腰椎椎间盘退行性变动物模型建立方法的研究进展

腰痛是目前全球首位致残疾病,给患者、家庭和社会造成极大的痛苦和沉重的负担.与增龄有关的椎间盘退行性变(IDD)是腰痛的最主要原因.随着工作与生活节奏的加快,IDD 呈现年轻化的趋势.建立符合IDD 规律、成功率高、可重复性好、操作简单、成本低且适合医学研究的IDD 动物模型,对明确腰椎IDD 的发生机制及开展防治工作具...     

腰椎椎间盘退行性变大动物模型的建立方法

<正>椎间盘退行性变(IDD)是脊柱外科的常见病和多发病,随着人口老龄化进程的加速,其发生率大幅上升~([1-2])。IDD是引起腰背痛的主要原因~([3-4]),为了寻求治疗腰背痛的有效手段,IDD与椎间盘再生的基础研究近年来受到了广泛关注。由于穿刺或者椎间盘造影会破坏椎间盘完整性,加速退行性变,在人体上进行的椎间盘研究只能进行观察而不能开展直接干预的有创研究,而动物模型在许多方面可以模拟人体IDD的发生过程,从而可     

终板下椎体缺血诱导兔椎间盘退行性变模型的建立及终板中内皮素1的表达

目的通过终板下注射无水乙醇阻碍椎体-终板营养,建立一种新型兔腰椎椎间盘退行性变模型,并观察终板退行性变过程中内皮素1(ET-1)的表达情况。方法健康4月龄新西兰兔32只,随机分成4组,每组8只,选取L5,6椎体(对应L4/L5及L5/L6椎间盘)注射300μL无水乙醇,选取L4椎体(对应L3/L4椎间盘)注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为实验对照,L7椎体(对应L6/L7椎间盘)未注入任何物质作为正常对照。其中1组造模后1个月提取软骨终板细胞,行免疫细胞化学染色检测ET-1表达;余3组分别于造模后1、3和5个月进行椎间盘X线和MRI检查,取椎间盘组织行HE染色观察形态学改变,免疫组织化学染色观察ET-1表达。结果注射无水乙醇后,随着时间进展,X线片显示椎间隙高度显著下降、椎间隙变窄、边缘骨赘增生,MRI T2WI显示椎间盘低信号;苏木精-伊红染色(HE)显示终板的生长板厚度变薄,终板结构破损,同时软骨终板细胞退化、直至消失,髓核中细胞发生转化(由空泡细胞转变为软骨样细胞,进而形成纤维软骨样细胞)造成髓核纤维化,纤维环结构排列紊乱、纤维化程度逐步加重;免疫组织化学染色显示,发生退行性变的终板组织内有ET-1表达,但随着退行性变加剧,ET-1表达强度下降;提取的退行性变软骨终板细胞(造模后1个月)也显示细胞质内ET-1强表达。结论通过注射无水乙醇阻碍椎体-终板营养途径可成功建立兔椎间盘退行性变模型,终板退行性变过程中伴随ET-1的表达。     

转录组分析鉴定腰椎椎间盘退行性变中潜在免疫相关生物标志物

目的 通过转录组分析鉴定腰椎椎间盘退行性变（IDD）中潜在的免疫相关生物标志物,寻找IDD免疫相关的关键靶点。方法 从基因表达汇编数据库（GEO）的GSE67567数据集中获得基因表达谱,并筛选差异表达mRNA、长链非编码RNA（lncRNA）和微RNA（miRNA）。使用加权基因共表达网络分析（WGCNA）和基因集富集分析（GSEA）筛选免疫相关模块,并使用Cytoscape构建lncRNA-miRNA-mRNA竞争性内源RNA（ceRNA）网络,通过免疫浸润分析确定相关的免疫细胞,使用Pearson相关分析筛选免疫相关的关键靶点。通过GSEA筛选关键的生物过程和途径。使用GEO的GSE124272数据集验证关键靶基因的表达。结果 WGCNA结果表明,蓝绿色模块与免疫力有关。免疫浸润分析显示,CD4幼稚T细胞可能是关键的免疫细胞。Pearson相关分析表明,4个mRNA（UHMK1、ZFP36L2、ZCCHC3、ZBTB20）和1个lncRNA（LINC00641）可能是IDD免疫相关的关键靶点,建立了一个免疫调节相关的ceRNA网络。GSEA结果显示,LINC00641可能通过TGF-β信号通路调节IDD。验证结果表明,这些关键基因在GSE124272数据集中存在差异表达。结论 mRNA（UHMK1、ZFP36L2、ZCCHC3、ZBTB20）和lncRNA（LINC00641）是IDD免疫相关的关键靶点。     

单侧双通道内窥镜下椎间盘切除术治疗腰椎术后退行性变1例报告

腰椎术后邻近节段退行性变(ASD)是腰椎后路融合术后的常见远期并发症^[1-2],其发生率为4%~31%^[3-5]。ASD由多种因素引起,继而产生新的神经压迫症状。Kambin等^[6]于1986年提出单侧双通道内窥镜下椎间盘切除术(UBED)治疗腰椎椎间盘突出症(LDH)^[7],其兼具了开放手术与微创手术的优点^[8]。本院采用UBED治疗腰椎术后ASD患者1例,现将诊疗过程报告如下。     

腰椎椎间隙高度与上位椎体高度的比值与椎间盘退行性变Pfirrmann分级的相关性

目的 探讨腰椎椎间隙高度与上位椎体高度的比值与椎间盘退行性变程度之间的关系,为腰椎椎间盘退行性疾病的诊断和治疗提供客观准确的依据。方法 回顾性分析2019年1月—2019年6月来本院就诊的61例腰椎椎间盘退行性变患者临床资料。在腰椎侧位X线片上测量腰椎椎间隙及相应上位椎体的高度,并计算椎间隙高度与上位椎体高度的比值;在腰椎矢状位MRI上评估腰椎椎间盘退行性变Pfirrmann分级;比较不同Pfirrmann分级椎间盘的椎间隙高度与上位椎体高度比值的差异,并采用Spearman相关分析研究椎间隙高度与上位椎体高度比值与相应节段椎间盘Pfirrmann分级之间的相关性。结果 除L₁/L₂节段,其余各节段椎间隙高度与上位椎体高度比值均随着Pfirrmann分级增加而逐渐减小,差异均有统计学意义（P < 0.05）。相同Pfirrmann分级的不同节段椎间盘之间椎间隙高度与上位椎体高度比值差异无统计学意义（P > 0.05）。Spearman相关分析结果显示,L₂/L₃、L₃/L₄、L₄/L₅、L₅/S₁节段Pfirrmann分级与椎间隙高度与上位椎体高度比值呈负相关（r =-0.568,P < 0.05）。结论 临床上测量L₂/L₃、L₃/L₄、L₄/L₅、L₅/S₁节段椎间隙高度与上位椎体高度比值对腰椎椎间盘退行性疾病的诊断可能具有重要意义。     

骨质疏松与腰段脊柱退行性变

骨质疏松是一种以低骨量和骨组织微结构破坏为特征、导致骨脆性增加的全身性疾病,可分为绝经后骨质疏松与老年性骨质疏松两型〔１〕。据１９９０年统计,我国老年性（＞６０岁）骨质疏松的发生率男性为６０－７２％,女性为９０－８４％〔２〕。这种低骨量和微结构破坏在外周主要表现在桡骨远端和股骨颈,而在脊柱的表现较在外周骨更早,更为广泛,常可导致椎体形态、脊柱曲度和力学性质的改变〔３〕,其中以下腰段脊柱的改变较为明显,其引发１９９９０２０１收稿,１９９９０６１５修回作者单位：第四军医大学西京医院骨科,陕西…     

腰椎退行性疾病手术病人术前邻近节段椎间盘的退变情况及分布规律

目的 观察腰椎退行性疾病手术病人术前邻近节段椎间盘的退变情况及分布规律。方法 回顾性分析济南军区总医院2012年1月至2016年2月收治的503例行手术治疗腰椎退行性疾病病人的术前临床资料,其中男240例（47.71%）,女263例（52.29%）;年龄为20~84岁,平均48.8岁。腰椎间盘突出症352例,退变性腰椎滑脱症91例,退变性腰椎管狭窄症60例。通过术前X线片评估腰椎稳定性;基于术前MRI,采用Pfirrmann分级标准评价腰椎间盘退变程度,记录Modic改变、高信号区域及许莫氏结节的发生情况。结果 503例中仅5例为单节段退变,12例为跳跃节段退变,余486例均为多节段退变。共1 863个（1 863/2 515,74.08%）腰椎间盘发生退变,5个节段椎间盘（L_1~2、L_2~3、L_3~4、L_4~5、L₅~S₁）均退变的病人比例为39.56%（199例）。不稳定节段数为127个,Modic改变为188个,高信号区域为241个,许莫氏结节节段数为161个。30岁以下男性病人腰椎间盘退变率较女性高;随着年龄增长,女性病人椎间盘退变率增加,退变程度加重。腰椎不稳、Modic改变、高信号区和许莫氏结节均与椎间盘退变存在明显相关性（P均＜0.05）。某一腰椎节段（L_3~4、L_4~5、L₅~S₁）椎间盘发生Pfirrmann Ⅳ、Ⅴ级退变时,邻近节段椎间盘退变（Pfirrmann Ⅲ+Ⅳ+Ⅴ级）比例均超过了80%,且严重退变（Pfirrmann Ⅳ+Ⅴ级）比例也较高,超过60%。结论 术前邻近节段椎间盘退变广泛存在,在临床工作中要予以重视。     

不同类型椎间盘退变动物模型的评价与比较

椎间盘退变发生机制以及再生和修复一直是脊柱外科研究的热点和重点,而作为重要研究载体的椎间盘退变动物模型承担着从基础理论到临床实践,从临床问题再到实验论证的不可或缺的重要角色。经过近80年来的不断研究,椎间盘退变动物模型已有数十种构建方法,主要分为生物力学改变、生物结构破坏、自发退变和全身疾病4大类型[1],每个类型又包含几种类似的造模方法。这些造模方式在模型设计、可靠性、操作性、重复性等方面各有优劣,     

腰椎椎间小关节退行性变的研究进展

虽然腰椎退行性变的始动因素来源于椎间盘．但当发展至椎间盘退变、椎管狭窄时．腰椎椎间小关节承受的压力显著递增．将产生异常应力和异常运动．随之而来的是腰椎椎间小关节骨质增生，韧带代偿性增生肥厚，而这些又是椎间小关节源性腰痛产生的重要病理基础。单纯行腰椎椎间小关节融合或破坏椎间小关节会引起一些远期并发症。目前．已有很多关于腰椎椎间小关节生物力学稳定性重建的研究。基于此，笔者将从流行病学、生物力学以及外科治疗等方面对腰椎椎间小关节退形性变的研究进展作一综述。     

围绝经期女性腰椎椎间盘退变程度的MRI观察

目的探讨围绝经期女性腰椎椎间盘MRI特点及相关退变规律。方法随机选择2014年1月—12月来本院就诊的成年男女患者各420例,记录患者年龄、身高、体质量指数(BMI)、吸烟史、高血压史、糖尿病史、月经史、职业等,每位患者均行腰椎MRI检查。女性患者按照月经史分为5个组:绝经前组(n=76),绝经0年且6年组(n=98),绝经≥6年且11年组(n=82),绝经≥11年且≤15年组(n=80),绝经15年组(n=84)。用Pfirrmann分级系统对腰椎椎间盘退变程度进行分级,用SPSS 19.0软件进行相关数据分析。结果男女患者年龄、BMI、糖尿病史、高血压史、职业等差异无统计学意义(P0.05);男性吸烟率明显高于女性,差异有统计学意义(P0.05)。男性患者Pfirrmann分级≥Ⅲ级的椎间盘比例高于女性(男78.2%,女60.8%),差异有统计学意义(P0.05);PfirrmannⅣ、Ⅴ级时差异更显著。在女性亚组中,绝经前组各椎间盘水平Pfirrmann平均分均显著低于各绝经组,差异有统计学意义(P0.05)。绝经≤15年时,绝经年限越高,L_1/L_2、L_2/L_3、L_4/L_5及L_5/S_1椎间盘Pfirrmann平均分越高,差异有统计学意义(P0.05);绝经≥11年且≤15年组与绝经15年组间各节段椎间盘Pfirrmann平均分差异均无统计学意义(P0.05)。结论男性患者腰椎椎间盘退变较女性严重。绝经后女性腰椎椎间盘退变较绝经前严重,且在绝经≤15年时,绝经年限越长,退变越严重;绝经15年后,腰椎椎间盘退变进程减缓。因此,雌激素水平下降可能是腰椎椎间盘退变的危险因素。     

新型微支架装载脂肪间充质干细胞移植修复椎间盘退行性变

目的探讨一种新型生物材料明胶微支架装载脂肪间充质干细胞(ADMSC)移植修复犬椎间盘退行性变的治疗效果。方法选用12只健康成年比格犬,采用穿刺抽吸髓核法建立椎间盘退行性变模型(L37),提取自体ADMSC并应用Luc-GFP慢病毒标记。4周后将犬椎间盘节段分为对照组(L7/S1)、模型组(L3/L4)、干细胞组(L4/L5,造模后注射ADMSC)、微支架组(L5/L6,造模后注射明胶微支架)、微支架装载干细胞组(L6/L7,造模后注射ADMSC和微支架共培养物)。分别于造模前及造模后4、8、12、24周行腰椎X线及MRI检查,观察椎间盘相对高度(术后椎间盘高度与术前椎间盘高度的比值)及相对灰度(MRI髓核组织灰度值与脑脊液灰度值的比值)的变化。24周后取椎间盘髓核组织,行冰冻切片荧光、HE染色及番红O染色观察,用ELISA法检测软骨相关蛋白SOX-9、PG和COL2的含量。结果影像学结果显示,造模后各组椎间盘相对高度及相对灰度与对照组相比均明显降低;造模后8、12、24周,微支架装载干细胞组椎间盘相对高度及相对灰度高于模型组、干细胞组和微支架组,差异均有统计学意义(P 0.05)。术后24周,微支架装载干细胞组和干细胞组髓核组织冰冻切片内能够检测到Luc-GFP+-ADMSC表达,且微支架装载干细胞组表达比干细胞组多。HE和番红O染色显示微支架装载干细胞组椎间盘退行性变比模型组、干细胞组和微支架组轻,蛋白定量检测结果显示微支架装载干细胞组髓核组织内SOX-9、PG和COL2表达高于模型组、微支架组和干细胞组,差异均有统计学意义(P 0.05)。结论明胶微支架装载ADMSC移植可延缓比格犬椎间盘退行性变,有望为发生退行性变的椎间盘组织的修复治疗提供新的策略。     

腰椎后外侧融合术对已存在退变的相邻节段的中远期影响

目的评估腰椎后外侧融合对已经存在退变但未纳入融合范围的相邻节段的中远期影响。方法对本院2004年1月—2005年12月因腰椎退行性疾患接受后路椎板切除减压、经椎弓根内固定、后外侧植骨融合的158例患者进行随访,采用影像学方法对其相邻节段的转归进行分析,比较相邻节段术前无退变和已存在退变的椎间盘的远期进一步退变情况及相应的临床功能。结果 102例病例获得完整随访,平均随访65.2个月(54~71个月),其中26例(25.5%)出现了相邻节段的影像学退变。在相邻上位节段中,术前无退变和已存在退变的椎间盘随访时出现进一步退变的发生率分别为13.5%(10/74)和35.7%(10/28),差异有统计学意义(P0.05)。在相邻下位节段中,术前没有退变和已存在退变的椎间盘随访时出现进一步退变的发生率分别为12.5%(6/48)和22.2%(4/18),差异无统计学意义。临床评价显示无论术前相邻节段有无退变,Oswestry功能障碍指数(ODI)在术后6个月时均较术前明显改善(P0.05),并在最终随访时得到保持,但术前相邻节段存在退变组随访时ODI明显高于无退变组(P0.05)。结论与术前无退变的相邻节段椎间盘相比,术前已存在退变的相邻椎间盘融合术后更容易出现进一步退变,而且会影响其远期的临床疗效。     

腰椎间盘突出症的病理及临床分型

洛阳正骨医院,河南洛阳 471002 腰椎间盘突出症(Lumbar disc herniation,LDH)是骨科临床常见病和多发病,是腰腿痛的常见原因.LDH的分型方法较多[1,2],本文就腰椎间盘突出症的病理及临床分型进行探讨,现简述如下.