高压氧治疗对2型糖尿病大鼠睾丸的保护作用及其机制

目的:研究高压氧对大鼠糖尿病睾丸病变的保护作用并探讨其机制。方法:32只大鼠,其中8只Wistar正常大鼠,24只2型糖尿病GK大鼠,分4组,分别为对照组、模型组、二甲双胍对照组及高压氧组。对照组和模型组予纯净水5 mL/(kg·d)灌胃,二甲双胍组予二甲双胍混悬液250 mL/(kg·d)灌胃,高压氧组予纯净水5 mL/(kg·d)灌胃,同时加以稳压纯氧0.15 MPa处理30 min。3周后集中处死,摘取睾丸组织。睾丸组织经甲醛溶液固定后制成切片,分别行HE染色观察组织结构变化;TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测NOS及SOD蛋白表达水平。结果:对照组睾丸曲细精管HE染色后光镜下见丰富饱满,生精细胞5~6层,腔内见丝状精子;模型组睾丸曲细精管萎缩,生精细胞数量减少,只有2~3层,腔内精子减少;高压氧组睾丸结构破坏较模型组明显减轻,曲细精管内精子数量明显增多,结构较完整。睾丸的凋亡主要发生在生精细胞,模型组凋亡指数最高,与其他3组相比差异具有统计学意义(P0.05);高压氧干预后凋亡细胞数较模型组减少,但仍高于对照组(P0.05),与二甲双胍组类似。模型组NOS表达最强,对照组最弱,与其他3组比较差异均有统计学意义(P0.05);高压氧组NOS表达介于对照组和模型组之间(P0.05),与二甲双胍组类似。模型组SOD表达最弱,对照组最强,高压氧组介于两者之间,与两组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:糖尿病时氧自由基增多,并引起凋亡增加是引起睾丸损伤的重要原因,高压氧可以促进SOD的合成,使其清除多余氧自由基,通过此机制可以抑制细胞过度凋亡,从而达到保护睾丸组织的目的。     

汉防己甲素影响糖尿病大鼠各组织葡萄糖转运蛋白4蛋白表达的意义

目的:观察汉防己甲素是否能够提高链脲菌素-糖尿病大鼠各组织葡萄糖转运蛋白4的蛋白表达,并与治疗糖尿病有已知疗效的药物二甲双胍作为对比,分析汉防己甲素对糖尿病的治疗作用。方法:实验于2004-10/2005-03在国家重点实验室国家人类基因组计划北方中心诺赛基因完成。①选用8～10周龄雄性(SPF级)Wistar大鼠28只。于大鼠静脉注射链脲佐菌素60.0mg/kg,当大鼠血浆葡萄糖浓度≥20mmol/L并且有多尿等其他糖尿病特征时,为糖尿病模型造模成功(n=28)。②将其造模成功大鼠按随机抽签法分为4组(每组7只):模型组,汉防己甲素组,二甲双胍组,二甲双胍 汉防己甲素组。汉防己甲素组:每8小时尾静脉注射1.0mg/kg汉防己甲素(浙江金华制药厂产品,2mL/支),3次/d;二甲双胍组:灌胃100mg/穴kg·d雪二甲双胍(丹东医创药业有限责任公司,2mL/支)混悬液;二甲双胍 汉防己甲素组:每8小时尾静脉注射1.0mg/kg汉防己甲素,3次/d,同时灌胃100mg/穴kg·d雪二甲双胍混悬液。模型组:饲以普通饲料喂养。每组干预1周。③在用药1周后将4组大鼠处死,立即解剖大鼠分别取出肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织放入-80℃保存,用电泳及Westernblot检测肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面/细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达。④计量资料差异比较采用t检验。结果:大鼠28只均进入结果分析。汉防己甲素组肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面/细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达明显高于模型组,是模型组的两三倍(P<0.05～0.01),尤其在肝脏和脂肪细胞中表达更高。二甲双胍组肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面/细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达也明显高于模型组,是模型组的一两倍(P<0.05),不如前者明显。二甲双胍 汉防己甲素组肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面/细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达也明显高于模型组,是模型组的2～3.5倍(P<0.05～0.01),尤其在脂肪细胞中最高。结论:汉防己甲素可以提高糖尿病大鼠外周组织葡萄糖转运蛋白4蛋白表达,提高对葡萄糖的利用率。该作用与二甲双胍基本相当,两者合用的效果并不特别明显。     

小剂量阿司匹林对糖尿病大鼠心脏的保护作用

目的 探讨小剂量阿司匹林对糖尿病大鼠心脏的保护作用及机制.方法 雄性SD大鼠尾静脉注射链脲佐菌素30 mg/kg,造成1型糖尿病动物模型后,随机分为糖尿病模型组和阿司匹林组各8只,另选8只健康雄性大鼠为对照组.阿司匹林组大鼠灌服阿司匹林9 mg/kg+蒸馏水,对照组和糖尿病模型组大鼠灌服同体积的蒸馏水,12周后检测各组大鼠空腹血糖、血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,HE染色法检查心肌组织病理显微结构,免疫组织化学法检测Caspase-3,Bax和Bcl-2的表达情况.结果 糖尿病模型组和阿司匹林组大鼠空腹血糖、CK和LDH水平较对照组明显升高(P＜0.05),阿司匹林组空腹血糖较糖尿病模型组降低(P＜0.05);阿司匹林组CK和LDH水平较糖尿病模型组降低,但差异均无统计学意义(P＞0.05);糖尿病模型组大鼠心脏显微结构基本正常,但可见局部心肌纤维排列紊乱等病理改变,小剂量阿司匹林治疗12周后,心肌上述病理改变明显减轻;糖尿病模型组Caspase-3和Bax表达均强于对照组(P＜0.05),Bcl-2表达弱于对照组(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值低于对照组(P＜0.05);阿司匹林组Caspase-3和Bax表达均弱于糖尿病模型组(P＜0.05),Bcl-2表达明显强于糖尿病模型组(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值明显高于糖尿病模型组(P＜0.05).结论 小剂量阿司匹林可能通过调节细胞凋亡相关蛋白表达对糖尿病大鼠心脏起保护作用.     

玉米须总皂苷对病因性糖尿病模型小鼠的降糖效应

目的:观察玉米须总皂苷对链脲佐菌素加灌服蔗糖所致糖尿病模型小鼠的影响,分析玉米须总皂苷的降糖特点。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用昆明种清洁级小鼠60只,随机数字表法分为6组:空白对照组、模型对照组、二甲双胍组、玉米须总皂苷400,200,100mg/kg组,10只/组。玉米须总皂苷由河南中医学院化学实验室提供。②除空白对照组外,其余5组均采用小剂量链脲佐菌素(15g/L) 蔗糖建立病因性糖尿病模型。造模后玉米须总皂苷400,200,100mg/kg组分别灌服400,200,100mg/kg剂量的玉米须总皂苷(浓度分别为20,10,5g/L,灌胃体积0.2mL/10g);二甲双胍组灌服0.5g/kg二甲双胍(浓度为25g/L,灌胃体积0.2mL/10g);模型对照组灌服同体积生理盐水。1次/d,共30d。③于给药第10,20天尾部取血测血糖值;第30天尾部采血测空腹血糖;然后灌服0.4mL/10g的葡萄糖5g/kg,并分别于灌糖后30,60,120min尾部采血进行血糖水平测定。处死后取胰腺、肾脏,作组织病理检查。结果:60只小鼠均进入结果分析。①与空白对照组比较,模型对照组给药后第10,20,30天各阶段血糖值均显著升高,说明小剂量静脉注射链脲佐菌素加蔗糖可成功建立糖尿病模型。②与模型对照组比较,玉米须总皂苷400,200,100mg/kg组给药后第30天血糖值均显著降低[(9.607±1.607),(7.535±1.517),(7.480±1.069),(7.667±1.336)mmol/L;P<0.01];玉米须总皂苷400,200mg/kg组糖耐量降低得到明显改善(P<0.05),保护链脲佐菌素所致的肾脏的病变和胰岛损伤。结论:静注小剂量的链脲佐菌素加灌服蔗糖可成功建立小鼠病因性糖尿病模型,玉米须总皂苷对该病因性糖尿病模型有较好治疗作用。     

甲状腺激素通过调节甲亢大鼠卵巢葡萄糖转运影响黄体增殖和血管生成、凋亡的机制

目的 探究甲状腺激素通过调节甲亢大鼠卵巢葡萄糖转运影响黄体增殖和血管生成、凋亡的机制.方法 将无特定病原体(SPF)级3周龄Sprague-Dawley大鼠根据随机数字表法分为两组:对照组(大鼠每日灌服5 mL蒸馏水,n=5)和甲亢组(L-甲状腺素250μg/kg溶于5 mL蒸馏水后灌胃,诱导大鼠甲亢,n=5).甲亢诱...     

啤酒对大鼠脂肪代谢相关酶活性的影响

背景长期过量饮用啤酒有可能会引起体内组织或血清酶活性的变化.目的观察啤酒的饮用量与大鼠脂肪合成与分解代谢相关酶活性的关系.设计随机对照动物实验.单位泰山医学院基础医学研究所.材料实验于2004-12/2005-02在泰山医学院基础医学研究所完成.选择SD大鼠60只,分为6组,每组10只.按体质量每天灌服啤酒量分为9 mL/kg,18 mL/kg,27 mL/kg,36 mL/kg及45 mL/kg组;对照组大鼠食水自由,不灌服啤酒.方法各组大鼠连续喂饲1周后,麻醉处死大鼠,采取血样,留取肝脏、皮下脂肪、肠系膜脂肪组织以及腓肠肌,分别进行生化分析和酶活性的测定.主要观察指标①喂饲1周后各组大鼠体质量、血糖、胰岛素以及血脂水平.②喂饲1周后各组大鼠肝脏和脂肪组织酶活性.③喂饲1周后各组大鼠激素敏感脂肪酶和脂蛋白脂肪酶活性.结果纳人60只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①喂饲1周后各组大鼠体质量及生化指标水平比较啤酒36 mL/kg组大鼠体质量、血清游离脂肪酸、高密度脂蛋白胆固醇、肝脏三酰甘油及肝脏胆固醇含量均显著高于对照组(x2=19.44～20.01,P＜0.01).②喂饲1周后各组大鼠肝脏和脂肪组织酶活性比较啤酒36 mL/kg组大鼠肝脏、皮下脂肪组织和肠系膜组织的肝脏微粒体三酰甘油转换蛋白、磷脂酰磷酸水解酶、苹果酸酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性均显著高于对照组(x2=15.02～16.00,P＜0.05).③喂饲1周后各组大鼠激素敏感脂肪酶和脂蛋白脂肪酶活性比较啤酒36 mL/kg组大鼠腓肠肌激素敏感脂肪酶活性显著低于对照组(P＜0.01),但皮下脂肪组织的激素敏感脂肪酶活性显著高于对照组(P＜0.01).啤酒36 mL/kg组在肠系膜脂肪、皮下脂肪及腓肠肌组织中脂蛋白脂肪酶活性均显著高于其他啤酒组和对照组(x2=19.00～20.00,P＜0.01).结论每日灌服一定量的啤酒(36 mL/kg)可促进大鼠肝脏合成和转运三酰甘油的能力,脂肪组织如肠系膜脂肪组织的脂质合成和储存增多,外周组织如肌肉组织和皮下脂肪组织的脂肪分解和动员也增加,最终导致体质量增长.     

栀子苷通过抑制细胞凋亡保护糖尿病大鼠胰岛细胞

目的探索栀子苷(GEN)对糖尿病大鼠胰岛细胞的影响及相关机制。方法利用链脲佐菌素(STZ)制作大鼠糖尿病模型,50只SD大鼠随机分为5组,对照组,模型组,栀子苷10 mg/kg,栀子苷25 mg/kg,栀子苷50 mg/kg,每组10只,连续栀子苷灌胃用药1周后,对照组和模型组只给与等量生理盐水灌胃处理。检测大鼠空腹血糖值;利用Western blot法检测凋亡因子NF-κB以及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达;酶联免疫吸附(ELISA)法检测Caspase-3、Caspase-9活性。结果一周后,模型组血糖值显着高于对照组,而栀子苷组较模型组有明显降低(P0.05);Western blot显示,模型组NF-κB和Bax表达显着高于对照组,而栀子苷组则明显抑制NF-κB和Bax表达,并呈剂量依赖效应(P0.05),相反,模型组中Bcl-2表达则显着低于对照组,而栀子苷组则显着高于模型组(P0.05);ELISA显示,模型组Caspase-3、Caspase-9活性显着高于对照组,而栀子苷组则明显抑制Caspase-3、Caspase-9活性,并呈剂量依赖效应(P0.05)。结论栀子苷对糖尿病大鼠模型具有降糖作用,可能是通过抑制NF-κB和Bax,提高Bcl-2表达,同时还可能抑制Caspase-3和Caspase-9蛋白酶活性,从而减轻了胰岛细胞的凋亡来发挥作用。     

甲强龙对环扎法所致大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的相关性研究

目的探讨甲强龙(MP)对大鼠脊髓损伤(SCI)后神经细胞凋亡的影响,以及相关分子机制研究。方法 45只SD大鼠随机分为3组,对照组(n=15),模型组(n=15)和实验组(n=15)。实验组于术后给与甲强龙尾静脉注射(30 mg/kg),模型组为SCI模型,对照组只切开椎板,不损伤脊髓。分别于7 d、14 d和21 d进行下肢功能评分(BBB评分);21 d后取出损伤脊髓,利用Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白表达;免疫组织化学染色及TUNEL染色检测Caspase-3阳性细胞数和神经细胞凋亡水平。结果各时间点BBB评分,模型组显著低于对照组,而实验组明显高于模型组(P0.05);Western blot法显示,甲强龙显著抑制Bax,提高Bcl-2表达(P0.05);组织学观察显示,甲强龙显著抑制Caspase-3表达,以及下调TUNEL阳性细胞数(P0.05)。结论甲强龙可通过抑制大鼠脊髓损伤Bax和Caspase-3表达,提高Bcl-2表达,从而抑制神经细胞的凋亡。     

二甲双胍干预FFA诱发内质网应激介导的IR及β细胞凋亡的机制研究

目的：探究二甲双胍干预游离脂肪酸（FFA）诱发内质网应激介导胰岛素抵抗（IR）与β细胞凋亡机制。方法：应用FFA喂养建立2型糖尿病大鼠模型,将建模大鼠随机分为二甲双胍组与模型组,二甲双胍组每天予200mg/kg浓度二甲双胍处理,模型组每天予相同体积生理盐水处理,将正常喂养大鼠作为空白对照组,同样予相同体积生理盐水处理。三组均给药52d,比较三组大鼠尾尖静脉血糖代谢、β细胞凋亡率、内质网应激指标mRNA、内质网应激指标蛋白表达水平。结果：模型组与二甲双胍组大鼠体重、MBCI显著低于空白对照组（P＜0.05）,空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR显著高于空白对照组（P＜0.05）;二甲双胍组大鼠体重、MBCI显著高于模型组（P＜0.05）,空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR显著低于模型组（P＜0.05）;模型组与二甲双胍组大鼠胰腺β细胞凋亡率显著高于空白对照组（P＜0.05）,二甲双胍组大鼠胰腺β细胞凋亡率显著低于模型组（P＜0.05）;模型组与二甲双胍组大鼠Bip、CHOP等内质网应激指标mRNA显著高于空白对照组（P＜0.05）,二甲双胍组大鼠Bip、CHOP等内质网应激指标mRNA显著低于模型组（P＜0.05）;模型组与二甲双胍组大鼠p-AKt、Akt、IRβ等内质网应激指标蛋白表达水平显著低于空白对照组（P＜0.05）,二甲双胍组大鼠p-AKt、Akt、IRβ等内质网应激指标蛋白表达显著高于模型组（P＜0.05）。结论：二甲双胍经由下调胰腺内质网应激相关指标mRNA,促进胰腺内质网应激相关蛋白表达,有效抑制FAA所致胰岛素抵抗以及β细胞凋亡。     

腹腔注射法建立一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型

目的探索建立一氧化碳(CO)中毒迟发性脑病(DNS)大鼠模型的可靠方法。方法成年Wistar大鼠随机分成4个实验组(每组n=10)和1个对照组(n=4),实验组分别按50、100、150和200 mL/kg腹腔内注射CO,对照组按200 mL/kg腹腔内注射空气。中毒后不同时间断尾取血,分光光度法检测碳氧血红蛋白(HbCO)变化。迷宫实验评估动物的智力状态,以正确上安全岛少于3次为DNS。TUNEL法原位检测大脑皮质、海马区细胞凋亡情况。结果各实验组注射CO后,大鼠呈现典型CO中毒表现,HbCO与CO注射剂量呈显著正相关(r=0.77,P<0.05)。50 mL/kg组和对照组无明显DNS表现;100 mL/kg组和150 mL/kg组大多数动物中毒后存活,约半数存活动物出现DNS表现,脑组织细胞凋亡率显著高于对照组。200 mL/kg组大多数动物中毒后死亡,存活动物DNS发生率和脑细胞凋亡数与100 mL/kg组和150 mL/kg组无显著差异。结论按100～150 mL/kg腹腔注射CO可有效建立DNS大鼠模型,具有简便、可靠、重复性好的特点,是一种非常理想的造模方法。     

二甲双胍对糖尿病大鼠心肌保护作用的形态学观察

目的:观察传统的降糖药二甲双胍对糖尿病大鼠心肌的保护作用。方法:实验于2004-03/10在锦州医学院试验动物中心完成。①取雄性SD大鼠一次性尾静脉注射新鲜配置的20g/L链脲佐菌素溶液60mg/kg制备糖尿病模型,取造模成功(空腹血糖≥13.9mmol/L)大鼠50只单纯随机分为糖尿病组10只,胰岛素组和二甲双胍组各20只,另取10只尾静脉注射枸橼酸钠缓冲液的正常大鼠为正常对照组。②成模后第4天起,糖尿病组隔天皮下注射鱼精蛋白胰岛素1～2U/次维持存活,胰岛素组皮下注射普通胰岛素(4～6U/次,每天两三次),二甲双胍组灌胃二甲双胍20～30mg/(kg·d),正常对照组每天灌胃等量生理盐水。实验过程中胰岛素组和二甲双胍组大鼠空腹血糖控制在6.4mmol/L以下。③治疗12周后,大鼠断头处死,采血测血糖和血浆胰岛素,取左心室心肌组织,常规制作电镜切片,JEOL1200EX电子显微镜观察。结果:60只大鼠进入结果分析。①空腹血糖水平:胰岛素组和二甲双胍组显著低于糖尿病组[(7.84±3.6),(8.16±3.13),(14.00±4.00)mmol/L,P<0.05],与正常对照组比较差异不显著[(5.76±0.84)mmol/L,P>0.05]。②空腹血浆胰岛素水平:二甲双胍组与正常对照组比较差异不明显[(11.01±4.21),(9.48±3.56)mU/L,P>0.05],但低于胰岛素组和糖尿病组[(33.86±14.73),(23.39±13.85)mU/L,P<0.05]。③心肌超微结构:糖尿病组大鼠心肌纤维内肌节紊乱,肌原纤维变性,线粒体增多,常有肿胀变性。经二甲双胍和胰岛素治疗后糖尿病大鼠心肌超微结构病理改变明显减轻。结论:二甲双胍能抑制糖尿病大鼠的心肌病变,对心肌有良好的保护作用。     

山药苦瓜复方制剂降低2型糖尿病大鼠血糖和血脂的实

背景药食两用中药山药、苦瓜和甘蔗纤维等降糖和降脂作用明显,但作用机制仍不十分清楚.目的观察山药苦瓜复方制剂对2型糖尿病大鼠血糖、血脂、血胰岛素水平及抗感染能力的影响.设计随机对照动物实验.单位广东医学院科技开发中心、药理教研室、实验动物中心、中心实验室.材料选用SPF级雌性SD大鼠80只,鼠龄4个月.二甲双胍(吉林省东北亚药业股份有限公司,批号040126).总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油试剂盒购于北京中生生物技术股份有限公司;Surestep Life scan血糖仪及试纸(美国强生公司);胰岛素放射免疫试剂盒(上海海军医学研究所);UV-3010紫外分光光度计(日本岛津);山药苦瓜复方制剂由广东医学院科技开发中心提供,批号040321,混悬液,由山药、苦瓜和甘蔗渣膳食纤维等成分经水提而成,其中生药含量1 kg/L.方法实验中的动物饲养和标本采集于2004-06/2005-12在广东医学院实验动物中心和科技开发中心实验室完成,指标的检测在广东医学院药理研究室和中心实验室完成.①随机选取20只为正常对照组,每天灌胃生理盐水5 mL/kg.其余60只大鼠灌胃脂肪乳剂5 mL/kg,1次/d,连续4周后,大鼠禁食12 h,腹腔注射2g/L链脲佐菌素30 mg/kg.正常对照组腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液.3 d后测随机血糖,2周后重复测血糖,以血糖水平高于13.5 mmol/L或尿糖＞++以上且持续2周为造模成功(n=48).②将48只大鼠按随机摸球法分为3组模型组,二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组,每组16只.模型组灌胃脂肪乳剂5 mL/kg;二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组灌胃脂肪乳剂5 mL/kg后分别灌胃二甲双胍1 mg/kg和含生药1 kg/L的山药苦瓜复方制剂5 mL/kg.正常对照组灌胃生理盐水5 mL/kg.各组均1次/d,连续6周.③在实验结束前1天测随机血糖.禁食12 h用放射免疫法测定血浆胰岛素水平,用分光光度法测定血浆总蛋白、白蛋白水平,按相应试剂盒说明测定三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平.④计量资料差异比较采用方差分析,先用Levene'stest对数据进行方差齐性检验,如方差齐用Bonferroni检验,如方差不齐则用Tamhane's T2检验.主要观察指标山药苦瓜复方制剂对2型糖尿病大鼠血糖、胰岛素、血脂和血浆蛋白水平的影响.结果造模失败脱失12只,模型组和二甲双胍组在实验过程有4,2只动物死亡,最终62只进入结果分析.①空腹血糖和血浆胰岛素测定结果正常对照组大鼠空腹血糖水平明显低于其他3组(t=2.673～4.224,＜0.05～0.01),血胰岛素水平明显高于其他3组(t=3.780～5.824,P＜0.05～0.01).模型组大鼠空腹胰岛素水平明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=2.825,P＜0.05),空腹血糖水平明显高于二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组(t=3.906,3.056,P＜0.05).二甲双胍组大鼠胰岛素水平明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=3.014,P＜0.05),但空腹血糖水平与山药苦瓜复方制剂组相近(P＞0.05).②血脂水平测定结果正常对照组大鼠血浆总胆固醇和三酰甘油水平明显低于其他3组,高密度脂蛋白胆固醇水平明显高于其他3组(t=2.521～4.892,P＜0.05～0.01).模型组大鼠血浆总胆固醇水平明显高于二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组(t=2.466,2.512,P＜0.05),三酰甘油水平明显高于山药苦瓜复方制剂组(t=2.612,P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇水平明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=3.688,P＜0.05).二甲双胍组大鼠血浆三酰甘油水平明显高于山药苦瓜复方制剂组(t=2.620,P＜0.05).③血浆蛋白水平测定结果各组大鼠血浆总蛋白水平相近(P＞0.05);正常对照组大鼠血浆白蛋白水平明显高于模型组和二甲双胍组(t=3.773,3.104,P＜0.05),与山药苦瓜复方制剂组相近(P＞0.05),白蛋白与球蛋白比值明显高于其他3组(t=2.830～3.056,P＜0.05).模型组大鼠血浆白蛋白水平和白蛋白与球蛋白比值明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=2.604,3.808,P＜0.05).结论山药苦瓜复方制剂可降低2型糖尿病模型大鼠血糖、血脂水平,升高胰岛素水平,提高抗感染能力.     

山药苦瓜复方制剂降低2型糖尿病大鼠血糖和血脂的实验(英文)

背景:药食两用中药山药、苦瓜和甘蔗纤维等降糖和降脂作用明显,但作用机制仍不十分清楚。目的:观察山药苦瓜复方制剂对2型糖尿病大鼠血糖、血脂、血胰岛素水平及抗感染能力的影响。设计:随机对照动物实验。单位:广东医学院科技开发中心、药理教研室、实验动物中心、中心实验室。材料:选用SPF级雌性SD大鼠80只,鼠龄4个月。二甲双胍(吉林省东北亚药业股份有限公司,批号040126)。总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油试剂盒购于北京中生生物技术股份有限公司;SurestepLifescan血糖仪及试纸(美国强生公司);胰岛素放射免疫试剂盒(上海海军医学研究所)鸦UV-3010紫外分光光度计(日本岛津);山药苦瓜复方制剂:由广东医学院科技开发中心提供,批号040321,混悬液,由山药、苦瓜和甘蔗渣膳食纤维等成分经水提而成,其中生药含量1kg/L。方法:实验中的动物饲养和标本采集于2004-06/2005-12在广东医学院实验动物中心和科技开发中心实验室完成,指标的检测在广东医学院药理研究室和中心实验室完成。①随机选取20只为正常对照组,每天灌胃生理盐水5mL/kg。其余60只大鼠灌胃脂肪乳剂5mL/kg,1次/d,连续4周后,大鼠禁食12h,腹腔注射2g/L链脲佐菌素30mg/kg。正常对照组腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液。3d后测随机血糖,2周后重复测血糖,以血糖水平高于13.5mmol/L或尿糖>荻以上且持续2周为造模成功(n=48)。②将48只大鼠按随机摸球法分为3组:模型组,二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组,每组16只。模型组灌胃脂肪乳剂5mL/kg;二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组灌胃脂肪乳剂5mL/kg后分别灌胃二甲双胍1mg/kg和含生药1kg/L的山药苦瓜复方制剂5mL/kg。正常对照组:灌胃生理盐水5mL/kg。各组均1次/d,连续6周。③在实验结束前1天测随机血糖。禁食12h用放射免疫法测定血浆胰岛素水平,用分光光度法测定血浆总蛋白、白蛋白水平,按相应试剂盒说明测定三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平。④计量资料差异比较采用方差分析,先用Levene’stest对数据进行方差齐性检验,如方差齐用Bonferroni检验,如方差不齐则用Tamhane’sT2检验。主要观察指标:山药苦瓜复方制剂对2型糖尿病大鼠血糖、胰岛素、血脂和血浆蛋白水平的影响。结果:造模失败脱失12只,模型组和二甲双胍组在实验过程有4,2只动物死亡,最终62只进入结果分析。①空腹血糖和血浆胰岛素测定结果:正常对照组大鼠空腹血糖水平明显低于其他3组(t=2.673～4.224,P<0.05～0.01),血胰岛素水平明显高于其他3组(t=3.780～5.824,P<0.05～0.01)。模型组大鼠空腹胰岛素水平明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=2.825,P<0.05),空腹血糖水平明显高于二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组(t=3.906,3.056,P<0.05)。二甲双胍组大鼠胰岛素水平明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=3.014,P<0.05),但空腹血糖水平与山药苦瓜复方制剂组相近(P>0.05)。②血脂水平测定结果:正常对照组大鼠血浆总胆固醇和三酰甘油水平明显低于其他3组,高密度脂蛋白胆固醇水平明显高于其他3组(t=2.521～4.892,P<0.05～0.01)。模型组大鼠血浆总胆固醇水平明显高于二甲双胍组和山药苦瓜复方制剂组(t=2.466,2.512,P<0.05),三酰甘油水平明显高于山药苦瓜复方制剂组(t=2.612,P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇水平明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=3.688,P<0.05)。二甲双胍组大鼠血浆三酰甘油水平明显高于山药苦瓜复方制剂组(t=2.620,P<0.05)。③血浆蛋白水平测定结果:各组大鼠血浆总蛋白水平相近(P>0.05);正常对照组大鼠血浆白蛋白水平明显高于模型组和二甲双胍组(t=3.773,3.104,P<0.05),与山药苦瓜复方制剂组相近(P>0.05),白蛋白与球蛋白比值明显高于其他3组(t=2.830～3.056,P<0.05)。模型组大鼠血浆白蛋白水平和白蛋白与球蛋白比值明显低于山药苦瓜复方制剂组(t=2.604,3.808,P<0.05)。结论:山药苦瓜复方制剂可降低2型糖尿病模型大鼠血糖、血脂水平,升高胰岛素水平,提高抗感染能力。     

高压氧对糖尿病大鼠血清和肾脏转化生长因子β1表达的影响

目的观察高压氧治疗对糖尿病大鼠血清和肾脏转化生长因子β1表达及肾脏超微结构的影响.方法①实验于2002-10/2003-03在上海市第五人民医院动物房、病理科和复旦大学医学院电镜室完成.选用2月龄雄性健康SD大鼠90只.随机留取正常大鼠20只,其余大鼠禁食过夜后,按55 mg/kg,腹腔内注射10 g/L的链脲佐菌素溶液造成糖尿病模型.糖尿病大鼠病程2个月后经过电镜病理观察证实糖尿病大鼠糖尿病肾病的超微结构异常63只.随机分为3组,模型组(n=32)和高压氧治疗组(n=31)及对照组(n=20).对照组(n=20)仅腹腔注射等体积生理盐水,不进行干预.模型组(n=32)隔天清晨皮下注射一次正规胰岛素和鱼精蛋白锌胰岛素控制血糖在8～13 mmol/L.高压氧治疗组(n=31)同样用胰岛素和鱼精蛋白锌胰岛素控制血糖,每天进入动物舱在0.15 MPa的压力下,吸入95%以上浓度的纯氧1 h.连续20 d.②分别在高压氧治疗10和20 d后分批留取股动脉血和肾脏后处死大鼠.用快速血糖仪测定尾静脉血糖,并测定体质量.取股动脉血测定各组大鼠血清转化生长因子β1水平,同时取肾脏进行苏木精-伊红染色病理学观察和电镜观察,并用转化生长因子β1多抗对肾组织做3',3-二氨基联苯胺二步法免疫组化染色.③组间比较用t检验.结果①在分组干预过程中,高压氧治疗组死亡1只,模型组死亡2只.进行血清转化生长因子β1水平测定大鼠对照组20只、高压氧治疗组30只、模型组30只.高压氧治疗10 d后,对照组处死6只,模型组处死7只,高压氧治疗组处死7只大鼠;治疗20 d后,对照组处死6只,模型组处死8只,高压氧治疗组处死8只大鼠.分别进行相应指标测定.②治疗前,糖尿病大鼠血清转化生长因子β1水平明显高于对照组(P＜0.05);病理学主要表现为肾小球内玻璃样变、硬化和血管减少.电镜观察显示模型组肾小球血管袢足突减少、融合、排列紊乱,系膜细胞旁间质基质沉积、纤维化.③治疗10 d后,高压氧治疗组大鼠血清转化生长因子β1水平明显低于模型组(P＜0.05),肾脏超微结构得到初步改善,而病理变化不明显.④治疗20 d后,高压氧治疗组肾小球病理异常减轻,超微结构较糖尿病组明显改善,而与对照组相似;血清转化生长因子β1水平明显低于模型组(P＜0.01),而与对照组差异不明显(P＞0.05).免疫组化结果显示肾小球和肾小管间质内转化生长因子β1染色明显减少.结论高压氧治疗可改善糖尿病大鼠肾脏病变,其机制可能与抑制转化生长因子β1合成和其在肾组织的表达有关.     

玉米须总皂苷对病因性糖尿病模型小鼠的降糖效应

目的：观察玉米须总皂苷对链脲佐菌素加灌服蔗糖所致糖尿病模型小鼠的影响，分析玉米须总皂苷的降糖特点。 方法：实验于2002—02／06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用昆明种清洁级小鼠60只，随机数字表法分为6组：空白对照组、模型对照组、二甲双胍组、玉米须总皂苷400，200，100mg／kg组，10只／组。玉米须总皂苷由河南中医学院化学实验室提供。②除空白对照组外，其余5组均采用小剂量链脲佐菌素（15g／L）＋蔗糖建立病因性糖尿病模型。造模后玉米须总皂苷400，200，100mg／kg组分别灌服400，200，100mg／kg剂量的玉米须总皂苷（浓度分别为20，10，5g/L，灌胃体积0．2mL／10g；二甲双胍组灌服0．5g／kg二甲双胍（浓度为25g／L，灌胃体积0．2mL／10g）；模型对照组灌服同体积生理盐水。1次／d，共30d。③于给药第10，20天尾部取血测血糖值；第30天尾部采血测空腹血糖；然后灌服0．4mL／10g的葡萄糖5g/kg，并分别于灌糖后30，60，120min尾部采血进行血糖水平测定。处死后取胰腺、肾脏，作组织病理检查。 结果：60只小鼠均进入结果分析。①与空白对照组比较，模型对照组给药后第10，20，30天各阶段血糖值均显著升高，说明小剂量静脉注射链脲佐菌素加蔗糖可成功建立糖尿病模型。②与模型对照组比较，玉米须总皂苷400，200，100mg／kg组给药后第30天血糖值均显著降低[（9．607&;#177;1．607），（7．535&;#177;1．517），（7．480&;#177;1．069），（7．667&;#177;1．336）mmol／L；P＜0．011；玉米须总皂苷400，200mg／kg组糖耐量降低得到明显改善（P＜0．05），保护链脲佐菌素所致的肾脏的病变和胰岛损伤。 结论：静注小剂量的链脲佐菌素加灌服蔗糖可成功建立小鼠病因性糖尿病模型，玉米须总皂苷对该病因性糖尿病模型有较好治疗作用。     

汉防己甲素影响糖尿病大鼠各组织葡萄糖转运蛋白4蛋白表达的意义

目的：观察汉防己甲素是否能够提高链脲菌素-糖尿病大鼠各组织葡萄糖转运蛋白4的蛋白表达，并与治疗糖尿病有已知疗效的药物二甲双胍作为对比，分析汉防己甲素对糖尿病的治疗作用。 方法：实验于2004—10／2005—03在国家重点实验室国家人类基因组计划北方中心诺赛基因完成。①选用8—10周龄雄性（SPF级）Wistar大鼠28只。于大鼠静脉注射链脲佐菌素60．0mg／kg，当大鼠血浆葡萄糖浓度≥20mmol／L并且有多尿等其他糖尿病特征时。为糖尿病模型造模成功（n=28）。②将其造模成功大鼠按随机抽签法分为4组（每组7只）：模型组，汉防己甲素组， 二甲双胍组，二甲双胍＋汉防已甲素组。汉防己甲素组：每8小时尾静脉注射1．0mg／kg汉防已甲素（浙江金华制药厂产品，2mL／支），3次／d；二甲双胍组：灌胃100mg／（kg&;#183;d）二甲双胍（丹东医创药业有限责任公司，2mL／支）混悬液；二甲双胍＋汉防己甲素组：每8小时尾静脉注射1．0mg／kg汉防己甲素，3次／d，同时灌胃100mg／（kg&;#183;d）二甲双胍混悬液。模型组：饲以普通饲料喂养。每组干预1周。③在用药1周后将4组大鼠处死，立即解剖大鼠分别取出肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织放入-80℃保存．用电泳及Western blot检测肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面／细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达。④计量资料差异比较采用t检验。 结果：大鼠28只均进入结果分析。汉防已甲素组肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面／细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达明显高于模型组，是模型组的两三倍（P〈0．05-0．01），尤其在肝脏和脂肪细胞中表达更高。二甲双胍组肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面／细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达也明显高于模型组，是模型组的一两倍（P〈0．05），不如前者明显。二甲双胍＋汉防己甲素组肝脏、骨骼肌及肾周脂肪组织和膜表面／细胞质的葡萄糖转运蛋白4蛋白表达也明显高于模型组。是模型缉的2-3．5倍（P〈0．05-0．01），尤其在脂肪细胞中最高。 结论：汉防已甲素可以提高糖尿病大鼠外周组织葡萄糖转运蛋白4蛋白表达。提高对葡萄糖的利用率。该作用与二甲双胍基本相当，两者合用的效果并不特别明显。     

参丹健胰丸改善2型糖尿病胰岛素抵抗的机理研究

目的:观察具有益气养阴活血功效的中药参丹健胰丸,对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的改善作用,并初步探讨其作用机理.方法:采用小剂量尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食方法,建立类似于2型糖尿病(DM)的大鼠模型40只,分4组,每组10只,正常对照组10只.正常对照组:自由饮水、摄食.模型对照组:自由饮水、摄食.参丹健胰丸组:每日以参丹健胰丸按体重0.6g/100g灌胃.二甲双胍组:每日以二甲双胍按体重0.15g/100g灌胃.参丹健胰丸合二甲双胍组:每日以二甲双胍按体重0.15g/100g及参丹健胰丸按体重0.6g/100g灌胃.测定各组大鼠治疗前后的糖耐量及治疗后的血清胰岛素水平(Ins)、胰岛素敏感指数(ISI).结果:参丹健胰丸可以改善2型糖尿病模型大鼠的糖耐量;降低2型糖尿病模型大鼠的血胰岛素水平;增加2型糖尿病模型大鼠的敏感性.结论:参丹健胰丸对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗具有整体防治功能.推测其机理为参丹健胰丸可改善胰岛β细胞的功能,增强组织对胰岛紊的敏感性,从而有效发挥药物改善胰岛素抵抗的综合效应.     

啤酒对大鼠脂肪代谢相关酶活性的影响

背景：长期过量饮用啤酒有可能会引起体内组织或血清酶活性的变化。目的：观察啤酒的饮用量与大鼠脂肪合成与分解代谢相关酶活性的关系。设计：随机对照动物实验。单位：泰山医学院基础医学研究所。材料：实验于2004-12／2005—02在泰山医学院基础医学研究所完成。选择SD大鼠60只，分为6组，每组10只。按体质量每天灌服啤酒量分为9mL／kg，18mL／kg，27mL／kg，36mL／kg及45mL／kg组；对照组大鼠食水自由，不灌服啤酒。方法：各组大鼠连续喂饲1周后，麻醉处死大鼠，采取血样，留取肝脏、皮下脂肪、肠系膜脂肪组织以及腓肠肌，分别进行生化分析和酶活性的测定。主要观察指标：④喂饲1周后各组大鼠体质量、血糖、胰岛素以及血脂水平。②喂饲1周后各组大鼠肝脏和脂肪组织酶活性。③喂饲1周后各组大鼠激素敏感脂肪酶和脂蛋白脂肪酶活性。结果：纳入60只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①喂饲1周后各组大鼠体质量及生化指标水平比较：啤酒36mL／kg组大鼠体质量、血清游离脂肪酸、高密度脂蛋白胆固醇、肝脏三酰甘油及肝脏胆固醇含量均显著高于对照组（x^2=19．44～20．01，P〈0．01）。②喂饲1周后各组大鼠肝脏和脂肪组织酶活性比较：啤酒36mL／kg组大鼠肝脏、皮下脂肪组织和肠系膜组织的肝脏微粒体三酰甘油转换蛋白、磷脂酰磷酸水解酶、苹果酸酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性均显著高于对照组（x^2=15．02～16．00，P〈0．05）。（④喂饲1周后各组大鼠激素敏感脂肪酶和脂蛋白脂肪酶活性比较：啤酒36mL/kg组大鼠腓肠肌激素敏感脂肪酶活性显著低于对照组（P〈0．01），但皮下脂肪组织的激素敏感脂肪酶活性显著高于对照组（P〈0．01）。啤酒36mL/kg组在肠系膜脂肪、皮下脂肪及腓肠肌组织中脂蛋白脂肪酶活性均显著高于其他啤酒组和对照组（x^2=19．00～20．00，P〈0．01）。结论：每日灌服一定量的啤酒（36mL／kg）可促进大鼠肝脏合成和转运三酰甘油的能力，脂肪组织如肠系膜脂肪组织的脂质合成和储存增多，外周组织如肌肉组织和皮下脂肪组织的脂肪分解和动员也增加，最终导致体质量增长。     

通络方药对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:探讨通络方药对糖尿病大鼠肾皮质氧化应激及抗氧化损伤能力的作用。方法:实验于2005-08/12在第二军医大学动物中心完成。选择雄性SD大鼠20只,大鼠适应性饲养5d,禁食18h后随机数字表法选取15只大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(60mg/kg)诱发糖尿病,另5只大鼠同时腹腔注射等体积的缓冲液作为对照。将糖尿病模型动物随机数字表法分为糖尿病模型组,通络方药处理组,褪黑素处理组,对照组,各组5只。通络方药处理组每天上午灌服通络方药水溶液1g/kg,褪黑素处理组每天上午灌服褪黑素溶液5mg/kg,其余两组均灌服等体积稀释液,连续处理6周后检测通络方药及褪黑素对糖尿病大鼠肾脏氧自由基代谢状态及抗氧化能力的改变。结果:纳入动物20只,均进入结果分析。①通络方药处理组、褪黑素处理组及糖尿病模型组大鼠血糖水平均明显高于对照组眼分别为(21.3±5.8),(21.6±3.0),(21.9±2.6),(4.0±0.5)mmol/L,P<0.05演,但各造模组间两两相比,血糖水平差异均无显著性意义(P>0.05)。②各造模组大鼠肾皮质丙二醛含量与对照组比较均增加,其中通络方药处理组丙二醛水平稍高于对照组,低于糖尿病模型组,差异均无显著性意义(P>0.05);褪黑素处理组丙二醛水平与糖尿病模型组相比明显降低,差异有显著性意义眼分别为(0.33±0.13),(0.90±0.35)μmol/L,P<0.05演。③各造模组大鼠肾皮质内超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、总抗氧化能力及谷胱甘肽含量均低于对照组,其中通络方药处理组超氧化物歧化酶活性高于糖尿病模型组(P>0.05),低于褪黑素处理组眼分别为(473.43±191.70),(763.49±175.04)μkat/g,P<0.05演;通络方药处理组谷胱甘肽含量显著高于糖尿病模型组分别为眼(22.2±11.8),(8.4±4.9)mg/g,P<0.05演,低于褪黑素处理组和对照组(P>0.05)。结论:通络方药可部分改善高糖引起的肾脏氧化应激,对糖尿病引起的大鼠肾脏损害具有一定的保护作用。     

柴胡疏肝散对癫痫合并抑郁大鼠的行为学及海马齿状回神经发生的影响

目的:探讨柴胡疏肝散(CHSGS)对慢性癫痫合并抑郁大鼠的行为学及海马齿状回神经发生的影响。方法:24只癫痫合并抑郁(锂-匹罗卡品诱导)大鼠随机分为模型组、氟西汀组和CHSGS组,每组8只,另设置正常对照组(n=8)。造模第21天后正常对照组予生理盐水10 mL/kg,氟西汀组每日灌服氟西汀(0.75mg/kg);CHSGS组每日灌服2.7 g生药/kg,连续1月。利用糖水消耗试验、旷场试验及免疫组织化学方法检测大鼠的行为学及海马齿状回神经发生改变。结果:与正常对照组比较,模型组、氟西汀组、CHSGS组的糖水消耗及行为学评分明显下降,海马齿状回新生神经元增加(P<0.05)。氟西汀组、CHSGS组糖水消耗及行为学评分较模型组明显提高,海马齿状回新生神经元增加(P<0.05);氟西汀组、CHSGS组相比差异无统计学意义。结论:CHSGS能提高癫痫合并抑郁大鼠海马齿状回的神经发生,改善抑郁症状。