大鼠局灶性脑缺血再灌注后MMP-9、TIMP-1的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在局灶性脑缺血再灌注中的表达规律.方法 健康雄性Wistar大鼠40只按随机数字表法分为缺血再灌注组(I/R组,共25只)和假手术组(Sham组,共15只).采用线栓法成功制作可复血流的大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注,于再灌注6 h、24 h、48 h、72 h和7 d时取材,进行MMP-9、TIMP-1免疫组织化学染色,通过免疫组化方法分析MMP-9、TIMP-1表达规律和在脑组织中的分布.结果 在I/R组,MMP-9再灌注6 h即有表达,24 h明显增多,48 h达高峰,72 h下降,7d时有微量的表达;TIMP-1在6h亦有表达,24h达高峰,48h时开始下降,7d时有微量表达.二者的阳性表达部位主要在血管内皮细胞,神经元、小胶质细胞亦有少量表达.Sham组未见阳性结果.结论 脑局部缺血再灌注后可诱导MMP-9、TIMP-1的大量表达,缺血后血管内皮损害是MMP-9及TIMP-1高表达的主要原因.     

黄体酮对脑梗死大鼠脑部MMP-9、TIMP-1表达及血脑屏障通透性的影响

目的观察黄体酮对脑梗死大鼠脑组织MMP-9、TI MP-1表达及血脑屏障通透性的影响。方法制作SD大鼠永久性局灶性脑缺血模型(permanent middle cerebral arteryocclusion,pMCAO),将大鼠随机分成假手术组、模型组、HBC溶剂治疗组和黄体酮治疗组。模型组、HBC溶剂治疗组和黄体酮治疗组,其中后3组设24h、48h、7d 3个时间点,每组每个时间点12只。应用干湿重法检测脑组织含水量;免疫组织化学法研究脑组织MMP-9、TI MP-1的表达情况。结果模型组MMP-9、TI MP-1的表达及脑水含量在各个时间点与HBC溶剂治疗组相比差异无统计学意义(P0.05),但在黄体酮治疗组脑组织中的表达较模型组和HBC治疗组明显降低(P0.05)。结论黄体酮可能通过调节MMP-9/TI MP-1表达,降低血脑屏障通透性,减轻脑缺血后脑水肿程度。     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注后MMP-9表达和脑水肿的影响

目的通过研究亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达和脑水肿的影响，探讨亚低温脑保护的可能机制。方法雄性SD大鼠72只，随机分为假手术组、亚低温组、常温组，线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注48h模型，缺血时间2h。采用比色法测定脑组织中伊文思蓝（EB）含量反映血脑屏障（BBB）通透性；干-湿重法检测脑组织含水量；免疫组化法检测MMP-9表达。结果与假手术组相比，缺血鼠缺血侧脑组织的EB含量及脑含水量明显增高，可见大量MMP-9免疫阳性细胞（P〈0．05）。亚低温组和常温组大鼠脑EB含量分别为（22．42±1．86）μg/g脑重和（38．67±2．94）μg／g脑重，脑含水量分别为80．07％±0．56％和82．49％±0．97％，皮质缺血区MMP-9阳性细胞IOD值分别为380．33±40．87和695．16±67．67，纹状体区MMP-9阳性细胞IOD值分别为294．19±33．47和451．87±5．77，差异均有显著性意义（P〈0．05）。亚低温明显减轻缺血脑组织病理学损伤。结论推测亚低温可通过抑制MMP-9表达，减轻BBB的破坏，继而减轻脑水肿，从而发挥确实的脑保护作用。     

AQP-9在大鼠感染性脑水肿脑组织中的表达及意义

目的 探讨水通道蛋白-9(AQP-9)在内毒素脂多糖(LPS)致大鼠感染性脑水肿脑组织中的表达及意义. 方法 1月龄普通级SD大鼠128只采用随机数字表法分为生理盐水(NS)组(64只)和LPS组(64只),采用颈内动脉注射LPS制作大鼠感染性脑水肿模型,模型成功后每组均选取6h、12h、24h和48 h4个时间点,在不同时间点采用HE染色观察脑组织形态学改变;干湿重法测定脑组织含水量(BWC);甲酰胺法测定脑组织伊文思蓝(EB)含量;免疫组织化学法检测脑组织AQP-9蛋白的表达量:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法 检测AQP-9 mRNA的表达水平并对结果 进行相关性分析. 结果 HE染色结果 显示LPS组血管周围间隙增宽、炎性细胞浸润、胶质细胞体积增大肿胀、神经元空泡变性、细胞核固缩等.与NS组相比,LPS组6 h、12 h、24 h和48 hBWC、EB含量、AQP.9蛋白及AQP.9mRNA表达水平均增高.差异具有统计学意义(P<0.05).同时LPS组BWC和EB含量、AQP-9蛋白、AQP.9 mRNA表达量、AQP-9 mRNA表达量与EB含量、AQP-9蛋白与mRNA表达量均呈正相关. 结论 AQP-9可能参与感染性脑水肿的发生和发展.     

高同型半胱氨酸血症大鼠血清MMP-9及TIMP-1的表达

<正> 高同型半胱氨酸血症(HHcy)是动脉粥样硬化(As)的独立危险因子,目前HHcy致As的机制尚不明确。细胞外基质(ECM)是血管壁的重要成分,其沉积和降解贯穿于As和血管壁重塑的整个过程。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组能降解ECM的蛋白酶,MMPs的组织型抑制剂(TIMPs)是MMPs的天然抑制物,其中TIMP-1是MMP-9的特异性抑制剂。该研究利用蛋氨酸负荷建立大鼠HHcy模型,通过测定血清同型半胱氨酸(Hcy)、MMP-9及TIMP-1水平探讨HHcy致As的机制。 1 材料和方法     

实验性脑出血灶周MMP-9的表达与脑水肿的关系

目的探讨脑出血（ICH）后出血灶周脑组织MMP-9表达的动态变化,分析其与脑水肿的关系。方法健康雄性Sprauge-Dawley（SD）大鼠56只,分为正常组（8只）和手术组（48只）,手术组选择出血后12、24、48、72、96、120h共6个时间点,每点各8只。在脑立体定向仪下采用自体动脉血注入尾状核法制备脑出血模型。用免疫组化法和RT-PCR法检测MMP-9的表达水平;用干湿重法测量脑含水量（BWC）;用测定渗出脑血管外的EB量来评价BBB的通透性,电镜观察神经元形态变化。结果ICH灶周脑组织MMP-9的表达在48h达峰值,脑水肿于72h达峰值,两者呈正相关（r=0．698,P〈0．01）。电镜观察到血管周围水肿,神经元水肿。结论MMP9参与了ICH后灶周脑组织水肿的过程,诱导或加重脑水肿。     

MMP-9与TIMP-1在脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-9和金属蛋白酶抑制剂TIMP-1在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤临床生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学PV9000通用二步法检测50例脑胶质瘤组织中MMP-9与TIMP-1的表达情况。结果随胶质瘤恶性程度增高MMP-9表达增强,TIMP-1表达减低,两者具有相关性,且差别具有统计学意义。结论 MMP-9、TIMP-1在胶质瘤中的表达与其恶性程度具有相关性,并可能评估其预后。     

参附注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 观察参附注射液对大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,探讨参附注射液的脑保护机制. 方法 Wistar大鼠90只按随机数字表法分为假手术组、参附治疗组、模型组,每组30只.后2组大鼠采用线栓法经左侧颈外一颈内动脉插线建立脑缺血再灌注模型,并分别于再灌注时静脉注射等量参附注射液和生理盐水.每组根据缺血时间分为0.5、1、1.5h3个亚组,每亚组10只,再灌注24h后将大鼠处死以干湿重法检测缺血再灌注侧脑组织含水量,Western blotting检测脑组织中MMP-9和TIMP-1的表达.结果 模型组与参附治疗组在脑缺血不同时间脑组织含水量、MMP-9、TIMP-1的表达均高于假手术组,并且随着缺血时间的增加,脑组织含水量和MMP-9的表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,参附治疗组在不同脑缺血时间脑组织的含水量、MMP-9的表达较低,而TIMP-1蛋白的表达较高,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 参附注射液可能通过调节MMP-9、TIMP-1的表达发挥抗脑水肿的作用.     

糖皮质激素对多发性硬化患者血清MMP-9、TIMP-1水平的调控作用

目的观察糖皮质激素(GC)治疗多发性硬化(MS)患者过程中血清MMP-9和TIMP-1水平的动态变化,探讨GC治疗MS的作用机制。方法收集80例MS患者不同时间点外周血;急性初期进行EDSS评分,根据EDSS评分将MS患者分为2组,其中GC治疗组(EDSS≧5分)急性期50例、追踪至缓解期46例,空白对照组(EDSS<5分)急性期30例、缓解期26例;健康对照组50例。采用酶联免疫吸附试验法检测血清MMP-9与TIMP-1水平。结果 (1)急性期MS血清MMP-9水平高于缓解期和健康对照组,而TIMP-1水平降低(P<0.05),缓解期和健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)MMP-9在MS血清中呈先升后降的趋势;GC治疗组不同时间点间差异有统计学意义(F=16.35,P<0.01),治疗1w时MMP-9水平达高峰,治疗4w时较治疗前降低(P<0.05);而空白对照组发病2w时MMP-9水平达高峰,且高于GC治疗组高峰(P<0.05)。(3)GC治疗组TIMP-1水平呈缓慢增高趋势,不同时间点间差异有统计学意义(F=4.27,P<0.05),与治疗前相比,治疗4w时TIMP-1水平升高(P<0.05);而空白对照组TIMP-1水平随病情波动变化不大。结论 MMP-9在MS急性期血清中表达增强,TIMP-1表达降低,MMP-9、MMP-9/TIMP-1水平反应了MS疾病活动性,监测其水平具有一定的诊断价值;MMP-9在MS血清中呈先升后降趋势,GC治疗可降低MMP-9上升的幅度,缩短MMP-9升高的时间,降低MMP-9的表达,并诱导TIMP-1的表达,这可能是GC治疗MS、加速MS病情缓解、缩短其病程的机制之一。     

MMP-9与脑出血后迟发性脑水肿的关系研究

目的探讨MMP-9对脑出血后迟发性脑水肿的影响。方法回顾性分析高血压性脑出血患者65例,其中并发迟发性脑水肿患者20例,未发生迟发性脑水肿患者45例,选择同期体检健康者40例作为对照组,检测3组患者血清MMP-9水平,并定期行头部CT检查,观察脑水肿情况。结果脑出血患者较对照组MMP-9水平明显增高（P〈0.01）,迟发性脑水肿组较非迟发性脑水肿组MMP-9水平明显升高（P〈0.05）。通过ROC曲线获得MMP-9预测迟发性脑水肿的临界值为103.7ng／ml。结论迟发性脑水肿可能与血清MMP-9水平升高有关,动态观察MMP-9水平可能对迟发性脑水肿的早期诊断有积极意义。     

MMP-2/9与脑出血后脑水肿的关系探讨

目的 探讨MMP-2／9与脑出血后脑水肿的关系。方法 采用胶原酶复制大鼠脑出血模型．通过免疫组化和原位杂交技术测定血肿周围脑组织中MMP-2／9的mRNA和蛋白表达，同时进行脑水含量和渗出脑血管外EB量的测定。结果 大鼠脑出血后血肿周围有明显的脑水肿发生和EB含量显著增加．均于24～48h达高峰。正常和假手术组可见极少量MMP-2蛋白和mRNA阳性染色细胞；而无MMP-9的表达。模型组出现大量MMP-2／9蛋白和mRNA阳性染色细胞；且MMP-9蛋白和mRNA表达在24～48h达高峰，与脑水含量和EB含量呈正相关。结论 大鼠脑血肿周围早期存在MMP-2／9的表达上调，其可能促进了出血后血管源性脑水肿的形成。     

依达拉奉对脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1的影响

目的探讨依达拉奉对急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响并探讨其作用机制。方法40例急性脑梗死患者随机分成两组,A组(银杏达莫20ml,1次/d,连续14d,静脉点滴);B组(加用依达拉奉注射液30mg,2次/d,连续14d,静脉点滴)。同期选择非脑血管病患者20例作为对照组。检测治疗前和治疗后第7天患者血清MMP-9及TIMP-1浓度的变化,测定治疗前、治疗第30天的NIHSS评分,判定两组的疗效。结果在治疗第7天,B组的MMP-9浓度明显低于A组(P<0.01)。治疗第7天时,与A组相比,B组TIMP-1浓度升高明显(P<0.01)。B组治疗的有效率及显效率明显高于A组(P<0.05)。结论依达拉奉能够直接降低血清MMP-9的浓度,或通过调节TIMP-1来降低MMP-9水平,可能是其有效治疗急性脑梗死的机制之一。     

基质金属蛋白酶-9及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1在脑动静脉畸形血清中的表达及与出血的关系

目的 研究基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalioproteinases-1,TIMP-1）在脑动静脉畸形（cerebullar arteriovenous malformations,CAVM）患者血清中的表达及其与出血的关系。 方法 选取48例脑动静脉畸形患者。按有无出血症状分为出血组及非出血组,并选取24例原发癫患者为正常对照组。对患者术前及术后3d、7d血清中的MMP-9和TIMP-1水平进行研究。 结果 术前出血组及非出血组中,MMP-9、TIMP-1含量均显著高于对照组（P<0.01）,术后出血组及非出血组中,上述指标与术前相比有所下降,但仍高于同期对照组（P<0.01）。出血组及非出血组间,术前与术后MMP-9、TIMP-1含量均无统计学差异（P>0.05）,但术前两组间MMP-9与TIMP-1之比值（MMP-9/TIMP-1）具有统计学差异（P<0.05）。 结论 MMP-9及TIMP-1与CAVM的发生发展有密切关系,MMP-9水平升高可能是TIMP-1合成和分泌的促进因素之一。MMP-9和TIMP-1比例失衡,可能是引起脑动静脉畸形出血的重要机制。     

Matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in perinatal asphyxia

Matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) play important roles in the function of the blood–brain-barrier (BBB). We investigated the roles of MMP-9 and TIMP-1 in the pathogenesis of hypoxic–ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia. Serum concentrations of MMP-9 and TIMP-1 were determined by ELISA in 12 neonates with perinatal asphyxia and 15 controls on the birth day and the next day. Serum MMP-9 concentrations in asphyxiated neonates with neurological sequelae (n = 5) were significantly higher than concentration in asphyxiated neonates without sequelae (n = 7) and controls on birth day (p = 0.003 and p < 0.001, respectively). The ratios of serum MMP-9/TIMP-1 on birth day in asphyxiated neonates with neurological sequelae were significantly higher than those in asphyxiated neonates without sequelae (p = 0.048). There were no significant differences in the serum MMP-9 concentrations or the ratios of MMP-9/TIMP-1 between asphyxiated neonates with and without neurological sequelae on the day after birth. Our preliminary study suggests that serum MMP-9 levels on birth day are important for predicting neurological prognosis of neonates with asphyxia.     

病毒性脑炎患儿血清及脑脊液中基质金属蛋白酶-9及其抑制剂的变化及临床意义

目的 探讨病毒性脑炎患儿血清和脑脊液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)水平的变化及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测48例病毒性脑炎患儿和25例正常患儿血清和脑脊液中MMP-9、TIMP-1水平.结果 病毒性脑炎患儿轻型组和重型组血清和脑脊液中基质金属蛋白酶-1和基质金属蛋白酶组织因子-1及其二者比值均明显高于对照组(P＜0.05或0.01),且重型组较轻型组明显增高(P＜0.05).结论 检测病毒性脑炎患儿血清和脑脊液中MMP-9、TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1比例对指导临床诊断和治疗具有一定的意义.     

基质金属蛋白酶-9及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1在脑动静脉畸形组织中的表达及其与出血的关系

目的 研究基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitors of metalloproteinase1,TIMP-1）在脑动静脉畸形（cerebullar arteriovenous malformations,CAVM）患者组织中的表达及其与出血的关系。方法 选取我院2007年5月至2008年9月间收治的48例CAVM患者。按有无出血症状分为出血组和非出血组,并选取24例原发癫患者为正常对照组。分别对其病史、临床症状、影像学表现等进行研究。对患者术中脑组织标本的MMP-9、TIMP-1含量以免疫组化方法进行研究。结果 MMP-9、TIMP-1均表达在胞浆中。MMP-9在正常对照组仅见微量表达;而在CAVM患者组织标本中可见表达明显升高。TIMP-1在CAVM患者组织中表达水平显著高于对照组,与MMP-9表达平行,出血组组与非出血组之间MMP-9、TIMP-1均无统计学差异,但两者之比（MMP-9/TIMP-1）有统计学差异。结论 ①MMP-9可能是导致CAVM血管壁结构不稳定、生长和过度扩张的重要因素,其水平升高可能是TIMP-1表达的促进因素之一;②MMP-9可能对于CAVM患者的出血具有促进作用,TIMP－1有着抑制MMP-9活性的重要作用,是防止CAVM出血的“保护因子”。MMP-9和TIMP-1比例失衡,造成MMP-9相对“过盛”,可能是引起脑动静脉畸形出血的重要机制。     

实验性脑出血血肿周围脑组织基质金属蛋白酶组织抑制剂-1的表达及其与脑水肿的关系

目的探讨实验性脑出血(ICH)血肿周围脑组织基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的表达及其与脑水肿的关系。方法采用自体血注入法建立大鼠ICH模型,制模后1h、3h、6h、12h、24h、36h、48h、72h、7d共9个时间点分别用干湿重法测血肿周围脑组织含水量,伊文思蓝(EB)检测血-脑屏障(BBB)通透性,Western Blot方法检测血肿周围组织的TIMP-1的表达;分析三者间的关系,并与假手术组相比较。结果与假手术组比较,ICH后各时间点血肿周围脑组织含水量和EB含量均明显增加(P<0.05～0.01),均于ICH48h达到高峰,且二者呈正相关(r=0.940,P<0.01);TIMP-1在ICH12～36h表达明显减低,ICH1～24h TIMP-1表达量与脑组织含水量以及EB含量呈负相关(r=-0.922,-0.950,均P<0.05)。结论大鼠ICH后血肿周围脑组织TIMP-1表达下调,可能促进了ICH早期的脑水肿形成。