参与CT-1肥大刺激过程，而PI3-K通路则不参与此过程。STAT3与ERK通路的相互作用共同参与CT-1的致肥大过程。     

心肌营养素-1的研究进展

心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)是1995年Pennica等从小鼠心脏胚胎干细胞中克隆出的一种新型细胞因子,因能诱导心肌细胞肥大,故命名为CT-1.进一步研究发现,其结构与细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)家族成员如白血病抑制因子(leukamia inhibitory factor,LIF)、睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)、抑瘤素M(oncostatin M,OSM)、IL-6和白细胞介素-11(interleukin-11,IL-11)具有高度同源性,属IL-6家族新成员.研究表明,CT-1存在于多种组织中,在心肌组织中表达最高,不仅在心脏发育和促心肌肥大中有重要作用,还对心肌细胞具有保护作用,同时对其他细胞也产生广泛的生物学影响.     

贝那普利对自发性高血压大鼠心肌纤维化及心肌肿瘤坏死因子表达影响

目的：研究贝那普利在预防自发性高血压大鼠（SHR）心肌纤维化中的作用及对心肌肿瘤坏死因子。“（TNF-α）表达的影响。方法：16只6周龄SHR分为实验组（SHR-con组）和药物干预组（SHR—ben组）,7只同周龄WKY鼠为正常血压对照组（WKY组）。SHR—ben组给予贝那普利（10mg&#183;kg-1&#183;d-1）灌胃12周,其余两纽蒸馏水灌胃,均每日1次。颈动脉插管,测颈动脉收缩压（SBP）和舒张压（DBP）,天狼猩红染色,计算机图像分析软件分析心肌切片的胶原容积分数（CVF）和心肌小动脉周围胶原面积与小动脉管腔面积比（PVCA／LA）;偏振光显微镜观察I、Ⅲ型胶原（像素表示）,计算I／Ⅲ型胶原之值,观察心肌纤维化程度;用冰冻切片（免疫组化法）观察心肌TNF。a表达。结果：喂养12周后与WKY组比,SHR-con组SBP和DBP明显升高,CVF、PVCA／LA、I／Ⅲ胶原之值亦显著升高（P〈0．01）,TNF—α表达亦增多;而SHR-ben组各指标较sHR-con组均显著性下降（P〈0．01）,贝那普利有效降低SHR的SBP、DBP,亦使CVF、PVCA／IA、I／Ⅲ胶原之值均明显下降,改善SHR左心室纤维化,且下调TNF—α表达。结论：长期应用贝那普利治疗可预防和部分逆转高血压大鼠心肌纤维化,其机制可能与贝那普利除能降低血压外,还能降低心肌局部TNF—α表达有关。     

川芎嗪联合贝那普利对GK大鼠肾间质MCP-1和TGF-β1表达干预的实验研究

目的：观察川芎嗪联合贝那普利对GK大鼠肾间质TGF—β1、MCP-1等表达的干预作用。方法：将GK大鼠随机分为模型组、川芎嗪组、贝那普利组、川芎嗪＋贝那普利组,每组10只;另设10只鼠龄、体重相匹配的Wistar大鼠作为正常对照组,分别予以相应处理,实验第8周、第12周和第16周,收集24h尿液,测定24h尿蛋白定量;治疗16周后处死动物,摘取肾脏,免疫组化法检测肾组织TGF—β1和MCP-1的表达。结果：与模型组相比,各治疗组24h尿蛋白、TGF-β1、MCP-1等指标改善（P〈0．05,或P〈0．01）;在下调TGF—β1、MCP-1方面,川芎嗪联合贝那普利组与川芎嗪组、贝那普利组相比有降低趋势（P〈0．05）。结论：川芎嗪联合贝那普利能改善GK大鼠肾脏的功能,其机制可能与降低GK大鼠血糖水平,下调肾组织TGF—β1、MCP-1表达有关。     

大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中核仁素的表达

目的：探讨腹主动脉缩窄致压力负荷增加大鼠心肌肥厚模型中核仁素的表达情况。方法：采用体质量
180~220 g SD大鼠40只,随机分为假手术组和腹主动脉缩窄模型组,利用腹主动脉缩窄法制备压力负荷增加心肌肥
厚模型,分别于术后2周、4周观察心脏质量指数、左心室质量指数;采用RT-PCR检测心肌组织中-MHC mRNA的
表达;采用Western印迹检测心肌、脑、肾组织中核仁素的表达情况。结果：腹主动脉缩窄模型组4周以后心脏质量
指数、左心室质量指数较假手术组显著增加(P<0.01);4周以后心肌组织中-MHC mRNA的表达较假手术组显著升高
(P<0.05);2周以后心肌组织中核仁素蛋白的表达较假手术组显著升高(P<0.05),而在脑、肾组织中无明显升高。结论：
核仁素蛋白在大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中的表达上调,表明核仁素可能参与了压力负荷增加心肌肥厚的发生
发展。     

心肌营养素-1在阿霉素心衰大鼠心室重构中的作用及伊贝沙坦对其的干预

目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂伊贝沙坦对阿霉素心衰大鼠心室肌中心肌营养素-1(CT-1)的表达以及对心室重构的影响.方法:30只雄性SD大鼠,随机分成2组:正常对照组(n=10)和心衰模型组(n=20).后者给予腹腔注射阿霉素造模,造模后将存活的18只大鼠随机分为模型对照组和治疗组,分别给予生理盐水(2mL/d, Qd)和伊贝沙坦(50mg/kg, Qd)灌胃.同时正常对照组也给予生理盐水(2mL/d, Qd)灌胃.灌胃12周后用免疫组织化学的方法检测CT-1的表达.结果:与正常对照组相比,模型对照组和治疗组大鼠CT-1的表达均明显升高,模型对照组大鼠心室肌CT-1和左心室质量指数呈明显正相关,治疗组的CT-1较模型对照组明显降低.结论:CT-1的过度激活在阿霉素心力衰竭大鼠的心室重构中发挥着重要作用,伊贝沙坦逆转心室重构的作用可能与其下调CT-1的表达有关.     

1磷酸鞘氨醇受体1型信号通路在压力超负荷诱导的心室重构中的作用及机制

目的 研究1磷酸鞘氨醇受体1型（sphingosine 1-phosphate receptor 1, S1PR1）信号通路在压力超负荷诱导的心室重构中的作用及其机制。方法 构建小鼠主动脉弓缩窄（transverse aortic constriction, TAC）模型,模型建立的第2天开始经腹腔注射S1PR1激动剂SEW2871或相应的对照溶剂DMSO,持续给药30d后观察S1PR1激动剂对TAC术后小鼠心功能的影响。体外实验： 首先通过慢病毒感染建立S1PR1基因过表达（S1PR1组）或S1PR1基因沉默（shRNA组）的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)稳定表达株及相应对照组（NC组）,并检测细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的活性水平。同时,分别收集NC组、S1PR1组和S1PR1组加ERK1/2阻滞剂U0126（S1PR1+U0126组）的HUVEC细胞培养上清液,在0.5μmol/L的血管紧张素II（Ang II）的刺激下将各组HUVEC细胞培养上清液分别与H9C2心肌细胞共培养,48h后测量H9C2心肌细胞大小,分析HUVEC细胞表达的S1PR1通过旁分泌对心肌细胞肥大的影响及可能机制。结果 给药30d后,心超提示TAC术后SEW2871组左室射血分数（59.65%±6.12%）较DMSO组（41.16%±11.91%）显著提高（P＜0.05）。免疫荧光染色表明TAC术后SEW2871组较DMSO组心肌组织纤维化及心肌肥大程度明显降低（P＜0.05）。蛋白印迹结果提示S1PR1激活ERK1/2信号通路。H9C2心肌细胞的面积测量结果表明S1PR1组[（22.52±4.13）μm2]较NC组[(34.98±12.92）μm2]及S1PR1+U0126组[(80.60±36.60）μm2]的心肌细胞的面积明显降低（P＜0.05）。结论 S1PR1可以显著改善压力超负荷诱导的心室重构,提高心功能,减轻心肌组织纤维化及心肌细胞肥大。内皮细胞表达的S1PR1能改善心肌细胞肥大,可能是通过激活ERK1/2信号通路完成。     

辛伐他汀对肾性高血压大鼠血压和心肌肥厚的影响

目的：研究辛伐他汀对肾性高血压大鼠血压抑制及对其抗心肌肥厚的作用。方法：大鼠被随机分成3组：假手术组、模型组（双肾双颊）和治疗组（双肾双夹＋辛伐他汀）。治疗组于模型制备后第3周予以辛伐他汀2m∥（kg·d）通过饮水给药,其他两组自由饮水。给药连续3个月后各组进行心功能各项指标的测定。结果：模型组颈动脉舒张压、收缩压、平均压、左心室重／体重,左右心室重量比分别比假手术组增加61．56％、39．93％、38．25％、61．64％和46．02％（各组P〈0．05）。辛伐他汀组的颈动脉舒张压、平均压、左心室重／体重和左右心室重量比分别比模型组减少11％、10．33％、11．53％和12．49％（各组P〈0．05）。结论：辛伐他汀可部分抑制肾性高血压大鼠的血压及心肌肥厚。     

Effect of Yiqi Huoxue Recipe (益气活血方) on cardiac function and ultrastructure in regression of pressure overload-induced myocardial hypertrophy in rats

Objective:To investigate the effect of Yiqi Huoxue Recipe (YHR,益气活血方)on the cardiac function and ultrastructure during the regression of myocardial hypertrophy induced by pressure overload in rats.Methods:The model of myocardial hypertrophy was established by abdominal aortic banding.Eighty male Wistar rats were divided into six groups,the normal control groupⅠ(n=20),the normal control groupⅡ(n=12),the hypertension model groupⅠ(n=12),the hypertension model groupⅡ(n=12),the YHR group(n=12)and the Captopril group(n=12).The observation was carried out in the normal control groupⅠand the hypertension model groupⅠafter 4 weeks of modeling,and the other four groups were observed after 16 weeks of modeling(12 weeks of administration).The cardiac function was measured with a multichannel biological signal analysis system,and the myocardium ultrastructure was observed by a transmission electron microscope. Results:(1)Compared with the normal control groupⅠ,the systolic blood pressure and cardiac coefficient(left ventricular weight/body weight)in the modelⅠgroup was higher(P<0.05,P<0.01). (2)In the YHR group,cardiac coefficient and-dp/dt_(max)were lower,left ventricular systolic pressure and dp/dt_(min)were higher when compared with the model groupⅡand the Captopril group(P<0.05 or P<0.01).In the Captopril group,only cardiac coefficient was lower when compared with the mode groupⅡ(P<0.05).(3)Compared with the normal control groupⅡ, dp/dt_(max)was higher(P<0.01), -dp/dt_(max)and isovolumetric contraction time(ICT)was lower(P<0.05,P<0.01)in both the YHR group and the Captopril group.(4)Results of the myocardium ultrastructure showed edema under myocardium plasmalemma,enlarged sarcoplasmic reticulum and T tube,and significantly enlarged intercalated disc of the cardiac muscle in the model groups.In the Captopril group,the extension of sarcoplasmic reticulum and T tube as well as the pathological changes of intercalated disc were lighter,with slight edema under the myocardium plasmalemma.In the YHR group,the expansion of the sarcoplasmic reticulum was less than in the Captopril group,part of the pathological changes of intercalated discs was slightly more severe than that in the Captopril group,the dissolution of nuclear chromatin was not found,which was similar to that of the Captopril group,and no injury of the nucleus was found,either.Conclusion:YHR could reverse myocardial hypertrophy in rats with abdominal aortic banding and improve the systolic and diastolic function of the left ventricle.The ultrastructure of the myocardium such as arcoplasmic reticulum,intercalated disc,and cell nucleus in abdominal aortic banding rats could be partly reversed by the recipe.     

伊贝沙坦联合贝那普利对老年高血压病患者心功能及左心室肥厚的影响

目的　探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂 (ARB)联合血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)并与ACEI比较 ,对老年高血压病患者心功能及左心室肥厚 (LVH)的影响。方法　 18例年龄≥ 65岁的老年原发性高血压 (高血压分级 1,2级 )经超声心动图 (UCG)测定左心室内径、室间隔和左室后壁厚度 ,并测算左心室重量指数符合LVH诊断的患者 ,随机分为两组 ,伊贝沙坦联合贝那普利治疗组 10例 ,贝那普利对照组 8例。治疗 8周后两组患者再次UCG检查 ,对比治疗前后左心功能及左心室参数的变化。结果　治疗组的心脏指数 (CI)、射血分数 (EF)及平均左室周边缩短率 (mVcf)均高于对照组(P <0 0 5 ) ,治疗后室间隔、左室后壁厚度无显著性改变 ,但左心室重量指数 (LVMI)有下降 (与治疗前及对照组比较均P<0 0 5 )。结论　ARB联合ACEI治疗改善老年高血压病患者心功能作用优于ACEI单独应用。短期 (8周 )联合治疗对LVH的影响不明显 ,但LVMI有下降     

压力过载型心肌肥厚大鼠模型的制备及评价

目的制备压力过载型心肌肥厚大鼠模型,并对其进行评价。方法选用240～260g雄性SD大鼠,采用内径0．6mm银夹对其腹主动脉进行缩窄手术,制备压力过载型心肌肥厚模型（LVH,n=15）,同时设置假手术组（SHAM,n=15）作对照。术后第24周检测大鼠血流动力学指标、全心质量指数（heart mass index,HMI）及左室质量指数（left ventricular mass index,LVMI）,并观察心肌组织形态学变化。结果与假手术组相比,模型大鼠动脉收缩压（systolic arterial pressure,SAP）,舒张压（diastolic arterial pressure,DAP）及平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）均显著上升（P〈0．001）,左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）及左室舒张末压（left ventficular end diastolic pressure,LVEDP）均显著升高（P〈0．01,P〈0．001）;全心质量指数及左室质量指数显著增加（P〈0．001）;模型大鼠心肌组织出现明显肥厚病理学改变。结论腹主动脉缩窄24周使大鼠产生明显的血流动力学及形态学异常,可成功制备压力过载型心肌肥厚动物模型。     

钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ调控压力负荷心力衰竭小鼠心肌细胞肥大和凋亡的作用及机制

[摘要]　目的　探讨抑制钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）介导压力负荷心力衰竭小鼠心肌细胞肥大及凋亡的作用及机制。方法　取6～8周雄性C57BL/6小鼠24只,随机分为4组：假手术组、假手术+KN-93组、主动脉缩窄术（TAC）组、TAC+KN-93组,每组6只。称各组小鼠体质量和心脏质量,计算心脏质量指数（HWI）;通过超声心动图评价小鼠心脏结构和功能;WGA、Masson及TUNEL染色分别检测小鼠心肌细胞横截面积、纤维化程度和凋亡水平;qRT-PCR检测ANP mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测心房利尿钠肽(ANP)、脑利尿钠肽(BNP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、活化的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)、活化的半胱胺酸蛋白酶9(Cleaved-caspase 9)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)、磷酸化钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(p-CaMKⅡ)和沉默调节蛋白(Sirt3)蛋白蛋白表达。结果　与假手术组相比,TAC组小鼠HWI、左心室舒张末期直径（LVEDD）、左心室收缩末期直径（LVESD）均增加（P均<0.05）,左心室射血分值（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）均降低（P均<0.05）;心肌细胞横截面积增大（P<0.05）,心肌组织ANP mRNA和蛋白及BNP、β-MHC蛋白表达均增加（P均＜0.05）,心肌纤维化和心肌细胞凋亡均增加（P均<0.05）,心肌组织凋亡蛋白活化的Caspase3、活化的aspase9和Bax相对表达量均增加（P均＜0.05）,抗凋亡蛋白Bcl-2相对表达量降低（P<0.05）,p-CaMKⅡ/CaMKⅡ比率下降（P<0.05）,Sirt3相对表达量增加（P<0.05）。而给予CaMKⅡ抑制剂KN-93后,TAC+ KN-93组小鼠上述指标均被逆转,与TAC组相比差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论　抑制CaMKⅡ能够减轻压力负荷心力衰竭小鼠的心功能不全,抑制心肌细胞肥大及凋亡,且其作用机制与Sirt3有关。